李小強(qiáng)，張言雷，李 輝，張曉琳

（山西運(yùn)城農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山西運(yùn)城 044000）

固體基質(zhì)發(fā)酵的特征是微生物在缺乏自由流動(dòng)水的潮濕固體基質(zhì)上生長(zhǎng)，其潛在優(yōu)勢(shì)是只需簡(jiǎn)單的培養(yǎng)設(shè)施，相對(duì)較低的投資，和液體發(fā)酵相比，可以生產(chǎn)更多的含有微生物代謝物的生物質(zhì)。益生菌對(duì)健康的影響是屬、種和菌株特異性的，使用多菌種益生菌可能比使用單菌種益生菌更有效（Timmerman 等，2004）。Reid 等（2003）認(rèn)為，益生菌對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的改善可能更明顯，同時(shí)可以降低抗生素的使用，而且益生菌與抗生素聯(lián)合使用可能導(dǎo)致一個(gè)累加效應(yīng)。因此，本研究旨在評(píng)估復(fù)合益生菌產(chǎn)品在低或高溫度下干燥的作用效果，并探討不同劑量的高溫干燥處理復(fù)合益生菌產(chǎn)品與抗生素聯(lián)用對(duì)斷奶仔豬的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)原料與動(dòng)物試驗(yàn)本試驗(yàn)選擇的復(fù)合益生菌由嗜酸乳桿菌、米曲菌和釀酒酵母菌構(gòu)成。試驗(yàn)1 ：將288 頭21 d 斷奶的仔豬[（6.43±0.65）kg]隨機(jī)分為4 組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)18 頭，分別飼喂陰性對(duì)照日糧，陽(yáng)性對(duì)照日糧（基礎(chǔ)日糧+75 mg/kg 金霉素）、基礎(chǔ)日糧+0.2% 高溫處理益生菌（70℃處理36 h）、基礎(chǔ)日糧+0.2% 低溫處理益生菌（40℃處理72 h）。試驗(yàn)2 ：同樣選擇288頭21 d 斷奶的仔豬[（5.84±0.18）kg]，采用2（0和75 mg/kg 金霉素）×2（2% 和4% 高溫處理益生菌）分組。兩個(gè)試驗(yàn)均開(kāi)展28 d?；A(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

1.2 生長(zhǎng)性能分別在試驗(yàn)第1、14 和28 天早上飼喂前2 h 對(duì)各重復(fù)豬只進(jìn)行稱(chēng)重，每周統(tǒng)計(jì)1次豬只的飼料用量，試驗(yàn)結(jié)束根據(jù)上述指標(biāo)計(jì)算平均日增重、平均日采食量及飼料報(bào)酬（日增重/日采食量）。

1.3 養(yǎng)分消化率及糞微生物將0.25% 氧化鉻被用作15 ～28 d 日糧中作為不可消化的標(biāo)記物，用于計(jì)算營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀總消化道消化率，試驗(yàn)方法參考Hahn 等（2006）研究方法。在22 ～28 d每個(gè)重復(fù)選擇4 頭豬飼喂含氧化鉻的日糧，連續(xù)收集3 d 的糞便。糞便樣品在60℃下烘干制成風(fēng)干樣品，粉碎過(guò)篩后用于干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和總能消化率的測(cè)定。在第14 和28 天收集新鮮糞便樣本，參考黃燦等（2008）的研究方法測(cè)定糞中總厭氧菌、乳酸桿菌、梭菌和大腸桿菌含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)1 的數(shù)據(jù)采用單因素方差分析方法進(jìn)行分析，采用Ducan’s 法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)2 數(shù)據(jù)分析為2×2 的因子設(shè)計(jì)，通過(guò)SAS 混合程序確定它們之間的相互作用。P ＜0.05表示差異顯著。

表1 基礎(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)益生菌和抗生素的影響由表2 可知，日糧處理對(duì)1 ～14 d 斷奶仔豬生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響（P ＞ 0.05）。與陰性對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照和益生菌組顯著提高了1 ～28 d 斷奶仔豬的日增重、平均日采食量和飼料報(bào)酬（P ＜0.05），同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照組仔豬的日增重和飼料報(bào)酬也顯著高于高溫處理益生菌組（P ＜0.05）。

表2 益生菌和抗生素對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表3 可知，與陰性和陽(yáng)性對(duì)照組相比，低溫處理益生菌組干物質(zhì)消化率及高溫處理組能量消化率顯著提高（P ＜0.05）。但高溫和低溫處理益生菌組對(duì)干物質(zhì)和總能消化率無(wú)顯著影響（P ＞0.05）。除了陽(yáng)性對(duì)照組糞中梭菌含量顯著低于陰性對(duì)照組外（P ＜0.05）。

表3 益生菌和抗生素對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化和糞中微生物含量的影響

2.2 高溫處理益生菌和抗生素組合的影響由表4 可知，在15 ～28 d 時(shí)，0.4% 高溫處理益生菌+ 抗生素組顯著提高了斷奶仔豬的日增重和日采食量（P ＜0.05），而0.4% 高溫處理益生菌組及0.4% 高溫處理益生菌+ 抗生素組顯著提高了1 ～28 d 斷奶仔豬的平均日增重（P ＜0.05）。此外，0.4%高溫處理益生菌組顯著提高了14 d 粗蛋白質(zhì)和干物質(zhì)表觀消化率，同時(shí)顯著提高了28 d干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和總能表觀消化率（P ＜0.05）。

表4 高溫和抗菌處理益生菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

表5 高溫和抗菌處理益生菌對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分消化及糞微生物含量的影響

由表5 可知，0.4% 高溫處理益生菌組顯著提高了14 和28 d 糞中乳酸桿菌含量，同時(shí)顯著 降 低 了14 d 糞 中 梭 菌 含 量（P ＜0.05）。此外，抗生組組也顯著降低了28 d 糞中梭菌含量（P ＜0.05）。

3 討論

本試驗(yàn)選用的益生菌微生物包括乳酸菌、酵母菌和曲霉菌。商業(yè)上，益生菌是通過(guò)冷凍干燥或噴霧干燥技術(shù)處理的，這兩種方法都會(huì)導(dǎo)致微生物細(xì)胞損傷和死亡，導(dǎo)致益生菌產(chǎn)品的功效降低。本研究觀察到的抗生素日糧改善了斷奶仔豬的日增重，這可能與采食量和飼料效率提高有關(guān)。在試驗(yàn)1 中，低溫和高溫處理益生組對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能、總能和干物質(zhì)表觀消化率無(wú)顯著差異。這些結(jié)果表明，高溫干燥對(duì)益生菌產(chǎn)品的功效無(wú)負(fù)面影響，即使在高溫干燥時(shí)益生菌產(chǎn)品中的微生物數(shù)量有所減少。與陰性對(duì)照組日糧相比，高溫或低溫干燥益生菌產(chǎn)品飼養(yǎng)的豬表現(xiàn)出較好的干物質(zhì)、總能消化率和生長(zhǎng)性能，糞便梭菌數(shù)量減少。在本研究中潛在的復(fù)合益生菌處理對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的有益影響與Guerra 等（2007）的研究結(jié)果一致。此外，Hung 等（2008）發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，以嗜熱鏈球菌、嗜熱乳桿菌、枯草桿菌或嗜酸乳桿菌和釀酒酵母發(fā)酵的多菌種微生物發(fā)酵豆粕作為益生菌載體的豬總體日增重得到改善。此外，動(dòng)物年齡、環(huán)境條件、畜群內(nèi)的健康狀況和農(nóng)場(chǎng)衛(wèi)生也可能影響益生菌的功效。本研究選擇的益生菌是以玉米- 豆粕混合料為固體發(fā)酵基質(zhì)，固體發(fā)酵產(chǎn)物包括益生菌及微生物發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的次生微生物代謝物，這些二次微生物代謝物包括乳酸菌產(chǎn)生的乳酸等有機(jī)酸，芽孢桿菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)和酶產(chǎn)生的淀粉酶和蛋白酶。益生菌產(chǎn)品中酶及其他次生代謝產(chǎn)物的存在以及益生菌內(nèi)源酶的產(chǎn)生可能是益生菌處理提高豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的原因（Hu 等，2008）。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，高溫處理對(duì)復(fù)合益生菌產(chǎn)品的功效無(wú)影響。但在高溫中干燥的益生菌產(chǎn)品在0.4% 添加水平下對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化的作用效果更好。此外，添加抗生素到益生菌日糧中可改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，但沒(méi)有顯示任何與益生菌的交互作用。