鄭州大學(xué)人民醫(yī)院 河南省人民醫(yī)院（450003）楊會珍 代婉清 張茜茜 王月霞 張曉菊

非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）約占肺癌的80%，其發(fā)病率、死亡率位居所有惡性腫瘤之首。腫瘤血管生成被認(rèn)為是腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)雜機制中的重要一步，在眾多血管生成調(diào)節(jié)因子中，血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）作為一種內(nèi)皮細(xì)胞特異性強有絲分裂原，參與腫瘤新生血管形成。多項研究表明，在非小細(xì)胞肺癌中，VEGF可能是一個重要的肺癌預(yù)后指標(biāo)[1][2]。本研探討了外周血VEGFA水平與非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的臨床特征關(guān)系，進(jìn)一步評價VEGFA在促進(jìn)NSCLC血行轉(zhuǎn)移中的能力及與治療、預(yù)后判斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月～2017年1月在河南省人民醫(yī)院就診的90例NSCLC患者，30例NSCLC患者接受外科手術(shù)，納入標(biāo)準(zhǔn)：①取得病理確診的NSCLC；②未接受過化放療等抗腫瘤治療；③入組前2周內(nèi)無外傷、手術(shù)病史；④既往無腫瘤病史；⑤患者及家屬簽署知情同意書，治療及隨訪依從性好；⑥預(yù)計生存期大于3個月。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有類風(fēng)濕、視網(wǎng)膜病變、銀屑病等疾病；②妊娠期、哺乳期女性。同期隨機納入健康體檢者30名作為對照組。實驗組與對照組入組時基線數(shù)據(jù)比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。

1.2 檢測方法 采集晨起空腹靜脈血，按照12000r/min的轉(zhuǎn)速離心，分離血清，采用全自動化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測。

1.3 基線病情評估 治療前需進(jìn)行詳細(xì)的病情評估，主要包括病史、體格檢查、血常規(guī)和生化指標(biāo)、心電圖、胸部CT、全身骨掃描、頭顱核磁共振。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 實驗數(shù)據(jù)使用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）計算。使用至少三個獨立的實驗進(jìn)行量化。統(tǒng)計比較采用Student'st檢驗或單因素方差分析（ANOVA）方法，然后采用Student Newman Keuls（SNK）檢驗方法來確定顯著性水平。使用社會科學(xué)統(tǒng)計軟件包（SPSS；IBM，Armonk，USA）20.0和GraphPad Prism 7.0（GraphPad，San Diego，CA）進(jìn)行統(tǒng)計計算。采用ROC曲線下面積分析VEGFA對肺癌復(fù)發(fā)診斷價值。P值閾值設(shè)為0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者VEGFA水平比較 接受外科手術(shù)的30例NSCLC患者外周血VEGFA水平與組織標(biāo)本中VEGFA免疫組化染色強度一致；在配對的實驗組（外科手術(shù)）VEGFA水平高于健康人群對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；實驗組內(nèi)外科手術(shù)患者與非外科手術(shù)患者的VEGFA水平無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。

2.2 NSCLC患者VEGFA與臨床參數(shù)、病理特征、預(yù)后關(guān)系 NSCLC患者VEGFA水平與患者年齡、性別、病理類型、腫瘤分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分期無關(guān)（P＞0.05）；臨床分期為III期患者VEGFA水平低于IV期VEGFA水平（P＜0.05）；T3～4分期患者VEGFA水平高于T1～2分期患者VEGFA水平（P＜0.05）；M1期患者VEGFA水平高于M0分期患者VEGFA水平（P＜0.05）；且在伴或不伴肺內(nèi)轉(zhuǎn)移、伴或不伴骨轉(zhuǎn)移、伴或不伴腦轉(zhuǎn)移患者中進(jìn)行VEGFA水平比較顯示，有單個臟器轉(zhuǎn)移的患者VEGFA水平明顯高于無相應(yīng)臟器轉(zhuǎn)移患者（P＜0.05）。

本研究隨訪截止日期為2020年3月，患者確診時基線VEGFA水平高者，臨床治療反應(yīng)較差（P＜0.05），PFS相對較短（P＜0.05），但OS未見明顯差異（P＞0.05）；接受系統(tǒng)治療后，VEGFA水平變化明顯者（依據(jù)復(fù)發(fā)時VEGFA水平/低谷VEGFA水平判斷），臨床治療反應(yīng)較好，PFS及OS越長；而治療后隨訪期間VEGFA最低值與臨床治療反應(yīng)無關(guān)（P＞0.05），而與PFS及OS相關(guān)，VEGFA水平越低PFS及OS相對越長（P＜0.05），見附圖。

2.3 VEGFA水平對肺癌復(fù)發(fā)診斷價值 采用ROC曲線分析，結(jié)果顯示：以VEGFA＞160pg/ml為參考值，對肺癌復(fù)發(fā)的診斷價值敏感性和特異性分別為：85.56%和74.44%，而當(dāng)以VEGFA水平＞231.5pg/ml為cutoff值時，其對肺癌復(fù)發(fā)的診斷價值敏感性和特異性分別為：71.11%和88.89%。

3 討論

研究表明外周血VEGFA水平高低與配對肺癌組織中VEGFA免疫組化染色強度呈相關(guān)性，提示外周血VEGFA水平可以作為穩(wěn)定的監(jiān)測血行轉(zhuǎn)移能力指標(biāo)，與既往研究一致。實驗組NSCLC患者VEGFA水平較對照組健康人群VEGFA水平明顯增高（P＜0.05），提示VEGFA參與了肺癌的發(fā)生發(fā)展。

既往研究顯示VEGFA主要為促血管生成因子，促進(jìn)血管生成，進(jìn)而與腫瘤的血行轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]。本研究顯示VEGFA水平與腫瘤的T分期、M分期相關(guān)，而與N分期、腫瘤分化程度無關(guān)，與既往研究結(jié)果一致。VEGFA水平也可作為全身系統(tǒng)治療療效的預(yù)測因子，基線VEGFA水平越高，復(fù)發(fā)時VEGFA/基線VEGFA水平值越大，臨床治療反應(yīng)率越高（P＜0.05），可能與VEGFA水平越高腫瘤血管相對豐富，對治療敏感性相對較好有關(guān)，這與既往研究顯示VEGFA與放化療治療敏感性相關(guān)研究結(jié)果一致；且回顧性分析顯示影像學(xué)確診復(fù)發(fā)時VEGFA水平高于231.5pg/ml時，對肺癌復(fù)發(fā)的預(yù)測敏感性和特異性分別為：71.11%和88.89%，也即當(dāng)VEGFA明顯升高時，作為肺癌復(fù)發(fā)的早期預(yù)警信號，需要對病情全面評估，密切隨訪影像學(xué)，積極查找病情進(jìn)展影像學(xué)證據(jù)，及時調(diào)整治療方案[4]。

本研究終點為入組患者的OS，隨訪截止日期為2020年3月，在生存曲線分析研究部分顯示，患者確診時基線VEGFA水平高者，PFS相對較短（P＜0.05），但OS未見明顯差異（P＞0.05），結(jié)合臨床治療反應(yīng)綜合評估，VEGFA水平較高者，在治療初期會收到較好治療效果，但因腫瘤負(fù)荷較重或耐藥細(xì)胞的增殖，導(dǎo)致腫瘤緩解時間持續(xù)較短，但是對后續(xù)方案治療仍存在較好臨床反應(yīng)，也即意味著患者在更換治療方案后可以適度延長生存期，因此對OS無明顯影響[5]；接受系統(tǒng)治療后，VEGFA水平變化明顯者，PFS及OS越長，進(jìn)一步分析顯示復(fù)發(fā)時VEGFA水平與基線VEGFA呈相關(guān)性，因此VEGFA水平越低，腫瘤緩解時間相對較長，復(fù)發(fā)時VEGFA水平/低谷VEGFA水平比值越大，可能預(yù)示著對一線方案耐藥后的治療方案臨床治療反應(yīng)率較高，進(jìn)而影響生存期；而治療后隨訪期間VEGFA最低值與臨床治療反應(yīng)無關(guān)（P＞0.05），而與PFS及OS相關(guān)，VEGFA水平越低，PFS及OS相對越長（P＜0.05）。因此結(jié)合本研究與既往研究結(jié)果，VEGFA水平可以作為臨床治療反應(yīng)及預(yù)后預(yù)測因子，且腫瘤緩解期間VEGFA水平越低，PFS越長，復(fù)發(fā)時VEGFA水平較低谷VEGFA變化明顯時，再次提示對后續(xù)治療方案的敏感性，以及相對較長的OS。

總之，本研究結(jié)果顯示在中晚期NSCLC患者中VEGFA水平較高，與原發(fā)腫瘤分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，血清VEGFA水平與NSCLC治療反應(yīng)、PFS及OS有一定相關(guān)性[6]，可能作為判斷復(fù)發(fā)及預(yù)后的分子標(biāo)志物，但仍需進(jìn)一步大樣本驗證及分子機制探索，以期為抑制NSCLC血管轉(zhuǎn)移機制及抗血管生成治療研究提供一定理論基礎(chǔ)。