宗延波
【摘要】 中藥材鑒定技術正朝著系統(tǒng)化、通用化、標準化、信息化、精細化的方向不斷發(fā)展,各種鑒定技術也獲得廣泛應用,本文詳細介紹了光譜法、分子生物技術、色譜法等前沿科學技術方法在中藥材鑒定領域的技術應用,希望能夠促進中藥現(xiàn)代化事業(yè)蓬勃發(fā)展,滿足中藥研究領域的現(xiàn)代化需求。
【關鍵詞】 中藥材鑒定;新技術;新方法
【中圖分類號】 R969.4?【文獻標志碼】A 【文章編號】1005-0019(2020)12-112-01
前言
中藥材原材料大部分來自于自然界的動植物,原材料成分品種復雜,藥效差異極大,因此對中藥材的鑒定工作十分重要,是保障中藥治療效果的前提條件,通常情況對中藥材的鑒定常用來源鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定、理論鑒定等方法進行,而隨著不同領域之間的交叉影響,計算機技術、生物新技術對中藥材鑒定領域的影響的不斷加深,生成發(fā)展了很多的新技術,推進了中藥材鑒定技術的不斷發(fā)展。本文對近些年來新出現(xiàn)的中藥材鑒定技術方法此做了詳細介紹和分析。
1 光譜法
如今的對光譜法應用極為普遍,而光譜法又可以細分為:紫外分光光譜法、可見分光光度法、原子吸收分光光度法、紅外分光光度法等。而最近幾年,經常應用的光譜法則有:中紅外光譜法(MIR)、質譜法(MS)、近紅外光譜法(NIR)和X射線衍射法(XRD)等。
NIR的光譜譜區(qū)范圍在780nm-2526nm之間,NIR法對檢測物測定迅速且無損傷,通常對藥材的原料藥和固體樣本進行檢測分析,其方法優(yōu)點有:鑒別速度快、鑒別效率高、鑒別無損傷、重現(xiàn)性好等。所以自上世紀70年代開始,NTR法在中藥材檢測鑒定領域逐漸被廣泛使用。但NTR法的應用對樣品也有一定要求,要建立穩(wěn)健良好的近紅外模型要求必須有數(shù)量足夠多且代表性強分布均勻的樣本作為參考,這是基本前提[1]。
MIR在中藥材鑒定方面由于其指紋區(qū)強的優(yōu)勢的得到極大的應用。其優(yōu)勢在于:1.可以整體反應受檢測中藥材樣品的化學信息[2];2.和其他附件技術整合使用,能夠快速對樣品進行鑒別,且不需要經過分離提取等預先處理過程;3.操作簡便,重復性好,但許多近緣中藥材品種在圖譜特征上變化稍小,因此對MIR應用一定局限性[3]。
XRD是使用X射線對晶粒的形狀大小進行準確檢測,且不污染受測樣品,其測量精度非常高,還能準確反應晶體大量的相關信息。XRD主要運用于對礦物類中藥材的檢測鑒定。據(jù)相關研究表明,XRD可以用于對爐甘石化學成分含量的鑒定檢測,通過檢測受鑒定爐甘石樣品中的主要化學成分ZnCO3 或ZnO的含量,來鑒別受檢測爐甘石樣品的真?zhèn)巍?/p>
2 色譜法
在中藥材鑒定領域當中對色譜法的運用范圍較一般方法廣,依據(jù)流動相和固定相的分子聚集狀態(tài)和操作形式將色譜法又細化為:薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、紙色譜法和柱色譜法等。而最近幾年,包含在色譜法當中的新中藥材鑒定方法如:蛋白電泳色譜法、指紋圖譜法等也開始逐漸推廣使用。
蛋白電泳色譜法廣泛適用于對蛋白質、氨基酸類成分的鑒定與分析,中藥材大多含有蛋白質及氨基酸,尤其是果實種子類中藥材,如桃仁、杏仁等,以及動物類藥材,如壁虎、烏梢蛇等。目前該方法已經用于對西洋參、人參及其偽品的鑒定。
首先介紹蛋白電泳色譜法,很多中藥材中含有蛋白質和氨基酸,譬如植物類中藥材,如桃仁、杏仁等,然后是動物類中藥材,如壁虎、烏梢蛇等,而蛋白電泳色譜法正是適用于對蛋白質和氨基酸類成分的檢測,其適用范圍非常廣,就新階段成果表明,該方法能夠準確鑒別西洋參、人參的真?zhèn)巍?/p>
然后是指紋圖譜法,HPLC指紋圖譜法是當下使用率最高的指紋圖譜分析方法,現(xiàn)在最新使用的指紋圖譜方法借助了液質聯(lián)用(HPLC-MS)、氣質聯(lián)用(GC-MS)等新技術。高效的分離能力和可以準確定性分析受檢測中藥材的小分子化學成分是HPLC 指紋圖譜鑒定法的優(yōu)點亮點,而缺點是其通用性較差,HPLC指紋圖譜反所應出的的化學信息相當精細,在給中藥材進行鑒定檢測時需要較大的樣本量來總結物種之間的共性特征[4]。
3 分子生物技術
在中藥材鑒定領域,分子生物技術類的中藥材鑒定方法當中,最新的正在運用的方法技術手段有:細胞生物學鑒定法、生物效價測定法、mRNA差異顯示鑒定法、DNA 條形碼鑒定技術和PCR分子鑒定技術等。下文是對其中DNA條形碼鑒定技術的詳細介紹。
首先是DNA條形碼鑒定技術,其作為分子生物學鑒定技術當中較為成熟的一種,核心原理是采用較短而又標準化的 DNA 序列作為條形碼,實現(xiàn)對中藥材快速而又準確的鑒定[5]。例如某個研究,選用了992個藥用植物樣本作為研究對象,將其中的7項遴選的DNA條形碼序列進行高質量篩選,組建了以ITS2與trn H-psb A為根基的大型中藥DNA條形碼鑒定數(shù)據(jù)庫。
然后在2010年版的《中國藥典》(第三增補本)當中收錄了關于中藥材DNA條形碼分子鑒定技術的指導原則,DNA條形碼鑒定技術在中藥材基原鑒定方面擁有著良好的運用前景。此外張彩云等人[5]的研究結果顯示,DNA條形碼鑒定技術可以對道地藥材的藥用品質進行鑒別,因為同種中藥材因產地原因而造成的品質差異,會在不同居群間的遺傳特征上反映出來。
結束語
隨著現(xiàn)代科學技術當中明星學科(計算機科學、物理學、化學、生物學)的不斷深入發(fā)展,科學技術之間一些錯誤的屏障正在被打破,在各個學科和中藥材鑒定技術的不斷借鑒和結合的過程當中,誕生了諸如光譜法、色譜法、顯微測定法、鑒定法和細胞生物技術等運用范圍廣泛應用效果良好的新技術新方法。使得中藥材的鑒定正在朝著精細化、準確化、科學化、前沿化的方向發(fā)展,其正在促使中藥鑒定不斷地優(yōu)化和發(fā)生變革,使得系統(tǒng)化、信息化成為現(xiàn)代中藥材鑒定技術未來的發(fā)展趨勢,而隨著系統(tǒng)生物學、基因組學和代謝組學等現(xiàn)代生物技術科學技術理論不斷運用到中藥材現(xiàn)代鑒定領域,將會推動不斷中醫(yī)藥的現(xiàn)代化發(fā)展進程。
參考文獻
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[2]龔海燕,羅曉,雷敬衛(wèi),等 .不同產地金銀花中紅外光譜分析 [J]. 中醫(yī)學報,2016,31(1):96-98.
[3]高珊珊.中藥飲片中紅外光譜鑒定的方法研究[D]. 成都:成都中醫(yī)藥大學,2016.
[4]孫揚波 . 礦物類中藥爐甘石鑒定方法的系統(tǒng)研究[D].武漢:湖北中醫(yī)藥大學,2018.
[5]張彩云,黃珊珊,顏海飛 . DNA 條形碼技術在中藥鑒定中的應用進展 [J]. 中草藥,2017,48(11):2306-2312.