曹春園 楊萍 王芳

摘要：目的 研究分析抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）檢測在ANCA相關疾病中的臨床價值。方法 選取2019年1月至2021年6月期間本院收治的ANCA相關疾病患者212例，抽選同期52例健康志愿者，對全體研究對象的血清ANCA進行檢測?？怪行粤＜毎麧{抗體（ANCA）檢測在ANCA相關疾病中的檢測陽性率。結果 健康志愿者組均未檢測出ANCA，WG、SLE、未分類性血管炎、腎病綜合征、急性腎炎、慢性腎炎患者的ANCA檢測陽性率均顯著高于健康志愿者組（P<0.05）。結論 抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）檢測在ANCA相關疾病中具有重要的參考價值，有利于為ANCA相關疾病治療和預后評價提供支持。ANCA作為一種具體的診斷篩查參考指標，對疾病的診斷和治療以及預后評價方面都具有重要的價值。

關鍵詞：抗中性粒細胞胞漿抗體;病情診斷;ANCA;腎小球疾病;預后評價

【中圖分類號】R446 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）15--02

抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）是一種針對中性粒細胞胞漿成分以及單核細胞溶酶體所形成的一組自身抗體，對其研究過程當中發(fā)現(xiàn)ANCA和WG（韋格納肉芽腫）、MPA（顯微鏡下多血管炎）、CSS（變應性肉芽腫血管炎）之間存在一定的關聯(lián)性，將其視為抗中性粒細胞胞漿抗體相關性小血管炎。ANCA，特異性PR3抗體和抗MPO抗體的檢測已成為原發(fā)性小血管炎的敏感特異的血清學檢測項目。近些年來，相關方面的分析已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，我國存在的一些原發(fā)性小血管炎并不十分罕見[1]。ANCA本身是一組系統(tǒng)性壞死性血管炎的血清學標志抗體，能夠用于對血管炎的診斷以及分類和后續(xù)的評估工作。除此之外，ANCA也會在一些腎小球疾病中被發(fā)現(xiàn)，ANCA陽性的腎小球疾病在臨床病理方面的表現(xiàn)相對來說會比較嚴重，患者的病情進展極快，因此通過對ANCA在腎小球疾病中的實際發(fā)生情況進行相對應的分析具有臨床價值，本文對此進行探討。

1資料和方法

1.1一般資料

選取2019年1月至2021年6月期間本院收治的ANCA相關疾病患者212例，抽選同期52例健康志愿者，ANCA相關疾病患者中有9例為WG（韋格納肉芽腫），20例SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡），12例未分類性血管炎，85例腎病綜合征，42例急性腎炎，44例慢性腎炎。

1.2方法

ANCA檢測試劑盒采用德國歐蒙公司生產，儀器使用EURO Pattern全自動熒光判斷系統(tǒng)。對全體研究對象的靜脈血采集2ml，以3500r/min離心10分鐘分離血清，檢測方式為間接免疫熒光法[2]。

1.3統(tǒng)計學方法

使用SPSS24.0軟件分析處理數(shù)據(jù)，計量資料采用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗;計數(shù)資料采用n（%）表示，組間比較采用x2檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

健康志愿者組均未檢測出ANCA，WG、SLE、未分類性血管炎、腎病綜合征、急性腎炎、慢性腎炎患者的ANCA檢測陽性率均顯著高于健康志愿者組（P<0.05）。詳細情況見表1。

3討論

ANCA是存在于系統(tǒng)性血管炎患者中的一類自身抗體，其抗原是多形核粒細胞（PMN）和單核細胞的胞漿成份。近些年來，相關方面的專業(yè)人員對ANCA和靶抗原的具體性質以及相關疾病之間存在的關聯(lián)性進行了相對應的分析，同時也對致病的原理以及具體的疾病檢測方法進行了更深層次的理解。實際中，ANCA本身體現(xiàn)出能夠激活嗜中性粒細胞的作用，使細胞釋放其中存在的一些蛋白水解酶、髓過氧化物酶以及其他的一些氧自由基，從而能夠使患者的血管內皮細胞受到相對應的損傷[3]。這些抗原能夠和相對應的一些抗體結合，共同產生一種免疫復合物，使患者的補體系統(tǒng)得以激活，從而加重患者內皮細胞的進一步破壞，參與到血管炎的發(fā)病過程中促進患者發(fā)病。因此，ANCA檢測能夠用于診斷原發(fā)性小血管炎。

隨著對ANCA的深入研究和檢測方法的提高，ANCA相關系統(tǒng)性血管炎的發(fā)病率較以前有所提高，年發(fā)病率為30/100萬，伴發(fā)急性腎衰約5%～6%[5]?？筆R3和抗MPO陽性的血管炎有相似的臨床和組織學特點，如上、下呼吸道損害，腎損害，單神經(jīng)炎和多神經(jīng)炎等。有學者將抗PR3和抗MPO在AASV中陽性率的分布進行比較，研究證實大部分WG病人抗PR3陽性，NCGN病人中絕大多數(shù)抗MPO陽性，MPA病人中二者的陽性率基本相同。越來越多的資料顯示，二者在臨床表現(xiàn)、組織病理學、病理生理學方面存在顯著差異。

間接熒光免疫法是檢測ANCA的參考方法或者標準方法，至今也是最常用的經(jīng)典方法。歐蒙公司生產的使用固定劑乙醇和甲醛，乙醇作為固定抗原片來進行試驗，表現(xiàn)為陽性時，中性粒細胞胞漿內可以看到胞漿型抗中性粒細胞胞漿抗體C-ANCA或者核周型抗中性粒細胞胞漿抗體P-ANCA的熒光顆粒[4]。前者抗體通常會在胞漿內呈現(xiàn)顆粒狀的排布，主要的靶抗原是蛋白酶3，而后者在細胞核的周圍主要是呈線條狀的分布，主要的靶抗原是髓過氧化物酶，除此之外還存在彈力蛋白酶以及組蛋白酶和乳鐵蛋白等物質。此法是區(qū)分c-ANCA和p-ANCA的基礎，有較高敏感性，可半定量，但測定的是總ANCA，不能準確區(qū)分靶抗原，需特異性的檢測方法作為補充。為提高對疾病診斷的特異性，檢測時應注意以下問題[6]。第一，檢測ANCA，一般建議同時做IIF初篩和相關靶抗原的確認實驗，以提高ANCA的臨床應用價值，不做單獨初篩或單獨確認實驗，以免降低對疾病診斷的特異性。第二，不能僅檢測抗PR3和MPO兩種特異性抗體，而不進行IIF初篩，這樣容易限制ANCA對疾病診斷的特異性。

本文的研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，健康的患者沒有檢測出ANCA，同時這種情況會在其他的疾病患者中呈現(xiàn)不同程度的顯示。這就表示ANCA在臨床方面能夠用于對相關疾病的診斷以及病情的判斷和療效以及預后評估等多個方面的重要指標。WG患者在具體的治療過程中病程的進展情況相對來說會比較快，導致其呼吸功能以及腎功能方面存在障礙，因此其預后就會比較差[7]。本文的研究分析，發(fā)現(xiàn)WG患者的ANCA陽性率相對來說會比較高，因此ANCA檢測能夠提高該種疾病的診斷率，可能患者的腎和肺功能病變方面還未出現(xiàn)嚴重影響，但ANCA檢測已出現(xiàn)異常，有利于該病的早期診斷。ANCA在具體的應用過程中，除了對WG比較敏感，同時也會對其他的一些自身免疫性疾病敏感，包括腎病綜合征以及其他的一些腎小球疾病等。在臨床醫(yī)學方面，SLE是一種多系統(tǒng)損害癥狀的慢性系統(tǒng)性自身免疫疾病，能夠導致患者的各部分系統(tǒng)以及器官都受到相對應的影響，繼發(fā)性狼瘡腎炎的發(fā)病率會比較高，導致患者腎衰竭而死亡。本文的研究中分析發(fā)現(xiàn)，在一部分SLE患者的ANCA檢測環(huán)節(jié)會表現(xiàn)出陽性，而SLE本身的病理情況是血管炎，這就表示ANCA可能會參與SLE血管炎方面的發(fā)病。因此進一步研究ANCA和SLE的關系，能夠在一定程度上了解血管炎的具體發(fā)病機制。ANCA定性分析方式能夠幫助患者的病情活動及預后判斷更加有效，采取有效的干預措施提高患者的生存率。本文的研究中分析發(fā)現(xiàn)，腎小球疾病的患者基于ANCA檢測方面的陽性率也會比較高，ANCA陽性腎小球疾病是近些年來發(fā)現(xiàn)存在的一種綜合表現(xiàn)，其各種病理表現(xiàn)都會比較嚴重，患者的病情進展比較快，會導致患者腎衰竭，ANCA陽性疾病的患者通常預后情況會比較差，生存率會比較低，通過對腎小球疾病患者進行ANCA的檢測，進行早期篩查，早期干預，體現(xiàn)其重要的價值，為疾病的治療及預后奠定良好的基礎。

除上述內容以外，我們也結合了其他學者的研究[8]，進行了ANCA的研究。中性粒細胞受到抗原刺激之后，細胞中的α顆?？舍尫诺鞍姿饷?、彈性蛋白酶等等，最終會刺激機體產生ANCA。ANCA與靶抗原結合后，會形成免疫復合物，最終對內皮細胞的破壞強隊增加，也參與到了血管炎的發(fā)病過程中。在ANCA檢測下可以提高對多項疾病的診斷率，且在病變尚未對肺部、腎功能造成嚴重影響的時候有所體現(xiàn)，對于疾病的早期診斷意義重大。此外，ANCA的敏感性高，對于其他自身免疫性疾病均有較高的診斷。例如SLE屬于多系統(tǒng)損害的慢性系統(tǒng)性和累及到多個器官和系統(tǒng)，最常見的部位則是腎部。通過對患者進行ANCA的檢測，可以發(fā)現(xiàn)ANCA參與到SLE血管炎過程，并且可以闡明ANCA血管炎的發(fā)病機制?？傮w來看，ANCA可以作為重要的指標對ANCA相關疾病進行診斷、治療以及預后評估，具有重要價值。

值得一提的是，ANCA陽性患者可以來自于不同的科室，包括風濕免疫科，肺病科，腎內科等等。腎內科ANCA患者的陽性率高，主要是由于與壞死性新月體腎炎以及腎小球壞死等疾病相關。此外，ANCA陽性還可見于炎癥性腸炎，甲亢等疾病的患者。隨著人們對ANCA研究的深入，關于其對疾病的鑒別診斷和預后分析也受到了醫(yī)學界的重視，但是ANCA無特異性，故而在臨床中需要結合患者病癥表現(xiàn)以及實驗室檢查結果進行切實判斷。目前ANCA已成為系統(tǒng)性血管炎的敏感血清學診斷工具，ANCA已成為研究系統(tǒng)性血管炎的熱門課題。

ANCA相關系統(tǒng)性血管炎的發(fā)病機制較為復雜，涉及到ANCA、致炎因子、內皮細胞及其它免疫效應細胞的相互作用，目前對ANCA的致病作用研究較為深入。1991年Ludemann提出ANCN介導的血管損傷模型，其主要內容為：①細胞因子，如IL-8、IL-1和TNF等刺激中性粒細胞，細胞漿內PR3、MPO等抗原物質相互作用，致中性粒細胞脫顆粒，釋放PR3、MPO、HLE等，導致內皮細胞損傷，引起血管火。ANCA在AAVS中的致病作用，其證據(jù)主要來自于臨床和體外試驗，已有充足的體外實驗證明ANCA是有害的，但ANCA是血管發(fā)生損傷的初始原因還是第二因素，目前尚未定論。

總體來說，本文的研究中涉及到的疾病相關臨床表現(xiàn)會比較復雜，容易會產生誤診、漏診的情況，ANCA作為一種具體的診斷篩查參考指標，對其的診斷和治療以及預后評價方面都具有重要的價值。

參考文獻：

[1] 云宗金， 徐鵬程， 宋斌，等. 抗中性粒細胞胞漿抗體相關性肥厚性硬脊膜炎1例報告并文獻復習[J]. 中風與神經(jīng)疾病雜志， 2019， 252（08）：68-71.

[2] 劉在栓， 劉雨欣， 胡靜，等. 抗中性粒細胞胞漿抗體熒光模型與其抗體譜對應關系[J]. 檢驗醫(yī)學與臨床， 2019， 16（14）：26-29.

[3] 王美娥， 胡朝軍， 李萍，等. 血清ANCA和GAB不同類型抗體檢測在潰瘍性結腸炎中的臨床應用[J]. 臨床檢驗雜志， 2020， 038（001）：73-75.

[4] 劉玉鵬， 宣依依， 趙震，等. 抗中性粒細胞胞漿抗體相關性血管炎合并肺間質病變患者血清KL-6水平分析[J]. 河南醫(yī)學研究， 2019， 28（07）：1165-1168.

[5] 陳樂，何焱玲.抗中性粒細胞胞漿抗體在抗中性粒細胞胞漿抗體相關血管炎中的作用機制新進展[J].國際免疫學雜志，2018，41（1）：94-99.

[6] 安曉寧，陳永熙.單核-巨噬細胞在抗中性粒細胞胞漿抗體相關性血管炎中作用的研究進展[J].上海交通大學學報（醫(yī)學版），2020，40（1）：123-127.

[7] 何浩，楊惠琴，鄒榮等.潑尼松與黃芪注射液聯(lián)合治療對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細胞胞漿抗體陽性檢出率的改善作用[J].實用醫(yī)學雜志，2021，37（11）：1481-1484.

[8] 喻慎儀，黃琴，任昊等.抗中性粒細胞胞漿抗體相關性血管炎神經(jīng)系統(tǒng)病變的研究進展[J].廣東醫(yī)學，2019，40（2）：159-162.