王 娜 ，蘇勝杰 ，戴伶俐 ，宋 越 ，張 帆 ，張?jiān)旅?，趙世華 ，劉 威 ＊

（1.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古呼和浩特 010010）

1 發(fā)病機(jī)理

羊痘病毒經(jīng)呼吸道、消化道、皮膚、黏膜侵入羊的血液中，隨后擴(kuò)散至全身，導(dǎo)致出現(xiàn)高熱癥狀。部分羊會出現(xiàn)丘疹和膿皰，丘疹和膿皰破潰后立刻結(jié)痂。以上過程易引發(fā)感染，致使羊的肺部和呼吸道阻塞，死亡率明顯上升[3]。

2 病因分析

2.1 管理不當(dāng)

養(yǎng)殖過程中羊舍密度大、通風(fēng)差，造成有害氣體聚集。飼料營養(yǎng)不均衡，致使羊只體弱、抵抗力下降。對糞便、垃圾未定期清理，導(dǎo)致滋生大量的細(xì)菌和病毒，造成羊痘的傳播和蔓延[4]。

2.2 季節(jié)因素

通常不同季節(jié)羊痘的發(fā)病率各有不同，冬末春初天氣寒冷干燥，羊群抵抗力下降，適宜病毒生存，是該病的高發(fā)期。夏季和秋季光照充足，可以殺滅病毒，使發(fā)病率顯著降低[4]。

2.3 免疫操作不當(dāng)

接種疫苗是預(yù)防該病的有效措施，但疫苗在儲存和運(yùn)輸過程中的溫度直接影響免疫效果，不適宜的溫度將會導(dǎo)致疫苗的效力下降甚至失效。養(yǎng)殖人員在免疫期間未按說明嚴(yán)格操作，也會降低疫苗免疫效果[4]。

2.4 生物安全性不良

寄生蟲是該病的重要傳染源，如果養(yǎng)殖人員未定期對羊舍進(jìn)行消毒，使羊體內(nèi)寄生蟲清理不徹底，在外因與內(nèi)因的作用下，病毒便可在羊群中大范圍傳播。養(yǎng)殖人員未經(jīng)培訓(xùn)，缺乏科學(xué)的養(yǎng)殖方法，能夠造成病毒大量繁殖，導(dǎo)致該病的傳播[4]。

3 病原學(xué)

3.1 病毒分類

病原主要包括綿羊痘病毒（SPPV）和山羊痘病毒(GTPV),二者均屬于痘病毒科、脊索動物痘病毒亞科、羊痘病毒屬[5]。

3.2 病毒特性

羊痘病毒核酸為線性雙股DNA，基因組全長約為150 kb，有147個(gè)開放閱讀框，病毒顆粒形態(tài)一般為卵圓形或磚形，大小為167×92 nm。使用Paschen氏等特殊染色法著染病料或切片，易看到原生小體，其表面有短管狀覆蓋物，核心凹陷成盤狀，具有囊膜，可以在細(xì)胞的胞漿內(nèi)復(fù)制病毒，并形成包涵體[5-6]。

1.1一般資料2013年6月至2014年6月我院對106例子宮內(nèi)病變患者開展了分析研究,患者最小22歲,最大56歲,平均39歲,有12例病程1年以上,38例半年至一年,56例半年以內(nèi)。

3.3 病毒理化特性

羊痘病毒在干燥寒冷的條件下抵抗能力較強(qiáng)，在干燥環(huán)境中能存活42～56 d，在低溫陰暗處可存活2年以上，凍干后至少能儲存3個(gè)月，在羊毛、痂皮中可存活2個(gè)月。但是該病毒對高溫、直射陽光和紫外線敏感，通常在50℃以上條件下迅速死亡。該病毒對常用消毒劑也較為敏感，如2%甲醛、3%石碳酸、2%福爾馬林以及碘酊等[6-7]。

4 流行病學(xué)

4.1 傳染源

病羊的分泌物、膿液、結(jié)痂后脫落的組織中均含有大量的病毒顆粒，成為痘病的主要傳染源[8]。

4.2 傳播途徑

主要通過呼吸道和消化道傳播，其次是破損的皮膚黏膜。此外被污染的墊料、飼料、喂食用具、飲用水、隱性感染羊、體外寄生蟲也是該病的傳播媒介。節(jié)肢動物亦可傳播該病[8]。

4.3 易感動物

不同品種、不同年齡、不同性別的羊均能感染該病。一般情況下，SPPV主要感染綿羊，細(xì)毛羊最易感，其次是羔羊、成年羊，妊娠母羊感染后易引發(fā)流產(chǎn)。易感羊群的發(fā)病率高達(dá)75%，且病死率為10%～58%。GTPV主要感染山羊，也有感染綿羊的報(bào)道。野兔、馴鹿也易感[5-6]。

4.4 流行特征

該病在眾多國家流行，尤以北非、印度次大陸、西南亞為甚，在養(yǎng)羊地區(qū)多呈地方性流行[9-11]。該病一年四季均可發(fā)生，但在冬末春初多發(fā)。其特點(diǎn)是首先發(fā)生于個(gè)別免疫力低下的羊只，隨后逐漸蔓延至全群[6]。

4.5 潛伏期

綿羊痘的潛伏期為4～8 d,山羊痘的潛伏期為5～14 d。

5 臨床癥狀

羊痘包括綿羊痘和山羊痘。綿羊痘只感染綿羊，具有典型的臨床癥狀；山羊痘多感染山羊，臨床癥狀類似于綿羊痘，但癥狀較輕。

5.1 綿羊痘的臨床癥狀

病羊體溫急劇上升，可達(dá)到41～42℃。呼吸急促，精神沉郁，食欲不振，眼結(jié)膜潮紅，鼻腔流出漿性、黏性或膿性分泌物。以上病癥持續(xù)1～2 d后，全身少毛或無毛處都可能長出痘疹，如眼、唇、鼻、尾根、乳房等部位。痘疹最初為紅斑，之后突出于皮膚表面形成丘疹且不斷變大，呈灰白色或淡紅色結(jié)節(jié)狀，逐漸變?yōu)樗?，其?nèi)容物變成膿性。膿皰破裂后，如不發(fā)生繼發(fā)感染，則干燥后形成痂塊，自然脫落并出現(xiàn)紅色的斑塊，之后逐漸變淡直至痊愈。此外，部分病羊可能會發(fā)生融合痘、出血痘、石痘、壞疽痘等[12]。

5.2 山羊痘的臨床癥狀

病羊體溫急劇上升，可達(dá)40～42℃。食欲不振，嚴(yán)重者拒食，精神萎靡，屈身拱背、身體發(fā)抖，部分伏臥，鼻孔閉塞，呼吸急促，伴有咳嗽，驅(qū)趕時(shí)發(fā)出慘叫聲。四肢內(nèi)側(cè)、尾根、口、鼻、乳房、肛門等部位常感染羊痘病毒，頭部、腹部偶爾出現(xiàn)感染。感染初期會出現(xiàn)大小不一的痘疹，為圓形的紅色結(jié)節(jié)，2 d后變?yōu)榈t色丘疹，后期形成水皰、膿包及痂皮，通常3～4周痂皮自然脫落。臨床案例表明，山羊痘也可以使其他部位（消化道、呼吸道、骨關(guān)節(jié)）出現(xiàn)炎癥，嚴(yán)重者還會導(dǎo)致膿毒敗血癥。幼羊常發(fā)生感染，經(jīng)剖檢后可見氣管、肺、腎等部位有典型性痘疹[12-13]。

6 剖解病變

6.1 綿羊痘的剖解病變

病羊頭部腫脹，并有大小不一的結(jié)節(jié)，在皮膚外表有大量的形狀各異的痘疹，其中尾腹面最多，通常為紐扣大小的白色圓形的痘疹。肺和氣管有出血性病變，肺腫大。心臟腫大，心耳有小出血點(diǎn)。小腸黏膜充血，部分出血，腸系膜淋巴結(jié)腫大。瘤胃壁和腎臟存在大小不一的乳白色斑點(diǎn)，內(nèi)含少量白色溶液[14]。

6.2 山羊痘的剖解病變

病羊的呼吸道有出血性炎癥，鼻、口、咽、氣管等器官的黏膜上有大量的痘瘡。前胃、第四胃黏膜上可見堅(jiān)硬的圓形結(jié)節(jié)。肝臟表面也存在灰色結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)周圍出血。肺部存在大理石樣結(jié)節(jié)，并有卡他性肺炎區(qū)。腎臟內(nèi)外可見白色點(diǎn)狀結(jié)節(jié)。肝臟與膽囊的交界處有紅色斑塊。心臟包膜變厚，并有大量積液。病變組織與正常組織之間存在明顯的界線[15]。

7 診斷

7.1 常規(guī)診斷

根據(jù)羊痘病的臨床癥狀、流行病學(xué)及剖解病變可做出初步診斷，對非典型病例還需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷[16]。

7.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

7.2.1 樣本采集。采集病料樣品的最佳時(shí)間為病羊出現(xiàn)臨床癥狀后的1周之內(nèi)。采集病羊皮膚和黏膜上的水皰或丘疹用于病原的分離培養(yǎng)。發(fā)熱期血液、肺部病變組織及淋巴結(jié)可作為病料，但用于組織學(xué)檢測的樣品應(yīng)包括病變周圍組織。采集后需立即置于10倍體積的10%的甲醛溶液中。

7.2.2 病毒分離培養(yǎng)。將水皰或丘疹接種于原代或者次代羔羊腎細(xì)胞和睪丸細(xì)胞，每天觀察培養(yǎng)瓶是否出現(xiàn)細(xì)胞病變，持續(xù)14 d。培養(yǎng)3～5 d后仍未出現(xiàn)病變，需盲傳3～5代，如產(chǎn)生病變或胞漿內(nèi)存在包涵體，表明水皰或丘疹中存在羊痘病毒[5]。

7.2.3 血清學(xué)檢測。酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）、病毒中和、瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散、重組核蛋白間接 ELISA、競爭性ELISA和對流免疫電泳是血清學(xué)診斷的常用方法。在實(shí)際檢測中，ELISA方法因簡便快捷，故最為常用[16]。

7.2.4 分子生物學(xué)檢測。通過PCR檢測皮膚組織和細(xì)胞培養(yǎng)物中的病毒基因，根據(jù)產(chǎn)物的特征，進(jìn)行分子生物學(xué)檢測診斷。張志成[17]等根據(jù)羊痘病毒的全基因序列，設(shè)計(jì)合成特異性引物，建立了PCR檢測方法，并研制了羊痘病毒PCR診斷試劑盒，該試劑盒特異性好、靈敏度高，可以用于臨床診斷。王鋆[18]利用綿羊痘病毒P32基因建立了PCR檢測方法。楊俊等人利用SPPV和GTPV基因建立了實(shí)時(shí)熒光RPA檢測方法，該法特異性好、靈敏度高，能為羊痘的早期診斷提供依據(jù)。

8 預(yù)防措施

8.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)及環(huán)境衛(wèi)生管理

養(yǎng)殖場宜建在多水多樹的地方，盡量遠(yuǎn)離傳染源。養(yǎng)殖場還應(yīng)制定衛(wèi)生消毒制度，定期使用不同的消毒液對養(yǎng)殖場進(jìn)行消毒。及時(shí)清理垃圾及糞便，并按時(shí)通風(fēng)換氣。堅(jiān)持自繁自育，防止外來病原侵入。綿羊和山羊應(yīng)分舍飼養(yǎng)，避免交叉感染。如果養(yǎng)殖場出現(xiàn)羊痘病，應(yīng)嚴(yán)格消毒，避免造成飼料、墊料、飲用水的二次污染[19]。

應(yīng)選擇優(yōu)質(zhì)的草料和干凈的飲用水，最好用豆科牧草和禾本科牧草混合飼喂，并添加適量的微量元素及維生素，確保羊只每日攝入充足的營養(yǎng)物質(zhì)[19]。

8.2 規(guī)范引種檢疫工作

如需引種，應(yīng)將所有引入羊只隔離飼養(yǎng)30 d，在確定無陽性者后方可混入大群飼養(yǎng)。一旦發(fā)現(xiàn)病羊，應(yīng)立即撲殺，并進(jìn)行無害化處理[13，20]。

8.3 加強(qiáng)疫苗接種工作

接種疫苗是防治羊痘行之有效的方法。首先，養(yǎng)殖場應(yīng)制定免疫計(jì)劃，即每年春秋季節(jié)給所有羊只定期接種羊痘疫苗，羔羊斷奶后應(yīng)進(jìn)行加免，配種前15 d亦需再次接種疫苗。其次，應(yīng)按照說明嚴(yán)格操作，保證方法、劑量、注射部位精準(zhǔn)[5，21]。

8.4 疫情處置

羊痘是國家Ⅰ類動物疫病，該病沒有特效藥物，發(fā)病后不需治療。確診后應(yīng)立即向當(dāng)?shù)卣蠄?bào)病情，由當(dāng)?shù)卣蛣游锓酪卟块T封鎖隔離養(yǎng)殖場，并將確診的病羊撲殺，進(jìn)行無害化處理。在對被病羊污染的墊料、飼料等污染物進(jìn)行徹底清理后，必須進(jìn)行無害化處理。隔離封鎖期間，禁止隨意買賣或移動羊只，對進(jìn)出疫區(qū)的車輛和人員需進(jìn)行檢疫和消毒。最后一只羊死亡或被撲殺后，間隔21 d未出現(xiàn)新的病例，方可在嚴(yán)格消毒和檢疫后解除封鎖[22-24]。