范婷
摘 要:免疫膠體金技術(shù)是以膠體金作位示蹤標(biāo)志物,應(yīng)用在抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù),膠體金不光可以和蛋白質(zhì)結(jié)合還可以與其他大分子相結(jié)合,被廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)和細胞生物學(xué)等領(lǐng)域,其成本非常的低,不需要特殊的儀器設(shè)備,應(yīng)用的范圍也非常的廣泛,可以適應(yīng)各種檢測條件和進行多項的檢測。免疫膠體金用于基層和現(xiàn)場快速檢測,并在快速檢測試劑中得到了非常廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。
關(guān)鍵詞:膠體金免疫層析;原理;應(yīng)用
0 引言
膠體金免疫層析技術(shù)是一種新型的體外診斷技術(shù),膠體金是顯色物,硝酸纖維膜是載體,能夠在層析的過程中達到檢測的目的。它的應(yīng)用范圍非常的廣泛,膠體金標(biāo)記技術(shù)標(biāo)記物的制備非常的簡便,方法敏感、特異,不需要使用放射性同位素,或有潛在致癌物質(zhì)的酶顯色底物,也不要熒光顯微鏡,膠體金是由氯金酸在還原劑的作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。
1 膠體金免疫層析技術(shù)概述
1.1 概述
膠體金除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外,還可以與SPA、PHA、ConA等大分子相結(jié)合,根據(jù)膠體金的物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應(yīng),加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)特性。它適用非常的方便和快速,所有的反應(yīng)都能在15分鐘內(nèi)完成,其本身是紅色,不需要加入發(fā)色試劑,對人體無害,標(biāo)記物也很穩(wěn)定,標(biāo)記樣品可以在4℃下貯存兩年以上。
1.2 原理
膠體金免疫層析試劑條最底層是保護層,次底層一般都是硝酸纖維素膜,在它上面固定了檢測蛋白。連接著膜的是包含有干燥劑金標(biāo)的金標(biāo)墊,在現(xiàn)有的大部分是試紙條中,金標(biāo)墊的金顆粒能特異性與檢測物中的抗體或抗原結(jié)合。樣品墊通常是紙,粘貼著金標(biāo)墊。當(dāng)液體樣品滴在樣品墊的時候,液體油毛細管作用力擴散通過金標(biāo)墊,干燥金標(biāo)遇水以后便于樣品中的分析物結(jié)合。
1.3 膠體金免疫層析的方法
膠體金免疫層析當(dāng)下的檢測方法非常的多,有間接法、夾心法、雙抗體夾心法、競爭法以及捕獲法,像間接法是用膠體金來標(biāo)記二抗,像是沒有標(biāo)記的特異性與已知抗原結(jié)合,間接法經(jīng)常是用在檢測血清樣本中的病毒上,雙抗夾心法就是用在檢測病原微生物性的大分子抗原,像早早孕試紙就是用這個方法,競爭法經(jīng)常用在濫用藥物、嗎啡、農(nóng)藥殘留等檢測上,捕獲法是用在風(fēng)疹病毒、艾滋病等檢測上。
2 膠體金免疫層析技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用
當(dāng)前食品安全的問題越來越多,對我國的食品行業(yè)的發(fā)展非常的不利,同時也造成了經(jīng)濟上面的損失。對此相關(guān)行業(yè)決定加強對食品安全檢測的研究,為了讓食品安全不在出現(xiàn)問題,便采用了先進的檢測技術(shù),膠體金層析技術(shù)就能夠快速有效的檢測出來,并且其成本非常的低,很適合基層的人員檢測,有了這項技術(shù)的應(yīng)用很好的促進了食品安全檢測的發(fā)展。
2.1 藥物殘留的檢測
隨著農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)的發(fā)展,也為人們帶來了許多的困擾,像那些農(nóng)藥和獸藥殘留以及食品中所添加的有害物質(zhì)都對人們的人體健康造成影響,為人們的食品安全問題造成了很大的威脅,但是大多數(shù)檢測藥物殘留的方法都非常的復(fù)雜、繁瑣、儀器也是非常的昂貴,這就需要膠體金免疫層析的存在,它不需要什么太大的儀器,成本更低保留的時間也很長,檢測的時間也非常的快,非常的適合基層的人員檢測。
2.2 食品中病原微生物檢測
在食品安全中絕對杜絕微生物的污染,這些腸道微生物致病菌的存儲嚴(yán)重危害著人們的身體健康問題,傳統(tǒng)的微生物檢測方法時間都比較的長,想那些潛在的病菌還不能夠全面的檢測出來,因此金體膠免疫層析技術(shù)就能夠檢測潛在的病菌,還可以不用接觸危險品。金體膠免疫層析技術(shù)在微生物檢測當(dāng)中有著非常不錯的作用。
2.3 生物毒素的檢測
真菌毒素的毒素更加是一種毒素比較高的生物毒素,它的范圍非常的廣泛,有著非常多的種類,如果和食品相結(jié)合了會對人們的健康有著很大危害,對于國內(nèi)這種病毒污染的問題比較嚴(yán)重,就非常的需要金體膠這種快速、高效的測試技術(shù),從而達到現(xiàn)場快速的檢測。
3 膠體金免疫層析技術(shù)的優(yōu)缺點
膠體金免疫層析技術(shù)有著高效、快速、成本低的特點能夠準(zhǔn)確清晰的測試所存在的問題,其設(shè)備上也沒有多大的特殊性,非常的方便攜帶,在特定的溫度下可以存儲很長的時間也不會出現(xiàn)信號衰減的現(xiàn)象,對人體也沒有什么害處,這些優(yōu)點同類測試技術(shù)都不能夠做到,不過仍然會出現(xiàn)一些問題,像是操作時的清潔度,顆粒本身的特性會對結(jié)果造成影響,檢測的重復(fù)性比較的低,如果被測試的樣品出現(xiàn)成分復(fù)雜、種類較多的情況下,就會影響測試的反應(yīng),測試的結(jié)果可能會出現(xiàn)高假陽性以及假陰性的幾率,不能夠自動化儲存。
4 總結(jié)
由于當(dāng)前科技的飛快發(fā)展,膠體金免疫層析技術(shù)有著很大的發(fā)展空間和發(fā)展?jié)摿Γ嘈湃蘸蟮哪z體金免疫層析技術(shù)能夠在食品安全檢測上大展拳腳。
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