李彩霞　蔡云梅

摘要 在安徽、廣西和山東3地開展50%醚菌酯水分散粒劑在黃瓜及土壤中的田間殘留及消解動態(tài)試驗。建立了測定黃瓜和土壤中醚菌酯的氣相色譜-電子捕獲檢測器（GC-ECD）分析方法。樣品經(jīng)乙腈振蕩提取，離心分層進GC-ECD進行檢測。結果表明，在0.005～5.000 mg/L 濃度時，線性關系良好，r均大于0.999 7。在4個添加水平下，醚菌酯的平均回收率在88%～109%，相對標準偏差（RSD）小于2.4%;在黃瓜和土壤中的定量限（LOQ）均為0.005 mg/kg。田間試驗結果表明，醚菌酯在黃瓜和土壤中的消解符合一級動力學方程，在黃瓜中的半衰期為1.6～4.1 d，在土壤中的半衰期為2.4～6.2 d;距末次施藥后3～10 d，醚菌酯在黃瓜中的最高殘留量為0.081 mg/kg，低于我國規(guī)定的黃瓜中醚菌酯最大殘留限量值（0.500 mg/kg）。

關鍵詞 醚菌酯;黃瓜;殘留;消解動態(tài)

中圖分類號 S481+.8文獻標識碼 A文章編號 0517-6611（2020）22-0087-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.22.023

Residue and Dissipation Dynamics of Kresoxim-methyl in Cucumber and Soil

LI Cai-xia， CAI? Yun-mei

（Department of Environmental Monitoring， Guangdong Polytechnic of Environmental Protection Engineering，F(xiàn)oshan，Guangdong? 528216 ）

Abstract Field trials were conducted to evaluate the dissipation and residue of 50% kresoxim-methyl WG in cucumber and soil in Anhui Province， Guangxi Province and Shandong Province. A gas chromatography with electron capture detector （GC-ECD） method was developed for the determination of kresoxim-methyl in cucumber and soil samples. The samples were extracted with acetonitrile by oscillation， then centrifuged and filtered and detected by GC-ECD. The results showed that， the linearity of kresoxim-methyl was in the concentration range of 0.005-5.000 mg/L with correlation coefficients higher than 0.999 7. The average recoveries of kresoxim-methyl in cucumber and soil were in the ranges of 88% to 109% at four spiked levels of 0.005， 0.05， 0.5 and 5.0 mg/kg， and the relative standard deviation （RSD） was less than 2.4%. The limit of quantification （LOQ） of kresoxim-methyl was 0.005 mg/kg which was the lowest spiked concentration. The results demonstrated that dissipation of kresoxim-methyl in cucumber and soil was in accordance with the first-order kinetic equation with the half-lives from 1.6 d to 4.1 d in cucumber and 2.4 d to 6.2 d in soil. The highest residue of kresoxim-emthyl in cucumber was 0.081 mg/kg， which was lower than the maximum residue limit （MRL， 0.500 mg/kg） of kresoxim-methyl in cucumber in China， when measured 3-10 d after final application. It was safe for human being when using this fungicide to control powdery mildew on cucumber.

Key words Kresoxim-methyl;Cucumber;Residue;Dissipation dynamics

作者簡介 李彩霞（1976—），女，山東鄆城人，講師，碩士，從事分析化學方面教學科研工作。

收稿日期 2020-07-30

醚菌酯（kresoxim-methyl，分子式為C18H19NO4），化學名稱（E）-2-甲氧亞氨基-[2-（鄰甲基苯氧基甲基）苯基]乙酸甲酯，是巴斯夫公司開發(fā)的一種strobilurins（丙烯酸甲酯類）殺菌劑，具有高效、廣譜、低毒等特點，對半知菌、子囊菌、擔子菌、卵菌綱等真菌引起的多種病害具有良好的防治效果，如葡萄和草莓白粉病、小麥銹病、馬鈴薯疫病、水稻稻瘟病等病害[1-4]。醚菌酯殺菌譜廣，且具有良好的保護和治療作用，與其他常用的殺菌劑無交互抗性，比常規(guī)殺菌劑持效期長[5]。醚菌酯選擇性好，對人畜及非靶標生物安全，對環(huán)境影響小。

關于醚菌酯在農(nóng)作物中殘留行為及檢測方法已有報道[6-12]，但對其殘留降解行為和對環(huán)境生態(tài)的研究相對較少。黃瓜（Cucumis sativus Linn.）屬葫蘆科，是我國主要出口蔬菜品種之一。黃瓜對環(huán)境條件要求嚴格且抗逆性較差，隨著栽培方式的變化，病蟲害成為黃瓜生產(chǎn)中突出的問題，嚴重影響黃瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)，其中白粉病是危害黃瓜生產(chǎn)的主要病害之一[13]。為此，筆者在我國3個不同試驗地進行了田間試驗，利用氣相色譜-電子捕獲檢測器（GC-ECD）測定黃瓜和土壤中的醚菌酯殘留量，對醚菌酯在黃瓜和土壤中的殘留消解動態(tài)和最終殘留水平進行研究，旨在確保50%醚菌酯

水分散粒劑在黃瓜上合理使用，確保黃瓜產(chǎn)品安全。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 6890氣相色譜儀，配有電子捕獲檢測器（美國Aglient公司）;XW-80A型渦旋混合器（江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司）;上海SCQ-2201B型超聲波清洗器（上海聲彥超聲波儀器有限公司）;EYELA SB-1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（EYELA東京理化器械株式會社）;DL-4000B型冷凍離心機（上海安亭科學儀器廠）;BS210電子分析天平（德國賽多利斯公司）。

醚菌酯標準品（純度99.7%），購自上海安譜公司;氯化鈉、無水硫酸鈉均為分析純，由江蘇強盛功能化學公司提供;色譜純正己烷和乙腈，購置于上海安譜科學儀器有限公司;0.22 um 濾膜，購于上海安譜科學儀器有限公司。

1.2 試驗方法

試驗分別在廣西壯族自治區(qū)南寧市、山東省濟南市和安徽省宿州市3地進行，供試黃瓜品種分別為豐元168、京優(yōu)選1號和津優(yōu)1號。參照《農(nóng)藥登記殘留田間試驗標準操作規(guī)程》[14]和《農(nóng)藥殘留試驗準則》[15]，設計農(nóng)藥消解動態(tài)試驗和最終殘留試驗。供試藥劑為50%醚菌酯水分散粒劑。每個試驗處理設3個重復小區(qū)，小區(qū)面積為15 m2。另設清水空白對照小區(qū)。

1.2.1 醚菌酯在黃瓜中的消解動態(tài)試驗。于黃瓜生長至成熟個體50%大小時施藥，施藥時應保證用于動態(tài)試驗的黃瓜均勻著藥，并做標記。施藥劑量為制劑量600 g/hm2，施藥1次。分別于施藥后2 h和1 d、2 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d采集黃瓜樣品。

1.2.2 醚菌酯在土壤中的消解動態(tài)試驗。在黃瓜地附近選一塊20 m2的空白地，施藥劑量為制劑量1 500 g/hm2，施藥1次。施藥后間隔2 h和1 d、2 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d、30 d、45 d分別采集土壤樣本。

1.2.3 醚菌酯在黃瓜和土壤中的最終殘留試驗。設2個施藥劑量，分別為制劑量300 g/hm2（低劑量）和450 g/hm2（高劑量），施藥次數(shù)分別3次和4次，施藥間隔為7 d。于末次施藥后3、5、7、10 d，分別采集黃瓜和土壤樣品。

1.2.4 采樣。黃瓜樣本的采集：隨機在試驗小區(qū)內(nèi)不同方向及上下不同部位采集6條以上（不少于2 kg）生長正常、無病害、成熟的黃瓜果實，粘好標簽，裝入塑封袋中包扎妥當，運回實驗室（8 h內(nèi)）。在室內(nèi)用不銹鋼刀切成1 cm大小的碎塊，在不銹鋼盆中混勻，用四分法縮分樣品，分取2份150 g的樣品，貯存于-20 ℃冰柜中保存。土壤樣本的采集：隨機取點6～12個，采用土鉆采集0～15 cm的土壤1～2 kg，除去土壤中的碎石、雜草和植物根莖等雜物，粉碎，過1 mm孔徑篩，于-20 ℃中保存。

1.3 樣品前處理

準確稱取打碎后黃瓜樣品和過篩后的土壤樣品10 g于50 mL離心管內(nèi)，加入乙腈20 mL，手搖1 min，用超聲波超聲10 min，加入氯化鈉5 g和無水硫酸鈉5 g，劇烈搖動1 min后，以3 000 r/min離心3 min。取上清液10 mL于45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，氮氣吹干后，用2 mL正己烷定容，過0.22 um的濾膜后，待測。

1.4 檢測條件

色譜柱為Agilent DB-5，30 m×250 μm（i.d.）×0.25 μm石英毛細管柱。進樣口溫度：260 ℃，檢測器溫度：320 ℃，柱溫：60 ℃保持1 min，以30 ℃/min升至180 ℃，保持1 min，以10 ℃/min升至280 ℃，保持4 min。載氣（氮氣≥99.999%），流量：2 mL/min;氫氣流量：2 mL/min;空氣流量：60 mL/min。進樣量：1 μL。

1.5 標準溶液配制及標準曲線繪制

精確稱取醚菌酯標準品（精確至0.1 mg），配成100 mg/L標準儲備液。按照梯度稀釋的原則，分別用黃瓜和土壤2種空白基質(zhì)配成0.005、0.010、0.050、0.100、0.500、1.000、5.000 mg/L的系列標準工作液，按“1.4”（檢測條件）進行測定。以醚菌酯的質(zhì)量濃度為橫坐標，相應的色譜峰面積為縱坐標繪制標準工作曲線，得到線性回歸方程。

1.6 添加回收率試驗

分別向空白黃瓜和土壤樣品中添加 0.005、0.050、0.500和5.000 mg/kg 4個水平的醚菌酯標準溶液，重復5次，用上述選定的分析與檢測方法測定其回收率。

2 結果與分析

2.1 方法的線性范圍、正確度及精密度

根據(jù)NY/T 788—2018《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗準則》[15]進行方法有效性評價。在0.005～5.000 mg/L時，醚菌酯在黃瓜和土壤中的質(zhì)量濃度（x）與色譜峰面積（y）呈良好的線性關系（圖1），回歸方程：y =22 121x-461.59，r=0.999 7（黃瓜）和 y=22 213x-103.8，r=1.000 0（土壤）。

添加回收試驗（表1）結果表明，在0.005、0.050、0.500和5.000 mg/kg 4個添加水平下，醚菌酯在黃瓜中的平均回收率在95%～109%，RSD為1.8%～2.4%;醚菌酯在土壤中的平均回收率在88%～99%，RSD為1.8%～2.4%。醚菌酯在黃瓜和土壤中的定量限（LOQ）均為0.005 mg/kg，最小檢出量為1×10-9 g。均符合《農(nóng)藥殘留試驗準則》的要求[12]。

2.2 醚菌酯在黃瓜和土壤中消解動態(tài)

醚菌酯在黃瓜和土壤中消解動力學方程見表2。3地田間試驗結果表明，施藥后2 h取樣進行檢測，黃瓜中醚菌酯的原始沉積量為0.220～0.533 mg/kg，14 d后在黃瓜中消解90.5%～100%。土壤中醚菌酯的原始沉積量為1.357～2.063 mg/kg，10 d 后在土壤中消解90.4%～98.8%。醚菌酯在黃瓜和土壤中的消解是一個逐漸降低的過程，且均符合一級動力學方程式（Ct=C0-kt）。醚菌酯在廣西、山東和安徽3地黃瓜中的半衰期為1.6～4.1 d。在廣西、山東和安徽3地土壤中的半衰期為2.4～6.2 d。醚菌酯在黃瓜和土壤中的消解速度快，半衰期短，對黃瓜的食用性和土壤環(huán)境的影響較小。

2.3 醚菌酯在黃瓜和土壤中的最終殘留

在廣西、山東和安徽3地田間試驗結果（表3和4）表明，50%醚菌酯水分散粒劑分別按有效劑量150和225 g/hm2施藥，施藥3和4次時，施藥間隔7 d，距最后一次施藥3、5、7和10 d時采收，黃瓜中醚菌酯的殘留量分別為<0.005～0.081 mg/kg、<0.005～0.074 mg/kg、<0.005～0.045 mg/kg和0.006～0.041 mg/kg，均低于我國規(guī)定醚菌酯在黃瓜上的MRL值（0.500 mg/kg）。土壤中醚菌酯殘留量分別為<0.005～0.179 mg/kg、<0.005～0.147 mg/kg、<0.005～0.045 mg/kg和<0.005～0.027 mg/kg?？傮w上，隨著施藥劑量和施藥次數(shù)的增加而增加，隨采樣時間的延長而降低。

3 結論與討論

該研究結果發(fā)現(xiàn)，醚菌酯在3地黃瓜中的原始沉積量為0.220～0.533 mg/kg，在山東黃瓜中的原始沉積量大于其他2個地區(qū)，可能與植株形態(tài)及施藥時的環(huán)境有關。結果表明，醚菌酯在黃瓜中的半衰期為1.6～4.1 d，劉聰云等[12]報道了醚菌酯在黃瓜中半衰期為1.5和2.1 d，葛謙等[10]報道醚菌酯在黃瓜中的半衰期為2.1～5.1 d，與該研究結果基本相似，表明醚菌酯在黃瓜易消解。醚菌酯在3地土壤中的半衰期為2.4～6.2 d，而研究表明，醚菌酯在土壤中的半衰期為4.9～10.8 d[10]。農(nóng)藥在土壤中的降解速率受試驗年份氣溫、降水情況、pH、土壤種類、有機質(zhì)含量等綜合因素的影響。

最終殘留試驗結果表明，50%醚菌酯水分散粒劑按有效劑量150和225 g/hm2，施藥3、4次，施藥間隔期7 d，距末次施藥3、5、7和10 d后，黃瓜中醚菌酯殘留量均低于我國規(guī)定的黃瓜中醚菌酯的最大殘留限量（0.500 mg/kg）。因此，按照推薦劑量使用該農(nóng)藥不會造成農(nóng)藥殘留超標，對人體健康是安全的。

參考文獻

[1] 關愛瑩，胡耐冬.Strobilurin類殺菌劑[J].世界農(nóng)藥，2002，24（2）：16-19.

[2] 呂國成.60%醚菌酯水分散粒劑防治黃瓜白粉病田間藥效試驗[J].廣西植保，2011，24（4）：20-21.

[3] 丁佩，馬海芹，戴德江，等.醚菌酯防治草莓白粉病的田間藥效試驗[J].浙江農(nóng)業(yè)科學，2015，56（7）：1058-1059，1066.

[4] 趙琪君，劉世江，丁怡，等.稻瘟病菌對丙環(huán)唑和醚菌酯的敏感性檢測[J].農(nóng)藥，2019，58（6）：462-464，468.

[5]SAUTER H，STEGLICH W，ANKE T.Strobilurions：Evolution of new class of active substances[J].Angew Chem Int Ed，1999，38（10）：1328-1349.

[6] 李國烈，覃明麗，蘇旭，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定桑葚中醚菌酯殘留量[J].農(nóng)藥，2017，56（12）：905-907，911.

[7] 宋天瑋，熊勝，陳恒輝，等.氣相色譜法快速檢測小麥中醚菌酯和噻呋酰胺的殘留[J].農(nóng)藥，2019，58（4）：285-287.

[8] 常津毓，王曉梅，侯志廣，等.醚菌酯在平菇和榆黃蘑及培養(yǎng)料中的殘留動態(tài)研究[J].食用菌，2015（2）：62-64.

[9] 于雪驪，蔡磊明.30%醚菌酯懸浮劑在小麥及土壤中的殘留動態(tài)[J].農(nóng)藥，2010，49（5）：361-362，370.

[10] 葛謙，茍春林，姜瑞.30%醚菌酯懸浮劑在黃瓜和土壤中的殘留降解行為及安全使用技術[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2014，42（22）：7422-7425.

[11] 趙爾成，朱曉丹，鄭尊濤，等.醚菌酯和腐霉利在溫室草莓中的殘留行為及其膳食攝入風險評估[J].農(nóng)藥學學報，2015，17（1）：75-82.

[12] 劉聰云，王有成，萬凱，等.黃瓜中醚菌酯的殘留及風險評估[J].農(nóng)藥學學報，2012，14（6）：685-688.

[13] 郝俊杰，李磊，王波，等.黃瓜白粉病抗性基因定位及候選基因分析[J].中國農(nóng)業(yè)科學，2018，51（7）：3427-3434.

[14] 農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥登記殘留田間試驗標準操作規(guī)程[M].北京：中國標準出版社，2007：395.

[15] 農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥殘留試驗準則：NY/T 788—2004[S].北京：中國標準出版社，2004.