徐 萍 敖日格樂(lè)* 王純潔 斯木吉德 陳 浩 劉 波 張 晨 崔銀雪 何利娜 曹家銘 武思同 劉飛鴻

(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010018； 2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010018)

據(jù)統(tǒng)計(jì)，2019年全國(guó)羊肉產(chǎn)量增加12萬(wàn)t；禽肉產(chǎn)量增加245萬(wàn)t；牛肉產(chǎn)量增加23萬(wàn)t[1]。眾所周知，牛肉中蛋白質(zhì)含量較高，脂肪和膽固醇含量相對(duì)較低，易被人體消化吸收，是公認(rèn)的綠色健康肉類(lèi)[2-3]。西門(mén)塔爾牛作為優(yōu)質(zhì)的乳肉兼用品種，其具有生長(zhǎng)速度快、肉產(chǎn)量高和適應(yīng)力強(qiáng)等特點(diǎn)[4]，自引入我國(guó)，在多個(gè)省份主要依靠放牧進(jìn)行養(yǎng)殖[5]。近年來(lái)，由于草原嚴(yán)重退化和沙化[6-7]，長(zhǎng)期干旱以及過(guò)度放牧造成牧草產(chǎn)量和質(zhì)量逐年下降[5,7-8]，而放牧肉牛生長(zhǎng)發(fā)育效果并不理想。如果將放牧與補(bǔ)飼結(jié)合，不僅可有效降低對(duì)草原的破壞[5]，減少飼養(yǎng)成本，還可有效改善母畜體況，促進(jìn)犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育[9-10]。放牧飼養(yǎng)牛群很容易造成礦物質(zhì)攝入不足，而補(bǔ)飼可滿足牛群所需，提高增重速度[11]。綿羊限時(shí)“放牧+補(bǔ)飼”可有效提高采食效率和反芻效率[12]；在夏季“放牧+補(bǔ)飼”可提高阿勒泰羊的生長(zhǎng)性能[13]；牦牛在“放牧+補(bǔ)飼”模式下其日增質(zhì)量是傳統(tǒng)放牧方式下的1.7倍，適時(shí)的補(bǔ)飼可有效挖掘放牧牛的生長(zhǎng)潛力[14]。為減緩草原沙漠化速度，在節(jié)約投資成本的條件下，可采取補(bǔ)飼的方法，保證放牧肉牛育肥效果。

飼養(yǎng)管理是肉牛養(yǎng)殖過(guò)程中的重要環(huán)節(jié)之一，根據(jù)各階段肉牛的生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn)，分階段精準(zhǔn)補(bǔ)飼，可達(dá)到最佳育肥效果，并有效縮短飼養(yǎng)周期[15]。而犢牛階段的發(fā)育情況及健康對(duì)育肥階段肉牛的生產(chǎn)性能和生產(chǎn)力水平起到十分關(guān)鍵的作用。由于犢牛出生時(shí)胃腸道發(fā)育不完全，隨著犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育，單一的母乳飼喂無(wú)法滿足犢牛的生長(zhǎng)需求，為保證犢牛階段機(jī)體正常發(fā)育，需根據(jù)犢牛階段營(yíng)養(yǎng)需求制定適合的精料補(bǔ)充料，為其提供全價(jià)所需的養(yǎng)分。為研究精準(zhǔn)補(bǔ)飼對(duì)放牧犢牛生長(zhǎng)性能和血液生化指標(biāo)、血清激素及免疫指標(biāo)的影響，本研究以日齡相近且同群放牧的西門(mén)塔爾犢牛為試驗(yàn)對(duì)象，以“放牧+補(bǔ)飼”為飼養(yǎng)模式，旨在尋找放牧犢牛精準(zhǔn)補(bǔ)飼方法，為放牧犢牛培育方式的選擇提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及地點(diǎn)

本研究于2019年7月在內(nèi)蒙古赤峰市阿魯科爾沁旗草原展開(kāi)，其草原面積遼闊，牧草種類(lèi)繁多，牧草主要品種為羊草、沙打旺和冰草等，試驗(yàn)期間牧草高在15～25 cm之間，牧草養(yǎng)分含量見(jiàn)表1。試驗(yàn)選用2月齡體重、體尺相似，健康的放牧西門(mén)塔爾犢牛16頭，并且母牛平均胎次相同，健康空懷期及泌乳良好。試驗(yàn)期間試驗(yàn)?？勺杂刹墒衬敛莺惋嬎?。

表1 混合新鮮牧草營(yíng)養(yǎng)組分Table 1 Nutrient content of mix fresh grass %

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將所選犢牛隨機(jī)分為2組，其中放牧組犢牛隨母牛全天牧場(chǎng)放牧；放牧加補(bǔ)飼組犢牛在全天放牧條件下，下午6:00時(shí)補(bǔ)飼1次犢牛自配精補(bǔ)料，其組成與營(yíng)養(yǎng)組分見(jiàn)表2。每頭放牧加補(bǔ)飼犢牛，在正式試驗(yàn)階段的第0～30 d補(bǔ)飼精料0.5 kg/d， 第31～ 60 d補(bǔ)飼精料1.0 kg/d。所有試驗(yàn)犢牛在相同草場(chǎng)進(jìn)行大群放牧，可降低放牧環(huán)境對(duì)2組犢牛生長(zhǎng)發(fā)育的影響。預(yù)飼期為10 d，正式飼喂期60 d，試驗(yàn)共70 d。

1.2.2樣品采集

正試期開(kāi)始前對(duì)每組犢牛稱(chēng)重并測(cè)量體尺；早晨空腹采集頸靜脈血液，靜置后，3 500 r/min 離心15 min，取其上清至離心管中，放置液氮中儲(chǔ)存，帶回實(shí)驗(yàn)室后保存至超低溫冰箱中，以備血清指標(biāo)檢測(cè)。正式試驗(yàn)開(kāi)始后間隔15 d對(duì)試驗(yàn)犢牛進(jìn)行體重、體尺測(cè)量和采集血液。

表2 精料組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table 2 Composition and nutrient levels of concentrate %

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)測(cè)定

每組犢牛在試驗(yàn)期間進(jìn)行5次體重和體尺測(cè)量，測(cè)量均在保定架中完成。

體重：早晨空腹進(jìn)行稱(chēng)重，犢牛依次通過(guò)保定架，讀取電子秤數(shù)據(jù)；

體高：犢牛髻甲最高處到保定架內(nèi)底部的直線距離；

體斜長(zhǎng)：犢牛肩胛骨前端到同側(cè)坐骨結(jié)節(jié)間的直線距離；

胸圍：犢牛肩胛骨后緣軀體的垂直周長(zhǎng)；

腹圍：犢牛后腿前腹部的最大周徑[4,16-17]。

1.3.2血清指標(biāo)測(cè)定

本研究檢測(cè)的血清指標(biāo)包括尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、生長(zhǎng)激素(GH)、免疫球蛋白G(IgG)、白介素-1(IL-1)、總蛋白(TP)和白介素-2(IL-2)，利用GYI-LRH-400-D生化培養(yǎng)箱和BIO-RAD680型酶標(biāo)儀檢測(cè)上述指標(biāo)含量[18-19]，檢測(cè)所需ELISA試劑盒訂購(gòu)于江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司，試驗(yàn)操作步驟詳見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

先用Excel 2016處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，再通過(guò)SAS 9.0單因素方差分析(One-way ANOVA)并進(jìn)行多重比較(Duncan法)檢驗(yàn)指標(biāo)差異性，以P<0.05作為衡量差異顯著性水平的標(biāo)準(zhǔn)，最終試驗(yàn)結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 放牧加補(bǔ)飼對(duì)西門(mén)塔爾犢牛生產(chǎn)性能的影響

犢牛生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知，在正試期的0～30 d，2組犢牛的日增重?zé)o顯著差異(P>0.05)，但在第31～60 d放牧加補(bǔ)飼對(duì)犢牛日增重有顯著影響，其放牧加補(bǔ)飼犢牛日增重高于放牧犢牛(P<0.05)；放牧加補(bǔ)飼組犢牛體高有高于放牧組的趨勢(shì)，但差異不顯著(P>0.05)；放牧加補(bǔ)飼組犢牛胸圍長(zhǎng)度略低于放牧組，但其增長(zhǎng)率高于放牧組(P>0.05)；放牧加補(bǔ)飼犢牛的體斜長(zhǎng)和腹圍長(zhǎng)度及其增長(zhǎng)率均大于放牧組，但差異不顯著(P>0.05)。由此可得，放牧加補(bǔ)飼可有效提高西門(mén)塔爾犢牛的日增重而且有促進(jìn)體尺增長(zhǎng)的趨勢(shì)。

表3 不同飼喂方式下?tīng)倥ＩL(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)測(cè)定Table 3 Measurement of calf growth and development indexes under different feeding methods

2.2 放牧加補(bǔ)飼對(duì)西門(mén)塔爾犢牛血清生化指標(biāo)的影響

犢牛血清生化指標(biāo)含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。由表4 可知，補(bǔ)飼條件下?tīng)倥UN和GLU含量均顯著高于放牧組犢牛(P<0.05)；而TP和TG含量差異不顯著(P>0.05)。

表4 不同飼喂方式下?tīng)倥Ｑ迳笜?biāo)測(cè)定Table 4 Determination of calf serum biochemical indicators under different feeding methods

2.3 放牧加補(bǔ)飼對(duì)西門(mén)塔爾犢牛血清激素及免疫指標(biāo)的影響

犢牛血清激素及免疫指標(biāo)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知，補(bǔ)飼條件下?tīng)倥gG和IL-1含量顯著高于放牧組犢牛(P<0.05)；而T3、T4、GH和IL-2在血清中的含量略高于放牧組，但差異不顯著(P>0.05)。

表5 不同飼喂方式下?tīng)倥Ｑ寮に丶懊庖咧笜?biāo)測(cè)定Table 5 Determination of serum hormones and immune indexes of calf under different feeding methods

3 討 論

3.1 放牧加補(bǔ)飼對(duì)西門(mén)塔爾犢牛生長(zhǎng)性能的影響

在牧草資源豐富的內(nèi)蒙古牧區(qū)，放牧肉牛在采食過(guò)程中可自由行走、呼吸新鮮空氣，充足的運(yùn)動(dòng)有利于提高機(jī)體抗病力[20]；在放牧期間，足夠的陽(yáng)光照射可促進(jìn)犢牛機(jī)體鈣吸收，使骨骼鈣化，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育[11,20]；母牛采食大量牧草，飼料添加劑和獸藥攝入量很少[9]，可為犢牛提供優(yōu)質(zhì)奶源，但母乳飼養(yǎng)不利于母牛體況恢復(fù)[9-10]。早期放牧犢牛通過(guò)攝入母乳及采食少量牧草補(bǔ)充體內(nèi)所需養(yǎng)分，隨著犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育，母乳和少量牧草不滿足犢牛的生長(zhǎng)發(fā)育需求，導(dǎo)致其生長(zhǎng)潛能無(wú)法發(fā)揮。在此期間其胃腸道發(fā)育尚未完全，采食牧草和消化能力有限；但補(bǔ)飼非纖維性碳水化合物可彌補(bǔ)其營(yíng)養(yǎng)攝入的不足[21]，確保該階段放牧犢牛的正常生長(zhǎng)發(fā)育。在本研究補(bǔ)飼前期，2組犢牛日增重差異不顯著，而后期放牧加補(bǔ)飼組日增重顯著高于放牧組，該結(jié)果表明補(bǔ)飼精料可為犢牛提供所需養(yǎng)分，并有效提高犢牛生長(zhǎng)性能。周振勇[22]的研究表明，飼養(yǎng)管理水平可顯著影響早期犢牛體重和體尺；張玲等[21]研究表明補(bǔ)飼精料可有效提高新疆放牧褐牛的日增重，為暖季放牧褐牛提供一定量糖分和蛋白等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有顯著提高犢牛日增重的趨勢(shì)[23]，這與本研究結(jié)果一致。在試驗(yàn)后期，補(bǔ)飼犢牛的補(bǔ)飼量增加，可能是影響試驗(yàn)后期日增重顯著增長(zhǎng)的主要因素。通過(guò)以上論述可說(shuō)明補(bǔ)飼在一定程度上可促進(jìn)放牧西門(mén)塔爾犢牛日增重增長(zhǎng)。在實(shí)際生產(chǎn)中，可用體重和體尺衡量犢牛飼養(yǎng)效果。體重作為研究肉牛生產(chǎn)力的首選指標(biāo)，可最直觀反映生長(zhǎng)育肥效果。而隨著犢牛體內(nèi)組織器官不斷發(fā)育，各體尺指標(biāo)在不斷增加，體尺指標(biāo)可以反映犢牛生長(zhǎng)發(fā)育情況[24]。在本研究中，放牧加補(bǔ)飼犢牛體尺與放牧犢牛間無(wú)顯著差異，但補(bǔ)飼組犢牛體尺有小幅度增長(zhǎng)趨勢(shì)。本研究還需要進(jìn)一步探究最佳補(bǔ)飼方案。若盡可能多的增加每組犢牛數(shù)量，則可降低個(gè)體間差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響；由于儲(chǔ)存空間不足，試驗(yàn)過(guò)程中多次訂購(gòu)飼料原料，其營(yíng)養(yǎng)成分可能存在差異而影響研究結(jié)果。后續(xù)若對(duì)其加以改善，研究結(jié)果可更具參考意義。

3.2 放牧加補(bǔ)飼對(duì)西門(mén)塔爾犢牛血清生化指標(biāo)的影響

補(bǔ)飼會(huì)引起血液內(nèi)與營(yíng)養(yǎng)代謝相關(guān)的生化指標(biāo)變化，血清生化指標(biāo)變化可以反映動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育情況，還反映營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)機(jī)體免疫機(jī)能的影響。TP和BUN水平是反映放牧犢牛對(duì)補(bǔ)飼精料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收能力的重要指標(biāo)[25]。高慶[26]研究表明小鼠體內(nèi)TP含量越高，動(dòng)物代謝越旺盛，吸收蛋白能力越強(qiáng)；張玲等[21]研究表明額外補(bǔ)飼可增加放牧褐牛血清中TP含量。在本研究中雖TP含量無(wú)顯著差異，但放牧加補(bǔ)飼組其含量高于放牧組，原因可能是補(bǔ)飼組犢?；厝ρa(bǔ)飼途中運(yùn)動(dòng)增加了能量消耗，導(dǎo)致2組犢牛蛋白質(zhì)吸收量無(wú)顯著差異。BUN可衡量動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)和氨基酸水平，Sarraseca等[27]和張杰等[28]研究均表明日糧中蛋白水平提高會(huì)顯著提升機(jī)體內(nèi)BUN水平。任萬(wàn)平[23]研究表明BUN水平與日增重呈正相關(guān)，在本研究中放牧加補(bǔ)飼組犢牛血清中BUN水平顯著提高，并且補(bǔ)飼后期其日增重亦有顯著提升，但兩者增長(zhǎng)是否呈正相關(guān)需進(jìn)一步研究。GLU含量和TG含量在一定程度上可反映機(jī)體糖脂代謝狀況[29]。GLU是機(jī)體最直接的能源物質(zhì)，能夠衡量糖原合成及分解的動(dòng)態(tài)平衡[30]；動(dòng)物從日糧中吸收的糖分多，其血液中GLU 含量可在一定范圍內(nèi)提高[31]；血清中GLU 含量表示結(jié)構(gòu)飼糧水平對(duì)犢牛碳水化合物代謝的影響[25]，本研究中補(bǔ)飼組動(dòng)物血清GLU含量顯著升高，結(jié)果表明補(bǔ)飼可顯著提高放牧組犢牛吸收、代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)糖分的效果。TG含量是監(jiān)測(cè)脂肪消化吸收的重要指標(biāo)，可直接反映機(jī)體脂代謝情況[32-33]。本研究補(bǔ)飼日糧中粗脂肪含量為3.32%，在相同放牧條件下，補(bǔ)飼組犢牛攝入脂肪含量較高，但2組犢牛TG含量無(wú)顯著差異。與放牧組相比，補(bǔ)飼組犢牛脂肪沉積量更高。

3.3 放牧加補(bǔ)飼對(duì)西門(mén)塔爾犢牛血清激素及免疫指標(biāo)的影響

GH不僅可促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)，同時(shí)可提高動(dòng)物體蛋白合成和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)能力[23]。龔飛飛等[34]研究表明，為放牧羔羊合理補(bǔ)飼，可促進(jìn)其血清GH分泌，并提高羔羊日增重。而Holcombe等[35]研究發(fā)現(xiàn)羔羊日增重提高對(duì)血清中GH變化無(wú)顯著影響，這與本研究結(jié)果一致，可能是由于補(bǔ)飼日糧成分和飼養(yǎng)環(huán)境等因素影響GH的分泌。甲狀腺激素可促進(jìn)腸道對(duì)葡萄糖的吸收，提高糖異生和肝糖原的合成[36]。甲狀腺激素主要有T3和T42種形式，是反映骨骼生長(zhǎng)的主要指標(biāo)之一[37]。有研究報(bào)道T3、T4可與GH協(xié)同促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)[17,38]，與增重呈正相關(guān)[37]。本研究結(jié)果表明補(bǔ)飼可顯著提高犢牛日增重，有提高犢牛血清中T3和T4水平的趨勢(shì)。

犢牛出生后會(huì)逐漸建立自身免疫，4周齡前依靠初乳中的免疫球蛋白獲得被動(dòng)免疫，隨著日糧采食量的增長(zhǎng)，被動(dòng)免疫會(huì)逐漸消失[39]。IgG是血清中免疫球蛋白的主要成分，是機(jī)體初級(jí)免疫應(yīng)答最持久、最重要的抗體[40]，其作為免疫屏障，有抗菌、抗病毒的作用[41]。本研究中放牧加補(bǔ)飼組犢牛IgG含量顯著高于補(bǔ)飼組，證明補(bǔ)飼有利于提高犢牛免疫功能。巨噬細(xì)胞是一類(lèi)重要的免疫細(xì)胞，可直接或間接作用分泌各種細(xì)胞因子(IL-1)，參與免疫調(diào)控[35]。蛋白質(zhì)是免疫系統(tǒng)發(fā)育和機(jī)能健全的物質(zhì)基礎(chǔ)，添加蛋白質(zhì)會(huì)導(dǎo)致外周巨噬細(xì)胞數(shù)量上升，吞噬細(xì)胞活性提高[42]。IL-1主要由活化的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可參與免疫反應(yīng)并提高其功能，過(guò)高的IL-1將引起動(dòng)物體內(nèi)組織細(xì)胞損傷，減緩生長(zhǎng)速度[42-44]。在本研究中2組犢牛飼養(yǎng)環(huán)境和草場(chǎng)范圍相同，補(bǔ)飼組犢牛體內(nèi)IL-1含量顯著高于放牧組。綜上推斷，導(dǎo)致IL-1含量顯著升高的主要原因可能與補(bǔ)充日糧中蛋白水平有關(guān)。張乃鋒[42]在其研究中提到IL-1水平隨蛋白水平增長(zhǎng)而提高，蛋白含量提升可促進(jìn)機(jī)體非特異性免疫功能，但其含量增長(zhǎng)量未達(dá)到致?tīng)倥Ｐ纬裳装Y的程度，對(duì)犢牛肝功能和生長(zhǎng)發(fā)育未造成不良影響。IL-1可通過(guò)輔助T淋巴細(xì)胞促進(jìn)抗體產(chǎn)生，并誘導(dǎo)其產(chǎn)生IL-2，從而增強(qiáng)特異性免疫[42]，IL-2在機(jī)體內(nèi)有促進(jìn)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化的作用，可增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞的殺傷活性，是反應(yīng)機(jī)體免疫機(jī)能高低和抗病力強(qiáng)弱的重要參考指標(biāo)[39,45]。在本研究中2組犢牛IL-2含量無(wú)顯著性差異，但補(bǔ)飼組含量較高，表明放牧加補(bǔ)飼組犢牛免疫機(jī)能有高于放牧組的趨勢(shì)。

4 結(jié) 論

補(bǔ)飼可提高放牧西門(mén)塔爾犢牛的生長(zhǎng)性能，改善血液生化指標(biāo)、血清激素水平，進(jìn)而改善西門(mén)塔爾犢牛整體免疫水平。