馬玉霞 田 莉 王 磊

（成都生物制品研究所有限責(zé)任公司，四川 成都 610000）

為了更好地保證藥品質(zhì)量，國家采用了新版本的GMP，在藥品生產(chǎn)管理中引入了“質(zhì)量來自設(shè)計(jì)”的概念。為了保證無菌藥品的質(zhì)量，進(jìn)一步對(duì)領(lǐng)域的主要灌裝技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)分析，GMP 要求無菌藥品的灌裝應(yīng)在A 類環(huán)境中進(jìn)行，并對(duì)懸浮顆粒進(jìn)行在線監(jiān)測(cè)和動(dòng)態(tài)微生物監(jiān)測(cè)（沉積物和浮游植物）。無菌灌裝是指在無菌環(huán)境下對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行包裝的一種新方法。無菌包裝過程涉及化學(xué)品、空氣等，包裝容器應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行滅菌和灌裝，以確保食品安全。無菌包裝始于20 世紀(jì)60 年代，但是由于當(dāng)時(shí)的技術(shù)原因，發(fā)展緩慢。直到20 世紀(jì)90 年代，隨著無菌包裝的改進(jìn)和完善，包裝技術(shù)取得了顯著的效果，無菌灌裝正式進(jìn)入了一個(gè)快速發(fā)展的時(shí)期。為了疫苗無菌灌裝的微生物得到更好的控制，所以對(duì)無菌灌裝對(duì)灌裝和包裝的工藝和類型有嚴(yán)格的要求，該文主要對(duì)無菌灌裝對(duì)灌裝進(jìn)行技術(shù)分析，根據(jù)應(yīng)用特點(diǎn)和具體要求進(jìn)行分析。

1 概念介紹

1.1 微生物特點(diǎn)

微生物是所有肉眼看不見或看不見的微小生物的總稱。它的特點(diǎn)有6 個(gè)。1）個(gè)體小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。在形狀上，小到肉眼看不見。它需要一個(gè)顯微鏡，細(xì)胞的大小是用微米和納米來測(cè)量的。2）繁殖快，生長(zhǎng)快。在實(shí)驗(yàn)條件下，細(xì)菌可以繁殖幾十分鐘到幾個(gè)小時(shí)。3）新陳代謝，活躍。4）微生物存在于高海拔地區(qū)，微生物也存在于動(dòng)植物無法生存的惡劣環(huán)境中。5）在當(dāng)?shù)丨h(huán)境中大量存在。6）易變異相對(duì)于高等生物來說，較容易發(fā)生變異。微生物種內(nèi)的遺傳多樣性非常豐富。

1.2 無菌灌裝技術(shù)

無菌包裝和裝瓶行業(yè)也為食品包裝和食品機(jī)械行業(yè)帶來了新的方向。它們廣泛應(yīng)用于液體乳制品、液體果汁和藥物疫苗的無菌包裝中。但是，無菌灌裝應(yīng)保證灌裝材料、灌裝設(shè)備和包裝容器的無菌環(huán)境。無菌灌裝通常是在無菌環(huán)境中對(duì)灌裝材料進(jìn)行完全的灌裝和滅菌。因此，無菌灌裝不僅包括無菌灌裝過程，還包括滅菌方法。通常，無菌灌裝需要對(duì)包裝材料和容器進(jìn)行消毒[1]。巴氏殺菌通常用于填料。不同填料的滅菌工藝和設(shè)備也不同。從無菌包裝技術(shù)的出現(xiàn)在1940 年代，特別是在過去的20 年～30 年，無菌包裝技術(shù)的創(chuàng)新發(fā)展和產(chǎn)業(yè)鏈的不斷改善，無菌包裝產(chǎn)品已經(jīng)普及世界各地，贏得了消費(fèi)者的支持。無菌包裝相關(guān)技術(shù)已成為無菌包裝技術(shù)研發(fā)的重點(diǎn)，相關(guān)專利申請(qǐng)正在積極開展。無菌灌裝對(duì)灌裝和包裝的工藝和類型有嚴(yán)格的要求，應(yīng)根據(jù)應(yīng)用特點(diǎn)和具體要求進(jìn)行。

無菌容器和生產(chǎn)線應(yīng)符合無菌生產(chǎn)的要求。無菌灌裝線的無菌性應(yīng)通過無菌產(chǎn)品的隔間、容器和管道進(jìn)行確認(rèn)。經(jīng)過3 次合格試驗(yàn)，培養(yǎng)基在與正常生產(chǎn)相同的生產(chǎn)管理?xiàng)l件下裝瓶，確認(rèn)系統(tǒng)完全無菌。無菌驗(yàn)證時(shí)間。1）新生產(chǎn)線安裝或搬遷后，必須對(duì)新生產(chǎn)線進(jìn)行無菌驗(yàn)證。2）設(shè)備檢修后無菌檢查。3）更換瓶子和瓶蓋的型號(hào)（尺寸和結(jié)構(gòu)的變化）進(jìn)行介質(zhì)灌裝試驗(yàn)，必要時(shí)驗(yàn)證包裝材料滅菌的有效性。4）在無菌區(qū)加入片劑，確認(rèn)局部清洗試驗(yàn)滅菌效果，并填充培養(yǎng)基。5）進(jìn)行介質(zhì)灌裝試驗(yàn)，必要時(shí)檢查各單元的無菌效果[2]。在無菌驗(yàn)證過程中，應(yīng)考慮以下3 點(diǎn)。1）如果進(jìn)行滅菌效果試驗(yàn)，除交叉污染外，試驗(yàn)前后應(yīng)徹底清潔燒瓶和瓶蓋的所有區(qū)域。2）無菌驗(yàn)證的試驗(yàn)順序應(yīng)根據(jù)新生產(chǎn)線的安裝進(jìn)度或檢修進(jìn)度確定，并制定詳細(xì)的無菌驗(yàn)證計(jì)劃。3）在新生產(chǎn)線無菌驗(yàn)證前，應(yīng)確認(rèn)反滲透水的微生物狀態(tài)和正壓室的環(huán)境微生物狀態(tài)為監(jiān)測(cè)指標(biāo)[3]。

無菌瓶蓋是無菌的，無菌產(chǎn)品在無菌環(huán)境中迅速灌裝。為此目的，應(yīng)確保容器和蓋子不受污染的生產(chǎn)條件；生產(chǎn)環(huán)境應(yīng)當(dāng)無污染；所提供的液體產(chǎn)品應(yīng)無污染。在無菌灌裝系統(tǒng)中，這一目標(biāo)是通過以下操作來實(shí)現(xiàn)的：為無菌灌裝操作提供并保持無菌環(huán)境；在無菌容器中灌裝無菌產(chǎn)品；還有容器的密封。在整個(gè)無菌生產(chǎn)線上，滅菌器和無菌灌裝機(jī)是關(guān)鍵。滅菌器保證無菌產(chǎn)品，灌裝機(jī)提供并保證無菌灌裝環(huán)境；充氣瓶和注射蓋的消毒；將無菌液體注入無菌瓶中，用無菌瓶蓋蓋住口；處理有缺陷的產(chǎn)品，并將符合要求的產(chǎn)品發(fā)送到加工設(shè)備。

在無菌灌裝系統(tǒng)內(nèi)，這個(gè)目標(biāo)是通過以下操作實(shí)現(xiàn)的：對(duì)與產(chǎn)品接觸的容器和蓋子表面進(jìn)行殺菌；為無菌灌裝操作提供和維持一個(gè)無菌環(huán)境；向無菌容器內(nèi)灌裝無菌產(chǎn)品；容器的密閉性，具體流程如圖1 所示。

2 微生物產(chǎn)生與控制

2.1 人員方面

圖1 疫苗無菌灌裝流程

人是無菌灌裝最大的污染源。因?yàn)槿梭w中帶有大量微生物，未經(jīng)清洗的皮膚微生物數(shù)量可達(dá) 105個(gè)/cm2～106個(gè)/cm2，人身上穿著的衣服是微生物傳播的媒介，衣服上的微生物主要來自環(huán)境中的微生物。人員會(huì)與產(chǎn)品產(chǎn)生間接接觸對(duì)產(chǎn)品造成污染。所以在無菌灌裝工作的操作人員必須保持良好的個(gè)人衛(wèi)生。進(jìn)入無菌灌裝間的時(shí)候要嚴(yán)格按照SOP 規(guī)定，不得化妝，佩戴首飾，不得帶手機(jī)。進(jìn)入車間時(shí)嚴(yán)格清洗消毒手部，佩戴好一次性口帽，一次性無菌橡膠手套，穿好無菌服戴好無菌護(hù)目鏡，身體不能有裸露部位，在著裝過程中每一步都應(yīng)用75%乙醇容易對(duì)手部進(jìn)行消毒處理。無菌灌裝間應(yīng)保證人員數(shù)量不超標(biāo)。無菌灌裝時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照SOP 進(jìn)行，身體的任何部位不得在瓶子上方移動(dòng)，與制品接觸時(shí)應(yīng)當(dāng)使用已滅菌的工具，每15 min 用75%乙醇溶液噴淋對(duì)手部進(jìn)行消毒，人員手部應(yīng)始終處于層流保護(hù)下，不得隨意走動(dòng)，在潔凈區(qū)內(nèi)做到輕、緩、慢[4]。與生產(chǎn)無關(guān)人員盡量不進(jìn)入無菌灌裝潔凈區(qū)。在無菌灌裝時(shí)，為評(píng)估無菌生產(chǎn)的微生物狀況，應(yīng)對(duì)無菌灌裝操作人員進(jìn)行表面取樣法來進(jìn)行檢測(cè)。無菌灌裝過程中微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)可以通過制定和規(guī)范預(yù)防措施來有效控制人員對(duì)產(chǎn)品的污染來最小化。

2.2 生產(chǎn)環(huán)境方面

疫苗灌裝是一項(xiàng)高風(fēng)險(xiǎn)工作，生產(chǎn)過程必須在無菌條件下進(jìn)行。因此，疫苗注射工廠在生產(chǎn)過程中，室內(nèi)空氣凈化度達(dá)不到生產(chǎn)工程的要求，因此應(yīng)該按照GMP 的要求進(jìn)行設(shè)計(jì)，以防污染。為了有效地避免無菌灌裝間被室外空氣流通進(jìn)入造成污染，潔凈室應(yīng)當(dāng)設(shè)置適當(dāng)?shù)膲翰钐岣呖諝忪o壓來確保微生物不能通過空氣流通進(jìn)入此區(qū)域。房間的衛(wèi)生程度越高，應(yīng)為壓力差越小，清潔度越低，應(yīng)為差越大。這樣，當(dāng)清潔室正常工作（開門）或空氣保密性受到損害時(shí)，空氣從高潔區(qū)移動(dòng)到低清潔區(qū)，使高潔道內(nèi)的清潔度不受低層清潔空氣的影響而受到污染或干燥。潔凈區(qū)內(nèi)按級(jí)別分成A、B、C3 個(gè)級(jí)別，無菌灌裝必須在A 級(jí)區(qū)域下并在100 級(jí)層流保護(hù)下進(jìn)行。潔凈區(qū)溫度、濕度需在規(guī)定范圍內(nèi)進(jìn)行無菌灌裝。為了保證潔凈區(qū)的潔凈度，工作人員需要每周用消毒液和注射用水對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行大掃除。在疫苗生產(chǎn)時(shí)采用沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法對(duì)無菌生產(chǎn)的微生物狀況進(jìn)行檢測(cè)。嚴(yán)格控制無菌灌裝生產(chǎn)環(huán)境條件，確保無微生物污染。

2.3 生產(chǎn)設(shè)備方面

疫苗在進(jìn)行無菌灌裝生產(chǎn)時(shí)，生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)工具與疫苗原液直接接觸。所以在進(jìn)行疫苗原液無菌灌裝前應(yīng)對(duì)灌裝機(jī)表面臺(tái)面進(jìn)行消毒擦拭，通常采用75%乙醇溶液，擦拭完畢后進(jìn)行自凈方可進(jìn)行操作[5]。凡與灌裝機(jī)直接接觸的壓縮空氣均需采用過濾后的潔凈壓空。潔凈區(qū)應(yīng)設(shè)置獨(dú)立的高壓滅菌暫存間，用于灌裝工組及無菌灌裝時(shí)需使用的相關(guān)物品存放。灌裝工具采用高壓滅菌或濕熱滅菌。灌裝前要確認(rèn)灌注泵、分液器、針頭、加塞工具等灌封工具是否安裝正確無誤。在疫苗無菌灌裝生產(chǎn)過程中如發(fā)生設(shè)備故障，現(xiàn)場(chǎng)操作員或負(fù)責(zé)人需立即對(duì)異常情況作出初步判斷，評(píng)估其嚴(yán)重性，如異常無法自行處理并可能影響制品質(zhì)量和正常生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)迅速通知維修人員，維修人員接到設(shè)備故障報(bào)告后根據(jù)嚴(yán)重程度確定維修方案。維修完成后灌裝人員需按照SOP 規(guī)定對(duì)設(shè)備進(jìn)行清潔消毒處理并自凈，再次開啟灌裝前對(duì)制品進(jìn)行抽量取樣。在完成當(dāng)批制品無菌灌裝后，應(yīng)對(duì)生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行嚴(yán)格的清潔消毒[6]。

3 結(jié)論

無菌灌裝主要用于液體灌裝，無菌產(chǎn)品在日常生活產(chǎn)品中占據(jù)重要地位。疫苗無菌灌裝中，微生物室影響其質(zhì)量的主要污染源。首先要建立無菌，要做到物料的無菌、包材的無菌、設(shè)備的無菌、環(huán)境的無菌等。在生產(chǎn)過程中應(yīng)該采取相應(yīng)的措施控制其中的微生物。生產(chǎn)設(shè)備和環(huán)境應(yīng)該經(jīng)常進(jìn)行清洗和消毒，以確保半成品和清潔產(chǎn)品不受污染。最后，加強(qiáng)對(duì)廠長(zhǎng)的培訓(xùn)，提高廠長(zhǎng)對(duì)生產(chǎn)微生物污染風(fēng)險(xiǎn)的認(rèn)識(shí)，使微生物能夠從各個(gè)方面得到有效控制。因此，無菌灌裝疫苗除了需要相對(duì)較高的設(shè)備外，還需要生產(chǎn)管理水平和疫苗公司工作人員的專業(yè)精神，可以為無菌產(chǎn)品的消費(fèi)帶來了很高的價(jià)值。