陳青青 劉珍巧 王豫蓉

重慶醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院正畸科 口腔疾病與生物醫(yī)學重慶市重點實驗室重慶市高校市級口腔生物醫(yī)學工程重點實驗室 重慶 401147

穴位中頻脈沖電刺激是通過電刺激相關穴位的治療方法，可增強運動神經(jīng)興奮性，使局部組織血液循環(huán)和代謝功能加快[3]，促進肌肉功能的恢復，且具有作用深度大、無痛、不易產(chǎn)生適應性、對皮膚無損傷等特點。目前穴位中頻脈沖電刺激治療主要應用于運動員肌肉訓練、肌肉損傷后理療以及神經(jīng)肌肉系統(tǒng)疾病的康復治療，還少見應用于口腔臨床功能矯治過程中的報道。

腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain-derived neurotropic factor，BDNF）是重要的神經(jīng)營養(yǎng)因子之一，在骨骼肌改建中起著重要作用[4-5]。本實驗建立了下頜前伸動物模型，給予咬肌頰車穴中頻脈沖電刺激，并對實驗大鼠的咬肌肌電變化與BDNF表達進行觀察，旨在了解穴位中頻脈沖電刺激對下頜前伸大鼠咬肌改建的影響，以探討穴位中頻脈沖電刺激應用于功能矯治的可能性。

1 材料和方法

1.1 實驗動物與分組

選用4周齡雄性Sprague-Dawley大鼠60只為研究對象，大鼠體質(zhì)量（70±5.27） g，均購自重慶醫(yī)科大學實驗動物中心。所有大鼠實驗前均自由飲水，定時攝食。按完全隨機設計原則將60只大鼠分為3個大組（實驗組、條件對照組和空白對照組），每個大組根據(jù)實驗觀測天數(shù)又隨機分為4個小組（3、7、14、21 d組），共12組，每組5只。各組的處理方式如下：1）實驗組，戴用前導下頜裝置且接受穴位中頻脈沖電刺激；2）條件對照組，戴用前導下頜裝置，不接受穴位中頻脈沖電刺激；3）空白對照組，不戴用前導下頜裝置且不接受穴位中頻脈沖電刺激。

1.2 主要儀器與試劑

前導下頜裝置參照Rabie等[6]使用的矯治器裝置制作，由底板、斜面導板兩部分組成。斜面導板與上頜咬合平面呈20°～25°，底板和斜面導板均使用甲基丙烯酸甲酯樹脂制成。黏固劑采用GC Fuji Ⅸ玻璃離子黏固劑（蘇州而至齒科有限公司）。ZM-C-IA型中頻治療儀（廊坊市天月醫(yī)療器械有限公司），BL-420F生物信號采集與分析儀（成都泰盟軟件有限公司），兔抗鼠BDNF（重慶蒙博生物科技有限公司），SABC試劑盒及DAB顯色試劑盒（北京索萊寶科技有限公司），顯微病理圖文分析系統(tǒng)（奧林巴斯公司，日本），總RNA提取試劑盒（北京康潤誠業(yè)生物科技有限公司），qRT-PCR Synthesis試劑盒、2×RealStar Green Fast Mixture（北京康潤誠業(yè)生物科技有限公司），Z223MK-2低溫離心機（Hermle公司，德國），C-1000型熒光定量聚合酶鏈反應儀（Bio-Rad公司，美國）。

1.3 建立下頜前伸動物模型以及明確中頻脈沖電刺激方式

使用玻璃離子黏固劑將自制的前導下頜裝置黏固于條件對照組和實驗組大鼠的上切牙上，戴用自制頸圈防止大鼠前爪干擾矯治器。根據(jù)中國針灸學會實驗針灸分會制定的《動物針灸穴位圖譜》，頰車穴定位于下頜角前上方咬肌最豐隆處的中點（圖1）。使用電推刀去除大鼠雙側(cè)頰車穴周圍的毛發(fā)，用75%乙醇棉球清潔待測部位。將大鼠固定于大鼠固定器上，將中頻電治療儀的兩個電極片分別置于實驗組大鼠雙側(cè)頰車穴表面皮膚，醫(yī)用膠帶固定電極片。開啟中頻電治療儀，選擇刺激模式9（神經(jīng)肌肉刺激模式），波形選擇正弦波，調(diào)制頻率選擇0～150 Hz，中頻電頻率選擇2 000～8 000 Hz，刺激強度選擇1檔。每天定時對實驗組大鼠進行中頻脈沖電刺激，刺激時間設定為15 min，實驗各組大鼠分別刺激3、7、14、21 d。

圖1 頰車穴定位Fig 1 Acupuncture point positioning

1.4 肌電測量與處理

各組大鼠分別于實驗3、7、14、21 d時行肌電測量，其中實驗組的肌電測量在中頻脈沖電刺激結束30 min后進行。測量時將大鼠固定于大鼠固定器上，將BL-420F生物信號采集與分析儀的正極置于大鼠左側(cè)頰車穴皮膚，負極置于大鼠右側(cè)頰車穴皮膚，地極置于大鼠背部皮膚，電極片使用醫(yī)用膠帶固定。記錄大鼠靜息狀態(tài)咬肌肌電1 min，肌電記錄完成后，涂布甘油以保護測量部位的皮膚。應用BL-420F生物技能實驗系統(tǒng)軟件對原始肌電信號進行平滑處理，每只大鼠隨機截取3個單位時長為2 s的肌電記錄，記錄積分肌電并取平均值。按以上方法得到各組大鼠在實驗各階段靜息狀態(tài)下的咬肌平均肌電微分值。

1.5 標本制備

分別于實驗3、7、14、21 d肌電測量完成后斷頸處死各空白對照組、條件對照組和實驗組大鼠。取大鼠左側(cè)咬肌置于新鮮配置的4%多聚甲醛溶液中，4 ℃固定12 h，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋。每塊咬肌組織作連續(xù)切片5張，切片厚度為4 μm，1張用于蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色，其余4張用于SABC免疫組織化學染色。取大鼠右側(cè)咬肌組織置于凍存管，快速轉(zhuǎn)移至液氮罐中，用于后續(xù)實時熒光定量聚合酶鏈反應（real-time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）檢測。

1.6 HE染色

取各組咬肌組織標本切片，常規(guī)脫蠟、水化，經(jīng)蘇木精染色、鹽酸乙醇分化、伊紅染色、梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，置于光學顯微鏡下觀察。

1.7 BDNF免疫組織化學染色

取各組咬肌組織標本切片，常規(guī)脫蠟、水化，H2O2孵育以阻斷內(nèi)源性過氧化氫酶的活性，檸檬酸鈉緩沖液浸泡，微波修復暴露抗原，滴加BSA封閉液（牛血清白蛋白），加入一抗，4 ℃孵育過夜，加入二抗，37 ℃孵育30 min，再滴加SABC，37 ℃孵育30 min，DAB顯色液顯色，蘇木精復染，脫水封片。切片置于光學顯微鏡下觀察，利用顯微病理圖文分析系統(tǒng)測定大鼠咬肌BDNF陽性染色部分的光密度值，每張組織切片隨機選取4個視野進行積分光密度值（integrated optical density，IOD）測量，結果取其平均值。

1.8 qRT-PCR檢測BDNF mRNA表達

取各組右側(cè)咬肌組織適量，經(jīng)研磨、勻漿，使用RNA快速提取試劑盒提取總RNA，紫外分光光度計檢測其純度，OD260/OD280值為1.9～2.1說明純度較好。純度符合要求后逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，然后以cDNA為模板，以β-actin為內(nèi)參照進行qRTPCR反應，反應體系按說明書進行，引物序列見表1，引物的合成與設計均由美國Invitrogen公司完成。

表1 qRT-PCR引物序列Tab 1 The primer sequence for qRT-PCR

本實驗反應條件為：解鏈95 ℃ 1 min，退火95 ℃ 5 s，延伸57 ℃ 10 s，最后延伸60 ℃ 34 s，共計40個循環(huán)。結果分析采用2-ΔΔCT法。

1.9 統(tǒng)計學方法

本研究使用Graphpad prism 7.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，組間比較采用雙因素方差分析，檢驗水準為雙側(cè)α=0.05。

2 結果

2.1 肌電檢測結果

各組大鼠的咬肌靜息肌電的變化圖見圖2，積分肌電值見表2。

圖2 各組大鼠下頜姿勢位咬肌靜息肌電變化Fig 2 Resting electromyographic changes of the masseter muscle in the mandibular advancement in different groups

表2 各組大鼠下頜姿勢位咬肌靜息積分肌電值Tab 2 Resting electromyographic of the masseter muscle in the mandibular advancement in different groups μV·ms-1,±s, n=5

表2 各組大鼠下頜姿勢位咬肌靜息積分肌電值Tab 2 Resting electromyographic of the masseter muscle in the mandibular advancement in different groups μV·ms-1,±s, n=5

注：a與空白對照組比較P＜0.05；b與條件對照組比較P＜0.05。

戴入時間 空白對照組 條件對照組 實驗組戴入前 143.81±5.20 147.71±4.27 150.61±2.41戴入當時 149.40±5.83 214.71±4.79a 241.13±6.85ab戴入3 d 142.43±7.65 202.67±5.89a 228.40±7.58ab戴入7 d 149.99±2.13 188.16±3.92a 204.66±6.89ab戴入14 d 144.44±5.46 178.74±3.65a 166.43±5.03ab戴入21 d 148.59±3.15 175.49±2.65a 155.11±7.44b

由圖2和表2可見，不同的觀測時間內(nèi)，空白對照組大鼠下頜姿勢位時咬肌靜息肌電的波動很小，條件對照組與實驗組大鼠下頜姿勢位時咬肌的靜息肌電在實驗各期均先升高后降低。條件對照組和實驗組大鼠戴入矯治器當時咬肌肌電活動明顯高于戴入前，且實驗組高于條件對照組（P<0.05）；矯治器戴入3 d，條件對照組與實驗組大鼠咬肌肌電均較戴入當時明顯降低，但仍高于戴入前水平；戴入14 d，實驗組肌電活動較條件對照組明顯降低（P<0.05）；戴入21 d，實驗組與空白對照組的肌電活動水平無明顯差異（P>0.05），均低于條件對照組（P<0.05）。

2.2 HE染色結果

各組大鼠咬肌的HE染色見圖3，各組標本均未見炎癥細胞浸潤。在各實驗階段，空白對照組咬肌肌纖維粗細較均勻，排列整齊、緊密，肌核形態(tài)較規(guī)則，多呈長橢圓形，位置分布較均勻，位于肌纖維邊緣。條件對照組在戴入7、14 d時出現(xiàn)咬肌肥大改變，表現(xiàn)為細胞核增多，排列紊亂，出現(xiàn)核內(nèi)移現(xiàn)象，肌纖維增粗，肌纖維間的間距減小；戴入21 d時，細胞核數(shù)量和肌纖維直徑較14 d時有所減少，細胞核排列較規(guī)則。實驗組在戴入7 d時出現(xiàn)咬肌增生肥大的表現(xiàn)，肌纖維增粗，細胞核增多，排列紊亂；戴入14 d時，細胞核數(shù)量有所減少；戴入21 d時，細胞核數(shù)量進一步減少，細胞核數(shù)量與空白對照組基本一致，但排列較空白對照組紊亂，仍有少許核內(nèi)移現(xiàn)象。與條件對照組比較，實驗組戴入3、7 d時的細胞核數(shù)量無明顯增多；戴入14 d時，實驗組細胞核有所減少；戴入21 d時，細胞核數(shù)量進一步減少。

圖3 各組大鼠下頜姿勢位時咬肌的組織學變化 HE × 400Fig 3 Histological changes of masseter muscle in the mandibular advancement in different groups HE × 400

2.3 BDNF免疫組織化學結果

各組大鼠咬肌纖維BDNF的免疫組織化學染色見圖4，BDNF陽性表達呈黃褐色。各組BDNF染色的IOD值結果見表3。條件對照組與實驗組大鼠咬肌BDNF表達在實驗過程中均呈先升高后降低的趨勢。與空白對照組比較，條件對照組在7、14、21 d時咬肌纖維BDNF陽性染色加深，實驗組3、7、14 d時咬肌纖維BDNF陽性染色加深，實驗組21 d時的IOD值與空白對照組的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。與條件對照組比較，實驗組3 d時BDNF陽性染色加深，7 d時兩組無明顯差異，14 d和21 d時BDNF蛋白表達降低（P<0.05）。

圖4 各組大鼠咬肌BDNF蛋白的表達變化 SABC × 400Fig 4 Changes of expression of BDNF protein in masseter muscle in different groups SABC × 400

表3 大鼠咬肌BDNF蛋白的IOD測量值變化Tab 3 Changes of the IOD of BDNF protein in masseter muscle ±s, n=5

表3 大鼠咬肌BDNF蛋白的IOD測量值變化Tab 3 Changes of the IOD of BDNF protein in masseter muscle ±s, n=5

注：a與空白對照組比較P<0.05；b與條件對照組比較P<0.05。

戴入時間/d 空白對照組 條件對照組 實驗組3 158.16±15.64 167.50±5.96 183.69±16.88ab 7 156.49±12.22 225.20±10.54a 213.43±9.49a 14 150.53±6.94 229.14±9.68a 196.45±13.11ab 21 149.33±5.64 200.93±20.25a 155.63±10.09b

2.4 qRT-PCR結果

大鼠咬肌組織提取出的RNA經(jīng)測定，其OD260/OD280值均在1.9～2.1之間，純度符合要求。BDNF mRNA的qRT-PCR結果見表4。條件對照組與實驗組BDNF mRNA的相對表達量在整個實驗過程中均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。與空白對照組比較，條件對照組BDNF mRNA的相對表達量在戴入7、14、21 d時明顯升高（P＜0.05），實驗組在戴入3、7、14 d時明顯升高（P＜0.05），戴入21 d時與空白對照組無明顯差異（P＞0.05）；與條件對照組相比較，實驗組在戴入3 d時BDNF mRNA相對表達量明顯升高（P＜0.05），7、14 d時無明顯差異（P＞0.05），21 d時相對表達量降低（P＜0.05）。

3 討論

正畸臨床上對處在生長發(fā)育期的安氏Ⅱ類患者，常使用功能矯治器前導下頜以刺激下頜生長，改善患者面型[7]。采用功能矯治器前伸下頜后，一方面使髁突在關節(jié)窩內(nèi)向前下方向移位，使生長活躍的髁突所受壓力減??；另一方面使相關肌肉牽張，肌肉被動牽張產(chǎn)生的力傳遞到牙齒、牙弓和頜骨上[8]，將功能過度或功能不足的肌肉導向正常；同時相關咀嚼肌發(fā)生適應性改建，維持下頜骨在新的姿勢位的穩(wěn)定性[9]。Sood等[2]研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)肌肉完成適應性改建通常需要2年左右時間，而功能矯治的時間通常為1年左右。由于神經(jīng)肌肉改建速度較慢，導致功能矯治結束后神經(jīng)肌肉平衡尚未建立，肌肉等軟組織可使前伸的下頜骨產(chǎn)生功能性回退，這是造成功能矯治遠期效果不穩(wěn)定的主要因素[10]。Vardimon等[11]提出延長功能矯治器戴用時間，以彌補戴用傳統(tǒng)功能矯治器神經(jīng)肌肉適應差的特點。但延長矯治器戴用時間會降低患者的依從性，導致矯治效果不佳，且過長時間戴用功能矯治器會影響兒童的正常生長發(fā)育。電刺激通過引入動作電位以促進失功能神經(jīng)恢復生物電活動[12]，可在肌肉組織中產(chǎn)生電阻性發(fā)熱，增加二磷酸腺苷、三磷酸腺苷等代謝產(chǎn)物釋放，引起血管活性介質(zhì)增加，有調(diào)節(jié)肌纖維生理、生化性質(zhì)，維持肌肉的體積和肌力，促進萎縮肌肉纖維再生，改善肌肉組織代謝，促進血液循環(huán)，緩解肌肉疲勞，治療運動性肌肉損傷，快速消腫等作用[13-14]。在諸多電刺激方式中，調(diào)制中頻脈沖電刺激兼有低頻電與中頻電的特點，其療效較單一的低頻電治療和中頻電治療更好[15]。調(diào)制中頻脈沖電刺激優(yōu)點包括：1）幅度、波形不斷變化，機體不易產(chǎn)生適應性；2）作用深度大；3）無電解作用，對皮膚無損傷。頜面部肌肉中，咬肌與咀嚼功能密切相關且力量強大，是影響下頜骨位置移動以及移動后復發(fā)的主要因素。頰車穴在解剖學上為咬肌覆蓋，周圍分布有下頜神經(jīng)、面神經(jīng)下頜緣支等。該穴位區(qū)域的神經(jīng)、肌肉數(shù)量多且復雜，與下頜運動關系非常密切[16]。臨床上，頰車穴常用作治療面癱、顳下頜關節(jié)疼痛的常選穴位，通過針灸或者電刺激等方式作用于頰車穴，有緩解咀嚼肌痙攣，減輕神經(jīng)肌肉疼痛，促進局部血液循環(huán)，改善面部神經(jīng)肌肉功能等作用[17-18]。

本研究選用處于生長發(fā)育高峰期的4周齡雄性大鼠，利用調(diào)制中頻脈沖電刺激實驗組大鼠的頰車穴，分別在戴用功能矯治器前，戴入當時和戴用后3、7、14、21 d時測量其咬肌靜息肌電值，觀察咬肌組織結構，檢測BDNF蛋白表達情況，探討穴位中頻脈沖電刺激是否能促進肌肉改建。

肌電圖是臨床上檢查肌肉功能常用的無創(chuàng)方法[19]。肌電是骨骼肌在興奮時因肌纖維動作電位傳導和擴布發(fā)生的電位變化，是肌肉中許多運動神經(jīng)元動作電位在時間和空間上的疊加。表面肌電信號是通過表面電極引導、記錄的肌電變化，能夠在非損傷狀態(tài)下定量反應肌肉功能狀態(tài)。有研究[20]表明，積分肌電與肌力成正比關系，能很好地反映肌肉的功能狀態(tài)。本實驗結果顯示，戴入矯治器前，各組大鼠咬肌在姿勢位時存在輕微肌電活動，這是由于姿勢位時下頜骨因重力作用有向后下方向旋轉(zhuǎn)的傾向，咬肌通過輕微收縮參與維持大鼠下頜姿勢位的穩(wěn)定?？瞻讓φ战M咬肌姿勢位肌電水平在實驗各期無明顯變化，說明咬肌功能受自然生長因素很小。條件對照組和實驗組大鼠戴入矯治器當時肌電活動增強，可能是由于矯治器前伸下頜，且增加了頜間垂直高度，咬肌受到牽拉，刺激牽張感受器，使其收縮活動增加，同時，肌肉張力性活動增加也有利于下頜前伸位的維持。電刺激與中樞神經(jīng)發(fā)出沖動所引起的肌肉收縮效果是一樣的，實驗組瞬時肌電高于對照組，可能是由于穴位中頻電刺激咬肌后，短時間內(nèi)調(diào)動了更多的肌纖維參與收縮，肌肉收縮活動增加所致。條件對照組與實驗組在戴入3、7 d時，咬肌靜息肌電逐漸降低，說明咬肌處于功能改建狀態(tài)，正逐漸適應下頜前伸位；戴入21 d時實驗組咬肌肌電與對照組無明顯差異，較條件對照組咬肌肌電水平低，提示實驗組大鼠較條件對照組大鼠更快適應了新的下頜位置，初步建立了新的功能平衡，并且通過適當?shù)募‰娝剑S持下頜在新的前伸姿勢位的穩(wěn)定。

肌肉受到適宜刺激可引起生理性活動增強，肌纖維肥大以及衛(wèi)星細胞數(shù)量增多，衛(wèi)星細胞加入到肌纖維中增加肌核量，表現(xiàn)為肌核內(nèi)移，又稱中央核現(xiàn)象，常見于代償性肥大的肌纖維中。本實驗過程中，條件對照組與實驗組均先發(fā)生代償性肥大，然后組織形態(tài)學慢慢恢復至大致正常。條件對照組與實驗組大鼠在下頜前伸第7天時肌纖維出現(xiàn)增生肥大表現(xiàn)，表現(xiàn)為肌纖維橫截面積增大，肌纖維間的間距減小，細胞核增多，排列紊亂，并出現(xiàn)中央核現(xiàn)象，說明條件對照組和實驗組大鼠咬肌功能增強，肌纖維代償性肥大以適應新的下頜前伸位置。前伸14 d時，條件對照組大鼠肌纖維細胞核數(shù)量與前伸7 d時無明顯差異，實驗組較前伸7 d天時肌纖維細胞核數(shù)量有所減少，中央核現(xiàn)象減少，說明實驗組大鼠咬肌功能活動開始減弱，開始適應新的下頜前伸位置；實驗組21 d時細胞核數(shù)量基本與空白對照組一致，但排列仍較紊亂，有少許核內(nèi)移現(xiàn)象，條件對照組細胞核數(shù)量仍較多，排列紊亂，說明實驗組大鼠咬肌活動進一步減弱，比條件對照組更好地適應新的下頜前伸位置，但仍處于適應改建過程中，未完全適應，可能仍需一段時間，才能形成穩(wěn)定的肌肉結構，穩(wěn)定新的下頜前伸位。

肌肉運動的最小功能單元稱為運動單元，由運動神經(jīng)元與其支配的肌肉纖維組成，二者之間的信息傳遞依賴神經(jīng)肌肉接頭（neuromuscular junction，NMJ）。NMJ通過將神經(jīng)元傳出的電信號轉(zhuǎn)化為化學信號，引起肌肉收縮，在肌肉的功能運動中起著至關重要的作用。BDNF可由肌纖維產(chǎn)生，是重要的運動神經(jīng)營養(yǎng)因子之一，有促進運動神經(jīng)元的存活、增強突觸傳遞效率、維持神NMJ的發(fā)育和功能等作用[4-5]，在骨骼肌改建中起著重要作用。肌肉收縮可增加骨骼肌內(nèi)BDNF的表達，BDNF表達升高可作為肌肉改建活躍的指標[21]。本研究顯示，空白對照組咬肌纖維BDNF表達逐漸降低，可能與軟食喂養(yǎng)有關。由于進食軟食，大鼠咀嚼次數(shù)與時間減少，咬肌功能活動減弱，從而影響了BDNF表達。條件對照組和實驗組大鼠在為期21 d的實驗階段內(nèi)，BDNF表達都呈先上升后下降的趨勢。實驗前階段BDNF表達水平上升提示咬肌為適應驟然改變的下頜位置，NMJ突觸活動增強，改建速度逐漸加快；實驗后階段BDNF表達水平下降說明隨著大鼠逐漸適應下頜前伸位，NMJ突觸活動逐漸減弱，改建速度放緩；當BDNF表達水平恢復至與空白對照組大鼠基本一致時，說明NMJ突觸活動水平已恢復至正常，咬肌改建基本完成。與空白對照組比較，實驗組大鼠咬肌BDNF表達在下頜前伸3 d時明顯升高，條件對照組大鼠無明顯差異，說明與單獨下頜前伸比較，穴位中頻電刺激組在戴用功能矯治器的早期即可進入活躍的改建期。在實驗7、14 d時，實驗組大鼠咬肌BDNF表達水平較條件對照組大鼠低，提示實驗組大鼠通過前期的高速改建，已逐漸適應新的下頜位置，改建速度由之放緩，而條件對照組大鼠尚未很好適應新的下頜位置，仍處于高速改建過程中。此外，也可能由于條件對照組大鼠改建上升期更長，導致BDNF表達水平在實驗后階段較實驗組大鼠更高。在實驗21 d時，與空白對照組比較，條件對照組BDNF表達水平仍較高，而實驗組BDNF表達水平則無明顯差異，說明實驗組咬肌肌肉改建已近完成，而條件對照組肌肉改建仍在進行，改建尚未完成。在實驗后階段，雖然條件對照組大鼠BDNF長時間處于高水平表達，但其完成改建的時間卻較實驗組更長。這也說明在不加干預的情況下，下頜前伸后，咬肌完成改建過程需要較長的時間，影響臨床功能矯治的療效和保持；穴位中頻脈沖電刺激縮短了咬肌完成改建的時間，可能對縮短患者矯治療程，更好保持矯治效果有積極作用。

本研究結果表明，中頻脈沖電刺激作用于下頜前伸大鼠頰車穴可早期加強咬肌的肌電活動，上調(diào)BDNF的表達，縮短咬肌肌電和BDNF水平恢復至正常的時間，促進肌肉組織完成改建，且其操作簡單，安全舒適，有望成為功能矯治的輔助療法，但其原理及具體作用機制還有待進一步研究。