樊鵬威，許少奇，王斌，陶文，喻娓，劉建中

(武漢市第七醫(yī)院檢驗中心,湖北 武漢)

0 引言

2019 年12 月在我國湖北省武漢市首先被檢測到，隨后施虐全球的冠狀病毒是一種從未在人體中被發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒新毒株[1]。世界衛(wèi)生組織已經(jīng)將該病毒的肺炎命名為“COVID-19”[2]，同時，國際病毒分類委員會聲明，將新型冠狀病毒命名為“SARA-CoV-2”.在疫情暴發(fā)流行以來，隨著對病毒研究的深入，我們對SARS-CoV-2 病毒的認識也越來越清楚，但仍會有一些未解之處。例如新型冠狀病毒病人出院隔離結束后，復查核酸結果為陽性的原因分析。本文針對這類病人進行了初步的研究分析，現(xiàn)將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

采集2020 年4 月至5 月到武漢市第七醫(yī)院新冠康復門診復診的新冠出院隔離結束病例1628 例，其中男779 人，女849 人，年齡為9-92 歲，平均(57.4±14.4)歲。所有確診患者均符合國家衛(wèi)生健康委員會印發(fā)的《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第七版)》出院標準，即連續(xù)兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標本核酸檢測陰性(采樣時間至少中間間隔24 小時)。

1.2 對所有病例采集咽拭子進行實時熒光RT-PCR 檢測SARS-CoV-2 核酸，檢測試劑由上海之江生物科技股份有限公司提供。

1.3 試劑新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)特異性IgM/IgG 抗體(膠體金免疫層析法)，由英諾特(唐山)生物科技有限公司研制。

1.4 方法

1.4.1 SARS-CoV-2 病毒核酸檢測

技術原理病原體核酸在裂解結合緩沖液存在的環(huán)境中釋放并與磁珠結合，然后通過磁力棒將結合在磁珠上的核酸同磁珠一起分離，再用洗脫液成。

溶解與磁珠結合的核酸，使樣品的核酸得到提取分離。

1.4.2 SARS-CoV-2 病毒特異性IgM/IgG 抗體檢測

在出院隔離28 天后，采集康復患者血清標本，按試劑盒說明書進行SARS-CoV-2 病毒特異性IgM/IgG 抗體檢測，室溫放置15 分鐘內(nèi)觀察結果。

1.5 統(tǒng)計學處理

應用SPSS 16.0 軟件數(shù)據(jù)。

2 結果

2.1 在COVID-19 患者出院復診核酸后，大多數(shù)出院病人核酸檢測為陰性，僅20 例核酸檢測為陽性，也就是我們俗稱的“復陽病人”，復陽病人占總檢測出院患者比率為1.23%。

表1 疾病康復期COVID-19 患者中復查核酸結果為陽性人數(shù)比例

2.2 在20 例SARS-CoV-2 病毒核酸檢測結果陽性的COVID-19 出院患者中，檢測其特異性IgM/IgG 抗體情況。

表2 二次檢測核酸為陽性患者的IgM 和IgG 抗體情況分析表

在20 例“復陽”患者中，抗體檢測僅有2 例IgM 和IgG抗體均為陽性，而其余18 例只要IgG 抗體為陽性。

3 討論

研究表明SARS-CoV-2 病毒的潛伏期為1-14d，多數(shù)為3-7d，該疾病的傳染源為COVID-19 患者及無癥狀攜帶者。雖然處于潛伏期的感染者多數(shù)沒有明顯的臨床癥狀和體征，但具有傳染性，可以作為疾病的傳染源，增加切斷傳染源的難度[3-5]。因此，對出院后患者的追蹤觀察，防止出院患者“復陽”，對切斷傳染源顯得尤為重要。

雖然病毒核酸檢測(RT-PCR)已成為診斷COVID-19 患者的確診方法，但是PCR 檢測有很多局限性，受各方面條件限制，對實驗室條件要求高、方法檢測陽性率偏低等。ARSCoV-2 的特定S 蛋白和N 蛋白，會刺激機體的免疫系統(tǒng)引起抗體應答，機體最早出現(xiàn)的抗體是IgM， SARS-CoV-2 特異性IgM 抗體多在3-5d 后開始出現(xiàn)陽性，IgG 抗體滴度在恢復期較急性期有4 倍以上升高，若檢測到IgM 和IgG 抗體陽性，可作為COVID-19 的診斷指標之一[6]。由此可知抗體的檢測具有極其重要的價值，抗體檢測可用做新型冠狀病毒核酸檢測陰性疑似病例的補充檢測指標或者疑似診斷病例診斷中與核酸檢測協(xié)同使用。

對出院隔離后核酸檢測為陽性患者進行分析，我們可以看出，此類患者在全部出院患者所占比率非常低，僅為1.23%，沒有之前研究報道那么嚴重，這可能于加強了出院患者的核酸檢測數(shù)量有關，降低了病人檢測的假陰性，降低復陽的可能性。在這些病毒核酸檢測為陽性的患者中IgM90%為陰性，只有2 例病毒IgM 為弱陽性，可能是由于IgM 抗體水平還未降到正常水平。這類人群均為隔離觀察，病毒的2 次感染問題可能性極低，病毒核酸復查為陽性存在主要原因我們分析有下面幾方面的原因：①病人體內(nèi)病毒載量較低，受標本采集方式限制，最好采集肺泡灌洗液進行核酸檢測，有COVID-19 死亡患者病理解剖顯示SARS-CoV-2 病毒僅殘留在尸體肺細胞中，由病毒引起了肺部的實質性病理變化；②患者本人具有基礎性疾病，導致免疫功能低下，而機體病毒沒有真正被清除，引起核酸檢測“復陽”；③受研發(fā)廠家試劑盒影響，試劑盒有缺陷，檢測特異性較低，不能達到臨床的要求.應該選擇超敏方法可能會改善復陽患者樣品中的RNA 陽性檢測，排除假陰性；④在采集標本的過程，采集者沒有嚴格按照操作規(guī)程進行，導致采集的患者標本不合格，檢測結果呈假陰性。

我國應對本次COVID-19 疫情已經(jīng)取得了階段性成果，初步抑制了疫情的發(fā)展，主要的成功經(jīng)驗就是需要控制好傳染性疾病的三要素：傳染源、傳播途徑和易感人群。本文主要的目的就是要分析“復陽”的患者，找出其中規(guī)律性內(nèi)容，進一步加深對SARS-CoV-2 病毒的認知，切斷傳染源。針對“復陽”患者可能產(chǎn)生的原因，我們建議一定要延長檢疫時間，還要增加核酸檢測次數(shù)，并對重點人群如有嚴重基礎疾病或者老年患者進行持續(xù)性的醫(yī)學觀察，選用符合臨床要求的檢測試劑，只有充分認識了SARS-CoV-2 病毒，才能夠有效戰(zhàn)勝該疾病。