沈強兵 繆忠明 陸淑華

摘 ?要：為了解如東縣豬場豬偽狂犬病免疫和感染現(xiàn)狀，為該病的防制和凈化提供依據(jù)，本研究利用酶聯(lián)免疫吸附試驗對從如東地區(qū)14個鄉(xiāng)鎮(zhèn)84家（戶）豬場和散養(yǎng)戶采集的276份血清樣本進(jìn)行豬偽狂犬病病毒野毒株感染抗體（gE抗體）和其中59家（戶）豬場和散養(yǎng)戶的204份血清樣本進(jìn)行疫苗毒株免疫抗體（gB抗體）的檢測。結(jié)果顯示豬場（散養(yǎng)戶）豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率為20.2%（17/84），血清樣本陽性率為20.7%（57/276）;血清樣本豬偽狂犬病病毒gB抗體陽性率為78.4%（160/204）。結(jié)果表明：如東縣豬群的豬偽狂犬病病毒野毒株感染比較嚴(yán)重，疫苗免疫比較理想，應(yīng)加強豬偽狂犬病的免疫接種和抗體檢測，從而更好地防控該病。

關(guān)鍵詞：如東;豬偽狂犬病;血清學(xué);流行病學(xué)調(diào)查

偽狂犬病（Pseudorabies，PR）是由皰疹病毒屬的偽狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起豬等家畜以及野生動物共患的一種流行很廣的急性傳染病，多種動物以發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎為主要特征[1]。豬是感染后唯一可以存活的動物，是該病毒最主要的貯存宿主和傳染源。豬偽狂犬病主要引起母豬繁殖障礙，表現(xiàn)為流產(chǎn)以及產(chǎn)死胎、木乃伊胎和弱仔等;新生仔豬感染后，主要表現(xiàn)為震顫和運動失調(diào)等神經(jīng)癥狀，伴有發(fā)熱、呼吸困難、嘔吐和腹瀉癥狀，死亡率可達(dá)50%～100%;生長育肥豬多為隱形感染，死亡率雖低，但增重緩慢。感染豬偽狂犬病病毒的豬抵抗力下降，極易繼發(fā)或并發(fā)其他疾病，會給養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。目前，給豬接種豬偽狂犬病基因工程缺失疫苗后，該病的流行性有所緩和，但其潛伏感染情況仍相當(dāng)普遍，臨床癥狀已經(jīng)從典型轉(zhuǎn)為非典型，雖死亡率大幅降低，但是仍嚴(yán)重影響豬群的生長速度和繁殖性能，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

為掌握江蘇省如東縣部分豬場的豬偽狂犬病感染和免疫的狀況，為有效控制和消滅豬偽狂犬病提供科學(xué)依據(jù)，我們對部分豬場進(jìn)行了豬偽狂犬病血清流行病學(xué)調(diào)查，現(xiàn)將調(diào)查結(jié)果報告如下：

1 ?材料與方法

1.1 血清樣本

2017年5月，從如東縣14個鄉(xiāng)鎮(zhèn)采集到豬血清樣本276份，其中：中小規(guī)?；i場28家，血清樣本140份，全部來自接種過豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗的豬群;散養(yǎng)戶56戶，血清樣本136份， ? ? ? 64份來自接種過豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗的豬群（表1）。血樣采集后，靜置2 h， ? ? ? 3 000 r/min離心 5 min，分離血清，隨后在-20 ℃下凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 檢測試劑

豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測試劑盒由法國ID-VET公司生產(chǎn)。

1.3 檢測方法

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）對血清樣本分別檢測PR野毒株感染抗體和PR疫苗株免疫抗體，操作過程與結(jié)果判定按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 結(jié)果判定

如果檢測到gE抗體陽性豬，則可以判定該豬場的豬群感染了豬偽狂犬病病毒野毒株。如果豬場有1個血清樣本為陽性，則判定該豬場為豬偽狂犬病病毒野毒株陽性場。

2 ?檢測結(jié)果

2.1 豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測

共檢測豬血清樣本276份，其中豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性樣本57份，樣本陽性率為20.7%;檢測84家（戶）豬場和散養(yǎng)戶，豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性豬場和散養(yǎng)戶17家（戶），陽性率為20.2%。

2.1.1 不同類型豬場檢測情況

在本次調(diào)查中，小規(guī)模化豬場檢測28家，gE抗體陽性場9家，陽性率達(dá)32.1%;散養(yǎng)戶檢測56戶，gE抗體陽性戶8戶，陽性率達(dá)14.3%;中小規(guī)?；i場檢測的血清樣本140份，gE抗體陽性血清樣本39份，陽性率達(dá)27.9%;散養(yǎng)戶檢測血清樣本136份，gE抗體陽性血清樣本 ?18份，樣本陽性率達(dá)13.2%（表2）。檢測結(jié)果表明，豬偽狂犬病病毒野毒株感染在如東縣中小規(guī)?；i場有較高的比例，且中小規(guī)模化豬場的感染率高于散養(yǎng)戶的，存在散發(fā)流行的可能。

2.1.2 不同豬群豬偽狂犬病gE抗體檢測情況

為了方便調(diào)查統(tǒng)計，根據(jù)豬的生長狀況，我們將豬群分為三個生長階段：仔豬群（2月齡以下）、育肥豬群（2月齡以上）和種豬群（包括后備母豬、生產(chǎn)母豬和種公豬）。血清樣本檢測結(jié)果顯示，不同豬群的豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率存在差異，其中種豬群、育肥豬群和仔豬群的陽性率分別為30%、28.9%和13.3%（表3）。育肥豬多為隱性感染，為豬偽狂犬病的防控增加了難度。

2.2 豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測

共檢測血清樣本204份，其中豬偽狂犬病病毒gB抗體陽性樣本160份，陽性率為78.4%;在采集自接種疫苗的28家中小規(guī)?；i場的140份血清樣本中，豬偽狂犬病病毒gB抗體陽性樣本118份，陽性率達(dá)84.3%;在來自31戶散養(yǎng)戶的64份血清樣本中，豬偽狂犬病病毒gB抗體陽性樣本42份，陽性率達(dá)65.7%（表4）。檢測結(jié)果表明，中小規(guī)?；i場的豬偽狂犬病免疫效果好于散養(yǎng)戶的，通過疫苗免疫預(yù)防豬偽狂犬病具有較好的保護(hù)效果。

3 ?討論

豬接種豬偽狂犬病基因缺失疫苗后，不會產(chǎn)生針對缺失基因編碼蛋白（gE）的抗體，如果用血清學(xué)方法檢測到這些缺失蛋白的抗體，則表明動物感染了豬偽狂犬病病毒野毒株，通過缺失疫苗與配套的診斷試劑盒，很容易區(qū)分免疫豬和感染豬，從而為豬偽狂犬病的凈化提供強有力的工具，對處于豬偽狂犬病病毒感染風(fēng)險中的豬場或散養(yǎng)戶，可按照“首次檢測→隔離/淘汰→免疫→二次檢測→隔離/淘汰→再次檢測→淘汰”等步驟進(jìn)行凈化。

在抽查的中小規(guī)?；i場中，豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性豬場占32.1%，豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性血清樣本占27.9%;在調(diào)查的散養(yǎng)戶中，豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性散養(yǎng)戶占14.3%，豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性血清樣本占13.2%，因此中小規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶在豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率上存在明顯的差異。分析其原因可能是：中小規(guī)?；i場不能自繁自養(yǎng)，大部分收購苗豬進(jìn)行育肥，苗豬來源復(fù)雜，感染豬偽狂犬病病毒野毒株的途徑和方式較多，容易發(fā)生感染，且中小規(guī)?；i場的日常管理存在較多漏洞，防病意識淡薄，不重視生物安全措施，無嚴(yán)格的防疫和管理制度。

本次調(diào)查的血清樣本檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，種豬群、育肥豬群和仔豬群的豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率分別為30.6%、28.9%和13.3%，不同生長階段的豬在感染豬偽狂犬病病毒野毒株上存在差異。仔豬群豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率低，一方面是體內(nèi)有母源抗體存在，另一方面是由于仔豬感染豬偽狂犬病病毒后死亡率較高，而調(diào)查所采集的血清多來自假定健康的豬群。育肥豬群和種豬群的豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率高，主要是成年豬常呈隱性感染，長期排毒和帶毒。

中小規(guī)?；i場比較重視豬偽狂犬病的預(yù)防，全部對豬接種了豬偽狂犬病疫苗，豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率為84.3%，而散養(yǎng)戶的豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率為65.7%，且有44.7%（25/56）的散養(yǎng)戶未免疫。中小規(guī)?；i場和散養(yǎng)戶免疫效果存在明顯的差異，必須引起重視。分析其原因可能與對豬偽狂犬病防控重視程度、疫苗質(zhì)量、免疫程序合理性和免疫操作等密切相關(guān)。

如東縣存在比較高的豬偽狂犬病病毒野毒株感染率，說明豬偽狂犬病的防控工作目前仍然任重道遠(yuǎn)。要堅持預(yù)防為主和防重于治的方針，采取綜合防控措施，做好豬偽狂犬病的消滅和凈化工作。具體措施有：①實施嚴(yán)格的引種檢疫;②加強消毒，做好滅鼠工作，嚴(yán)格控制貓和犬等其他動物進(jìn)入豬場;③嚴(yán)格實施自繁自養(yǎng)和全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式;④做好豬偽狂犬病gE缺失活疫苗的免疫;⑤持續(xù)開展檢測和淘汰陽性豬，建立陰性豬群;⑥加強生物安全等多方面措施，從而最終達(dá)到免疫凈化的目標(biāo)任務(wù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 殷震，劉景華. 動物病毒學(xué)（第2版）[M]. 北京：科學(xué)出版社，1997：998