張 平 魏京廣 吳金英*

（1 中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 廣東廣州 510275 2 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)海洋學(xué)院 廣東廣州 510642）

魚類生理學(xué)的許多實驗都需要抽取血樣進行分析測定，目前常用的魚類取血的方法大概有3種：心臟取血、斷尾取血及尾部血管取血［1-5］。心臟取血血量足，但取血后魚必然死亡，而且許多實驗不需要那么大量的血液。斷尾取血會夾雜著體表的粘液或水分，甚至還會有體內(nèi)的組織等，適用于一些要求不高或?qū)﹄s質(zhì)影響不計的實驗，體長小于5 cm 的魚斷尾后可能根本觀察不到血液流出。尾部血管取血的方法相對簡單，并且在3 種方法中對魚的傷害最小，取血后魚還可放歸水體中存活，此方法尤其適用于需連續(xù)性數(shù)據(jù)的實驗，但操作有一定的技術(shù)難度。

筆者在多年的教學(xué)科研中探索出了一套較為成熟的魚尾部血管取血的方法，只要熟練掌握其中幾個要點并注意到關(guān)鍵問題，就可又快又好地獲取魚血?，F(xiàn)以吉富羅非魚為例，對流程和技術(shù)要點進行介紹。

1 魚體保定

抓魚前首先要了解魚類尾柄的位置，從臀鰭基部后端至尾鰭基部的部分都是尾柄（圖1）；熟悉魚類尾椎骨、尾動脈和尾靜脈的情況（圖1），其尾椎背面是椎弓，延伸成椎棘；腹面是脈弓，延伸成脈棘；椎弓容納和保護脊髓，脈弓包圍尾動脈和尾靜脈，需明確其脈弓內(nèi)具有脈孔、有尾動脈和尾靜脈通過；并熟練掌握注射器的使用。如果采血量不多，可采用濕毛巾包埋魚的頭部，盡量不要麻醉，麻醉會影響后續(xù)相關(guān)實驗。如果抽血量較大，則需要麻醉魚?？膳宕髅蘧€手套，保持魚鰓部有水流，盡量避免用手直接接觸魚體，減少感染。

圖1 鯉魚的骨骼［6］

2 抽血

用注射針頭從尾柄腹方正中部前方刮掉一片魚鱗，略為傾斜地插入尾椎骨附近（圖2、圖3），并將針稍微后退一些，然后小心推進，進入血管棘之間，輕輕刺破流經(jīng)血管弧的動脈或靜脈，若這時見注射針端有血液涌出（圖4），表明已正確刺破尾部血管；隨后輕拉注射柄使注射針筒出現(xiàn)負壓，血液就會慢慢注入而得到血樣，達到適合的量后拉出針頭（圖5）；若未達到所需血量，可將針筒拔出且暫時留下針頭，將針筒內(nèi)的血液注進收集管內(nèi)，然后，再接上原來的針頭，再次抽取血樣，此操作過程可反復(fù)多次直至取夠所需血量。

圖2 進針位置（尾柄腹方正中部）

圖3 進針操作

圖4 血液涌出

圖5 血液逐漸充滿針管

3 拔針止血

用手指壓住取血部位，經(jīng)1 min 左右，直至不滴血為止。

4 魚回歸水體

拿走毛巾，盡快將魚放回水體中并充氧，以便下次繼續(xù)使用。

5 小結(jié)

整個流程的難點是正確刺破魚尾部血管，以及尾部血管進針位置是在魚尾柄腹方正中部前方。如果刺破血管失敗，再次扎針時必須要移向原針口的前方處。抽血過程中，如果發(fā)現(xiàn)血液不再繼續(xù)注入針筒，可輕微轉(zhuǎn)動針頭直到血液繼續(xù)注入，若還無效果，則將注射器拔出，清洗干凈或取新的注射器重新操作。