梁炎婷 蔣文瓊 鄧敏 陳海波

【摘要】 目的 激光共聚焦顯微鏡下觀察比較不同涂布方式下兩種粘接系統(tǒng)處理牙體粘接面產(chǎn)生納米滲漏的差異性。

方法 按照納入標準選取近一個月內(nèi)拔除的35顆第三磨牙，分別在其頰舌側(cè)制備尺寸一致的箱狀洞形，隨機分為空白對照組（A0組），自酸蝕粘接劑涂布1、2、3次組（B組），全酸蝕粘接系統(tǒng)涂布1、2、3次組（C組），共7組。24 h后觀察并檢測光固化復(fù)合樹脂充填后納米滲漏的長度和形態(tài)的變化。

結(jié)果 B2、C2組產(chǎn)生的納米滲漏值最低（P<0.05）;在相同涂布次數(shù)下，自酸蝕的納米滲漏值均低于全酸蝕粘接系統(tǒng)（P均<0.05）。

結(jié)論 涂布數(shù)量是影響牙體粘接界面封閉性的因素之一，推薦涂布粘接劑2次，有助于減少納米滲漏。

【關(guān)鍵詞】 涂布方式;納米滲漏;粘接系統(tǒng);粘接面封閉性;激光掃描共聚焦顯微鏡

中圖分類號：R783.1 ? 文獻標志碼：A ? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.12.004

【Abstract】 Objective To observe and compare the differences of nanoleakage on the adhesive surface of teeth treated by two adhesive systems under laser confocal microscope with different coating methods.

Methods 35 third molars extracted within one month were selected according to inclusion criteria. Respectively，box-shaped cavities of the same measurement were prepared on the buccal and lingual surface. They were randomly separated into blank control group （AO group）， self-acid adhesive coating 1， 2， 3 times groups （B groups），total acid adhesive coating 1， 2， 3 times groups （C groups）， with a total of 7 groups. The length and the change of morphology of nanoleakage were observed and measured after 24 h of light-cured compounded resin filling.

Results The values of nanoleakage in B2 group and C2 group were the lowest （P<0.05）. Under the same coating times， the nanoleakage values of the self-acid erosion were all lower than those of the total acid corrosion bonding system（all P<0.05）.

Conclusion The number of coating is one of the factors affecting the sealing of tooth bonding interface. It is suggested to apply the adhesive twice to reduce the nanoleakage.

【Key words】 coating method; nanoleakage; adhesive system; adhesive interface sealing; confocal laser scanning microscopy

牙本質(zhì)粘接是微創(chuàng)美學(xué)修復(fù)[1]中不可缺少的一部分。在牙體缺損的病例中，復(fù)合樹脂作為目前應(yīng)用最廣的牙色修復(fù)材料，具有操作靈活、簡單快捷及色度美觀、與自然牙匹配良好等性能優(yōu)點[2]，其臨床操作包括充填、粘接等技術(shù)目前已相對成熟，粘接劑系統(tǒng)的進步也已被口腔醫(yī)師所見證，然而牙本質(zhì)與充填體間粘接界面的封閉性仍是影響樹脂修復(fù)效果的直接原因，封閉不佳易造成修復(fù)失敗[3]，可能由于粘接劑未完全滲透或樹脂不完全聚合而引起的納米滲漏一直沒有得到很好的改善，這也仍是牙體牙髓醫(yī)師及口腔修復(fù)醫(yī)師致力的方向之一?；谡辰臃N類及其處理方式在粘接封閉性能中的主要影響作用[4]，本實驗采用激光掃描共聚焦顯微鏡（CLSM）觀察比較不同涂布數(shù)量下，自酸與全酸粘接系統(tǒng)中充填體與牙體粘接界面產(chǎn)生納米滲漏的差異性，為口腔臨床上進一步合理選擇粘接劑、有效減少納米滲漏提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料和方法

1.1 主要器材

AdperTM Single Bond 2全酸蝕粘接系統(tǒng)、AdperTM Easy One自酸蝕粘接系統(tǒng)、35%磷酸凝膠（美國3M公司）;光固化復(fù)合樹脂（日本幻彩公司）;光固化燈（美國DEMI）;羅丹明B染料（美國Sigma公司）;激光掃描共聚焦顯微鏡（日本 OLYMPUS公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗材料的選擇

采用隨機數(shù)字表選取右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院口腔頜面外科門診于2021年1～3月內(nèi)拔除的第三磨牙35顆，患者年齡18～30歲。納入標準：①牙齒形態(tài)基本正常;②牙體無缺損、無裂紋;③牙根無吸收、無畸形;根尖止點閉合完全。

1.2.2 實驗材料的處理

每顆牙統(tǒng)一于頰舌正中頸部的釉牙骨質(zhì)界冠方0.1 cm處備洞，目砂紙常規(guī)按序調(diào)磨，要求如下：牙合齦徑0.3 cm，近遠中徑0.4 cm，洞深0.2 cm，洞緣斜面45°、寬0.05 cm的箱狀洞形。

1.2.3 方法

上述實驗材料隨機分成7組（每組5顆牙，每顆牙頰舌側(cè)各預(yù)備一洞形，每組共10個樣本），A0組為空白對照組，自酸粘接系統(tǒng)涂1、2、3次分為B1、B2、B3組，全酸粘接系統(tǒng)涂1、2、3次分為C1、C2、C3組，依次進行如下處理：①A0空白對照組：蒸餾水沖洗窩洞內(nèi)表面1 min后干燥;②自酸組：B1、B2、B3組均使用35%磷酸酸蝕牙釉質(zhì)15 s，蒸餾水沖洗1 min后干燥，自酸粘接劑連續(xù)涂布20 s，靜置15 s，弱風(fēng)吹5 s，強光固化10 s;B2、B3組分別重復(fù)上述干燥后的步驟2、3次，最后強光固化10 s;③全酸組：C1、C2、C3組均使用35%磷酸酸蝕牙釉質(zhì)30 s，牙本質(zhì)15 s，蒸餾水沖洗1 min后干燥牙釉質(zhì)，弱風(fēng)吹牙本質(zhì)2 s，全酸粘接劑連續(xù)涂布20 s，靜置15 s，弱風(fēng)吹5 s，強光固化10 s;C2、C3組分別重復(fù)上述弱風(fēng)吹牙本質(zhì)后的步驟2、3次，最后強光固化10 s。復(fù)合樹脂分層充填每個箱狀窩洞，固化20 s并打磨拋光后，于根尖處封閉自凝樹脂，距牙體與樹脂交界處1 mm以外的所有組織表面均勻涂抹兩層指甲油。在37℃水浴條件下的1 g/L羅丹明B異硫氰酸酒精溶液中加入完全干燥后的7組樣本，24 h蒸餾水洗凈后，切取每個預(yù)備洞形平行牙體長軸自頰舌方向的牙體組織2片，目砂紙常規(guī)按序調(diào)磨。

1.2.4 納米滲漏檢測

將實驗切片置于100%相對濕度的共聚焦皿中，通過CLSM觀察切片近遠中向的中點位剖面。CLSM參數(shù)的目鏡為10×，物鏡為Plan Naofluar 20×。測量粘接交界面處每個樣本2個切片的熒光劑滲透長度的均值，即該樣本的納米滲漏的數(shù)值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計軟件進行分析，定量資料服從正態(tài)分布采用（±s）表示，組間總體差異比較采用單因素方差分析（One-way ANOVE），兩兩比較選擇LSD-t分析法，檢驗水準：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié) ?果

2.1 納米滲漏的實驗結(jié)果分析

根據(jù)所得數(shù)據(jù)，各組間納米滲漏值差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。組間兩兩比較：①實驗組與空白組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均<0.01），其納米滲漏值均低于空白組。②自酸組兩兩比較：B1、B3組的納米滲漏值均高于B2組（P均<0.01）;而B1組高于B3組（P<0.01）。③全酸組兩兩比較：C1、C3組的納米滲漏值均高于C2組（P均<0.01）;C1組高于C3組（P<0.01）。④涂布數(shù)量相同時，C1組納米滲漏值高于B1組，C2組高于B2組，C3高于B3組（P均<0.01）。見表1及圖1。

2.2 CLSM觀察納米滲漏形態(tài)與長度

CLSM觀察7組切片可見不同程度熒光劑朝牙本質(zhì)方滲透，熒光帶長度反映納米滲漏數(shù)值，熒光劑越寬長且顏色濃密表示納米滲漏越明顯。見圖2。①A0組：納米滲漏粗長、致密，熒光帶鮮亮。②B1組（圖2-B1）納米滲漏的熒光帶較短且稀薄，寬度適中，熒光帶顏色較為暗淡。③B2組（圖2-B2）納米滲漏的熒光帶最短，最稀少，寬度最小，熒光劑顏色最為暗淡。④B3組（圖2-B3）納米滲漏的熒光帶雖不太連續(xù)，但較長且密而粗大，熒光帶色彩較濃。⑤C1組（圖2-C1）納米滲漏的熒光帶較B1長且密而粗大，相對連續(xù)，熒光帶色彩較B1濃。⑥C2組（圖2-C2）納米滲漏的熒光帶較短，寬度適中，較B2長且粗大，熒光劑顏色較濃。⑦C3組（圖2-C3）納米滲漏的熒光帶較短，寬度適中，較B3長且粗大，相對連續(xù)，熒光劑顏色亦比B3濃。

3 討 ?論

SANO等[5]于1995年首次提出納米滲漏的理論，他在電子顯微鏡中發(fā)現(xiàn)了充填材料與牙本質(zhì)粘接界面混合層底部存在納米尺度的微小滲入，其原因可能是脫礦與滲透間存在差異。染色法因其價格實惠、操作簡便、高敏感性等優(yōu)點，最常用于納米滲漏的研究[6]。本文所采用的羅丹明B即為常見的染色劑之一。納米滲漏作為一種特殊的滲漏，亦成為考驗粘接效果及粘接強度的重要標準之一[7]。由此，減少納米滲漏有助于提高樹脂修復(fù)的遠期穩(wěn)定性。而粘接劑的種類及粘接面的處理方式可能對樹脂與牙體粘接界面封閉性的影響最大。關(guān)于封閉性更佳的粘接系統(tǒng)種類目前尚無報道，粘接最佳涂布次數(shù)亦仍無定論。本實驗擬采用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察并比較不同涂布次數(shù)對不同粘接系統(tǒng)牙本質(zhì)粘接界面納米滲漏的影響。

粘接界面封閉性能與固化方式、涂抹方向、涂布數(shù)量等多因素有關(guān)。楊文麗等[8]研究發(fā)現(xiàn)連續(xù)同向涂布的方式可使粘接劑滲透充分，進而達到良好的粘接效果。故本研究選用同向連續(xù)涂布粘接劑的方法，得出以下結(jié)果：無論是何種粘接系統(tǒng)，涂布2次組產(chǎn)生的納米滲漏值均比其他組次的小，1次組的數(shù)值最大?？赡艿脑蚴牵阂环矫?，氣泡的出現(xiàn)、分布不均勻等現(xiàn)象常因僅僅的1層粘接劑所導(dǎo)致，涂布1次以上時可將多層粘接劑疊加在一起，彌補缺漏之處，減少不完全滲透入牙本質(zhì)的情況;另一方面，由于自酸粘接系統(tǒng)中的含水成分及牙本質(zhì)的濕粘接特性，僅涂布1次的方式亦會使得樹脂粘接單體無法充分置換出水分[9]，產(chǎn)生多孔的納米通道，且此時微拉伸強度顯著低于多次涂布[10]，嚴重影響粘接強度和封閉性。而當涂布數(shù)量增加為2次時，可及時補充并建立均勻有效的混合層及高質(zhì)量的樹脂突，進一步減少了納米滲漏。這也與文獻[11～12]的結(jié)論一致。同時學(xué)者們也認為相比于重涂時可能會去除部分表面粘接劑的情況，使用輕力涂布粘接劑2次較理想。兩種粘接劑涂布3次的納米滲漏值較涂布2次增加，原因可能是：涂布數(shù)量越多，粘接劑層可能越厚重，當受到外界刺激時，該界面聚縮形成的不穩(wěn)定團塊會發(fā)生脫落現(xiàn)象，間隙出現(xiàn)，造成納米滲漏增多[11]。

在相同涂布次數(shù)下，兩種粘接系統(tǒng)數(shù)據(jù)顯示均形成納米滲漏，自酸粘接系統(tǒng)沒有全酸蝕的明顯，這可能與粘接劑的滲透方式有關(guān)。酸蝕脫礦與樹脂單體的滲透在全酸粘接系統(tǒng)中分為兩步完成，樹脂單體滲入困難，造成牙本質(zhì)脫礦的深度大于單體滲入的深度，無效封閉的粘接面積增大，易產(chǎn)生納米滲漏。而自酸蝕粘接系統(tǒng)則相反，酸蝕與滲透的同步完成使得粘接劑可在牙本質(zhì)膠原纖維網(wǎng)與牙本質(zhì)小管間的空隙中充分滲入后，與牙本質(zhì)發(fā)生緊密接觸，水分子難以進入其中，所產(chǎn)生的納米滲漏則較少。這與文獻[13～14]的研究成果相似。此外，為了提高樹脂修復(fù)的遠期穩(wěn)定性，學(xué)者們開展了大量的試驗，發(fā)現(xiàn)采用乙醇濕粘接、氯己定增量[15]，以及使用脫敏劑、疏水涂層等預(yù)處理牙本質(zhì)表面可有效減少納米滲漏;同時鎳激光照射、鉺激光備洞[16]、防水型牙本質(zhì)生物粘接劑也是研究熱點之一。而這些新成果的長期作用及可靠性仍待進一步探討。

綜上所述，涂布數(shù)量對牙體粘接界面封閉性影響顯著，推薦涂布粘接劑2次，有助于減少納米滲漏，增強牙本質(zhì)粘接界面的封閉性能;臨床上可根據(jù)需要合理選擇粘接劑種類;同時，應(yīng)提高對每一個治療步驟的重視程度，系統(tǒng)化、規(guī)范性的操作是預(yù)防牙體與充填體邊緣納米滲漏的重要前提。

參 考 文 獻

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（收稿日期：2021-09-23 修回日期：2021-11-22）

（編輯：梁明佩）