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摘?要：目的：分析2018-2019年西藏日喀則市流感樣病例咽拭子病毒核酸檢測(cè)的結(jié)果。方法：提取咽拭子標(biāo)本中病毒核酸，接受Real—timeRT—PCR法，檢測(cè)核酸與鑒別型別。 結(jié)果：1.選擇2018年—2019年總共采集303份流感樣病例咽拭子，檢出流感病毒核酸陽(yáng)性22份，陽(yáng)性率7.26%（22/303）。甲型流感病毒陽(yáng)性9份、其中H1N1亞型毒株陽(yáng)性3份、H3N2亞型毒株陽(yáng)性6份，B型流感病毒13份;2.流感樣病例一年四季均可發(fā)生，無(wú)明顯季節(jié)性;3.城鎮(zhèn)陽(yáng)性率明顯高于農(nóng)村;0-5歲是高發(fā)階段。結(jié)論：對(duì)于日喀則市而言，流感防控的重點(diǎn)在于甲型H1N1、多見于城鎮(zhèn)地區(qū)的0—5歲嬰幼兒。

關(guān)鍵詞：日喀則市?流感?咽拭子?病毒核酸檢測(cè)?分析

中圖分類號(hào)：R511.7??文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A????文章編號(hào)：1003-9082（2020）08-0-01

流行性感冒（簡(jiǎn)稱流感），是由流感病毒傳染的一種急性呼吸道傳染病，傳播速度快，在人群中易引起傳播，是第一個(gè)實(shí)行全球監(jiān)測(cè)的傳染病。因流感病毒基因（RNA）變異性大，流感的危害性隨之增大，癥狀較輕的情況下，會(huì)在小范圍內(nèi)流行，若情況較嚴(yán)重，會(huì)在全世界范圍內(nèi)流行。為流感癥狀的檢測(cè)多采用咽拭子病毒核酸指標(biāo)，它能夠有效對(duì)流感進(jìn)行判斷，有助于提高流感的診斷準(zhǔn)確度，本次將2018年1月至2019年12月在日喀則市疾控中心檢驗(yàn)科接收哨點(diǎn)醫(yī)院送樣的疑似流感患者咽拭子303例作為檢驗(yàn)對(duì)象，分析流感樣病例咽拭子病毒核酸檢測(cè)的結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

一、材料與方法

1.監(jiān)測(cè)病例定義標(biāo)準(zhǔn)

體溫高于38℃，且存在咽痛、咳嗽癥狀，并未被診斷為急性呼吸道感染病例，則是流感樣病例。

2.標(biāo)本來(lái)源

選取發(fā)病未超過(guò)3d且沒(méi)有服用任何抗病毒藥物的流感樣病例，并對(duì)咽拭子標(biāo)本進(jìn)行采集。全部標(biāo)本均通過(guò)專業(yè)培訓(xùn)、考核合格后任職的醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行采集，采集后迅速把標(biāo)本放入滅菌的病毒采樣液中，冷藏，并迅速送到日喀則市疾控中心檢驗(yàn)科接受病毒核酸檢測(cè)。

3.主要檢測(cè)試劑和儀器

RNA提取試劑盒;甲（A）H1N1流感病毒核酸檢測(cè)試劑盒;低溫高速臺(tái)式離心機(jī);旋渦混合器;二級(jí)生物安全柜、ABI7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。

4.病毒核酸檢測(cè)方法

用拭子擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，同樣將拭子頭侵入采樣液中，尾部棄去，然后迅速將拭子放入采樣管中待檢;對(duì)于全部咽拭子標(biāo)本，采取Real—timeRT—PCR法檢測(cè)流感病毒核酸，先檢測(cè)甲（A）型H 1N 1流感病毒核酸，確定陰陽(yáng)性。針對(duì)FluA陽(yáng)性同時(shí)又排除甲（A）型H 1N 1者，再結(jié)合季節(jié)性流感H 1、H 3亞型病毒核酸檢測(cè)。最后，F(xiàn)luA陰性者直接檢測(cè)B型流感病毒核酸。每次試驗(yàn)均設(shè)立無(wú)模板對(duì)照（NTC）、陽(yáng)性模板對(duì)照（FAM +）。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本文的咽拭子病毒核酸檢測(cè)情況以百分率（%）表示。

二、 結(jié)果

1.西藏2018年1月—2019年12月流感病毒核酸檢測(cè)結(jié)果

據(jù)統(tǒng)計(jì)，2018年1月—2019年12月總共采集303份流感樣病例咽拭子，檢出流感病毒核酸陽(yáng)性22份，陽(yáng)性率7.26%。其中甲型H1N1毒株陽(yáng)性3份、H1亞型毒株陽(yáng)性3份、H3亞型毒株陽(yáng)性6份，B型流感病毒13份，詳見表1。

2.影響流感病情感染的因素

2.1性別對(duì)流感病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性的影響

據(jù)統(tǒng)計(jì)，該地區(qū)男女流感病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性率對(duì)比差異不明顯，詳見表2。

2.2?城鄉(xiāng)對(duì)流感病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性的影響

據(jù)統(tǒng)計(jì)，城鎮(zhèn)病例檢測(cè)陽(yáng)性率為8.19%，農(nóng)村為5.83%。兩個(gè)數(shù)據(jù)對(duì)比，城鎮(zhèn)陽(yáng)性率明顯高于農(nóng)村，詳見表3。

2.3不同年齡段對(duì)西藏流感病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性率的影響

據(jù)統(tǒng)計(jì)得知，0—5歲是流感高發(fā)階段，不同年齡段流感病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性率見表4。

三、討論

采取實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對(duì)咽拭子病毒核酸進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)快速簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度與靈敏度高，特異度較強(qiáng)，也減少污染，能夠及時(shí)準(zhǔn)確掌握病毒變異情況。2018年1月—2019年12月西藏日喀則市流感病毒核酸監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，該市均檢出甲型H1N1、H1亞型毒株、H3亞型毒株、B型流感病毒，其中甲型H3N2所占比例最高。同時(shí)，本研究從性別、居住環(huán)境、年齡等角度進(jìn)行了研究，研究結(jié)果表明男女檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率對(duì)比差異較小，這說(shuō)明了性別不會(huì)影響流感病毒發(fā)病率。同時(shí)，城鎮(zhèn)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率明顯高于農(nóng)村地區(qū)，這主要是由于城鎮(zhèn)地區(qū)人口多、流動(dòng)頻繁、公共場(chǎng)所人流量大，早晨空氣中攜帶了大量的病毒。另外，在年齡階段對(duì)比中，0—5歲檢測(cè)陽(yáng)性率最高，陽(yáng)性率最低的是26—60歲，60歲以上;其原因是26-60歲，出現(xiàn)在人口密集的集市或街區(qū)的概率較小，日常接觸的人也相對(duì)較少，因此接觸病毒的風(fēng)險(xiǎn)較低。0—5歲嬰幼兒陽(yáng)性率最高，這主要是此年齡段屬于嬰幼兒，一般在五歲以下的嬰幼兒，跟隨家屬到處閑逛，活動(dòng)范圍廣，加之心比較小，很容易誘發(fā)流感病毒感染。

綜上所述，采取咽拭子病毒核酸檢測(cè)分析，可以有效提高病毒檢出陽(yáng)性率，準(zhǔn)確判斷病毒變異情況，及當(dāng)年的病毒流行趨勢(shì)。對(duì)于流感病毒傳播而言，天氣原因和機(jī)體免疫力是主要原因。西藏各個(gè)哨點(diǎn)醫(yī)院及時(shí)關(guān)注學(xué)前兒童尤其是嬰幼兒的衛(wèi)生宣教工作，強(qiáng)化病毒檢測(cè)水平，對(duì)制定有效的防控工作而言具有重大的現(xiàn)實(shí)意義。