黃瀟航 宋肇程 張 龍 李詩藝 胡奇林 黃志堅(jiān) 殷光文*

(1.福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，福州，350002；2.福建農(nóng)林大學(xué)福建省動(dòng)物藥物工程實(shí)驗(yàn)室，福州，350002；3.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，福州，350013)

王錦蛇(Elaphecarinata)又稱為大王蛇、錦蛇、菜花蛇、黃蟒蛇等，是一種在我國廣泛分布的肉食性蛇類，主要分布在平原丘陵、山地的雜草荒地，分布范圍除了東北三省、內(nèi)蒙古、寧夏、新疆、青海、西藏以及海南之外，其余各個(gè)省區(qū)均有分布[1]。由于其具有較強(qiáng)的捕鼠能力，在控制鼠害方面發(fā)揮著重要生態(tài)作用。近年來，由于偷盜濫捕，導(dǎo)致野生種群急劇下降，目前借助人工繁育實(shí)現(xiàn)其種群可持續(xù)性發(fā)展顯得至關(guān)重要。蛇蛔蟲病是一種由蛇蛔蟲寄生導(dǎo)致的慢性消耗性疾病，不同品種的蛇類攜帶蛇蛔蟲的承受力存在一定差異。我國最早臨床蛇蛔蟲的報(bào)道是由周忠勇等[2]于1986年便對蟒蛇蛔蟲病在國內(nèi)的流行情況進(jìn)行了相關(guān)調(diào)查，并提及絲狀蛔蟲(Ophidascarisfilaria)的嚴(yán)重侵襲可以導(dǎo)致蟒蛇個(gè)體發(fā)生死亡。除此外，關(guān)于臨床的病例資料鮮有報(bào)道。我國科研人員于2012年解析了蛇蛔蟲的ITS序列并進(jìn)行了相關(guān)的演化研究[3]，隨后也陸續(xù)完成了對蛇蛔蟲的大小核糖亞基的遺傳序列擴(kuò)增研究[4]，為蛇蛔蟲在動(dòng)物分類學(xué)上的物種演化提供了重要的參考資料。在國外文獻(xiàn)中對于蛇類蛔蟲病的感染發(fā)生已有相關(guān)資料積累報(bào)道，國內(nèi)先后對蛇類蛔蟲病在動(dòng)物學(xué)分類種的形態(tài)描述、種群分子遺傳研究等進(jìn)行了系統(tǒng)的歸納整理[5]，但少見詳細(xì)蟲體外觀形態(tài)、病理組織學(xué)變化相關(guān)圖像資料的具體報(bào)道。通過對2019年接診的1例福建省某蛇類養(yǎng)殖場送檢的王錦蛇消化道蛔蟲病例的臨床癥狀、死亡剖檢情況、病理組織學(xué)研究及防控建議進(jìn)行介紹，希望為相關(guān)從事蛇類品種保育和繁育的機(jī)構(gòu)單位提供相關(guān)的臨床參考。

1 病例介紹

2019年下旬，福建省北部某蛇類養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的人工養(yǎng)殖王錦蛇蛇群出現(xiàn)消化不良、食欲不振的癥狀，蛇體消瘦，糞便顏色稀薄，使用益生菌藥物添加飼喂、青霉素、阿莫西林等抗生素治療效果不佳，引進(jìn)至發(fā)病均未進(jìn)行驅(qū)蟲治療，部分病蛇開始拒食，消瘦，甚至出現(xiàn)虛弱死亡。該場蛇房為水熱加溫，蛇房為土磚瓦房結(jié)構(gòu)，發(fā)酵床養(yǎng)殖，潮濕且保溫效果較差，蛇房環(huán)境衛(wèi)生較差。

2 臨床檢查

外觀病蛇體表鱗甲顏色暗淡，對雞雛等鮮飼料采食欲望不強(qiáng)。病蛇口部有大量人工填喂的食糜堆積(圖1)，形態(tài)消瘦(圖2)，行動(dòng)遲緩，數(shù)日抗拒進(jìn)食但腹部鼓起，質(zhì)地堅(jiān)硬。該場曾使用青霉素、阿莫西林等抗菌藥物治療無效，且無驅(qū)蟲藥使用慣例，加之發(fā)病蛇群發(fā)病進(jìn)程較慢，傳染性較弱，送檢懷疑為寄生蟲寄生感染導(dǎo)致。

圖1 病蛇口中充滿大量的反流食糜，口腔內(nèi)散發(fā)惡臭Fig.1 The diseased snake’s mouth is filled with a large amount of reflux chyme，and the mouth has a foul odor

圖2 拒絕采食后消瘦的病蛇Fig.2 The diseased snake is thin after refusing to eat

3 病理剖檢

使用高壓滅菌過的手術(shù)器械對病死蛇進(jìn)行臨床剖檢，觀察其氣管、肺、食道、肝、胃部、腸、腎等主要臟器的病變情況。對主要病變部位進(jìn)行拍照記錄，并采集主要消化器官病變部位，浸泡10%福爾馬林溶液送往福州都拜特生物技術(shù)有限公司進(jìn)行H.E.病理切片制備。

4 結(jié)果

4.1 剖檢結(jié)果

對死蛇臨床剖檢結(jié)果顯示，該蛇氣管、肺呼吸氣管均正常。消化系統(tǒng)部位觀察到靠近胃下部有異常鼓起，外部觸診較硬，懷疑為異物阻塞導(dǎo)致。觀察消化道胃腸有大量的灰白色結(jié)節(jié)異常增生，部分出現(xiàn)潰瘍灶(圖3)。剖檢胃腸，觀察在胃腸交界處內(nèi)壁有大量棕褐色、長條狀線蟲(Caenorhabditiselegans)團(tuán)栓塞，阻塞食糜，肉眼可見在腸道扎堆寄生的蟲體(圖4)，生理鹽水中蟲體活動(dòng)性較強(qiáng)(圖5)。剖檢該例病蛇完整蟲體長度約4—8 cm。

圖3 胃腸交界處形成結(jié)節(jié)性病變和潰瘍灶(箭頭標(biāo)識)Fig.3 Nodular lesions at the junction of the intestines and on the stomach wall with ulcers

圖4 腸道內(nèi)寄生的蛔蟲堵塞，食糜淤積Fig.4 Parasitic maggots in the intestine are blocked and stagnant

圖5 生理鹽水中浸泡清洗后具備較強(qiáng)活動(dòng)性的線蟲蟲體Fig.5 Soak in physiological saline nematodes with strong activity after cleaning

圖6 蛔蟲的頭部形態(tài)結(jié)構(gòu)(40×)Fig.6 Morphological structure of Ascaris head(40×)

圖7 蛔蟲的尾部形態(tài)(40×)Fig.7 Morphology of Ascaris tail(40×)

在光鏡形態(tài)下，蟲體體壁較厚，本次獲得蟲體中，較小蟲體可以觀察到具有3瓣唇口器形態(tài)，食道結(jié)構(gòu)較長(圖6)；從尾部形態(tài)看，蟲體末端具有較為尖銳的尾部形態(tài)，光鏡下可以觀察到蟲尾部內(nèi)有尖刺狀結(jié)構(gòu)(圖7)。根據(jù)臨床檢查結(jié)果，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)的蟲體形態(tài)描述記載[6]，臨床初步判斷蛇蛔蟲是導(dǎo)致本次蛇群發(fā)病的主要原因。

4.2 病理組織學(xué)

病理組織學(xué)研究選取典型病變部位進(jìn)行樣品切片，浸泡10%甲醛溶液(福爾馬林溶液)后送往福州都拜特生物技術(shù)有限公司進(jìn)行病理組織切片的制備。結(jié)果及分析如下：圖8和圖9病理組織切片中可以觀察到有腸道內(nèi)存在炎性浸潤，腸壁外壁發(fā)生嚴(yán)重機(jī)械性損傷，腸黏膜多量脫落(圖8箭頭)，存在腸道炎癥，可以在脫落的腸黏膜中觀察到寄生蟲部分蟲體(圖9箭頭)，說明蛇蛔蟲的大量寄生給王錦蛇消化道造成了較為嚴(yán)重的機(jī)械性損傷。

圖8 腸(HE，200×)Fig.8 Intestine(200×)

圖9 腸(HE，400×)Fig.9 Intestine(400×)

5 病例分析與治療

5.1 病因分析

剖檢結(jié)果顯示，蛇蛔蟲在蛇群內(nèi)的大量寄生是導(dǎo)致本次王錦蛇發(fā)病的主要原因。我國科學(xué)家對多種動(dòng)物蛔蟲有相關(guān)方面的系統(tǒng)分類和報(bào)道，證明其在臨床養(yǎng)殖中能夠造成較為嚴(yán)重的危害?；紫x的大量寄生造成的宿主營養(yǎng)攝入障礙，所攝食營養(yǎng)被大量剝奪，造成宿主動(dòng)物異常消瘦，加上寄生導(dǎo)致的機(jī)械性損傷，造成腸道黏膜免疫屏障受損，導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體免疫力下降。剖檢病蛇胃腸交界處，蛔蟲大量寄生造成胃腸交界處堵塞，從而導(dǎo)致外部食物無法通過進(jìn)入腸道，而在胃內(nèi)形成反流，造成病蛇拒絕進(jìn)食，反吐食糜。機(jī)體長期無食物供給營養(yǎng)、蛇蛔蟲在腸道內(nèi)營養(yǎng)剝奪及其在消化道內(nèi)壁上造成的機(jī)械性損傷，山區(qū)溫差變化大、溫控較差的飼養(yǎng)環(huán)境造成蛇群免疫力下降和持續(xù)性應(yīng)激等數(shù)項(xiàng)因素，最終導(dǎo)致了蛇群死亡現(xiàn)象的發(fā)生。

5.2 防控措施

蛇蛔蟲的來源可能由野生種蛇引種時(shí)帶入或者食源性攝入感染人工養(yǎng)殖蛇群，在臨床治療從預(yù)防和治療兩方面同時(shí)入手。預(yù)防上，可以對新引進(jìn)的野生種蛇進(jìn)行體表藥物消毒，驅(qū)蟲藥物治療和隔離觀察，觀察無異常后再進(jìn)入飼養(yǎng)區(qū)進(jìn)行飼養(yǎng)。對于驅(qū)蟲后的糞便進(jìn)行及時(shí)堆積發(fā)酵。對發(fā)生過蛔蟲病的蛇房在治療后進(jìn)行火焰高溫?zé)疲l(fā)酵床墊料及時(shí)清理更換，切斷環(huán)境中蛔蟲的感染來源。同時(shí)在日常飼養(yǎng)管理過程中對蛇群進(jìn)行定期的驅(qū)蟲，陸生養(yǎng)殖蛇類主要以線蟲和絳蟲(tapeworm)的驅(qū)蟲防控為主，預(yù)防性驅(qū)蟲可使用左旋咪唑。同時(shí)在平時(shí)飼養(yǎng)管理中嚴(yán)格控制人員的進(jìn)出消毒，蛇糞無害化處理，在能力范圍內(nèi)做好蛇舍溫度內(nèi)濕度和溫度的調(diào)控，減少蛇類的環(huán)境應(yīng)激。對于病蛇的治療，推薦使用阿苯噠唑或伊維菌素對患病蛇群進(jìn)行驅(qū)蟲。為了確定蟲體驅(qū)蟲后的康復(fù)效果，建議在治療藥物中增加抗生素類消炎藥物，同時(shí)使用益生菌等腸道康復(fù)制劑。此外，供應(yīng)充足的清潔飲水，補(bǔ)充適量的維生素C幫助提高健康蛇群的抵抗力。

6 結(jié)語

蛇蛔蟲涉及與報(bào)道種類較多，且生活史研究較為復(fù)雜，但食源性攝入感染依舊是主要的感染途徑?；紫x成蟲在腸道的寄生發(fā)育可以導(dǎo)致宿主動(dòng)物的消化道機(jī)械性損傷、炎癥與機(jī)械性損傷，造成動(dòng)物機(jī)體腸道免疫屏障受損而繼發(fā)細(xì)菌病等微生物疾病，嚴(yán)重危害動(dòng)物健康。動(dòng)物蛔蟲卵如豬蛔蟲卵等對外界環(huán)境抗逆性較強(qiáng)，為養(yǎng)殖臨床中徹底防控該病的發(fā)生提供了一定難度，也提供了相應(yīng)的防控思路。通過對蛇蛔蟲病的臨床表現(xiàn)、病理剖檢、病理組織學(xué)研究等方面進(jìn)行了病例研究，對發(fā)病原因進(jìn)行了分析，并提出了治療方案，為王錦蛇人工繁育提供了蛇群蛔蟲病臨床圖像資料在內(nèi)的相關(guān)參考。此外，由于臨床診斷中判斷出蟲體大類即可開展針對性治療，因此未對本次發(fā)現(xiàn)的蛇蛔蟲具體種類分類進(jìn)行生物遺傳方面的研究，結(jié)合外觀形態(tài)、光鏡觀察判斷為蛇蛔蟲，作一案例報(bào)道，后續(xù)將對其生物學(xué)分類進(jìn)一步探討。