王思媛,馮 琪,景艷莉
(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)園藝園林學(xué)院,黑龍江大慶 163000)
板藍(lán)根(RadixIsatidis),別名靛青根、藍(lán)靛根、靛根,是十字花科植物菘藍(lán)(IsatisindigoticaFort.)的根。具有清熱解毒、涼血利咽之功效,廣泛用于治療多種疾病如流感、腮腺炎、外感發(fā)熱、溫毒發(fā)斑、風(fēng)熱感冒、咽喉腫爛、流行性乙型腦炎、肝炎、腮腺炎[1]。是全國(guó)廣泛種植的大宗草藥之一。
可溶性糖在植物中主要包括葡萄糖、果糖、蔗糖,作為信號(hào)分子在植物體內(nèi)調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng),在植物的生長(zhǎng)發(fā)育及形態(tài)構(gòu)成過(guò)程中起著重要作用。植物組織中可溶性糖含量測(cè)定是一項(xiàng)常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)[2]。新鮮樣品液氮冷凍處理方法屬于超低溫保存,是生物材料所有的代謝活動(dòng)和細(xì)胞分裂都將停止,細(xì)胞幾乎處于完全不活動(dòng)的狀態(tài),解凍后仍能存活的技術(shù)[3-4]。測(cè)定可溶性糖含量通常使用蒽酮比色法[5],對(duì)板藍(lán)根根部和葉部樣品分別進(jìn)行烘干處理[6-7]和液氮冷凍處理,旨在探究哪種樣品處理方法能夠更準(zhǔn)確地測(cè)定出板藍(lán)根內(nèi)可溶糖的含量。
試驗(yàn)菘藍(lán)種子由大慶市紅崗區(qū)晟乾中藥材種植合作社提供,原產(chǎn)地為山西省運(yùn)城市萬(wàn)榮縣,播種于大慶市大同區(qū)黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)試驗(yàn)基地。在2020年7月采集3株施肥不同但長(zhǎng)勢(shì)良好的板藍(lán)根進(jìn)行處理,編號(hào)為 A (尿素:15.87kg/667m2,過(guò)磷酸鈣:86.25kg/667m2,硫酸鉀:15kg/667m2)、B (尿素:23.81kg/667m2,過(guò)磷酸鈣:57.5kg/667m2,硫酸鉀:15kg/667m2)、C (尿素:15.87kg/667m2,過(guò)磷酸鈣:57.5kg/667m2,硫酸鉀:22.5kg/667m2)。
將板藍(lán)根A、B、C的根部和葉部中間1/3切碎混合均勻。每株稱取0.2g(±0.04g)/份根部和葉部,分別將每份處理用錫紙包裹后放入液氮內(nèi)冷凍后放入-80℃冰柜保存,處理編號(hào):凍A、凍B、凍C,重復(fù)3次;每株稱取足夠量的根部和葉部并記錄,先將葉部放入恒溫烘干機(jī)內(nèi)進(jìn)行105℃、30min殺青,再同地下部分在60℃[8]的條件下烘干至恒重,記錄,每株稱取0.2(±0.04g)/份根部和葉部,處理編號(hào):干A、干B、干C,重復(fù)3次。
測(cè)定方法參照李合生的蒽酮比色法[9]。
板藍(lán)根A、B、C株的根部與葉部經(jīng)過(guò)烘干和液氮冷凍處理后測(cè)得可溶性糖含量見(jiàn)表1。通過(guò)數(shù)據(jù)分析可知,板藍(lán)根根部、葉部經(jīng)過(guò)烘干處理測(cè)得可溶性糖含量均與液氮冷凍處理測(cè)得可溶性糖含量存在極顯著的差異(p<0.01),烘干處理測(cè)得可溶性糖含量均高于液氮冷凍處理,且板藍(lán)根根部的可溶性糖含量高于葉部。
表1 各部位不同處理對(duì)測(cè)量板藍(lán)根可溶性糖含量的影響
由于不同處理后的含水量不同,因此,利用折算分析直觀地比較收獲時(shí)期同質(zhì)量板藍(lán)根根部與葉部的可溶性糖含量。
通過(guò)樣品的鮮重與烘干后的重量計(jì)算得出板藍(lán)根根部和葉部的折干率回歸方程(根部折干率回歸方程:y=0.4084x-0.928,R2=0.9988;葉部折干率回歸方程:y=0.28x-1.0007,R2=0.9995)。假設(shè)在收獲時(shí)期,同質(zhì)量為44g的新鮮板藍(lán)根根部分別進(jìn)行液氮冷凍和烘干處理,烘干處理經(jīng)過(guò)折干率折算得出烘干后樣品重量,再計(jì)算得出可溶性糖含量,與液氮冷凍處理后的板藍(lán)根根部的可溶性糖含量比較,見(jiàn)表2。同樣假設(shè)在收獲時(shí)期,同質(zhì)量為40g的板藍(lán)根葉部分別進(jìn)行液氮冷凍和烘干處理,烘干處理經(jīng)過(guò)折干率折算得出烘干后樣品重量,再計(jì)算得出可溶性糖含量,與液氮冷凍處理后的板藍(lán)根根部的可溶性糖含量比較,見(jiàn)表2。
表2 各部位不同處理的板藍(lán)根可溶性糖含量
通過(guò)數(shù)據(jù)分析可知,新鮮板藍(lán)根根部經(jīng)過(guò)烘干處理測(cè)得可溶性糖含量與液氮冷凍處理測(cè)得可溶性糖含量存在顯著的差異(p<0.05),根部烘干處理測(cè)得可溶性糖含量比液氮冷凍處理增加了50.8%,說(shuō)明板藍(lán)根根部經(jīng)過(guò)烘干處理的樣品能更準(zhǔn)確地測(cè)量出其可溶性糖的含量。板藍(lán)根葉部經(jīng)過(guò)烘干處理測(cè)得可溶性糖含量與液氮冷凍處理測(cè)得可溶性糖含量存在顯著的差異(p<0.05),葉部烘干處理測(cè)得可溶性糖含量比液氮冷凍處理增加了31%。說(shuō)明板藍(lán)根葉部經(jīng)過(guò)烘干處理的樣品也能更準(zhǔn)確地測(cè)量出其可溶性糖的含量。
經(jīng)過(guò)研究分析以及折干率的計(jì)算得出,烘干處理下板藍(lán)根根部與葉部的可溶性糖含量更高并與液氮冷凍處理下的可溶性糖含量存在顯著差異。烘干處理能夠更準(zhǔn)確地測(cè)量出板藍(lán)根的可溶性糖含量。在同種處理下,板藍(lán)根A、B、C的可溶性糖含量不同可能是由于施肥量不同導(dǎo)致的結(jié)果。