張映雪，張建麗，柳世萍，賈全，徐巍巍(華北制藥河北華民藥業(yè)有限責(zé)任公司，河北 石家莊 052165)

1 儀器與試劑

1.1 儀器

電子天平，自動(dòng)溶出儀，紫外分光光度計(jì)。

1.2 試劑

頭孢克肟膠囊(日本長(zhǎng)生堂制藥株式會(huì)社)，鹽酸(試劑級(jí))，氫氧化鈉(試劑級(jí))，磷酸二氫鉀(試劑級(jí))，乙酸鈉(試劑級(jí))，乙酸(試劑級(jí))，磷酸氫二鈉(試劑級(jí))。

2 溶出曲線的測(cè)定

2.1 溶出介質(zhì)配制

pH 1.2 鹽酸介質(zhì)：量取鹽酸7.65 mL，用純化水稀釋至1 000 mL，搖勻即得。

pH 4.5 醋酸鹽緩沖液：稱取乙酸鈉2.99 g，加200 mL 純化水溶解，量取2.0 mol/L 乙酸溶液14 mL [量取乙酸120.0 g (114 mL)，用純化水稀釋至1 000 mL]，用純化水稀釋至1 000 mL，搖勻，即得。

pH 6.8 磷酸鹽緩沖液：取0.2 mol/L 磷酸二氫鉀溶液(稱取磷酸二氫鉀27.22 g，加純化水溶解并稀釋至1 000 mL)250 mL，0.2 mol/L 氫氧化鈉溶液(稱取氫氧化鈉8.00 g，加純化水溶解并稀釋至1 000 mL)112.0 mL，混合后，用純化水稀釋1 000 mL，即得。

pH 7.2 磷酸鹽緩沖液：量取0.2 mol/L 磷酸二氫鉀溶液(稱取磷酸二氫鉀27.22 g，加純化水溶解并稀釋至1 00 mL)250 mL，0.2 mol/L 氫氧化鈉溶液(稱取氫氧化鈉8.00 g，加純化水溶解并稀釋至1 000 mL)173.5 mL，混合后，用純化水水稀釋1 000 mL，即得。

pH 7.5 磷酸氫二鈉-枸櫞酸緩沖液：取0.05 mol/L 磷酸氫二鈉溶液1 000 mL，加0.025 mol/L 枸櫞酸溶液1 000 mL，并調(diào)pH 值至7.5，即得。

水：純化水。

備注：以上六種介質(zhì)使用的純化水均是經(jīng)脫氣的。

2.2 溶出曲線測(cè)定

精密稱取頭孢克肟對(duì)照品，用溶出介質(zhì)(水、pH 1.2 鹽酸溶液、pH 4.5 乙酸鹽緩沖液、pH 6.8 磷酸鹽緩沖液、pH 7.2 磷酸鹽緩沖液、pH 7.5 磷酸鹽緩沖液)定量稀釋制成10 μg/mL的頭孢克肟溶液，作為對(duì)照品溶液，采用紫外-可見分光光度法，在288 nm 波長(zhǎng)檢測(cè)樣品吸光度。取參比制劑樣品，分別以六種溶液為溶出介質(zhì)，以兩種方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(籃法，100 轉(zhuǎn)；槳法，50 轉(zhuǎn)，加沉降籃)，分別在對(duì)應(yīng)的取樣時(shí)間點(diǎn)，取出實(shí)驗(yàn)溶液(5～10 mL)，過濾，并補(bǔ)充相同體積的介質(zhì)溶液，用溶出介質(zhì)定量稀釋制成每10 μg/mL 的頭孢克肟 (按C16H15N5O7S2計(jì))溶液，作為供試品，同樣采用紫外-可見分光光度法，檢測(cè)樣品吸光度，以12 粒的平均溶出量、實(shí)驗(yàn)時(shí)間，為縱坐標(biāo)、橫坐標(biāo)，制作溶出曲線圖[1]。

2.3 影響溶出數(shù)據(jù)的因素

除藥物自身因素，實(shí)驗(yàn)儀器，取樣過濾方式，紫外波長(zhǎng)等均有可能對(duì)藥物的溶出數(shù)據(jù)產(chǎn)生影響。

(1)中間精密度實(shí)驗(yàn)。取頭孢克肟膠囊參比制劑樣品，在不同日期，使用不同儀器，采用籃法100 轉(zhuǎn)進(jìn)行溶出曲線實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)出溶出度，制作溶出曲線，比較儀器之間的結(jié)果差異。

(2)溶液度穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。使用頭孢克肟膠囊參比制劑樣品，采用籃法100 轉(zhuǎn)進(jìn)行溶出曲線實(shí)驗(yàn)，在5 min 和60 min 取適量溶液，過濾，精密量取濾液適量，用溶出介質(zhì)稀釋制成約10 μg/mL的溶液，用紫外分光光度計(jì)法檢測(cè)吸光度，該濾液置于室溫，分別于1、2、3 h 測(cè)定溶液的吸光度，計(jì)算變異系數(shù)。

(3)溶出儀濾膜吸附實(shí)驗(yàn)。使用溶出儀過濾頭，模擬溶出儀的取樣方式進(jìn)行濾膜吸附實(shí)驗(yàn)，配制濃度相當(dāng)于主藥溶出度20% 的溶液和相當(dāng)于主藥溶出度100% 的溶液，兩種溶液均分為兩份，一份用濾頭過濾，一份不過濾。使用紫外-可見光光度法在288 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定溶液的吸光度。

(4)耐用性實(shí)驗(yàn)。取頭孢克肟膠囊參比制劑樣品，考察溶出曲線測(cè)定方法波長(zhǎng)在288±2 nm 的微小變動(dòng)下，測(cè)定供試品溶液的吸光度。

3 結(jié)果與討論

3.1 pH 1.2 鹽酸介質(zhì)溶出曲線的測(cè)定

以pH 1.2 鹽酸鹽溶液作為介質(zhì)，采用籃法100 轉(zhuǎn)和槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)，紫外分光光度發(fā)檢測(cè)溶出度，繪制對(duì)應(yīng)的溶出曲線。

兩條溶出曲線差異很大，籃法100 轉(zhuǎn)最終溶出量遠(yuǎn)高于槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)。

3.2 pH 4.5 醋酸介質(zhì)溶出曲線的測(cè)定

以pH 4.5 醋酸鹽溶液作為介質(zhì)，采用籃法100 轉(zhuǎn)和槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)，紫外分光光度發(fā)檢測(cè)溶出度，繪制對(duì)應(yīng)的溶出曲線[2]。

溶解過程中溶出度籃法100 轉(zhuǎn)始終高于槳法50 轉(zhuǎn)。

3.3 pH 6.8 磷酸介質(zhì)溶出曲線的測(cè)定

以pH 6.8 磷酸鹽溶液作為介質(zhì)，采用籃法100 轉(zhuǎn)和槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)，紫外分光光度發(fā)檢測(cè)溶出度，繪制對(duì)應(yīng)的溶出曲線。

溶解過程中溶出度籃法100 轉(zhuǎn)始終高于槳法50 轉(zhuǎn)。

3.4 pH 7.2 磷酸介質(zhì)溶出曲線的測(cè)定

以pH 7.2 磷酸鹽溶液作為介質(zhì)，采用籃法100 轉(zhuǎn)和槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)，紫外分光光度發(fā)檢測(cè)溶出度，繪制對(duì)應(yīng)的溶出曲線。

初期籃法100 轉(zhuǎn)的溶解速度快，后期兩者溶出量接近。

3.5 pH 7.5 磷酸介質(zhì)溶出曲線的測(cè)定

以pH 7.5 磷酸鹽溶液作為介質(zhì)，采用籃法100 轉(zhuǎn)和槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)，紫外分光光度發(fā)檢測(cè)溶出度，繪制對(duì)應(yīng)的溶出曲線。

初期籃法100 轉(zhuǎn)的溶解速度快，后期兩者溶出量接近。

3.6 水介質(zhì)溶出曲線的測(cè)定

以水作為溶出介質(zhì)進(jìn)行溶出實(shí)驗(yàn)，采用籃法100 轉(zhuǎn)和槳法50 轉(zhuǎn)(加沉降籃)，紫外分光光度發(fā)檢測(cè)溶出度，繪制對(duì)應(yīng)的溶出曲線。

溶解過程中溶出度籃法100 轉(zhuǎn)始終高于槳法50 轉(zhuǎn)。

3.7 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象

實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，采用槳法50 轉(zhuǎn)的溶出杯中，膠囊在杯底部破裂，物料堆積為錐形，導(dǎo)致變異系數(shù)值可能偏大。投料過程中沉降籃降落位置和速度會(huì)有差異，也會(huì)導(dǎo)致變異系數(shù)值偏大。而籃法100 轉(zhuǎn)不會(huì)出現(xiàn)這種情況[3]。

3.8 溶出度變異系數(shù)數(shù)據(jù)比較

比較數(shù)據(jù)可知，實(shí)用槳法50 轉(zhuǎn)方法的溶出度變異系數(shù)高于籃法100 轉(zhuǎn)的變異系數(shù)。

3.9 其他因素

采用紫外分光光度發(fā)測(cè)定頭孢克肟膠囊的溶出度變異系數(shù)小于15%，方法學(xué)研究中線性范圍、回收率、溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)等方法學(xué)指標(biāo)滿足檢測(cè)要求，本品所用的輔料對(duì)檢測(cè)無干擾。

4 結(jié)語

通過進(jìn)行大量溶出實(shí)驗(yàn)，對(duì)比兩種溶出方法檢測(cè)溶出曲線的結(jié)果，并結(jié)合溶解過程中的現(xiàn)象和各時(shí)間點(diǎn)變異系數(shù)，明顯看出在各介質(zhì)中籃法100 轉(zhuǎn)的區(qū)分力優(yōu)于槳法50 轉(zhuǎn)，該方法與《中國藥典》中頭孢克肟膠囊溶出度方法一致。綜上所述，頭孢克肟膠囊溶出實(shí)驗(yàn)方法選擇籃法100 轉(zhuǎn)更為合適。