譚朝陽 侯玉蘭 謝 鳳 劉大偉 羅文蘋 鄧資翔

重慶市璧山區(qū)人民醫(yī)院心內(nèi)科 402760

高膽固醇血癥是造成心腦血管梗阻栓塞的主要原因之一，既往研究發(fā)現(xiàn)血膽固醇水平每下降1%，冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低2%～3%，因此，高膽固醇血癥的早期治療對于預(yù)防冠心病的發(fā)生十分重要[1]。在高膽固醇血癥的治療過程中，他汀類藥物一直是治療的基礎(chǔ)藥物[2]。它能通過抑制肝臟制造膽固醇，來降低血中膽固醇含量，其中辛伐他汀是常見的他汀類藥物，臨床應(yīng)用十分廣泛。近年來，部分學(xué)者提出他汀類藥物如阿托伐他汀可能能通過調(diào)節(jié)腸道菌群菌屬，進(jìn)一步調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，而辛伐他汀對腸道菌群的影響目前仍不明確。 本文通過探討辛伐他汀治療對高膽固醇血癥患者血脂及腸道菌群的影響，為進(jìn)一步研究提供參考。

1 對象與方法

1.1 觀察對象 選取2019年5—10月我院心內(nèi)科初診高膽固醇血癥患者50例作為觀察對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國成人血脂異常防治指南(2016年修訂版)》[3]中對于高膽固醇血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，血總膽固醇≥6.22mmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往接受降血脂治療；(2)患有胃腸疾病包括但不限于惡性腫瘤、胃潰瘍、炎癥性腸病、急性胃腸炎、消化道出血；(3)感染性疾??；(4)1個(gè)月內(nèi)服用抗生素及益生菌類藥物。所有受試者均簽署知情同意書，本研究通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。入組患者中男33例，女17例，年齡(43.6±7.9)歲，體重(59.3±8.4)kg,BMI 26.6±3.8。

1.2 治療方法 所有患者予以辛伐他汀(默沙東制藥有限公司，批號(hào)：國藥準(zhǔn)字H19990366)10mg，口服，1次/晚，療程為12周。

1.3 檢測方法

1.3.1 血脂(TC、TG、HDL-C及LDL-C)測定：所有患者治療前后收集空腹靜脈血標(biāo)本，3 000r/min離心5min取上清，存儲(chǔ)于-20℃冰箱，所有樣本同批次全自動(dòng)生化分析儀(貝克曼庫爾特AU5800)測定血清TC、TG、HDL-C及LDL-C水平。

1.3.2 C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素測定：所有患者治療前后收集空腹靜脈血標(biāo)本，3 000r/min離心5min取上清，存儲(chǔ)于-20℃冰箱，所有樣本同批次檢驗(yàn)，CRP采用免疫透射比濁法檢測，試劑盒購買自北京世紀(jì)沃德生物科技有限公司；LPS采用鱟試劑動(dòng)態(tài)比濁法檢測，試劑盒購自武漢云克隆科技股份有限公司。

1.3.3 腸道菌群測序：治療前后收集患者糞便，并保存于-8℃冰箱內(nèi)，同批次行通過16S rDNA的V3-V4區(qū)域測序分析腸道菌群的多樣性，提取DNA模板采用糞便標(biāo)本使用Stool DNA試劑盒(Omega Bio-Tek公司，美國)，通過設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增16S rRNA的V3區(qū)域，得到分離的DNA樣本。通過兩步PCR法建立DNA樣本庫，在第二步時(shí)加上Illumina測序適配元件，并進(jìn)一步通過Illumina MiSeq系統(tǒng)(TinyGene Bio-Tech公司，上海)對分離得到的DNA樣本庫進(jìn)行測序，并通過相關(guān)軟件對測序結(jié)果進(jìn)行分析。

1.4 觀察指標(biāo) (1)比較患者治療前后血脂相關(guān)指標(biāo)(TC、TG、HDL-C及LDL-C)水平的改變；(2)比較患者治療前后C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素水平的改變；(3)比較患者治療前后腸道菌群菌屬的改變；(4)觀察并記錄辛伐他汀治療療程內(nèi)患者不良反應(yīng)的發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2.1 患者治療前后血脂相關(guān)指標(biāo)情況 與治療前相比，辛伐他汀治療后患者TC、TG、LDL-C水平顯著降低，HDL-C水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 患者治療前后血脂相關(guān)指標(biāo)情況

2.2 患者治療前后C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素水平情況 與治療前相比，辛伐他汀治療后患者CRP及LPS水平顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 患者治療前后C反應(yīng)蛋白及內(nèi)毒素水平情況

2.3 患者治療前后腸道菌群菌屬情況 與治療前相比，治療后患者腸道菌群菌屬中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬及擬桿菌門未分類普氏菌屬顯著升高，腸球菌屬顯著下降，其中未分類瘤胃菌屬、未分類毛螺菌屬、鏈球菌屬及葡萄球菌屬均無顯著改變(P>0.05)，見表3。

表3 患者治療前后腸道菌群菌屬情況

2.4 不良反應(yīng)發(fā)生情況 辛伐他汀治療后2例患者發(fā)生不良反應(yīng)，1例患者發(fā)生胃腸脹氣，1例患者發(fā)生腹痛。

3 討論

血脂異常是一種常見心血管疾病，其中以低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)增高為主要表現(xiàn)的高膽固醇血癥是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病，例如冠心病、缺血性卒中以及外周動(dòng)脈疾病等疾病發(fā)生的最重要的危險(xiǎn)因素[4]。對于高膽固醇血癥的治療，他汀類藥物是基礎(chǔ)類藥物，非而他汀類藥物常作為補(bǔ)充藥物[5]。

既往研究發(fā)現(xiàn)，人類胃腸道中的微生物群對個(gè)體的健康具有顯著影響。近期研究發(fā)現(xiàn)，腸道的微生物失衡可能在心血管疾病(CVD)的發(fā)病機(jī)制中起作用。一項(xiàng)研究[6]發(fā)現(xiàn)，與單獨(dú)給予大鼠模型瑞舒伐他汀治療相比，給予大鼠模型瑞舒伐他汀及抗生素治療后，腸道菌群的多樣性明顯減少(乳酸桿菌和雙歧桿菌的豐度顯著降低)，同時(shí)瑞舒伐他汀的降脂功效也顯著受損，說明腸道菌群的改變對于他汀類藥物的降脂作用有一定影響。同時(shí)另一項(xiàng)納入202例高脂血癥患者的研究[7]發(fā)現(xiàn)，他汀類藥物治療后，對他汀類藥物敏感的患者乳酸桿菌、真細(xì)菌、糞腸球菌和雙歧桿菌比例顯著增加，說明腸道菌群改變可能與他汀藥物的療效有一定相關(guān)性，但該研究并未對這一現(xiàn)象進(jìn)一步的機(jī)制進(jìn)行探討。而近期一項(xiàng)對于實(shí)驗(yàn)小鼠模型的基礎(chǔ)研究[8]發(fā)現(xiàn)，抗生素治療后的小鼠腸道菌群發(fā)生了相應(yīng)改變，同時(shí)所產(chǎn)生的次級(jí)膽汁酸的水平下降，進(jìn)一步利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析腸道菌群所產(chǎn)生的次級(jí)膽汁酸對于小鼠糖脂代謝的影響發(fā)現(xiàn)，小鼠體內(nèi)參與糖原代謝和膽固醇及膽汁酸生物合成的蛋白質(zhì)的表達(dá)水平都發(fā)生了改變，說明腸道菌群的改變也能在一定程度上影響體內(nèi)膽固醇的水平。不僅如此，他汀類藥物對于腸道菌群的改變還與機(jī)體炎癥因子的水平有一定相關(guān)性，一項(xiàng)對小鼠糖尿病模型的基礎(chǔ)研究[9]發(fā)現(xiàn)，阿托伐他汀治療糖尿病小鼠后，腸桿菌和腸球菌均減少 , 乳桿菌、雙歧桿菌和擬桿菌增加，同時(shí)CRP及LPS水平顯著下降，表明糖尿病小鼠炎癥狀態(tài)得到一定減輕，但這個(gè)方面在臨床研究中尚無相關(guān)資料支持，因此，本文中同時(shí)檢測CRP及LPS的水平，擬對該點(diǎn)進(jìn)行臨床上的探討。

本文結(jié)果顯示，辛伐他汀治療后患者TC、TG、LDL-C、CRP及LPS水平顯著降低，HDL-C水平顯著升高，同時(shí)腸道菌群菌屬中乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬及擬桿菌門未分類普氏菌屬顯著升高，腸球菌屬顯著下降，說明辛伐他汀不僅降低高膽固醇血癥患者血脂水平，還能減輕其輕度炎癥狀態(tài)，同時(shí)調(diào)節(jié)腸道微生物菌群的改變，使得益生菌比例顯著增加，通過對既往文獻(xiàn)復(fù)習(xí)，筆者有理由提出假說，其輕度炎癥狀態(tài)的改善，可能是腸道菌群調(diào)整后，進(jìn)一步影響了次級(jí)膽汁酸的水平導(dǎo)致，但這一方面，仍需進(jìn)一步基礎(chǔ)研究進(jìn)行驗(yàn)證。