姚俊濤?姜萱?李財(cái)進(jìn)?梅富琪?錢坤

摘要：目的研究蒙脫石對(duì)泥鰍肝臟中鹽酸左氧氟沙星分布的影響。方法選取30克左右的泥鰍，分成7組，分別為空白組，高、中、低濃度的鹽酸左氧氟沙星組，高、中、低濃度蒙脫石與中鹽酸左氧氟沙星組合組，灌胃給藥，在30min、45min、60min、75min、1.5h、4.5h、6h、7.5h、9h、54h、72h時(shí)間點(diǎn)各取樣6個(gè)，處理后高效液相檢測(cè)濃度。結(jié)果蒙脫石不改變泥鰍體內(nèi)肝臟的鹽酸左氧氟沙星達(dá)峰時(shí)間，但是改變了藥峰濃度。結(jié)論蒙脫石鹽酸左氧氟沙星的吸附作用，增大了泥鰍肝臟體內(nèi)的藥峰濃度。

關(guān)鍵詞：泥鰍;肝臟;鹽酸左氧氟沙星;蒙脫石

泥鰍是一種肉質(zhì)較為鮮美、口感細(xì)嫩小型魚類，具有雜食的特點(diǎn)【1】，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高。鹽酸左氧氟沙星為氧氟沙星的左旋體，屬于三代喹諾酮抗菌藥物，比氧氟沙星高一倍左右的抗菌活性【2】，在肝臟部位的代謝率低，血藥濃度較高【3】，不良反應(yīng)少【4】，抗菌活力強(qiáng)【5-6】，通常用于敏感菌引起的系統(tǒng)感染，包括枸櫞酸桿菌、大腸埃希菌、沙門菌屬等活性較強(qiáng)的革蘭氏陰性菌。常用于魚類的爛鰓病、腸炎、爛尾癥等疾病防治。蒙脫石是一種特殊的火山巖在堿性環(huán)境下變成的硅鋁酸鹽粘土礦石【7】，對(duì)致病菌有很強(qiáng)的吸附、固定、滅活以及排出的能力【8】對(duì)消化道的粘膜可以起到覆蓋作用，臨床上可用于治療腹瀉和其他一些胃腸道疾病。蒙脫石具有吸附性能【9】和凝膠特性，因而常常與喹諾酮類藥物共用【10】。

一、材料與方法

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

泥鰍其質(zhì)量為30±3克，購(gòu)于湖州養(yǎng)殖場(chǎng)，太陽(yáng)暴曬的水中養(yǎng)殖十日。

（二）試劑和儀器

鹽酸左氧氟沙星原料藥，湖北鑫潤(rùn)德化工有限公司生產(chǎn)，蒙脫石，湖北金細(xì)蒙脫石科技有限公司生產(chǎn)，高效液相色譜分析儀LC-20AT，島津公司生產(chǎn)。

（三）給藥劑量與分組

按照每克泥鰍活重計(jì)，高、中、低劑量鹽酸左氧氟沙星分別為0.0025mg、0.0075mg、0.0225mg，蒙脫石高、中、低劑量分別為0.005mg、0.015mg、0.045mg。

實(shí)驗(yàn)共設(shè)7組：高、中、低鹽酸左氧氟沙星組，中劑量鹽酸左氧氟沙星+高、中、低蒙脫石組，空白組。

（四）取樣與樣品處理

灌胃給藥后，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)，分別在15min、30min、45min、60min、75min、3h、6h、9h、12h、16h、24h、48h、60h、72h時(shí)間點(diǎn)取樣，每組取樣6條，處死后取肝臟，稱重后離心管內(nèi)零下10℃保存。

取出保存的肝臟樣品，置于室溫下自然解凍，加入1mL超純水和3mL丙酮，漩渦振蕩儀振蕩3分鐘，4℃，10000r/min離心8分鐘;上清液轉(zhuǎn)移到新的10mL離心管中，加入1mL0.040g/mL的NaC，100μL氨水和3mL二氯甲烷，漩渦振蕩1分鐘，4℃，6000r/min離心6分鐘;有機(jī)相轉(zhuǎn)移到新的離心管，剩余液體再加入3mL二氯甲烷，漩渦振蕩1分鐘，4℃，6000r/min離心6分鐘，取有機(jī)相，合并2次的有機(jī)相，恒溫干燥;加入1mL10%乙腈和3mL正己烷，漩渦振蕩2分鐘，4℃，6000r/min離心6分鐘，棄有機(jī)相，重復(fù)一次此步驟;流動(dòng)相定容至2ml。

色譜條件：C18柱，柱溫32℃，0.8mL/min流速，流動(dòng)相：10%乙腈與0.04mol/L檸檬酸（pH4.0）等體積混合，進(jìn)樣量20μL。

二、結(jié)果與討論

（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線

將段鹽酸左氧氟沙星的實(shí)測(cè)濃度設(shè)為橫坐標(biāo)，將所得峰面積設(shè)為縱坐標(biāo)，回歸后的方程為y=361.09x+366，R2=0.9988.

（二）精密度

上午高、中、低濃度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為17.54%、14.08%、13.35%，下午分別為17.39%、13.25%、16.28%;日間高、中、低濃度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為16.37%、13.77%、13.05%。

（三）回收率

5mg/L、10mg/L、20mg/L濃度的回收率分別為：108.07%、96.08%、98.26%。

（四）無(wú)蒙脫石的藥物殘留規(guī)律

不同時(shí)間點(diǎn)，高、中、低濃度的鹽酸左氧氟沙星在肝臟中殘留變化見(jiàn)圖1，由圖可知，肝臟中藥物在4.5h可以達(dá)到峰值。從30min至4.5h階段肝臟中的藥物濃度隨時(shí)間的增加而上升，隨著時(shí)間的推移泥鰍肝臟中的鹽酸左氧氟沙星藥物濃度逐漸降低，并最終趨向于0。

圖1 鹽酸左氧氟沙星在肝臟中殘留變化圖

（五）蒙脫石對(duì)藥物殘的影響

不同濃度蒙脫石條件下，肝臟中鹽酸左氧氟沙星達(dá)峰時(shí)間仍然在4.5h左右，但是藥峰濃度明顯增高，增高量與蒙脫石濃度呈正相關(guān)。

蒙脫石是一種含水鋁硅酸鹽構(gòu)成的礦物，顆粒細(xì)小，粒徑約在0.2～1微米之間，有膠體分散特征，對(duì)喹諾酮類藥物包括鹽酸左旋氧氟沙星在內(nèi)的一系列藥物具有很好的吸附作用。本實(shí)驗(yàn)中在加入蒙脫石后，泥鰍肝臟中的藥物峰值高于不加蒙脫石，特別是高濃度和中濃度的蒙脫石，明顯增加了藥峰濃度，這也驗(yàn)證了蒙脫石對(duì)鹽酸左旋氧氟沙星的吸附作用，促進(jìn)了肝臟中藥物濃度的增高。

參考文獻(xiàn)：

[1]儂科.泥鰍養(yǎng)殖技術(shù)匯總[N].東方城鄉(xiāng)報(bào)，2019（7）：1-2.

[2]劉一曦.鹽酸左氧氟沙星替代標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)中的阿莫西林或克拉霉素治療幽門螺旋桿菌感染的療效比較分析[J].中外醫(yī)療，2019（21）：115-117.

[3]王秋華.眼鏡蛇肌肉注射鹽酸左氧氟沙星血藥濃度變化規(guī)律的初步研究[J].獸醫(yī)雜志，2016（11）：110-112.

[4]劉燕.抗菌藥物致3例不良反應(yīng)的分析[R].蘇州大學(xué)附屬?gòu)埣腋坩t(yī)院藥學(xué)論文，2019，9（2）：146-148.

作者簡(jiǎn)介：

姚俊濤（1998—），男，漢族，浙江杭州人，學(xué)歷：本科，從事藥學(xué)研究;

李財(cái)進(jìn)（1998—），男，漢族，安徽安慶人，學(xué)歷：本科，從事藥學(xué)研究;

姜萱（1999—），女，漢族，內(nèi)蒙古赤峰人，學(xué)歷：本科，從事藥學(xué)研究;

梅富琪（2000—），男，漢族，浙江溫州人，學(xué)歷：本科，從事藥學(xué)研究;

錢坤（1969—），男，漢族，安徽省銅陵人，湖州師范學(xué)院，藥學(xué)博士，副教授，從事生物技術(shù)藥物研究。