周 昊，封 冰綜述，王 銳審校

0 引 言

肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是全球最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，并已成為腫瘤相關(guān)死亡的第三大原因[1]。早期肝細(xì)胞癌可以通過(guò)手術(shù)治愈。但是，由于早期癥狀不典型和缺乏合適的診斷工具，大多數(shù)患者確診時(shí)已經(jīng)處于Ⅲ期，伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，不再適合手術(shù)，只能通過(guò)靶向治療或者介入治療延長(zhǎng)生存時(shí)間。若能夠早期發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶，并通過(guò)分子靶點(diǎn)有效抑制HCC的轉(zhuǎn)移，對(duì)于提高患者生存率及改善預(yù)后具有重要意義。本文主要就MicroRNAs(miRNAs)通過(guò)Wnt(Wingless/Int1)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor β, TGF-β)通路影響肝癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)換(epithelial-mesenchymal transition，EMT)及細(xì)胞外基質(zhì)重塑的研究進(jìn)展作一綜述。

1 HCC轉(zhuǎn)移機(jī)制

HCC轉(zhuǎn)移涉及五個(gè)經(jīng)典步驟，包括鄰近組織的局部侵入，血管內(nèi)滲透，循環(huán)系統(tǒng)中的存活，外滲，以及肝(肝內(nèi))或遠(yuǎn)端器官(肝外)的異常定植。很多時(shí)候，腫瘤遷移和侵襲與EMT緊密相關(guān)。EMT 的特點(diǎn)是細(xì)胞表面上皮表型減少和間質(zhì)表型增多，細(xì)胞骨架重構(gòu)、間葉細(xì)胞的表型增加、細(xì)胞-細(xì)胞間或細(xì)胞-基質(zhì)間的黏附性減弱、細(xì)胞的移動(dòng)能力增強(qiáng)等改變，腫瘤細(xì)胞從極性上皮樣細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)殚g充質(zhì)表型細(xì)胞[2]。通過(guò)EMT，腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞間黏附降低、運(yùn)動(dòng)能力增加，獲得從原位向周圍侵襲的能力，最終進(jìn)入血液和淋巴途徑轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)處形成新的病灶。這一過(guò)程與多種生長(zhǎng)因子(EGF、FGF、TGF-β等)和轉(zhuǎn)錄因子有關(guān)，包括 Snail(Snail/Slug)家族，ZEB(ZEB1/ZEB2)家族和HLH家族(Twist1)等[3-5]。這些轉(zhuǎn)錄因子作用于E-cadherin啟動(dòng)子，抑制其轉(zhuǎn)錄。 E-cadherin的表達(dá)缺失，能進(jìn)一步激活間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)基因，如波形蛋白和N型鈣黏蛋白的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)，從而引起細(xì)胞形態(tài)的改變，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力和侵襲能力[6]。此外，腫瘤細(xì)胞周圍的微環(huán)境發(fā)生變化，也是腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要原因之一。

2 MiRNA與HCC轉(zhuǎn)移

miRNAs是一組高度保守的小型非編碼RNA，由20～22個(gè)核苷酸組成，負(fù)責(zé)基因的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。成熟的miRNA進(jìn)入 RNA 誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體中，單鏈 miRNA在輸入蛋白 XPO8的介導(dǎo)下與靶mRNA分子結(jié)合，隨后mRNA在復(fù)合體中的核酸內(nèi)切酶argonaute的作用下被分解。在動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，miRNA與靶mRNA的結(jié)合位點(diǎn)不完全互補(bǔ)，miRNA通過(guò)靶向結(jié)合mRNAs的3′UTR，少部分則靶向mRNA的5′UTR，導(dǎo)致mRNA翻譯抑制，從而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)[7]。因此，miRNA通過(guò)靶向多種基因參與調(diào)節(jié)各種生物活性。越來(lái)越多的研究表明，miRNA的失調(diào)與各種癌癥的發(fā)展和進(jìn)展相關(guān)，并作為癌基因或腫瘤抑制因子發(fā)揮作用。失調(diào)的miRNA被認(rèn)為是癌癥臨床診斷和預(yù)后的有用生物標(biāo)志物，也是癌癥治療的潛在治療靶點(diǎn)[8]。然而，miRNA調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)在HCC發(fā)生、發(fā)展中的機(jī)制細(xì)節(jié)仍然很大程度上未知。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，miRNA通過(guò)調(diào)節(jié)多種信號(hào)通路參與了腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移過(guò)程，如Wnt、TGF-β信號(hào)通路等，同時(shí)微環(huán)境在HCC轉(zhuǎn)移中也起到重要作用。

2.1 Wnt /β-catenin信號(hào)通路與HCC轉(zhuǎn)移在正常成熟細(xì)胞中，Wnt通路處于關(guān)閉狀態(tài)。β-連環(huán)蛋白(β-catenin)是細(xì)胞表面鈣黏蛋白復(fù)合物的一種成分，胞漿中的β-catenin大部分與突出于細(xì)胞膜的E-cadherin結(jié)合，形成β-catenin/E-cadherin復(fù)合體，再與肌動(dòng)蛋白骨架相連，介導(dǎo)細(xì)胞間黏附，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[9]。目前發(fā)現(xiàn)Wnt信號(hào)途徑激活有三條途徑：Wnt/Ca2+途徑、平面細(xì)胞極性途徑和正規(guī)Wnt途徑。當(dāng)Wnt基因在腫瘤中被異常激活，其蛋白與胞膜卷曲蛋白(frizzled, Fz)受體結(jié)合，激活松散蛋白(dishevelled, Dsh)，進(jìn)而抑制GSK3β/APC/Axin復(fù)合物對(duì)β-catenin的磷酸化，降低了β-catenin的磷酸化降解，胞質(zhì)中聚集增多的β-catenin轉(zhuǎn)進(jìn)入細(xì)胞核，與核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子T淋巴細(xì)胞因子(T-cell-specific transcription factor, TCF)/淋巴樣增強(qiáng)因子發(fā)生作用，激活下游眾多靶基因如c-MYC和cyclin D1的過(guò)度表達(dá), 從而誘導(dǎo)HCC的EMT過(guò)程[10-11]。

許多miRNA可直接與Wnt信號(hào)通路中的細(xì)胞因子相互作用。如miR-766-3p可與Wnt3a的mRNA結(jié)合，下調(diào)Wnt3a的表達(dá)，從而通過(guò)Wnt/PRC1正向調(diào)節(jié)環(huán)抑制HCC細(xì)胞的侵襲和遷移[12]。在HCC中，高表達(dá)的Wnt3a往往與預(yù)后不良相關(guān)。miR-504、miR-542-3p、miR-485-5p可與Frizzled 7(FZD7)的mRNA的3′-UTR區(qū)域結(jié)合，負(fù)向調(diào)控其表達(dá)，從而抑制HCC細(xì)胞中β-catenin的核轉(zhuǎn)位，阻止細(xì)胞核中β-catenin的積累和Wnt信號(hào)的激活[13-16]。Frizzled 5(FZD5)也是Wnt的共同受體，miR-1324直接靶向FZD5 mRNA，抑制HCC中Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活[17]。GSK3β是Wnt /β-catenin信號(hào)通路的重要成員，可以通過(guò)在Ser33，Ser37和Thr41處磷酸化使β-catenin降解。生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)GSK3β上存在miR-1246、miR-26a-5p的潛在結(jié)合位點(diǎn)。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)這兩個(gè)miRNA可以直接與GSK3β mRNA結(jié)合，抑制其轉(zhuǎn)錄后翻譯，從而促進(jìn)β-catentin通路的激活。臨床數(shù)據(jù)也驗(yàn)證了在肝癌組織中miR-1246、miR-26a-5p表達(dá)明顯上升，與腫瘤臨床分期及預(yù)后呈負(fù)相關(guān)[18-19]。

除直接影響通路中的細(xì)胞因子外，miRNA還可作用于一些與Wnt/β-catenin信號(hào)通路存在相互作用的細(xì)胞因子。分泌的分泌性卷曲相關(guān)蛋白(secreted frizzled- related protein, SFRP)是一種可溶性的分泌性糖蛋白, 位于染色體8p12-11.1，可與卷曲受體競(jìng)爭(zhēng)Wnt蛋白[20]。miR-27a與SFRP1的mRNA 結(jié)合，在轉(zhuǎn)錄后水平抑制其表達(dá)。SFRP1的表達(dá)降低會(huì)導(dǎo)致更多的Wnt蛋白與Fz受體結(jié)合，進(jìn)而促進(jìn)EMT發(fā)生[21]。FOXO3a是Forkhead box O(FOXO)轉(zhuǎn)錄因子家族的成員，可與β-catenin結(jié)合，是一種腫瘤抑制基因。FOXO3a與TCF競(jìng)爭(zhēng)β-catenin，減少β-catenin/TCF復(fù)合物的形成，抑制Wnt /β-catenin通路的下游信號(hào)傳導(dǎo)。miR-182-5p與FOXO3a mRNA的72-79位點(diǎn)存在互補(bǔ)序列，在轉(zhuǎn)錄后水平抑制FOXO3a表達(dá)，進(jìn)而增強(qiáng)β-catenin與TCF4之間的相互作用，促進(jìn)Wnt/β-catenin通路的激活。此外，β-catenin的表達(dá)增多會(huì)反過(guò)來(lái)促進(jìn)miR-96，miR-182和miR-183的轉(zhuǎn)錄，形成Wnt /β-catenin-miRNA正反饋環(huán)，進(jìn)一步誘導(dǎo)肝細(xì)胞癌發(fā)生和進(jìn)展[22]。

有的miRNA會(huì)同時(shí)對(duì)兩種及以上的細(xì)胞因子產(chǎn)生影響。miR-500a可直接結(jié)合SFRP2和GSK-3βmRNA的3′-UTR，同時(shí)增強(qiáng)Wnt蛋白與卷曲受體的結(jié)合并減少β-catenin的降解，增加Wnt通路下游靶點(diǎn)的激活[23]。有的miRNA還可同時(shí)影響多個(gè)信號(hào)通路。HMGA2是一種高遷移率A族蛋白質(zhì)的膜，是一種非組蛋白染色質(zhì)結(jié)合蛋白，參與調(diào)節(jié)各種類型癌癥發(fā)生和進(jìn)展。與正常組織相比，HMGA2在各種類型的腫瘤組織中都表達(dá)增加，在肝細(xì)胞癌中也是如此。miR-337可通過(guò)結(jié)合HMGA2來(lái)抑制PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活，發(fā)揮抑癌基因的作用[24]。

2.2 TGF-β通路TGF-β是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的一個(gè)重要亞類，其家族龐大，包括9個(gè)亞族，共27類因子，參與調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育過(guò)程中的EMT現(xiàn)象。其機(jī)制主要是通過(guò)Smad依賴通路和非Smad依賴通路完成的。Smad蛋白存在于胞質(zhì)中，是由Smad基因編碼的相對(duì)分子質(zhì)量為42 000～60 000 Da 的蛋白質(zhì)分子。作為TGF-β受體復(fù)合物的下游信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白, Smads蛋白家族可將信號(hào)由胞膜傳導(dǎo)至胞核, 從而調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。典型的Smad依賴通路誘導(dǎo)的EMT過(guò)程如下: TGF-β首先與腫瘤細(xì)胞膜上的TGF-βⅡ 型受體(TpRⅡ)結(jié)合, 通過(guò)TpRⅡ激酶使TGF-βⅠ型受體(TpRⅠ)磷酸化后激活下游的Smad2/3, 磷酸化的Smad2/3再與胞內(nèi)的Smad4結(jié)合形成三聚體, 進(jìn)入細(xì)胞核, 并與DNA結(jié)合而發(fā)生相互作用, 促使EMT形成。而非Smad依賴通路中，活性TGF-β受體則激活PI3K/AKT，ERK，JNK/p38和RhoA等信號(hào)通路，誘導(dǎo)其下游轉(zhuǎn)錄。異常的TGF-β表達(dá)是腫瘤發(fā)展的罪魁禍?zhǔn)字弧Ｗ畛?，是抑制?xì)胞生長(zhǎng)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的腫瘤抑制因子。然而，在腫瘤進(jìn)展的后期階段，TGF-β充當(dāng)腫瘤啟動(dòng)子，與腫瘤侵襲性的增強(qiáng)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)[25]。

根據(jù)miRNA靶基因的多樣性，靶標(biāo)預(yù)測(cè)表明TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的許多個(gè)組分都被miRNA靶向。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，已經(jīng)證實(shí)多種miRNA通過(guò)靶向配體、受體、Smad蛋白和非Smad依賴通路中的組分調(diào)節(jié)TGF-β信號(hào)通路的激活。miR-142、miR-542-3p可通過(guò)直接靶向TGF-β1的3′UTR，抑制TGF-β1的翻譯，從而抑制TGF-β信號(hào)通路的激活。在HCC中，miR-542-3p的表達(dá)減少、而miR-142發(fā)生甲基化，進(jìn)一步誘發(fā)腫瘤的進(jìn)展[26]。許多miRNA與TGF-β受體結(jié)合，特別是TGF-βⅡ型受體(TpRⅡ)，如miR-302d、miR-590-5p等。這些miRNA與TpRⅡ受體mRNA結(jié)合，抑制其翻譯，從而抑制TGF-β通路下游因子的激活，從而抑制HCC細(xì)胞的EMT過(guò)程[27-28]。

2.3 Smad依賴通路SMAD蛋白是Smad依賴通路中的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，許多miRNA均靶向SMAD蛋白，miR-142就是其中之一?？膳cSMAD3的mRNA結(jié)合，從而抑制TGF-β的激活。經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，在HCC的發(fā)展過(guò)程中，miR-142在HCC細(xì)胞中過(guò)度甲基化，導(dǎo)致其表達(dá)顯著減少，促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移[29]。而miR-125b則可抑制SMAD2及SMAD4的翻譯，從而削弱EMT和相關(guān)性狀[30]。

Fos相關(guān)抗原2(FOSL2/FRA2)與FOS異二聚體和Jun同源二聚體一起構(gòu)成AP-1轉(zhuǎn)錄因子家族。FOSL2促進(jìn)侵襲性腫瘤生長(zhǎng)，在TGF-β信號(hào)通路的調(diào)節(jié)中起重要作用，在HCC中Fos水平明顯升高。miR-133a通過(guò)靶向FOSL2影響Smad3蛋白的表達(dá)，從而抑制HCC的轉(zhuǎn)移[31]。

miR-145通過(guò)HCC中Smad3的特定結(jié)構(gòu)域特異性磷酸化，產(chǎn)生pSmad3C從而抑制腫瘤進(jìn)展。而miR-21通過(guò)ERK1/2/MAPK促進(jìn)腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移。反之，pSmad3C的增加又導(dǎo)致miR-145表達(dá)上調(diào)及miR-21下調(diào)，從而進(jìn)一步抑制腫瘤進(jìn)展[32]。

2.4 非Smad依賴通路TGF-β信號(hào)通路的下游轉(zhuǎn)錄因子同時(shí)調(diào)節(jié)許多miRNA的轉(zhuǎn)錄，如miR-200家族、miR-203和miR-216/217等。TGF-β信號(hào)通路下游的轉(zhuǎn)錄因子ZEB家族等均可抑制其轉(zhuǎn)錄。TGF-β信號(hào)通路和miRNA途徑相互影響，形成反饋調(diào)節(jié)環(huán)。ZEB家族包括ZEB1，ZEB2，Snail1和Slug，在調(diào)節(jié)生理和病理性EMT中發(fā)揮核心作用。在EMT過(guò)程中，ZEB1不僅可與E-鈣黏蛋白啟動(dòng)子的E-box元件結(jié)合來(lái)抑制E-鈣黏蛋白轉(zhuǎn)錄，還可激活間充質(zhì)基因。

MiR-200家族是最經(jīng)典的調(diào)控EMT的miRNA家族。其包含五個(gè)miRNA：miR-200b、miR-200c、miR-429、miR-200a、miR-141。分別由miR-200b/200a/429和miR-200c/141兩個(gè)簇轉(zhuǎn)錄，這兩個(gè)簇的啟動(dòng)子區(qū)域存在ZEB型E-box元件，當(dāng)發(fā)生EMT時(shí)被TGF-β誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄抑制因子ZEB1和ZEB2抑制。相反，miR-200家族靶向ZEB1/2的3′-UTR。因此，ZEB1/2和miR-200家族形成雙向負(fù)反饋環(huán)。此外，miR-200家族還通過(guò)調(diào)節(jié)Rho-ROCK信號(hào)傳導(dǎo)、黏著斑、基質(zhì)金屬蛋白酶等EMT的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子來(lái)維持上皮特性并防止轉(zhuǎn)移。另外，miR-205、miR-101也存在類似的機(jī)制[33]。

在HCC中，miR-630作為腫瘤抑制因子靶向Slug抑制HCC的轉(zhuǎn)移。在miR-630轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游的1.0-kb區(qū)域存在SP1和c-Jun的響應(yīng)元件。TGF-β通過(guò)Erk/SP1和JNK/c-Jun信號(hào)通路抑制miR-630轉(zhuǎn)錄，從而間接上調(diào)Slug，促進(jìn)HCC細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和侵襲。除調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo)，部分miRNA可直接影響鈣黏蛋白的翻譯。miR-199b-5p、miR-194可直接靶向N-鈣粘蛋白的3′-UTR端，從而顯著抑制HCC細(xì)胞中N-鈣黏蛋白的表達(dá)，抑制HCC細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。此外miR-199b-5p還可抑制TGF-β1激活的Akt磷酸化，TGF-β1通過(guò)Akt磷酸化誘導(dǎo)N-鈣黏蛋白過(guò)度表達(dá)。同時(shí)TGF-β1還通過(guò)非Smad信號(hào)傳導(dǎo)途徑miR-199b-5p下調(diào)，形成了一個(gè)調(diào)節(jié)環(huán)[34-35]。

miR-34/miR-449家族由6個(gè)同源成員組成：miR-34a，miR-34b，miR-34c，miR-449a，miR-449b和miR-449c。miR-449a，miR-449b和miR-449c均由CDC20B的第二個(gè)內(nèi)含子中基因簇編碼，由組蛋白乙?；餐{(diào)節(jié)，以細(xì)胞系依賴性方式調(diào)節(jié)SOX4。轉(zhuǎn)錄因子SOX4的生理功能是調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育過(guò)程中的發(fā)育過(guò)程，如調(diào)節(jié)纖毛發(fā)生和膽管形成。臨床研究發(fā)現(xiàn)，HCC標(biāo)本中SOX4是表達(dá)明顯上升。而SOX4轉(zhuǎn)錄因子受TGF-β下游的Smad2和Smad3直接調(diào)控，SOX4過(guò)表達(dá)是TGF-β介導(dǎo)的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化和細(xì)胞遷移的關(guān)鍵因素。miR-449家族通過(guò)阻止TGF-β介導(dǎo)的SOX4過(guò)表達(dá)來(lái)干擾TGF-β途徑，從而抑制細(xì)胞遷移[36]。

2.5 微環(huán)境與HCC轉(zhuǎn)移已有研究發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境對(duì)于多種癌癥的轉(zhuǎn)移是至關(guān)重要的。雖然之前的研究主要集中在miRNA對(duì)癌細(xì)胞內(nèi)在特性的影響，但最近的報(bào)道顯示，miRNA也可影響癌細(xì)胞與其相關(guān)基質(zhì)之間的相互作用。

在癌癥的早期階段，上皮樣癌細(xì)胞分泌各種生長(zhǎng)因子活化成纖維細(xì)胞、降低MMPs表達(dá)，使癌細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)降解減緩，細(xì)胞基質(zhì)硬度增加?；罨某衫w維細(xì)胞還能通過(guò)調(diào)控胰島素樣生長(zhǎng)因子、角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子等促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、抑制凋亡。之后，成纖維細(xì)胞表現(xiàn)出肌成纖維細(xì)胞的特征，激活TGF-β通路等促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生EMT，并產(chǎn)生FGF-2等因子促進(jìn)血管生成。此外，CAF還上調(diào)賴氨酰氧化酶(lysyl oxidase，LOX)表達(dá)、分泌膠原蛋白Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ，Ⅸ形成膠原纖維，進(jìn)一步重塑和增強(qiáng)ECM。由于過(guò)度的增殖和生長(zhǎng)，腫瘤核心區(qū)域開(kāi)始缺氧，癌細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子增加，增強(qiáng)血管生成并向周圍浸潤(rùn)。當(dāng)癌細(xì)胞發(fā)生EMT時(shí)，會(huì)產(chǎn)生CSF-1，吸引巨噬細(xì)胞至腫瘤部位，產(chǎn)生EGF，IL-33等進(jìn)一步促進(jìn)轉(zhuǎn)移。在腫瘤邊緣，基質(zhì)細(xì)胞還會(huì)排列成膠原束，腫瘤細(xì)胞經(jīng)此向周圍轉(zhuǎn)移。到了后期，癌細(xì)胞反而會(huì)上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶、解聚素-金屬蛋白酶等表達(dá)，降解基質(zhì)，從而滲入淋巴結(jié)和血管向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。

LOX是一種分泌的銅依賴性胺氧化酶，其在翻譯后催化ECM中膠原蛋白或彈性蛋白交聯(lián)。LOX氧化膠原，使肽基賴氨酸和羥基賴氨酸殘基脫氨基形成肽氨基己二酸半醛(烯丙基)，隨后凝聚。賴氨酰氧化酶樣(LOXL)1-4蛋白與LOX作用類似。LOXL2介導(dǎo)的ECM重塑導(dǎo)致ROCK的活化并隨后增強(qiáng)HCC局部侵襲。miR-26和miR-29協(xié)同抑制LOXL2表達(dá)，而這兩種miRNA在發(fā)生轉(zhuǎn)移的HCC中明顯下調(diào)。此外miR-26和miR-29不僅在HCC中失調(diào)，而且在其他癌癥中也被失調(diào)。最近在乳腺癌中證實(shí)，GATA結(jié)合蛋白3介導(dǎo)的miR-29b抑制了一組前轉(zhuǎn)移基因，這些基因主要為HIF靶點(diǎn)[37]。

IL-34鑒定為miR-28-5p的直接靶標(biāo)，miR-28-5p可抑制IL-34的分泌。IL-34被HCC細(xì)胞分泌至細(xì)胞外后，與細(xì)胞膜上CSF-1R結(jié)合，激活局灶性黏附激酶和細(xì)胞外信號(hào)相關(guān)的激酶1和2(ERK1/2)，吸引巨噬細(xì)胞作趨化性遷移，聚集至腫瘤細(xì)胞附近。招募的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumour-associated macrophages,TAM)分泌各種生長(zhǎng)因子、血管生成因子和MMPs等，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移能力，還可促進(jìn)腫瘤血管生成。同時(shí)，TAM可通過(guò)TGF-β途徑進(jìn)一步抑制miR-28-5p的成熟，形成一個(gè)正反饋環(huán)[38]。

3 結(jié) 語(yǔ)

綜上所述, 本文著重總結(jié)了Wnt、TGF-β信號(hào)通路和包括miR-200家族在內(nèi)的miRNA 在HCC轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2萬(wàn)多種miRNA，其中與腫瘤相關(guān)的miRNA有近千種，但還存在著其他未被發(fā)現(xiàn)的信號(hào)通路或新的miRNA參與腫瘤的轉(zhuǎn)移。并且這些信號(hào)通路及miRNA之間存在著更為復(fù)雜的協(xié)同或拮抗效應(yīng)，這些都是需要我們更深入地研究。這些研究可增加我們對(duì)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制的理解, 從而開(kāi)發(fā)新的腫瘤治療方法，為提高患者生存率提供新的希望。