梅振英 張榮菲 趙志敏 鄭國(guó)棟 徐新軍 楊得坡?

（1.中山大學(xué)藥學(xué)院， 廣東 廣州510006； 2.廣東省現(xiàn)代中藥工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心， 廣東 廣州510006；3.廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院， 廣東 廣州511436）

陳皮Pericarpium Citri Reticulatae為蕓香科植物橘Citrus reticulataBlanco 及其栽培變種的干燥成熟果皮［1］，其中的黃酮主要由二氫黃酮類和多甲氧基黃酮類（polymethoxyfla?vones，PMFs）組成，后者是柑橘屬特有的一類具有2 個(gè)或2 個(gè)以上甲氧基的天然黃酮類化合物［2］，具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化、降脂減肥、神經(jīng)保護(hù)等藥理活性［3?12］。近年來(lái)學(xué)者們?cè)陉惼MFs 提取純化方面開(kāi)展了大量研究，包括傳統(tǒng)溶劑法以及超聲提取、超臨界萃取、加壓溶劑萃取、高速逆流分離等，但尚未對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)整理和歸納?；谀壳瓣惼MFs 成分組成、提取純化技術(shù)和生物活性的大量研究報(bào)道，本文比較分析各種提取純化技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)，探究陳皮PMFs 化學(xué)成分與生物活性之間的關(guān)聯(lián)性，以期為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 PMFs 結(jié)構(gòu)及成分組成

PMFs 以2?苯基色原酮為母核，見(jiàn)圖1。C3 到C8 和C2′到C6′的取代基多為?OCH3、?H 或?OH，甲氧基取代多發(fā)生在6，7，8，3′，4′位，偶有5′位和6′位，天然來(lái)源的PMFs 甲氧基最多可取代7 個(gè)［13］。

圖1 PMFs 母核結(jié)構(gòu)

取代羥基的數(shù)量和位置對(duì)黃酮類化合物生物學(xué)功能具有重要影響，后者中游離羥基會(huì)在小腸和肝臟中進(jìn)行快速硫酸化和葡萄糖醛酸化，導(dǎo)致其口服生物利用度減少［14?17］，進(jìn)入體循環(huán)和進(jìn)一步在體內(nèi)分布的能力亦降低，從而限制了它們?cè)谌梭w中的應(yīng)用。與黃酮苷類化合物不同，PMFs 極性較低，不易溶于水，甲氧基越多，其在水中的溶解性越差［18］，這些特性還可以對(duì)其生物膜的滲透性、代謝速率以及結(jié)合特性等產(chǎn)生影響［19］，如可以提高代謝穩(wěn)定性，改善其在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收情況［20?23］。PMFs 的代謝受體內(nèi)細(xì)胞色素P450 酶的催化發(fā)生羥基化和去甲基化，而PMFs 的甲氧基數(shù)量和位置也影響該酶的催化作用［24?25］。PMFs 與蛋白質(zhì)、細(xì)胞膜和酶之間相互作用與其結(jié)構(gòu)中存在的甲氧基數(shù)量和位置有關(guān)，含甲氧基取代的黃酮類化合物血漿蛋白結(jié)合力比不含有甲氧基取代的提高1.38～15.85 倍［26?27］。

柑橘屬植物中含有量較高的是川陳皮素（3′，4′，5，6，7，8?六甲氧基黃酮）和橘皮素（5，6，7，8，4′?五甲氧基黃酮），具有顯著的藥理和生理活性，是迄今為止研究最為廣泛的PMFs。陳皮中PMFs 豐富，除了川陳皮素和橘皮素之外，還包括甜橙黃酮、異橙黃酮、5，7，8，3′，4′?五甲氧基黃酮、5，7，8，4′?四甲氧基黃酮、5?羥基?6，7，8，3′，4′?五甲氧基黃酮等。已報(bào)道的PMFs 見(jiàn)表1。

表1 陳皮PMFs 成分組成

在質(zhì)量控制方面，本課題組建立了同時(shí)測(cè)定陳皮中多種PMFs 的HPLC 法，并對(duì)我國(guó)32 個(gè)地區(qū)的不同批次樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，不同地區(qū)、品種其含有量存在較大差異［35］。羅琥捷等［36］，對(duì)11 個(gè)品種陳皮中PMFs 含有量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)存在明顯差異，以茶枝柑、大紅袍、福橘、蘆柑、南豐蜜橘、砂糖桔為高，均在0.4% 以上。Luo等［37］采集了來(lái)自于不同產(chǎn)地的10 個(gè)品種25 批陳皮，也表明不同品種PMFs 含有量存在較大差異。因此，今后在研究中應(yīng)建立有效的鑒別方法，有利于對(duì)不同品種陳皮的合理利用和深入開(kāi)發(fā)。

2 PMFs 提取純化

近年來(lái)，陳皮PMFs 的提取純化工藝及條件不斷得到優(yōu)化，其產(chǎn)率也在逐步提升，主要包括溶劑提取法、超聲提取法、大孔樹(shù)脂吸附法、超臨界流體萃取法及柱層析色譜法等。

2.1 溶劑提取法 溶劑提取法是實(shí)驗(yàn)室最常用的提取PMFs 方法，常用的有機(jī)溶劑有石油醚、乙酸乙酯、乙醇、甲醇等。張相飛等［38］采用溶劑提取法提取陳皮中橘皮素和川陳皮素，優(yōu)選了提取溶劑，并采用正交試驗(yàn)考察了提取溫度、提取時(shí)間、溶劑添加量和提取次數(shù)對(duì)提取工藝的影響，結(jié)果表明石油醚有較高的提取率，最佳提取工藝為加入6 倍量石油醚，80 ℃下提取4 次，每次3 h，橘皮素含有量為1.014 mg／5 g 藥材，川陳皮素含有量為1.739 mg／5 g藥材。宋玉鵬等［39］采用簡(jiǎn)單、高效的多溶劑萃取法，以丙酮?石油醚?水（6 ∶5 ∶5）為溶劑體系，從陳皮三氯甲烷萃取部分粗提物中分離得到純度高于98% 的川陳皮素和橘皮素。

2.2 超聲提取法 超聲提取法常用于植物中黃酮類成分的提取，用于陳皮PMFs 時(shí)，超聲波可以破壞細(xì)胞膜，促進(jìn)該成分釋放。同時(shí)，超聲波所產(chǎn)生的機(jī)械效應(yīng)也可以將能量傳遞給溶劑和陳皮細(xì)胞，加速細(xì)胞裂解，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的釋放和溶解［40］。本課題組采用超聲提取法從廣陳皮中提取川陳皮素、橘皮素、5?去甲川陳皮素、3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮和5?羥基?3′，4′，6，7，8?五甲氧基黃酮，比較不同溶劑對(duì)PMFs 的提取率，發(fā)現(xiàn)與石油醚、甲醇、乙醇相比，乙酸乙酯提取效果較好，另外，其提取率在一定范圍內(nèi)也受到陳皮粒徑、溶劑用量和超聲時(shí)間的影響［41］。

2.3 大孔樹(shù)脂吸附法 大孔樹(shù)脂吸附法富集PMFs 是通過(guò)其結(jié)構(gòu)中的不規(guī)則孔穴對(duì)該成分產(chǎn)生較大的范德華引力或氫鍵作用，再選用合適的溶劑洗脫下來(lái)，從而實(shí)現(xiàn)其富集，并具有穩(wěn)定性高、選擇性好、可重復(fù)循環(huán)利用等特點(diǎn)。

胡燕飛等［42］采用硅膠柱層析技術(shù)和大孔樹(shù)脂吸附技術(shù)相結(jié)合的方法，從陳皮中提取分離得到4 個(gè)PMFs，分別為3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮、川陳皮素、5?羥基?3′，4′6，7，8?五甲氧基黃酮和3，5，6，7，3′，4′?六甲氧基黃酮。劉韶等［43］以川陳皮素和橘皮素的含有量為指標(biāo)，篩選大孔樹(shù)脂純化陳皮中PMFs 的最佳工藝條件為洗脫劑80%乙醇，用量6 倍柱體積，上樣液質(zhì)量濃度500 mg／mL，川陳皮素、橘皮素純度分別提高了3.7、3.2 倍。蘇明媛等［44］將陳皮乙醇提取液經(jīng)AB?8 大孔樹(shù)脂吸附后用60% 乙醇洗脫，陳皮總黃酮得率為（2.61±0.23）%，通過(guò)紫外分光光度法發(fā)現(xiàn)其主要成分為川陳皮素及橙皮苷。

2.4 超臨界流體萃取法 超臨界CO2萃取法具有提取工藝簡(jiǎn)單、操作條件溫和、提取效率高、無(wú)有機(jī)溶劑殘留等優(yōu)點(diǎn)［40］，另外它還有利于熱不穩(wěn)定成分存在，使其生物活性成分不易發(fā)生變化，因此更適用于PMFs 的提取。羅歡等［45］以萃取率和萃取物中川陳皮素、橘皮素的含有量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)優(yōu)選陳皮超臨界萃取工藝，確定最佳條件為萃取時(shí)間2 h，萃取溫度35 ℃，萃取壓力30 MPa，CO2體積流量20 kg／h，陳皮萃取率為1.96%，川陳皮素、橘皮素總質(zhì)量分?jǐn)?shù)45.23 mg／g。

2.5 加壓溶劑提取法 加壓溶劑提取法是一種在較高溫度（50～200 ℃）和壓力（10.3～20.6 MPa）的條件下，用有機(jī)溶劑萃取固體或半固體樣品的方法，與其他萃取技術(shù)相比，該方法具有自動(dòng)化程度高、萃取溶劑用量少、環(huán)境污染少、提取效率高等特點(diǎn)，尤其是其萃取過(guò)程始終密閉，有利于保護(hù)不耐氧和對(duì)光敏感的活性成分［46］。Li 等［47］采用加壓溶劑提取法從廣陳皮中提取川陳皮素、橘皮素和橙皮苷，并對(duì)工藝進(jìn)行了優(yōu)化，確定最佳條件為液固比25.0 ∶1，溫 度160 ℃，萃取壓 力1 500 psi（1 psi ＝6.895 kPa），70%甲醇靜態(tài)萃取20 min，川陳皮素、橘皮素、橙皮苷總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為804.4 mg／g。

2.6 柱層析色譜法 柱層析色譜法是根據(jù)待分離組分在固定相中的吸附力不同，經(jīng)過(guò)反復(fù)吸附和解析過(guò)程而實(shí)現(xiàn)逐一分離的方法，具有樣品處理量大、分離速度快、使用方便、成本低等特點(diǎn)。楊潔等［2］采用柱層析色譜法從陳皮80%乙醇提取物中分離純化得到8 個(gè)PMFs。Fu 等［28］采用硅膠柱色譜、Sephadex LH?20 與ODS 柱層析法相結(jié)合的方式，從陳皮中分離得到了9 個(gè)PMFs。呂小健等［48］采用硅膠柱色譜法，從陳皮乙醇提取物中分離得到高純度的川陳皮素和橘皮素。

2.7 高速逆流色譜法 高速逆流色譜法（High?speed counter?current chromatography，HSCCC）是一種不需要任何載體的液液分配色譜技術(shù)，其用于分離純化PMFs 時(shí)，具有上樣量大、分離效率高、產(chǎn)品純度高、樣品回收率高等特點(diǎn)。本課題組采用HSCCC 從廣陳皮中制備分離PMFs，以石油醚?乙酸乙酯?甲醇?水（1 ∶0.8 ∶0.7 ∶0.8）為溶劑體系，結(jié)果從300 mg 乙酸乙酯粗提物中一次性制備分離得到3 個(gè)PMFs，分別為川陳皮素、3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮及橘皮素，其純度分別為96.25%、97.10%、99.22%［49］。孫印石 等［50］以石油 醚?乙酸乙 酯?甲 醇?水（2 ∶4 ∶3 ∶3）為溶劑體系，采用HSCCC 從4 g 陳皮粗提物中一步分離制備得到49.8 mg 桔皮素、50.6 mg 5?羥基?6，7，8，3′4′?五甲氧基黃酮，純度均達(dá)到97.0% 以上。Long 等［51］采用HSCCC，從陳皮超臨界CO2提取物中分離得到高純度川陳皮素、3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮和橘皮素。

2.8 制備型HPLC 法 采用制備型HPLC（pHPLC）分離純化目標(biāo)化合物時(shí)，具有制備量大、快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，分離量可達(dá)到克數(shù)量級(jí)以上，這也使其在多個(gè)研究領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng) 用［52］。Fu 等［34］采用硅 膠柱層 析與制備型HPLC 相結(jié)合的方式，從廣陳皮中分離得到8 個(gè)PMFs，分別為5?去甲橘皮素、甜橙黃酮、5?羥基?3′，4′，6，7，8?五甲氧基黃酮、3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮、3′，4′，5，6，7，8?六甲氧基黃酮、5，6，7，8，4′?五甲氧基黃酮、5?去甲川陳皮素、6，7，8，3′，4′?五甲氧基黃酮。

3 PMFs 生物活性

PMFs 是陳皮中主要的活性成分，迄今為止已有文獻(xiàn)報(bào)道的生物活性包括抗炎、抗癌、減肥降脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、神經(jīng)保護(hù)、抗菌和抗氧化等［53］。

3.1 抗炎 小膠質(zhì)細(xì)胞是大腦固有的免疫細(xì)胞，在一定的環(huán)境毒素和組織損傷作用下被激活，分泌出多種細(xì)胞毒素和促炎因子，如NO、活性氧（ROS）、腫瘤壞死因子（TNF?α）和白介素?1β（IL?1β）等，其積累會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞死亡。Ho 等［54］采用脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)陳皮提取物（川陳皮素、橘皮素和橙皮苷）及其中8 種黃酮化合物的抗神經(jīng)炎癥活性進(jìn)行研究，結(jié)果顯示只有川陳皮素在100 μmol／L 的濃度下對(duì)LPS 誘導(dǎo)NO、TNF?α、IL?1β 和IL?6 分泌的抑制率超過(guò)50%；2 mg／mL陳皮提取物對(duì)LPS 誘導(dǎo)NO、TNF?α、IL?1β 和IL?6 分泌的抑制作用顯著；2 mg／mL 陳皮提取物中橙皮苷、川陳皮素和橘皮素濃度分別為135、40、60 μmol／L，當(dāng)單獨(dú)應(yīng)用其中1 種化合物時(shí)對(duì)炎癥因子的抑制作用很輕微，只有聯(lián)合應(yīng)用才可以顯著抑制LPS 誘導(dǎo)的炎癥因子表達(dá)，其抑制作用與2 mg／mL 陳皮提取物相當(dāng)，表明陳皮具有較強(qiáng)的抗神經(jīng)炎癥活性，是橙皮苷、川陳皮素和橘皮素共同作用的結(jié)果。

有研究表明，加熱處理可以增強(qiáng)陳皮抗炎活性。Ho等［55］發(fā)現(xiàn)，在0～120 min 內(nèi)100 ℃下加熱處理陳皮后其抗炎活性呈時(shí)間依賴性升高，并且能夠顯著抑制LPS 誘導(dǎo)RAW 264.7 巨噬細(xì)胞NO 的產(chǎn)生。陳皮提取物的抗炎活性與川陳皮素、橘皮素的含有量高度相關(guān)，適當(dāng)?shù)募訜崽幚碛欣趦烧哚尫?，在一定程度上增?qiáng)了加熱處理后陳皮的抗炎活性。

郭姍姍等［11］從陳皮中分離得到5?去甲基川陳皮素（5HPMF），在小鼠尿樣中檢測(cè)到3 種主要代謝產(chǎn)物（5，3′?去二甲基川陳皮素、5，4′?去二甲基川陳皮素和5，3′，4′?去三甲基川陳皮素），5HPMF 及3 個(gè)代謝物均能顯著抑制LPS 誘導(dǎo)的RAW264.7 細(xì)胞炎癥反應(yīng)，降低細(xì)胞外NO水平。5HPMF 及5，4′?去二甲基川陳皮素、5，3′，4′?去三甲基川陳皮素抗炎活性主要與抑制iNOS、COX?2 和IL?1的基因表達(dá)有關(guān)，5，3′?去二甲基川陳皮素則是通過(guò)誘導(dǎo)HO?1 基因表達(dá)來(lái)抑制炎癥。

綜上所述，陳皮PMFs 具有較強(qiáng)的抗炎活性，是藥材發(fā)揮抗炎作用的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，而且PMFs 體內(nèi)代謝物可能具有比其母體更強(qiáng)的抗炎活性。

3.2 抗腫瘤 陳皮PMFs 抗腫瘤活性已有很多報(bào)道，如抑制乳腺癌、肝癌、胃癌等。吳宏偉等［56］發(fā)現(xiàn)，以皮下移植S180 肉瘤小鼠為動(dòng)物模型灌胃給藥時(shí)，陳皮提取物能夠顯著抑制小鼠移植性腫瘤的生長(zhǎng)，提取物主要含3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧 基黃酮、川陳皮 素、5?羥 基?3′，4′，6，7，8?五甲氧基黃酮、3，5，6，7，3′，4′?六甲氧基黃酮和橙皮苷。李娜等［12］進(jìn)一步體內(nèi)外研究均表明，陳皮PMFs 可以直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，可能與其抑制雞胚絨毛尿囊膜血管生成，降低腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）、微血管密度（MVD）、抑癌基因（p53）、B 淋巴細(xì)胞瘤（bcl?2）水平，降低血清IL?6、TNF?α 水平有關(guān)。

王志國(guó)等［4］發(fā) 現(xiàn)，PMFs 可以抑 制人乳 腺癌細(xì) 胞（MCF?7）、肝癌細(xì)胞（HepG2）的生長(zhǎng)，呈時(shí)間、劑量依賴性，同等條件下在一定時(shí)間和劑量范圍內(nèi)，MCF?7 對(duì)于PMFs 作用的敏感性也較高。李蘭英等［7］分別以20 mg／L、40 mg／L PMFs 作用于人肝癌SMMC?7721、HepG2 細(xì)胞株48、72 h，發(fā)現(xiàn)對(duì)兩者生長(zhǎng)增殖呈現(xiàn)時(shí)間、濃度依賴性抑制作用。

研究表明，陳皮PMFs 可以通過(guò)對(duì)小鼠的非特異性及特異性免疫應(yīng)答，提高荷瘤小鼠的免疫功能［57］。植物血凝素（PHA）會(huì)誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，而PMFs 具有提高荷瘤小鼠誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化率的作用，呈劑量依賴性；PMFs 中、高劑量可提高荷瘤小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬率、吞噬指數(shù)和血清溶血素水平，增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能；PMFs 低、中、高劑量組均可降低荷瘤小鼠IL?2、TNF?α 水平。除了可以影響荷瘤小鼠免疫功能外，PMFs 還能誘導(dǎo)荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞凋亡［8］。

綜上所述，陳皮PMFs 通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)免疫等方式發(fā)揮抗腫瘤作用，具有廣譜的抑瘤活性。

3.3 神經(jīng)保護(hù) 大腦氧化損傷發(fā)生在大多數(shù)神經(jīng)退行性疾病中，如阿爾茨海默病（AD）、帕金森?。≒D）和亨廷頓病［58］，有研究發(fā)現(xiàn)，陳皮及其所含的PMFs 有潛力用于與氧化應(yīng)激損傷有關(guān)的神經(jīng)退行性疾病的預(yù)防和治療。蘇明媛等［44］采用150 μmol／L H202處理大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤（PC12）3 h 作為氧化損傷模型，分別考察了陳皮提取物及川陳皮素對(duì)氧化損傷的PC12細(xì)胞的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)兩者能夠降低氧化損傷細(xì)胞內(nèi)乳酸脫氫酶LDH 的釋放，抑制線粒體膜電位的下降；抑制ROS 與丙二 醛（MDA）的生成，提高谷 胱甘肽（GSH）與超氧化物歧化酶（SOD）的活性；降低氧化損傷細(xì)胞內(nèi)caspase?3 凋亡蛋白酶的活性及細(xì)胞凋亡率，表明它們可維持氧化損傷細(xì)胞生物膜的穩(wěn)定性、增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)抗氧化能力并改善H2O2造成的氧化應(yīng)激損傷程度，具有神經(jīng)保護(hù)作用。

3.4 降脂減肥及抗脂肪酶活性 血清中總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL?C）與甘油三酯（TG）過(guò)高或伴有高密度脂蛋白膽固醇（HDL?C）水平過(guò)低是引起動(dòng)脈粥樣硬化主要原因，也是高脂血癥的主要特征。馮孔龍等［13］采用高脂膳食誘導(dǎo)的SD 大鼠動(dòng)物模型，研究PMFs和陳皮油降脂減肥活性，結(jié)果表明3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮和川陳皮素均能夠顯著降低血清TC、TG 和LDL?C 水平，橘皮素和陳皮油能夠顯著降低血清TC 和LDL?C 水平，3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮、川陳皮素、橘皮素和陳皮油均能夠有效預(yù)防高脂膳食大鼠肥胖，并且呈一定的劑量依賴性，以3，5，6，7，8，3′，4′?七甲氧基黃酮高劑量組預(yù)防肥胖效果較好，提示其活性可能隨甲氧基數(shù)量增多而逐漸增強(qiáng)。Guo 等［59］發(fā)現(xiàn)，陳皮提取物對(duì)預(yù)防肥胖和2 型糖尿病有效，可能與改善脂質(zhì)代謝，激活A(yù)MPK 通路有關(guān)。

Zeng 等［60］在體外對(duì)陳皮的抗脂肪酶活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，研究了其中PMFs 在不同采收期的動(dòng)態(tài)變化及其與抗脂肪酶活性的關(guān)系，表明該成分含有量和抗脂肪酶活性隨采收期的延長(zhǎng)而降低。對(duì)陳皮中分離得到的PMFs抗脂肪酶活性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示川陳皮素對(duì)豬胰脂肪酶（PPL）的抑制作用最強(qiáng)，強(qiáng)于陽(yáng)性藥奧利司他，說(shuō)明該成分可能是陳皮中最具潛力的脂肪酶抑制劑。Tripoli 等［61］給高膽固醇血癥倉(cāng)鼠補(bǔ)充1% 以川陳皮素為主要成分的PMFs 混合物，可顯著降低血清LDL 和膽固醇水平，降低血清及肝中甘油三酯水平。Lee 等［62?63］也證明，川陳皮素具有顯著的降血脂活性，可能與抑制脂肪酶活性有關(guān)。

3.5 促消化 傅曼琴等［64］對(duì)廣陳皮提取物不同極性部位的促消化作用進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位促消化活性最強(qiáng)，并從中分離純化得到橙皮苷、川陳皮素和橘皮素；與橙皮苷相比，川陳皮素和橘皮素的促消化活性較強(qiáng)，可顯著促進(jìn)胃液、胃蛋白酶的分泌，提高胃蛋白酶活力，提示PMFs 為廣陳皮促消化功能的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。

3.6 抗病毒 Xu 等［65］發(fā)現(xiàn)廣陳皮超臨界流體萃取物具有體外抗病毒活性，并從中分離得到5 個(gè)PMFs；細(xì)胞病變效應(yīng)還原試驗(yàn)表明，提取物中川陳皮素和橘皮素具有較好的抗RSV 作用，效果與陽(yáng)性藥利巴韋林相當(dāng)。進(jìn)一步研究表明，橘皮素可以劑量依賴性地抑制RSV 誘導(dǎo)的HEp?2 細(xì)胞斑塊形成，可能與其影響RSV 胞內(nèi)復(fù)制、抑制RSV 進(jìn)入HEp?2 細(xì)胞有關(guān)。

3.7 抗氧化 有研究表明，PMFs 可作為陳皮在貯藏過(guò)程中質(zhì)量變化的指標(biāo)，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，橙皮苷含有量逐漸降低，PMFs 含有量逐漸升高，提取物抗氧化活性逐漸增強(qiáng)［34］。Chen 等［66］比較了來(lái)自于美國(guó)加州及我國(guó)廣西、浙江、四川、新會(huì)的陳皮，發(fā)現(xiàn)四川和新會(huì)產(chǎn)陳皮中川陳皮素含有量較高；新會(huì)產(chǎn)陳皮提取物中PMFs 含有量最高，對(duì)ABTS、DPPH、2，2?偶氮二（2?甲基丙基咪）二鹽酸鹽和NO 的清除能力也最強(qiáng)，為陳皮抗氧化作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。

Yi 等［67］分別采用DPPH 清除法、過(guò)氧化氫還原能力檢測(cè)法、羥基自由基清除法、超氧陰離子自由基清除法等多種檢測(cè)方法，對(duì)陳皮提取物及其主要化合物（川陳皮素、橘皮素、橙皮苷）的抗氧化活性進(jìn)行了比較，結(jié)果也顯示它們均具有一定的抗氧化活性。

4 結(jié)語(yǔ)

陳皮PMFs 成分復(fù)雜，種類豐富，發(fā)揮藥效時(shí)具有多成分、多靶點(diǎn)、協(xié)同作用的特性，由于其生物活性廣泛，用于制劑和藥效研究的需求量日益增多，因此建立更高效的提取純化方法顯得尤為重要。但傳統(tǒng)提取純化方法存在提取效率低、純度不高等缺點(diǎn)，目前越來(lái)越多的新方法（如超臨界提取法、加壓溶劑萃取法、高速逆流色譜法等）已廣泛應(yīng)用于相關(guān)研究中，具有提取率高、分離效果好等顯著優(yōu)勢(shì)，但同時(shí)也伴隨著設(shè)備成本高，操作繁瑣，不便于工業(yè)化生產(chǎn)等不足。因此在后期研究中需針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)，取長(zhǎng)補(bǔ)短，建立更為有效的適合工業(yè)生產(chǎn)的提取純化新技術(shù)，以促進(jìn)陳皮PMFs 產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。

此外，目前關(guān)于陳皮PMFs 化學(xué)成分和藥理活性的研究還不夠全面，大多集中在川陳皮素和橘皮素，可能是因?yàn)閮烧吆辛孔罡?，但正如本文所述，陳皮中還存在其他PMFs，大多數(shù)生物活性和作用機(jī)制尚不清楚。因此，對(duì)陳皮中各單體PMF 的生物活性、體內(nèi)代謝過(guò)程及安全性等方面開(kāi)展系統(tǒng)的研究，闡明羥基和甲氧基的位置及數(shù)量對(duì)生物活性的影響，將有助于充分挖掘該成分藥用和食用價(jià)值，更好地開(kāi)發(fā)利用相關(guān)資源，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。