李艷楠，左文博，薛 慧，張 彤，張 宇，徐宛婷，羅英花，金成浩

（1. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，黑龍江 大慶 163319；2. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163319）

0 引言

金松雙黃酮（Sciadopitysin, SP） 屬黃酮類化合物，常見于裸子植物，如香附、柳杉、羅漢松、紅豆杉及銀杏等。金松雙黃酮中文別名西阿多黃素，分子式為C33H24O10，分子量為580.54，外觀呈黃色結(jié)晶，可溶于丙酮和乙酸乙酯，微溶于石油醚和水，需存放于避光陰涼處[1]。近年來，金松雙黃酮的生物活性被逐漸挖掘，有研究表明金松雙黃酮具有抗腫瘤、抗氧化、降低血糖血脂等多種藥理作用。文中對(duì)金松雙黃酮的生物活性及其作用機(jī)制進(jìn)行了綜述。

1 金松雙黃酮的抗腫瘤作用

肺癌是嚴(yán)重威脅人類生命健康的惡性腫瘤之一，隨著我國(guó)工業(yè)化速度加快、環(huán)境污染加重等因素，肺癌的死亡率與發(fā)病率正日益上升[2]。當(dāng)非小細(xì)胞肺癌被確診時(shí)，可采用放射治療來提高生存率，G2/M期是放射治療最敏感的時(shí)期，有研究表明紫杉醇能將腫瘤細(xì)胞增殖周期阻滯于G2/M期，從而提高腫瘤放射治療的效果，還能增強(qiáng)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡能力或直接殺傷腫瘤細(xì)胞[3]，但當(dāng)其用量過大時(shí)會(huì)導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生耐藥性及副作用，從而限制了其在臨床上的應(yīng)用，金松雙黃酮可以減少紫杉醇引起的不良反應(yīng)并促進(jìn)紫杉醇誘導(dǎo)肺癌A549 細(xì)胞凋亡[4]。趙學(xué)梅等人[5]通過逆轉(zhuǎn)錄- 聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白免疫印跡法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，金松雙黃酮聯(lián)合紫杉醇能明顯上調(diào)caspase-3 蛋白活性、促進(jìn)Bax mRNA 的表達(dá)、抑制Bcl-2 mRNA 的表達(dá)。由此推測(cè)出金松雙黃酮與紫杉醇聯(lián)用可在基因水平和蛋白水平上加強(qiáng)紫杉醇對(duì)Bcl-2 家族的作用，進(jìn)而激活caspase-3，從而促進(jìn)紫杉醇對(duì)A549 細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用。這表明金松雙黃酮在肺癌治療中具有重要價(jià)值，為肺癌的臨床化療方案開辟新思路。

2 金松雙黃酮的抗氧化作用

自由基是人體的正常代謝產(chǎn)物，當(dāng)其少量存在時(shí)有助于保持能量、消除炎癥等，但數(shù)量過多時(shí)會(huì)引發(fā)一系列疾病。李英等人[6]發(fā)現(xiàn)紅豆杉中共有7 種具有顯著的抗氧化活性的物質(zhì)，其中包括金松雙黃酮。張佳麗等人[7]分別于波長(zhǎng)517 nm 和734 nm 處測(cè)定金松雙黃酮清除DPPH、ABTS 自由基的清除率及半數(shù)抑制率IC50值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮具有明顯的抗氧化活性。陸瑞利等人[8]采用二苯基苦基苯肼自由基酶標(biāo)儀法，對(duì)60 多種裸子植物的自由基清除活性進(jìn)行研究，在部分植物中發(fā)現(xiàn)了金松雙黃酮并證實(shí)其具有較強(qiáng)的清除自由基活性，這說明金松雙黃酮對(duì)部分裸子植物具有抗氧化作用。在另一項(xiàng)動(dòng)物試驗(yàn)中，Suh K S 等人[9]發(fā)現(xiàn)如果用金松雙黃酮對(duì)胰腺β 細(xì)胞大鼠胰島素瘤細(xì)胞株RIN-m5F 細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理，可以保護(hù)細(xì)胞免受甲基乙二醛（MG） 誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡和胰島素分泌受損，還能阻止白細(xì)胞介素-1β 在細(xì)胞內(nèi)引起的氧自由基與心磷脂過氧化，并提高RIN-m5F 細(xì)胞中的磷酸腺苷酸蛋白激酶和乙二醛酶I 的活性，降低MG- 蛋白加合物的形成。這些結(jié)果表明，金松雙黃酮對(duì)細(xì)胞損傷具有一定的保護(hù)作用。

3 金松雙黃酮對(duì)骨組織的作用

3.1 金松雙黃酮的抗骨質(zhì)疏松作用

骨組織處于不斷生長(zhǎng)與重建的動(dòng)態(tài)過程中，成骨細(xì)胞骨質(zhì)的生成與破骨細(xì)胞骨質(zhì)的吸收共同維持骨的動(dòng)態(tài)平衡。當(dāng)破骨細(xì)胞過度分化時(shí)將會(huì)引發(fā)骨疾病，如骨質(zhì)疏松癥。曹津津[10]通過體內(nèi)體外試驗(yàn)對(duì)金松雙黃酮抗骨質(zhì)疏松癥的作用進(jìn)行探討，發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮能夠以劑量依賴性的方式抑制NF-κB 信號(hào)通路的活化，抑制破骨細(xì)胞相關(guān)基因Cts-K、MMP-9、TRAP、NFATc1 和C-Fos 的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而抑制破骨細(xì)胞的分化與骨吸收活性。LPS 是革蘭氏陰性菌外壁的重要組成部分，用LPS 腹腔注射小鼠后發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮可改善由LPS 引起的破骨細(xì)胞數(shù)目增多的現(xiàn)象，從而證實(shí)了金松雙黃酮對(duì)LPS 誘導(dǎo)的小鼠骨丟失具有顯著的治療作用[11]。張磊等人[12]通過體內(nèi)體外藥理研究發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮具備雌激素樣作用，該作用可明顯提升由維甲酸引起的骨質(zhì)疏松大鼠的中股骨骨密度、骨灰重、骨鈣及骨磷含量。劉進(jìn)鵬[13]從杉木枝葉中分離得到金松雙黃酮，并將成骨肉瘤細(xì)胞MG-63-PERE 與維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松模型結(jié)合，發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮具有較好的雌激素樣作用和抗骨質(zhì)疏松癥的作用。這些研究證實(shí)了金松雙黃酮對(duì)骨質(zhì)疏松癥的治療具有顯著作用。

3.2 金松雙黃酮的保護(hù)成骨細(xì)胞功能作用

Suh K S 等人[4]采用成骨細(xì)胞MC3T3-E1 研究了金松雙黃酮對(duì)成骨細(xì)胞功能和抗霉素A 誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的影響，發(fā)現(xiàn)當(dāng)成骨細(xì)胞MC3T3-E1 直接暴露于抗霉素A 時(shí)，成骨細(xì)胞功能會(huì)顯著降低，但如果使用金松雙黃酮過氧化物酶對(duì)成骨細(xì)胞MC3T3-E1進(jìn)行預(yù)處理，可以通過防止線粒體膜電位（MMP）下降，維持三磷酸腺苷（ATP） 的水平，抑制活性氧（ROS） 釋放和硝基酪氨酸的增加，從而顯著降低抗霉素A 誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷情況和腫瘤壞死因子TNF-α的產(chǎn)生與氧化應(yīng)激，還能增加抗霉素A 抑制的CREB 的磷酸化水平。此外，金松雙黃酮可顯著提高細(xì)胞堿性磷酸酶活性、膠原蛋白合成、骨鈣素生成、礦化和谷胱甘肽含量，這些物質(zhì)的增加可以促進(jìn)礦化結(jié)石的生成。這些結(jié)果表明，金松雙黃酮可通過改善線粒體功能，保護(hù)線粒體免受氧化應(yīng)激的損傷并激活CREB 保護(hù)成骨細(xì)胞MC3T3-E1 免受抗霉素A 誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷。

3.3 金松雙黃酮的抗糖尿性骨病作用

糖尿?。―iabetes Mellitus，DM） 是一種慢性高血糖的代謝性疾病，全球每年因患糖尿病而死亡的人數(shù)高達(dá)350 萬(wàn)人[14]，目前用于治療糖尿病的各種藥物常會(huì)導(dǎo)致不同程度的副作用。陳建偉等人[15]對(duì)雄性昆明小鼠進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)組喂食高脂飼料，對(duì)照組喂食標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，4 周后進(jìn)行灌胃和連續(xù)給藥。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，金松雙黃酮可顯著抑制α - 葡萄糖苷酶的活性、降低血糖血脂，減輕糖尿病心肌病大鼠心臟重量與體重比值、心肌病理組織學(xué)異常等現(xiàn)象，且沒有產(chǎn)生不良反應(yīng)。MG 是晚期糖基化終產(chǎn)物的前體，可導(dǎo)致包括骨缺損在內(nèi)的糖尿病并發(fā)癥[16]，Choi E M等人[17]采用成骨細(xì)胞MC3T3-E1 研究了金松雙黃酮對(duì)MG 誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的影響，發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮可通過上調(diào)線粒體生物合成而發(fā)揮其治療作用。線粒體生物合成的增強(qiáng)可能有助于金松雙黃酮對(duì)成骨MC3T3-E1 細(xì)胞的保護(hù)，且金松雙黃酮還能通過阻斷MG 介導(dǎo)的糖基化系統(tǒng)，從而預(yù)防糖尿性骨病的發(fā)生。這證實(shí)了金松雙黃酮在治療糖尿病及其并發(fā)癥方面具有一定的效果，為推動(dòng)其成為有效防治糖尿病藥物的開發(fā)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

4 金松雙黃酮對(duì)阿茲海默病的作用

阿茲海默?。ˋlzheimer's Disease，AD） 俗稱老年癡呆癥，是一種進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要表現(xiàn)為行為障礙、認(rèn)知和記憶功能惡化、日常生活能力不斷下降等，占癡呆病因的60%～80%，是目前已知癡呆原因中最常見的一種，常發(fā)病于老年人群，且對(duì)老年人的生命健康存在嚴(yán)重威脅[18]。阿茲海默病的組織病理學(xué)特征是細(xì)胞外β - 淀粉樣蛋白（Amyloid-β，Aβ） 肽在神經(jīng)細(xì)胞外沉積形成神經(jīng)炎性斑塊和細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)，Aβ 聚集體是阿茲海默病中的神經(jīng)毒性物質(zhì)。Gu Q 等人[19]以紅豆杉95%乙醇提取物為原料，提取出5 種化合物，其中包括金松雙黃酮。進(jìn)一步采用硫磺蛋白- 熒光法檢測(cè)這5 種化合物對(duì)Aβ 聚集的抑制活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮對(duì)抑制初級(jí)皮層神經(jīng)元的Aβ 聚集和原纖維的形成最有效，且金松雙黃酮還能降低Aβ 誘導(dǎo)的毒性，并增加人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y 細(xì)胞的生存能力，表明金松雙黃酮對(duì)阿茲海默病的治療有很大的潛能。

5 金松雙黃酮的藥物相互作用

眾所周知，中草藥與西藥合用可提高療效，但共服藥物對(duì)藥物代謝酶的抑制作用也會(huì)引發(fā)藥物間相互作用（DDI）。王欣欣等人[20]借助體外代謝孵育體系研究了金松雙黃酮對(duì)12 種尿苷二磷酸葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGTs） 的抑制作用，發(fā)現(xiàn)金松雙黃酮對(duì)UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8 和UGT1A10 均具有較強(qiáng)的抑制作用，且當(dāng)金松雙黃酮與經(jīng)過UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8 和UGT1A10 代謝的藥物聯(lián)合使用時(shí)會(huì)引發(fā)各種不良反應(yīng)，如雷洛昔芬與金松雙黃酮聯(lián)用時(shí)會(huì)影響其葡糖醛酸化結(jié)合的反應(yīng)速率，導(dǎo)致血藥濃度異常升高并引發(fā)毒性反應(yīng)，然而當(dāng)金松雙黃酮與某些經(jīng)過UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8 和UGT1A10 代謝但具有較高治療指數(shù)的藥物聯(lián)合使用時(shí)，可以延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的消除半衰期，從而提高療效。該研究結(jié)果提示金松雙黃酮與臨床藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可以在一定程度上提高藥物的治療效果，但在使用時(shí)應(yīng)合理用藥，注意避免因UGT 抑制導(dǎo)致的不良反應(yīng)。

6 結(jié)語(yǔ)

金松雙黃酮主要存在于裸子植物中，制備方法簡(jiǎn)單且成本低廉[1]，經(jīng)多項(xiàng)研究總結(jié)發(fā)現(xiàn)，金松雙黃酮具有抗腫瘤、抗氧化等多種作用，對(duì)骨質(zhì)疏松癥、糖尿性骨病和阿茲海默病存在顯著的治療效果，這就可以避免機(jī)體因藥物的作用機(jī)制單一而產(chǎn)生抗藥性的缺點(diǎn)。為了進(jìn)一步挖掘其更高的使用價(jià)值，仍需要結(jié)合相關(guān)的中醫(yī)藥理論，從動(dòng)物、細(xì)胞及分子水平上對(duì)金松雙黃酮進(jìn)行更加深入的研究和探討，使其更有效地應(yīng)用于臨床，發(fā)揮治療作用。