李敏 榮耕 王明明 孫貴銀 向德兵 李華 張鐵耀

【摘要】目的：研究DNA定量分析聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）檢查在宮頸早期病變中的準(zhǔn)確性及其在宮頸癌篩查中的意義。方法：選擇2013年～2016年宮頸檢查病例，8016例行DNA定量分析，7553例行DNA定量分析聯(lián)合TCT，分別399例和329例行宮頸活檢，以組織學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估DNA定量分析與DNA定量分析聯(lián)合TCT檢查的診斷準(zhǔn)確性。結(jié)果：DNA定量分析與DNA定量分析聯(lián)合TCT檢查的陽(yáng)性符合率、敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)性分別為81.1%、90.18%、75.67%、81.1%和88.33%、86.95%和94.64%、86.95%、88.33%和93.95%，聯(lián)合檢查陽(yáng)性符合率、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均高于單獨(dú)DNA定量分析，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：DNA定量分析聯(lián)合TCT檢查，在保持較高的敏感性的優(yōu)勢(shì)的同時(shí)提高了特異性，提高了對(duì)宮頸早期病變的診斷準(zhǔn)確性，兩種篩查方法的聯(lián)合應(yīng)用是宮頸癌篩查較為理想的方案。

【關(guān)鍵詞】子宮頸病變;細(xì)胞DNA定量分析;薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查

[中圖分類號(hào)]R711.74 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]2096-5249（2020）14-000-02

宮頸癌是引起女性死亡的第四大腫瘤，85%的死亡病例發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家[1]。我國(guó)從2009年由衛(wèi)生部、財(cái)政部、全國(guó)婦聯(lián)正式開(kāi)始實(shí)施農(nóng)村婦女“兩癌”檢查以來(lái)，經(jīng)過(guò)了十年的婦科普查，宮頸癌的發(fā)病率和病死率降低了近68%。但每年新發(fā)病例仍約13萬(wàn)以上，占世界宮頸癌新發(fā)病例總數(shù)的1/4[2]。這種疾病的發(fā)病率在一些西方發(fā)達(dá)國(guó)家當(dāng)中有著明顯的降低，這些國(guó)家之所以能夠降低這種疾病的發(fā)生最主要原因還是發(fā)現(xiàn)的及時(shí)能夠讓患者更快的接受治療。本文探討細(xì)胞DNA定量分析在宮頸癌篩查中的意義，以及DNA定量分析聯(lián)合TCT在宮頸早期病變?cè)\斷中的準(zhǔn)確性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 這次醫(yī)學(xué)研究選擇我院體檢中心于2013年7月至2016年12月進(jìn)行檢查的患者病例。7553例患者進(jìn)行細(xì)胞DNA定量分析和薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT），8016例進(jìn)行細(xì)胞DNA定量分析檢查，年齡20～65歲，平均43歲。參與本次醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)的患者都有一定的性生活史，在這一段時(shí)間內(nèi)并沒(méi)有使用避孕類藥物。

1.2方法

1.2.1液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本采集 采集標(biāo)本之前，詢問(wèn)患者經(jīng)期，保證與體檢者的經(jīng)期錯(cuò)開(kāi)，通常會(huì)在體檢者的經(jīng)期過(guò)去的三天左右，婦科醫(yī)生使用陰道窺器，將體檢者的子宮頸進(jìn)行暴露，使用頸管刷，進(jìn)行取樣，然后使用特質(zhì)的宮頸鱗柱管刷浸泡在裝有保存液的玻璃瓶中。

1.2.2宮頸DNA定量分析聯(lián)合TCT檢查 dna定量分析宮頸檢查方法是將存放入薄層細(xì)胞保存液中的薄層細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)液基薄層細(xì)胞試劑和制片送入診斷系統(tǒng)進(jìn)行處理，制作成液基薄層細(xì)胞涂片，95%的細(xì)胞用乙醇固定，每個(gè)病例都制作2張薄層細(xì)胞涂片，并通過(guò)檢查對(duì)dna進(jìn)行定量分析。巴氏染色后鏡檢讀片。（1）對(duì)樣品的滿意度：主要包括檢查細(xì)胞標(biāo)本質(zhì)量（≥40%為基本滿意，<40%以上為基本滿意），有無(wú)頸管細(xì)胞或有無(wú)化生頸管細(xì)胞。（2）標(biāo)本病原體評(píng)價(jià)項(xiàng)目：主要包括標(biāo)本有無(wú)滴蟲(chóng)、念珠菌、線索性炎細(xì)胞、皰疹病毒、hpv感染。（3）炎細(xì)胞及標(biāo)本紅細(xì)胞病原體評(píng)價(jià)項(xiàng)目檢查情況：主要包括檢查標(biāo)本中紅細(xì)胞的情況，是否可能伴有輕、中、重度的炎癥。（4）對(duì)鱗狀細(xì)胞特征改變進(jìn)行描述性的診斷：根據(jù)描述性診斷的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組[3-4]，液基細(xì)胞學(xué)的分析和檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性的甲狀腺病變主要是指目前未見(jiàn)的asc-us細(xì)胞及其以上的陽(yáng)性細(xì)胞病變。在對(duì)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行染色之后，經(jīng)過(guò)圈子的染色的方式來(lái)分辨鱗狀細(xì)胞并對(duì)標(biāo)本完成圖像掃描和定位分析兩項(xiàng)工作。系統(tǒng)對(duì)每個(gè)異倍體的鱗狀細(xì)胞標(biāo)本約8000個(gè)類型和特征參數(shù)的標(biāo)本以及細(xì)胞核的多個(gè)類型和特征參數(shù)的細(xì)胞異常標(biāo)本進(jìn)行了定量分析，并根據(jù)其不同的鱗狀細(xì)胞標(biāo)本異倍體細(xì)胞的類型和標(biāo)本特征參數(shù)自動(dòng)地計(jì)算完成每個(gè)鱗狀細(xì)胞標(biāo)本中異倍體細(xì)胞的計(jì)數(shù)和標(biāo)本細(xì)胞的分類。

異倍體判定的主要標(biāo)準(zhǔn)：（1）異倍體的正常陰性（情況下未見(jiàn)的陽(yáng)性異倍體或可見(jiàn)dna正常的異倍體陽(yáng)性細(xì)胞）;（2）異倍體的陰性通常情況下可見(jiàn)少量的陽(yáng)性細(xì)胞異常增生（5%～10%的少量陽(yáng)性細(xì)胞異常增生）;（3）所有的醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)和研究結(jié)論都是通過(guò)專業(yè)醫(yī)學(xué)咨詢服務(wù)平臺(tái)獲得，并由醫(yī)院聘請(qǐng)遠(yuǎn)程治療婦科的專家（其中包括遠(yuǎn)程的婦科專家和病理細(xì)胞學(xué)的專家）對(duì)本次檢查的結(jié)果和數(shù)據(jù)進(jìn)行了分析和復(fù)核。dna定量分析本文的定量檢查包括細(xì)胞學(xué)結(jié)果中所提示的典型陽(yáng)性通常中所提示的陽(yáng)性是僅泛指可疑或少量可能屬于典型陽(yáng)性的非血液基性粒細(xì)胞陽(yáng)性病例。

1.2.3組織病理學(xué)檢查 tct定量分析宮頸異常病理學(xué)檢查的結(jié)果為asc-us及其以上的異常宮頸浸潤(rùn)細(xì)胞病變，或dna定量分析宮頸異常檢查結(jié)果為可疑或陽(yáng)性的任何宮頸異常的病例均建議及時(shí)到醫(yī)院就診或?qū)⒒颊咿D(zhuǎn)至正規(guī)的婦科醫(yī)院或正規(guī)婦科門(mén)診，采用正規(guī)的電子激光陰道鏡下進(jìn)行觀察檢查了解異常發(fā)生部位宮頸的一般組織上皮病變的發(fā)生情況及方法了解異常的發(fā)生部位宮頸的一般組織異常及上皮對(duì)于冰醋酸和三氯二碘的化學(xué)反應(yīng)，選擇可疑或陽(yáng)性宮頸的一般組織異?；蛏掀そ?rùn)細(xì)胞病變的異常發(fā)生部位對(duì)宮頸進(jìn)行病理學(xué)檢查，如無(wú)明顯的宮頸鱗柱組織浸潤(rùn)細(xì)胞異常者，在與正常宮頸的鱗柱浸潤(rùn)細(xì)胞上皮癌相連接或交界的異常發(fā)生部位3、6、9、12點(diǎn)處采取方法進(jìn)行異常宮頸鱗柱浸潤(rùn)細(xì)胞組織的檢查宮頸病理學(xué)的活檢。異常宮頸鱗柱浸潤(rùn)細(xì)胞組織的檢查宮頸病理學(xué)的檢查及診斷方法宮頸鱗柱組織檢查病理學(xué)的結(jié)果主要按癥狀可以分為宮頸炎癥、宮頸腫瘤及其上皮內(nèi)組織瘤樣的惡性病變（低級(jí)別、高級(jí)別）、鱗形浸潤(rùn)細(xì)胞癌（主要檢查對(duì)象是那些包括微小的惡性宮頸腫瘤和鱗柱浸潤(rùn)細(xì)胞樣的宮頸癌）。以低級(jí)別及以上的惡性宮頸腫瘤病變的發(fā)生部位作為定義分析檢查結(jié)果為可疑或陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究，筆者使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，卡方值代表測(cè)量數(shù)據(jù)，卡方值驗(yàn)算t值，（_x±s）代表計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)，通過(guò)對(duì)χ2的值進(jìn)行計(jì)算，χ2驗(yàn)算計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)，當(dāng)P<0.05時(shí)，我們則認(rèn)為差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1宮頸DNA定量分析與組織病理學(xué)結(jié)果的比較 8016例DNA定量分析結(jié)果為陰性病例7124例，異常891例（11.12%），其中可疑病例624例（7.78%），陽(yáng)性病例267例（3.33%）。其中399例行病理活檢，以組織病理學(xué)診斷結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，399例病人中DNA倍體正常組（161例）、可疑陽(yáng)性組（71例）及陽(yáng)性組（167例），3組活檢分別診斷高級(jí)別及以上病變0例、3例、56例。238例DNA陽(yáng)性病例中，診斷為陽(yáng)性者193例，陽(yáng)性符合率為81.09%。DNA定量分析的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為90.18%（193/214）、75.67%（140/185）、81.1%（193/238）和86.95%（140/161）。宮頸DNA定量分析與組織病理學(xué)結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 DNA定量分析聯(lián)合TCT檢查結(jié)果 DNA定量分析聯(lián)合TCT檢查病例7553例，其中陽(yáng)性病例422例（5.58%），其中329例行病理活檢，180例陽(yáng)性病例中，病理結(jié)果診斷陽(yáng)性者159例，陽(yáng)性符合率88.33%。聯(lián)合檢查的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為94.64%（159/168）、86.95%（140/161）、88.33%（159/180）和93.95%（140/149）。約登指數(shù)=敏感性+特異性-1=81.59%。

3 討論

通過(guò)近幾年的數(shù)據(jù)能夠看出來(lái)，宮頸癌是全球范圍內(nèi)患病患者和死亡幾率都很高的疾病之一。迄今為止這種疾病形成的原因不太明確，并且在這種疾病發(fā)病的初始階段沒(méi)有什么明顯的臨床癥狀，導(dǎo)致這種疾病很難再形成的初期就被發(fā)現(xiàn)，等到患者入院進(jìn)行治療時(shí)已經(jīng)是這種疾病的中后期這個(gè)時(shí)候已經(jīng)錯(cuò)過(guò)了治療的最佳時(shí)間段也導(dǎo)致治愈率降低，在這種疾病的后期會(huì)讓女性患者的陰道出現(xiàn)出血情況并伴隨大量的膿性黏液流出，還會(huì)導(dǎo)致下身腫脹和全身器官衰竭等癥狀增加了女性同胞的痛苦最后導(dǎo)致死亡。經(jīng)過(guò)此次研究發(fā)現(xiàn)女性同胞定期的去醫(yī)院做婦科相關(guān)方面的腫瘤檢查是非常有必要的，這么做可以非常有效的防止宮頸癌的發(fā)生也能夠做到及時(shí)發(fā)現(xiàn)并提早治療?，F(xiàn)如今細(xì)胞DNA定量分析技術(shù)在婦科宮頸癌檢查方面的廣泛運(yùn)用也能提高這種疾病的治愈效果，這種技術(shù)對(duì)該疾病的檢查準(zhǔn)確性高并且操作簡(jiǎn)單能夠很好的幫助醫(yī)生了解患者病情[5]。在本研究中DNA定量分析與病理診斷陽(yáng)性符合率為81.09%，DNA定量分析為可疑陽(yáng)性的有71例，其中活檢病理診斷為慢性宮頸炎的為34例，低級(jí)別鱗形上皮內(nèi)病變的為34例，高級(jí)別鱗形上皮內(nèi)病變及以上病變的為3例，發(fā)現(xiàn)宮頸上皮病變的總數(shù)為37例，其DNA倍體定量分析病例與活檢病理診斷的符合率為52.11%（37/71）;DNA定量分析為陽(yáng)性的有167例，其中活檢病理診斷為慢性宮頸炎的有11例，低級(jí)別上皮內(nèi)病變的有80例，高級(jí)別鱗形上皮內(nèi)病變及以上病變的為76例，發(fā)現(xiàn)宮頸上皮病變的總數(shù)為136例，其DNA倍體定量分析病例與活檢病理診斷的符合率為93.41%（156/167）。DNA定量分析陽(yáng)性結(jié)果與組織學(xué)陽(yáng)性符合率明顯高于可疑陽(yáng)性的病例（χ2=47.712，P=0.000，P<0.01），顯著差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明DNA定量分析陽(yáng)性結(jié)果比可疑陽(yáng)性結(jié)果更具有臨床指導(dǎo)意義，臨床醫(yī)生應(yīng)對(duì)DNA定量篩查的陽(yáng)性病例引起高度的關(guān)注和積極的干預(yù)和治療。而DNA定量分析可疑陽(yáng)性病例需要結(jié)合TCT細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果綜合判斷才能有效指導(dǎo)臨床。

隨著科技的進(jìn)步和社會(huì)對(duì)宮頸癌的關(guān)注度的提高，宮頸篩查方法也是也來(lái)越多，目前運(yùn)用較多的薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查有較高的特異度，但其靈敏度較低，DNA定量分析敏感性高，但特異性較低，DNA定量分析聯(lián)合宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查，在保持較高的敏感性的優(yōu)勢(shì)的同時(shí)提高了特異性，提高了對(duì)宮頸早期病變的診斷準(zhǔn)確性，兩種篩查方法的聯(lián)合應(yīng)用是宮頸癌篩查較為理想的方案。

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作者簡(jiǎn)介：李敏（1977-），本科學(xué)歷，副主任醫(yī)師，研究方向：病理診斷。