孟慶順 孫麗

摘要：試驗建立了用氣相色譜法對大米中禾草敵殘留量進(jìn)行測定的方法，采用火焰光度檢測器FPD，外標(biāo)法，自動進(jìn)樣。結(jié)果表明，大米中禾草敵檢出限2 μg/kg（進(jìn)樣量為1 μL，S/N=3），標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為10～100 μg/kg（r=0.999 74），樣品加標(biāo)回收率80.0%～97.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD（n=10）3.28%。該方法回收率高、重現(xiàn)性好、分析時間短，是一種準(zhǔn)確快速簡單的檢測方法。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法;大米;禾草敵;火焰光度檢測器

中圖分類號：O657.7+1;S511 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：0439-8114（2020）15-0126-03

Abstract： A method for the determination of herbicide residues in rice was established by gas chromatography. The method was validated by flame photometric detector FPD， external standard method and automatic injection. The results showed that the detection limit of diclofenac sodium was 2 μg/kg （injection volume was 1 μL， S/N 3）， the linear range of standard curve was 10～100 μg/kg （r =0.999 74）， the recovery of standard addition was 80.0%～97.5%， RSD （n=10） was 3.28%. The method has the advantages of high recovery rate， good reproducibility and short analysis time. It is an accurate， fast and simple detection method.

Key words： gas chromatography; rice; molinate; flame photometric detector

禾草敵，中文別名禾草知、禾大壯顆粒劑、殺克爾、草達(dá)滅、草達(dá)滅顆粒劑，是一種氨基甲酸酯類選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型稻田專用低毒除草劑，屬類脂合成抑制劑。禾草敵適用于水稻秧田、直播田及插秧本田。持效期30～40 d，主防稻田稗草，施藥后，由于比重大于水而沉降在水與泥的界面，形成高濃度的藥層，雜草通過藥層時，能迅速被初生根，尤其是芽鞘吸收，并積累在生長點的分生組織，阻止蛋白質(zhì)合成，使增殖的細(xì)胞缺乏蛋白質(zhì)及原生質(zhì)而形成空脆;禾草敵還能抑制α-淀粉酶活性，停止或減弱淀粉的水解，使蛋白質(zhì)合成及細(xì)胞分裂失去能量供給，受害的細(xì)胞膨大，生長點扭曲而死亡。水稻是中國最主要的糧食作物之一，隨著禾草敵的大量施用，有可能污染周圍環(huán)境，包括種植的大米，對人的健康造成危害。為了預(yù)防可能存在的風(fēng)險，需要檢測大米中禾草敵殘留量。GB2763-2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) ?食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[1]和原國家食藥總局發(fā)布的《2017版國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則》都規(guī)定了禾草敵殘留量是必檢的農(nóng)殘項目，用GB/T 5009.134-2003《大米中禾草敵殘留量的測定》[2]方法檢測。隨著科技的不斷進(jìn)步，檢測方法沒有得到相應(yīng)的發(fā)展，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法使用填充柱，標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定樣品提取如下：將混合均勻的樣品置于250 mL三角瓶，加入100 mL丙酮水（1+1），振蕩提取 ? ? ? 30 min，用鋪有玻璃纖維濾紙的布氏漏斗抽濾，再用100 mL丙酮水（1+1）洗滌3～4次，合并濾液于 ? ?500 mL分液漏斗中，加入0.05 moL/L HCl 3 mL，用石油醚提取3次，每次20 mL，振搖1 min，石油醚層經(jīng)5 g無水硫酸鈉脫水于45 ℃恒溫水浴鍋減壓濃縮約5 mL。凈化：層析柱中依次加入2 g無水硫酸鈉、5 g硅鎂吸附劑，用20 mL石油醚濕法裝柱，柱上端再鋪2 g無水硫酸鈉，將提取液轉(zhuǎn)入層析柱中，用50 mL乙醚+石油醚（1+1）洗脫，于45 ℃水浴減壓濃縮并定容，放入冰水浴中留待GC分析。該標(biāo)準(zhǔn)方法操作處理過程繁瑣復(fù)雜，需要大量的有機(jī)試劑，污染環(huán)境，對人體健康帶來危害，需要對檢驗方法進(jìn)一步優(yōu)化和探討[3-8]。利用安捷倫7890B氣相色譜FPD檢測器，不僅檢測結(jié)果重現(xiàn)性好，且樣品前期處理簡單，樣品直接用乙腈溶解，過濾，濃縮（禾草敵沸點約202 ℃），丙酮定容，用氣相專用小柱凈化，干擾物質(zhì)少，分析時間短，是定量檢測大米中禾草敵殘留量的理想方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

安捷倫7890B氣相色譜儀，配有FPD檢測器、硫濾光片、7693液體自動進(jìn)樣器和150位進(jìn)樣盤。

乙腈（色譜純）;丙酮（色譜純）;禾草敵標(biāo)樣濃度100 μg/mL，不確定度3%，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司;有機(jī)相針式濾器（尼龍），上海安譜實驗科技有限公司，100只/罐，13 mm，0.22 μm。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱為DB-1701毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）;檢測器260 ℃（FPD檢測器），進(jìn)樣口溫度220 ℃，100 ℃保持1 min，20 ℃/min升溫至220 ℃保持4 min;后運(yùn)行至250 ℃，載氣為高純氮;柱流速1.0 mL/min。不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量 ?1 μL。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.01、 0.02、0.04、0.08、0.10 mL于10 mL的容量瓶中，以丙酮稀釋定容，濃度分別為0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 μg/mL，現(xiàn)用現(xiàn)配，禾草敵濃度的平方與峰面積成正比，利用安捷倫7890B脫機(jī)狀態(tài)工作站，在校正設(shè)置中選擇二次曲線，與原標(biāo)準(zhǔn)手動繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線相比更簡便。

1.2.3 試樣制備及測定 準(zhǔn)確稱取混合均勻樣品10 g于100 mL離心管中，加入60 mL乙腈，振蕩提取40 min，高速離心10 min（10 000 r/min），樣液過濾于蒸發(fā)皿中，在50 ℃水浴鍋中濃縮近干，用丙酮定容至1 mL，用0.22 μm氣相濾頭過濾于進(jìn)樣瓶中，待測。同時做空白試驗，樣品的提取在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。

在試驗條件下，7890B FPD檢測器樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的色譜見圖1、圖2。從工作站色譜可得出，0.40 μg/mL禾草敵分離度為50.03，塔板數(shù)為280 189，完全可以滿足實驗室的檢驗要求。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測器及柱箱程序升溫的選擇

FPD檢測器對禾草敵響應(yīng)具有明顯的優(yōu)勢，儀器靈敏度高，重現(xiàn)性好，對環(huán)境污染小。利用正交試驗法對色譜柱、進(jìn)樣口、檢測器溫度進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計，找出最佳溫度和程序升溫時間。即FPD檢測器260 ℃，進(jìn)樣口溫度220 ℃，100 ℃保持1 min，20 ℃/min升溫至220 ℃保持4 min;后運(yùn)行至250 ℃，載氣為高純氮;柱流速1.0 mL/min。不分流進(jìn)樣。進(jìn)樣量1 μL。

2.2 色譜柱的選擇

在實驗室常用的毛細(xì)管柱中選擇非極性（DB-1）、弱極性（DB-5）、中極性（DB-1701、HB-5）、極性柱（DB-210）進(jìn)行試驗驗證。根據(jù)待測物的性質(zhì)，以及參考相關(guān)文獻(xiàn)，最終選擇DB-1701毛細(xì)管柱 ?（30 m×0.32 mm×0.25 μm），分離效果最理想。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度和檢出限

按試驗方法測定系列標(biāo)準(zhǔn)液，10～100 μg/kg呈線性，利用安捷倫7890B氣相色譜儀工作站中的校正表得出線性回歸方程為Y=2 709.575 76X2+ ? ? ?1 005.997 00X-107.127 33，相關(guān)系數(shù)r=0.999 74（圖3）。0.10 μg/mL禾草敵標(biāo)準(zhǔn)譜工作站得出，信號噪聲比為16.5，逐級稀釋0.10 μg/mL禾草敵標(biāo)準(zhǔn)濃度至0.02 μg/mL，工作站得出的信號噪聲比為3.4，即0.02 μg/mL是此檢測條件禾草敵的最低檢測濃度。大米中禾草敵檢出限（進(jìn)樣量1 μL，3S/N）為2 μg/kg。取市場上檢測出禾草敵的大米10份，做精密度試驗，測出禾草敵的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為3.28%。

2.4 方法的回收率

準(zhǔn)確稱大米10 g共3份于250 mL三角瓶中，迅速加入0.1、0.2、0.8 mL禾草敵標(biāo)樣（1.0 μg/mL）。按“1.2.3”進(jìn)行分析，平行測定3次，被測樣品加標(biāo)回收率在80.0%～97.5%，表明測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠（表1）。

3 結(jié)論

采用該方法對大米中禾草敵殘留量進(jìn)行測定，采用外標(biāo)法，前處理簡單，有機(jī)試劑用量少，干擾組分少，環(huán)境污染小，分析時間短[9，10]。通過對樣品的加標(biāo)回收和樣品中目標(biāo)物質(zhì)的反復(fù)多次驗證，該方法精密度和準(zhǔn)確度高，靈敏度好， 觖決了GB/T ? ? ? 5009.134-2003《大米中禾草敵殘留量的測定》方法中的缺點，GB2763-2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) ?食品中農(nóng)藥最大殘留限量》標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定禾草敵殘留量最大為0.1 mg/kg，該方法完全滿足標(biāo)準(zhǔn)的要求，適合基層檢驗機(jī)構(gòu)快速定量批量檢測大米中禾草敵殘留量。

參考文獻(xiàn)：

[1] GB 2763-2019，食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量[S].

[2] GB/T 5009.134-2003，水稻中禾草敵殘留量的測定[S].

[3] 楊 軍. 我國食物中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留現(xiàn)狀及干預(yù)措施[J]. 中國公共衛(wèi)生，2000（16）：755-756.

[4] 王 華 ，熊漢國，潘學(xué)榮. 有機(jī)磷農(nóng)藥殘留快速檢測方法研究進(jìn)展[J]. 中國公共衛(wèi)生，2007（4）：500-501.

[5] 孫 波，孫 昊，武首香. 有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測方法及研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工，2015（3）：70-72.

[6] 胡海濤，代 澎，馬金波. 氣相色譜法同時測定食品中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留方法研究[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2012（11）：2600-2601.

[7] 丁耀泉，陳瑞娟. 東莞市市售食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量監(jiān)測與分析[J]. 衛(wèi)生職業(yè)教育，2008，26（23）：90-92.

[8] 谷 敏，廖敏立 ，范江平，等. 氣相色譜法測定大米中有機(jī)磷殘留量的方法探究[J]. 廣東化工，2016，43（16）：182-183.

[9] 明宗元. 我國食品農(nóng)藥污染現(xiàn)狀分析與研究[J]. 北京農(nóng)業(yè)，2011（18）：117-118.

[10] 柴麗月，常衛(wèi)民，陳樹兵，等. 食品中農(nóng)藥殘留分析技術(shù)研究[J]. 食品科學(xué)，2006，27（7）：260-264.