(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所/云南省南藥可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 云南 景洪 666100)

傣百解為蘿藦科牛奶菜屬(Marsdeniatenacissima(Roxh.) Moon)藤本植物，是傣族傳統(tǒng)解藥，傣語(yǔ)稱“雅解先打”，意為解百毒的藥，在我國(guó)西雙版納、德宏、西盟、孟連、新平、元江等地，以及老撾、緬甸等國(guó)家的傣族居住區(qū)被廣泛使用。傣百解以根入藥，具有清火解毒、消腫止痛之功效，常用于咽喉腫痛、口舌生瘡、療瘍斑疹、肺熱咳嗽、胃脘痛、尿痛、解藥食毒等[1]。傣百解在傣醫(yī)臨床中應(yīng)用廣泛，是雅解片(國(guó)藥準(zhǔn)字品種)、百解膠囊和雅解嘎罕等制劑的組方藥材[2]。由于其臨床效果較好，需求量較大，傣百解的野生資源日益枯竭。為解決傣百解野生資源嚴(yán)重不足的問(wèn)題，滿足醫(yī)療保健等方面的市場(chǎng)需求，對(duì)傣百解進(jìn)行人工栽培迫在眉睫。目前，傣百解的研究主要集中在化學(xué)成分、藥理作用等方面[3-6]，而在種子繁育和栽培等方面研究較少。本試驗(yàn)對(duì)傣百解種子的采集與處理、種子貯藏及萌發(fā)特性進(jìn)行了初步研究，以期為傣百解種子播種、貯藏等提供參考，并為傣百解的人工栽培奠定科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料、儀器

傣百解種子于2017年3月采自云南省普洱市野生植株。

儀器：GXZ型智能光照培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠)、種子低溫低濕儲(chǔ)藏柜(浙江托普儀器有限公司)、電子天平(精確0.001 g)、游標(biāo)卡尺、培養(yǎng)皿(12 cm)、定性濾紙、紗布、河沙。

1.2 研究方法

1.2.1種子的準(zhǔn)備

于采收期選取飽滿、無(wú)病蟲(chóng)害、未開(kāi)裂的果實(shí)，將果實(shí)攤放在通風(fēng)陰涼處，待果實(shí)出現(xiàn)裂縫時(shí)，沿裂縫將果實(shí)中的種子取出并去掉附屬物，除去干癟、壞死的種子。將種子攤放陰涼處5～12 h后置于自封袋中，當(dāng)自封袋中有水汽出現(xiàn)時(shí)，將自封袋打開(kāi)及時(shí)通風(fēng)使水汽蒸發(fā)，待水汽消失后封閉自封袋，如此反復(fù)，直至自封袋中不再出現(xiàn)水汽即可。

1.2.2種子形態(tài)特征測(cè)定

隨機(jī)選取處理好的種子，采用電子游標(biāo)卡尺分別測(cè)量其種子橫徑、縱徑、厚度(短軸直徑)，精度為0.01 mm。

1.2.3種子重量測(cè)定

采用千粒法測(cè)定千粒重。用精度為0.001 g的電子天平稱重。

1.2.4種子水分測(cè)定

參照GB/T 3543.6中高溫烘干法，烘干5 h測(cè)定種子含水量，重復(fù)5次。

1.2.5溫度和光照時(shí)間對(duì)種子萌發(fā)的影響

將傣百解種子分別在15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃恒溫條件和15 ℃/25 ℃、20 ℃/30 ℃變溫條件下培養(yǎng)；并在每個(gè)溫度條件下設(shè)置每天光照12 h和全黑暗的處理。

1.2.6發(fā)芽床對(duì)種子萌發(fā)的影響

采用濾紙、河沙、雙層紗布3種發(fā)芽床，并設(shè)置紙上、紙間、沙上、沙間、紗布上5個(gè)播種方式，于25 ℃、光照12 h·d-1條件下培養(yǎng)。

1.2.7貯藏溫度和貯藏時(shí)間對(duì)種子萌發(fā)的影響

在低溫(4 ℃)和室溫(25 ℃)條件下分別貯藏1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月，于紙床、溫度25 ℃和光照12 h·d-1條件下培養(yǎng)。

以上發(fā)芽試驗(yàn)，每個(gè)處理50粒，重復(fù)3次。種子萌發(fā)在培養(yǎng)皿中進(jìn)行，發(fā)芽過(guò)程中保持發(fā)芽床的濕潤(rùn)，以胚根長(zhǎng)度超過(guò)種子直徑作為萌發(fā)標(biāo)志。每日統(tǒng)計(jì)發(fā)芽數(shù)，并根據(jù)發(fā)芽數(shù)計(jì)算發(fā)芽率。

發(fā)芽率(%)=(種子發(fā)芽數(shù)/供試種子總數(shù))×100%。

1.2.8數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，Origin 8.0軟件作圖，其中不同處理間的差異顯著性采用Duncan法進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié) 果

2.1 種子的形態(tài)特征

傣百解種子呈三角倒卵形，頂端具有白色絹質(zhì)種毛，灰綠色紙質(zhì)質(zhì)地，皮較薄。由表1可知，傣百解種子平均縱徑為(13.10±1.06)mm、平均橫徑為(8.22±0.69)mm、平均短軸直徑為(0.76±0.06)mm，千粒重量為(26.91±2.51)g，含水量為(10.27±0.40)%。

表1 傣百解種子的形態(tài)特征

2.2 溫度對(duì)種子萌發(fā)的影響

試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同發(fā)芽溫度對(duì)種子萌發(fā)有影響。在20～30 ℃，15 ℃/25 ℃和20 ℃/30 ℃條件下，種子發(fā)芽率均大于96%，每個(gè)處理之間無(wú)顯著性差異；15 ℃時(shí)種子發(fā)芽率最低，僅為2.5%，且均與其它處理呈顯著性差異(見(jiàn)表2)。此外，在25 ℃、30 ℃及20 ℃/30 ℃ 3個(gè)條件下，發(fā)芽完成時(shí)間僅需6 d；在20 ℃、15 ℃/25 ℃條件下，發(fā)芽完成時(shí)間為8 d，15 ℃下第9天才發(fā)芽，此后幾乎不發(fā)芽(見(jiàn)圖1)；說(shuō)明隨著發(fā)芽溫度的增加，種子發(fā)芽整齊度越好，發(fā)芽完成時(shí)間也越短。

表2 溫度對(duì)種子發(fā)芽率的影響

圖1 不同溫度下種子發(fā)芽率與發(fā)芽時(shí)間(d)的關(guān)系

2.3 光照對(duì)種子萌發(fā)的影響

光照對(duì)種子萌發(fā)的影響結(jié)果(圖2)顯示，傣百解種子在周期性光照和全黑暗條件下都能很好地萌發(fā)。在同一溫度下，黑暗和周期性光照條件下種子的萌發(fā)均無(wú)顯著性差異。說(shuō)明傣百解種子萌發(fā)對(duì)光的要求不高。

圖2 光照對(duì)種子發(fā)芽率的影響

2.4 發(fā)芽床對(duì)種子萌發(fā)的影響

發(fā)芽床對(duì)種子萌發(fā)的影響結(jié)果見(jiàn)表3。在不同發(fā)芽床及播種方式下，傣百解種子的發(fā)芽率差異不顯著。但不同發(fā)芽床的發(fā)芽時(shí)間和發(fā)芽整齊度有明顯差別，沙床條件下種子發(fā)芽起始時(shí)間比紗布和紙床晚1 d，且紙上播種的種子在第8天才完成發(fā)芽，其發(fā)芽整齊度最低。說(shuō)明紗布和紙床更適宜傣百解種子的萌發(fā)。

2.5 貯藏溫度和時(shí)間對(duì)種子萌發(fā)的影響

貯藏溫度和貯藏時(shí)間對(duì)傣百解種子萌發(fā)的影響結(jié)果見(jiàn)圖3，在低溫(4 ℃)和室溫(25 ℃)2個(gè)貯藏溫度下，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，傣百解種子的發(fā)芽率均呈下降趨勢(shì)；貯藏3個(gè)月內(nèi)，發(fā)芽率均保持在90%以上，貯藏到6個(gè)月時(shí)，發(fā)芽率不及60%。在貯藏時(shí)間相同時(shí)，低溫貯藏的種子其發(fā)芽率均高于室溫；貯藏2個(gè)月內(nèi)，2個(gè)貯藏溫度下的起始發(fā)芽時(shí)間一致，為2～3 d；貯藏3個(gè)月后，低溫貯藏的起始發(fā)芽時(shí)間均早于室溫儲(chǔ)藏，且種子發(fā)芽整齊度也優(yōu)于室溫儲(chǔ)藏。

表3 發(fā)芽床對(duì)種子萌發(fā)的影響 單位：%

圖3 貯藏溫度和時(shí)間對(duì)種子發(fā)芽率的影響

3 結(jié)論與討論

傣百解種子極易發(fā)芽，在適宜的溫度條件下，種子于第2天開(kāi)始萌發(fā)，第4天可達(dá)到發(fā)芽高峰，第10天種子可完全萌發(fā)。傣百解種子在20～30 ℃的恒溫或變溫條件下均能很好地發(fā)芽，發(fā)芽率均大于96%，并且隨著溫度的增加，發(fā)芽速度和整齊度也更高，說(shuō)明傣百解種子為中、高溫萌發(fā)型種子。這一特性與其屬熱帶性植物相一致[1]，即傣百解主要分布在熱帶地區(qū)，長(zhǎng)期在高溫環(huán)境下生長(zhǎng)，因此種子對(duì)較高的溫度具有更好的適應(yīng)性。

在適宜的溫度下，無(wú)論光照或黑暗條件，傣百解種子發(fā)芽率均很高，且無(wú)顯著性差別，說(shuō)明傣百解種子是光中性種子。

不同發(fā)芽床及播種方式均適宜傣百解種子發(fā)芽，發(fā)芽率可達(dá)96%以上；沙床條件下種子萌發(fā)較其它處理晚1 d，并且種子發(fā)芽整齊度較其他處理的低，尤以沙上最差。這可能是因?yàn)樗旨巴笟庑允欠N子萌發(fā)初期的必需因素，沙床保水性低于其它發(fā)芽床，導(dǎo)致種子發(fā)芽時(shí)吸收水分所需的時(shí)間較長(zhǎng)，從而萌發(fā)時(shí)間推遲。特別是沙上處理，種子還未能充分吸足水分，發(fā)芽床已失去大量水分，導(dǎo)致種子需較長(zhǎng)的吸水時(shí)間。

隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，傣百解種子的發(fā)芽率均呈下降趨勢(shì)，貯藏到6個(gè)月時(shí)，發(fā)芽率急劇降低，發(fā)芽率低于60%，因此種子從采收到播種不宜超過(guò)3個(gè)月。在低溫和室溫起始下貯藏3個(gè)月，種子的發(fā)芽率均保持在90%以上，但低溫貯藏的種子發(fā)芽率相對(duì)較高，且發(fā)芽時(shí)間較早，整齊度也較好，說(shuō)明低溫條件更利于種子的貯藏。這可能與低溫時(shí)種子的呼吸作用較弱，種子內(nèi)部的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗較慢相關(guān)[7,8]。

綜上，傣百解種子為中高溫型、光中性種子，容易萌發(fā)，適宜的發(fā)芽溫度為20～30 ℃；低溫和室溫均是傣百解種子貯藏的適宜溫度，但以低溫貯藏為佳，貯藏時(shí)間不宜超過(guò)3個(gè)月。