孫秀錦 ，包海鷹 **

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方食用菌資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 長(zhǎng)春 130118；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長(zhǎng)春 130118）

紫丁香蘑Lepista nuda（Bull.）Cooke又名紫晶蘑、近裸香蘑，隸屬于擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota）蘑菇綱（Agaricomycetes） 蘑菇目（Agaricales） 口蘑科（Tricholomataceae） 香蘑屬 （Lepista）[1-2]。主要分布于東北、西北、華中、內(nèi)蒙古等地區(qū)[3]。其子實(shí)體具有特殊的氣味，這種氣味被稱(chēng)為“六六六粉”氣味，因這一特性而被廣為人知[4]。紫丁香蘑營(yíng)養(yǎng)豐富，富含大量人體必須氨基酸、維生素及礦物質(zhì)元素，具有一定藥用價(jià)值，能抗菌、抗病毒及抗腫瘤[5]，是一種重要野生食用菌。Mercan等[6]和Yamac等[7]研究表明，紫丁香蘑提取物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等具有顯著的抑菌活性。Wu等[8]從野生紫丁香蘑子實(shí)體中分離的金屬蛋白酶表現(xiàn)出抗HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制活性。此外該菌子實(shí)體提取物對(duì)小白鼠肉瘤和艾氏腹水癌的抑制率高達(dá)90%以上，且能調(diào)節(jié)機(jī)體正常糖代謝，促進(jìn)神經(jīng)傳導(dǎo)[4]。

目前有關(guān)紫丁香蘑藥理方面的研究較多，而國(guó)內(nèi)外對(duì)其化學(xué)成分的研究鮮有報(bào)道[5]。高錦明等[9]從紫丁香蘑子實(shí)體中分離得到4個(gè)化合物，類(lèi)型為神經(jīng)酰胺類(lèi)、麥角甾醇類(lèi)和脂肪酸類(lèi)；Yaoita等[10]從紫丁香蘑中分離得到1個(gè)神經(jīng)酰胺類(lèi)成分；No?l-Suberville等[11]表明紫丁香蘑含有1種脂肪酸和3種芳香化合物。關(guān)于特殊的“六六六粉”氣味則鮮見(jiàn)報(bào)道。為進(jìn)一步分析紫丁香蘑的化學(xué)成分，對(duì)其子實(shí)體石油醚和乙酸乙酯提取物的化學(xué)成分進(jìn)行研究，分離得到19個(gè)化合物和具有特殊“六六六粉”氣味的組分A。通過(guò)應(yīng)用GC-MS技術(shù)對(duì)組分A的化學(xué)成分進(jìn)行分析，以期為更合理地開(kāi)發(fā)和利用紫丁香蘑藥用資源提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

試驗(yàn)用紫丁香蘑（Lepista nuda） 子實(shí)體購(gòu)自阿爾山蘑菇市場(chǎng)，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)菌物研究所圖力古爾教授鑒定為紫丁香蘑，憑證標(biāo)本保存于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)菌物標(biāo)本館（標(biāo)本號(hào)HMJAU-54793）。

Bruker-500M AVIII核磁共振波譜儀，瑞士布魯克公司；5975型GC-MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國(guó)安捷倫公司；Finnigan-MAT.LCQ型質(zhì)譜儀，F(xiàn)innigan公司；CP214型電子天平，奧豪斯儀器有限公司；柱色譜硅膠和薄層硅膠板，青島海洋化工有限公司；所用試劑均為分析純，北京化工廠。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 提取與分離

紫丁香蘑干燥子實(shí)體3 kg，粉碎后依次用石油醚10 L（60℃～90℃）、二氯甲烷10 L和乙酸乙酯10 L回流提取3次，每次10 h。減壓回收溶劑，分別得到浸膏21.6 g，22.9 g和44.6 g。

石油醚提取物經(jīng)正相硅膠柱色譜，以石油醚∶乙酸乙酯=500∶1～0∶1梯度洗脫，TLC檢測(cè)合并得到10個(gè)流分（Fr.1～Fr.10）。Fr.10經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚∶乙酸乙酯=20∶1～1∶1洗脫，反復(fù)重結(jié)晶后得到化合物1共19 mg。Fr.3經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚∶乙酸乙酯=150∶1～30∶1反復(fù)洗脫后得到組分A，剩余部分經(jīng)制備薄層色譜得到化合物2共10 mg、化合物3共7 mg。Fr.5經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚∶乙酸乙酯=80∶1～10∶1反復(fù)洗脫后經(jīng)制備薄層色譜得到化合物4共8 mg。Fr.6經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚∶乙酸乙酯=50∶1～5∶1反復(fù)洗脫后經(jīng)制備薄層色譜得到化合物5共12 mg和化合物6共14 mg。Fr.9經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇=150∶1～50∶1反復(fù)洗脫及重結(jié)晶得到化合物7共26 mg、化合物8共22 mg、化合物9共23 mg、化合物10共18 mg。Fr.8經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶得到化合物11共28 mg。

乙酸乙酯提取物經(jīng)正相硅膠柱色譜，以二氯甲烷∶甲醇=500∶1～0∶1梯度洗脫，TLC檢測(cè)合并得7個(gè)流分（Fr.1～Fr.7）。Fr.6經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶得到化合物12共126 mg。Fr.3經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇=130∶1～50∶1反復(fù)洗脫后得到化合物 13共 20 mg。Fr.4經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇=50∶1～20∶1洗脫及重結(jié)晶后得到化合物14共26 mg。Fr.5經(jīng)硅膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇=40∶1～10∶1反復(fù)洗脫后得到化合物15共15 mg、化合物16共19 mg。Fr.7經(jīng)硅膠柱色譜，三氯甲烷∶甲醇=20∶1～1∶1反復(fù)洗脫后經(jīng)制備薄層色譜得到化合物17共15 mg、化合物18共18 mg、化合物19共14 mg。

1.2.2 GC-MS分析

采用美國(guó)安捷倫公司氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)具有“六六六粉”氣味的組分A進(jìn)行分析。

1） 氣相色譜條件

HP-5MS型毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），初始溫度50℃保持3 min，然后以10℃·min-1的速度升溫至250℃，再以15℃·min-1的速度升溫至280℃，載氣為高純氦氣，載氣流量1.0 mL·min-1，進(jìn)樣量為 1 μL。

2） 質(zhì)譜條件

EI離子源，電力電壓70 eV，離子源溫度230℃，接口溫度280℃，四級(jí)桿溫度150℃，掃描范圍20 m·z-1～600 m·z-1。

1.2.3 主體揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的評(píng)定

采用相對(duì)氣味活度值ROAV（relative odor activity value，ROAV） 評(píng)價(jià)各揮發(fā)性成分對(duì)樣品總體風(fēng)味的貢獻(xiàn)[12]。定義對(duì)樣品風(fēng)味貢獻(xiàn)最大的組分ROAV為100，則其他揮發(fā)性成分的ROAV小于100，按下式計(jì)算各揮發(fā)性成分的ROAV：

式中：Cri、Ti分別為揮發(fā)性成分的百分含量和氣味閾值；Crstan、Tstan分別為對(duì)樣品整體風(fēng)味貢獻(xiàn)最大組分的百分含量和氣味閾值。ROAV≥1，說(shuō)明該物質(zhì)為樣品的主體風(fēng)味成分，且在一定范圍內(nèi)，ROAV越大說(shuō)明該物質(zhì)對(duì)總體風(fēng)味貢獻(xiàn)越大；0.1≤ROAV＜1，說(shuō)明該物質(zhì)對(duì)整體風(fēng)味有重要修飾作用[13]。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

從紫丁香蘑子實(shí)體石油醚和乙酸乙酯提取物中共分離得到19個(gè)化合物，分別鑒定如下，括號(hào)內(nèi)溶劑表示本化合物能在這種溶劑中全部溶解。

化合物1：白色針狀晶體（氯仿）；易溶于石油醚、氯仿；熔點(diǎn)178℃～179℃；EI-MS m/z：427[MH]-；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ 6.50：（1H，d，J=8.5 Hz，H-7），6.24 （1H，d，J=8.5 Hz，H-6），5.22 （1H，dd，J=15.3，7.5 Hz，H-23），5.15（1H，dd，J=15.3，8.3 Hz，H-22），3.97（1H，m，H-3），0.88 （3H，s，H-18），1.09 （3H，s，H-19），1.00（3H，d，J=6.6 Hz，H-21），0.83（3H，d，J=5.0 Hz，H-26），0.81 （3H，d，J=5.0 Hz，H-27），0.91 （3H，d，J=5.3 Hz，H-28）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：135.41（C-6），135.20（C-22），132.33（C-23），130.75（C-7），82.15（C-5），79.42（C-8），66.47（C-3），56.23（C-17），51.70 （C-14），51.13 （C-9），44.57 （C-13），42.78 （C-24），39.70 （C-20），39.36 （C-12），36.98 （C-4），36.96 （C-10），34.71 （C-1），33.07（C-25），30.14（C-2），28.62（C-16），23.41（C-11），20.88 （C-21），20.63 （C-15），19.93 （C-27），19.63 （C-26），18.17 （C-19），17.55 （C-28），12.87（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道一致，故鑒定化合物 1為 5α,8α-表二氧-（22E,24R） -麥角甾-6,22-二烯-3β-醇。

化合物2：無(wú)色油狀液體（氯仿）；易溶于氯仿、乙酸乙酯；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.00（1H，m，H-16），2.25（2H，t，J=7.5 Hz，H-13），1.61 （2H，t，J=7.3 Hz，H-15），1.31～1.20（26H，m，H-2～12，17，18），0.88（3H，t，J=6.8 Hz，H-1）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：173.33 （C-14），67.21 （C-16），34.70 （C-13），31.90（C-3），29.77（C-5），29.65（C-6），29.61（C-7），29.57（C-4），29.44（C-9），29.32（C-10），29.24 （C-11），29.10 （C-8），25.02 （C-12），22.65 （C-2），21.80 （C-17），21.64 （C-18），14.04（C-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道一致，故鑒定化合物2為肉豆蔻酸異丙酯。

化合物3：無(wú)色油狀液體（氯仿）；易溶于氯仿、甲醇；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.00（1H，m，H-18），2.25（2H，t，J=7.5 Hz，H-15），1.61 （2H，t，J=7.3 Hz，H-17），1.33～1.20（30H，m，H-2～14，19，20），0.88（3H，t，J=6.9 Hz，H-1）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：173.29 （C-16），67.19 （C-18），34.68 （C-15），31.90（C-3），29.66（C-4），29.66（C-5），29.65（C-6），29.63 （C-7），29.62 （C-8），29.61 （C-9），29.57 （C-10），29.44 （C-11），29.33 （C-12），29.24 （C-13），29.10 （C-2），25.02 （C-14），22.65（C-20），21.79（C-19），14.03（C-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]報(bào)道一致，故鑒定化合物3為棕櫚酸異丙酯。

化合物4：無(wú)色油狀液體（氯仿）；易溶于氯仿、乙酸乙酯；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：2.41（2H，t，J=7.5 Hz，H-3），2.13（3H，s，H-1），1.57～1.27 （14H，m，H-4～10），0.88 （3H，t，J=6.9 Hz，H-11）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：209.07 （C-2），43.73 （C-3），31.81 （C-9），29.70（C-5），29.37 （C-6），29.35 （C-7），29.20 （C-8），29.14 （C-1），23.83 （C-4），22.59 （C-10），13.99（C-11）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報(bào)道一致，故鑒定化合物4為2-十一烷酮。

化合物5：無(wú)色油狀液體（氯仿）；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：7.70（2H，dt，J=7.4，3.7 Hz，H-3，6），7.50 （2H，dd，J=5.8，3.3 Hz，H-4，5），4.36 （4H，q，J=7.2 Hz，H-1′，1″），1.35（6H，t，J=7.2 Hz，H-2′，2″）；13C NMR （126 MHz，CDCl3）δ：167.48（C=O），132.23（C-1，2），130.87（C-4，5），128.74 （C-3，6），61.47 （C-1′，1″），13.99（C-2′，2″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道一致，故鑒定化合物5為鄰苯二甲酸二乙酯。

化合物6：無(wú)色油狀液體（氯仿）；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：7.71（2H，dd，J=5.7，3.3 Hz，H-3，6），7.50 （2H，dd，J=5.7，3.3 Hz，H-4，5），4.31 （4H，t，J=6.7 Hz，H-1′，1″），1.72（4H，m，H-2′，2″），1.44 （4H，m，H-3′，3″），0.96 （6H，t，J=7.4 Hz，H-4′，4″）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：167.58（C=O），132.33（C-1，2），130.84 （C-4，5），128.77 （C-3，6），65.43（C-1′，1″），30.55（C-2′，2″），19.13（C-3′，3″），13.63（C-4′，4″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn) [18]報(bào)道一致，故鑒定化合物6為鄰苯二甲酸二丁酯。

化合物7：白色粉末狀固體（氯仿）；易溶于氯仿、甲醇；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：2.34（2H，t，J=7.5 Hz，H-15），1.63（2H，m，H-14），1.26（24H，m，H-2～13），0.88（3H，t，J=6.8 Hz，H-1）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：180.14（C-COOH），34.06（C-15），31.92（C-3），29.68（C-5），29.66（C-6），29.65（C-7），29.65（C-8），29.63（C-9），29.58（C-10），29.43（C-4），29.35 （C-11），29.23 （C-12），29.06 （C-13），24.68（C-14），22.68（C-2），14.08（C-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道一致，故鑒定化合物7為軟脂酸。

化合物8：白色粉末狀固體（氯仿）；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：2.34（2H，t，J=7.5 Hz，H-17），1.63（2H，m，H-16），1.26（28H，m，H-2～15），0.88 （3H，t，J=6.9 Hz，H-1）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：180.45（C-COOH），34.11（C-17），31.93（C-3），29.70（C-5），29.68（C-6），29.67 （C-7），29.65 （C-8），29.64 （C-9，10），29.59 （C-11，12），29.43 （C-4），29.36 （C-13），29.23 （C-14），29.06 （C-15），24.67 （C-16），22.68（C-2），14.07（C-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]報(bào)道一致，故鑒定化合物8為硬脂酸。

化合物9：白色粉末狀固體（氯仿）；易溶于氯仿、甲醇，微溶于石油醚；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.34（2H，m，H-17，18），2.35（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），2.01 （4H，m，H-16，19），1.63（2H，m，H-3），1.37～1.17（36H，m，H-4～15，20～25），0.88 （3H，t，J=6.9 Hz，H-26）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：179.35（CCOOH），130.03 （C-17），129.73 （C-18），33.92（C-2），31.92（C-16），29.76（C-19），29.69（C-3），29.67 （C-4），29.66 （C-5），29.63 （C-6），29.58（C-7），29.51（C-8），29.43（C-9），29.35（C-10），29.32 （C-11），29.31 （C-12），29.23（C-13），29.13 （C-14），29.06 （C-15），29.03 （C-20），27.22 （C-21），27.15 （C-22），24.69 （C-23），24.67（C-24），22.68（C-25），14.09（C-26）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]報(bào)道一致，故鑒定化合物9為順-17-二十六碳烯酸。

化合物10：白色粉末狀固體（氯仿）；易溶于氯仿、甲醇，微溶于石油醚；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.35（2H，m，H-15，16），2.35（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），2.02 （4H，m，H-14，17），1.27（32H，m，H4～13，18～23），0.88（3H，t，J=6.8 Hz，H-24），1.63（2H，m，H-3）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：178.69（C-COOH），130.03（C-15），129.73（C-16），33.82 （C-2），31.92（C-14），31.90 （C-17），29.76 （C-3），29.67 （C-4），29.63（C-5），29.58（C-6），29.51（C-7），29.43（C-8），29.35（C-9），29.32（C-10），29.23（C-11），29.13 （C-12），29.06 （C-13），29.03 （C-18），27.22 （C-19），27.15 （C-20），24.70 （C-21），24.68（C-22），22.68（C-23），14.09（C-24）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[22]報(bào)道一致，故鑒定化合物10為順-15-二十四碳烯酸。

化合物11：白色針狀晶體（氯仿）；薄層檢測(cè)在紫外燈波長(zhǎng)254 nm下有吸收，10%H2SO4乙醇溶液顯色為紫色斑點(diǎn)；與麥角甾醇對(duì)照品薄層Rf一致，混合后熔點(diǎn)不下降，故鑒定化合物11為麥角甾醇。

化合物12：無(wú)色針狀晶體（甲醇）；易溶于甲醇，不溶或難溶于石油醚、乙酸乙酯；1H NMR（500 MHz，D2O） δ：5.73（4H，s）；13C NMR （126 MHz，D2O） δ：162.81。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]報(bào)道一致，故鑒定化合物12為脲。

化合物13：白色粉末狀固體（氯仿）；熔點(diǎn)138℃～140℃；易溶于氯仿、甲醇；EI-MS m/z：414[M+H]+；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.35（1H，d，J=5.1 Hz，H-6），3.55 （1H，m，H-3），1.01（3H，s，H-19），0.92（3H，d，J=6.5 Hz，H-21），0.83 （3H，s，H-26），0.80 （3H，s，H-27），0.84（3H，s，H-29），0.68（3H，s，H-18）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：37.27（C-1），31.61（C-2），71.79（C-3），42.25（C-4），140.76（C-5），121.69 （C-6），31.92 （C-7），31.97 （C-8），50.16（C-9），36.51（C-10），21.09（C-11），39.80（C-12），42.61 （C-13），56.78 （C-14），24.30（C-15），29.70 （C-16），56.09 （C-17），11.86 （C-18），19.06 （C-19），19.81 （C-20），18.79 （C-21），36.15 （C-22），26.14 （C-23），45.86 （C-24），29.19 （C-25），19.39 （C-26），20.51 （C-27），23.09（C-28），11.98（C-29）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24]報(bào)道一致，故鑒定化合物13為β-谷甾醇。

化合物14：白色針狀晶體（氯仿）；熔點(diǎn)165℃～167℃；易溶于氯仿、丙酮、甲醇；EI-MS m/z：427[M+H]+；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：6.50（1H，d，J=8.4Hz，H-7），6.28（1H，d，J=8.4 Hz，H-6），5.43 （1H，dd，J=5.9，1.9 Hz，H-11），5.24 （1H，dd，J=15.2，6.9 Hz，H-23），5.15 （1H，dd，J=15.2，7.7 Hz，H-22），4.00（1H，m，H-3），1.09（3H，s，H-19），1.00（3H，d，J=6.6 Hz，H-21），0.92 （3H，d，J=6.8 Hz，H-28），0.84 （3H，d，J=4.8Hz，H-27），0.82（3H，d，J=4.8 Hz，H-26），0.74（3H，s，H-18）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：142.60（C-9），135.42（C-6），135.20（C-22），132.32（C-23），130.74 （C-7），119.70 （C-11），82.70 （C-5），78.35 （C-8），66.47 （C-3），55.83 （C-17），48.16（C-14），43.62 （C-13），42.78 （C-24），41.20（C-12），39.70 （C-20），37.97 （C-10），36.06 （C-4），33.07 （C-25），32.59 （C-1），30.57 （C-2），28.62（C-16），25.54 （C-19），20.87 （C-15），20.62（C-21），19.93 （C-27），19.63 （C-26），17.55 （C-28），12.87（C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[25]報(bào)道一致，故鑒定化合物 14為 （22E,24R） -5α,8α-過(guò)氧化麥角甾-6,9（11）,22-三烯-3β-醇。

化合物15：白色粉末狀固體（甲醇）；微溶于氯仿、甲醇，不溶或難溶于石油醚；1H NMR（500 MHz，D2O） δ：3.81 （2H，dd，J=11.8，2.7 Hz，H-1a，6a），3.75 （2H，d，J=8.5 Hz，H-3，4），3.70 （2H，td，J=8.5，7.3，2.7 Hz，H-2，5），3.62 （2H，dd，J=11.7，6.1 Hz，H-1b，6b）；13C NMR （126 MHz，D2O） δ：70.90（C-3，4），69.33（C-2，5），63.25 （C-1，6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[26]報(bào)道一致，故鑒定化合物15為D-甘露醇。

化合物16：白色針狀晶體（甲醇）；易溶于甲醇，不溶或難溶于石油醚；1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：9.08（1H，d，J=1.5 Hz，H-2），8.79（1H，dd，J=4.8，1.7 Hz，H-6），8.27（1H，dt，J=7.9，1.9 Hz，H-4），7.54 （1H，m，H-5）；13C NMR（126 MHz，DMSO-d6）δ：166.71（CCOOH），153.71（C-2），150.66（C-6），137.41（C-4），127.04（C-3），124.24（C-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[27]報(bào)道一致，故鑒定化合物16為煙酸。

化合物17：白色粉末狀固體（甲醇）；熔點(diǎn)234℃～236℃；略溶于甲醇、氯仿等，不溶或難溶于石油醚；EI-MS m/z：267[M+H]+；1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：8.35（1H，s，H-8），8.15（1H，s，H-2），7.34（2H，s，N-H），5.89（1H，m，H-1′），5.44 （1H，d，J=6.1 Hz，2′-OH），5.18 （1H，s，3′-OH），4.63 （1H，m，H-2′），4.17（1H，m，H-3′），3.98（1H，m，H-4′），3.69（1H，m，H-5a′），3.57（1H，m，H-5b′）；13C NMR（126 MHz，DMSO-d6）δ：156.64（C-6），152.86 （C-2），149.56 （C-4），140.40 （C-8），119.85（C-5），88.42（C-1′），86.38（C-4′），73.94（C-2′），71.15（C-3′），62.16（C-5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[28]報(bào)道一致，故鑒定化合物17為腺嘌呤核苷酸。

化合物18：白色針狀晶體（氯仿）；易溶于氯仿、甲醇；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：8.12（2H，d，J=7.8 Hz，H-2，6），7.60（1H，t，J=7.8 Hz，H-4），7.46 （2H，t，J=7.8 Hz，H-3，5）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：172.60（C-COOH），133.83 （C-4），130.25 （C-2，6），129.40 （C-1），128.50（C-3，5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[29]報(bào)道一致，故鑒定化合物18為苯甲酸。

化合物19：白色針狀晶體（氯仿）；易溶于氯仿、甲醇；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ：7.02（1H，d，J ＝ 8.4 Hz，H-5），7.53 （1H，m，H-6），6.94 （1H，t，J ＝ 7.6 Hz，H-7），7.94 （1H，dd，J＝8.0，1.5 Hz，H-8）；13C NMR（126 MHz，CDCl3）δ：174.87 （C-COOH），162.23 （C-2），137.01 （C-4），130.96 （C-6），117.86 （C-3），119.61 （C-5），111.31（C-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[30]報(bào)道一致，故鑒定化合物19為2-羥基苯甲酸。

2.2 組分A揮發(fā)性成分分析

對(duì)組分A的總離子流圖進(jìn)行分析，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)進(jìn)行鑒定，組分A的GC-MS分析圖譜見(jiàn)圖1，組分A的化學(xué)成分見(jiàn)表1。

表1 組分A的化學(xué)成分Tab.1 Chemical constituents of A

由圖1及表1可知，共鑒定出16種化合物。包括脂肪酸類(lèi)2種（2.08%）、酯類(lèi)6種（10.37%）、醇類(lèi) 1種 （2.74%）、酮類(lèi) 1種 （0.29%）、烷烴類(lèi) 4種（6.86%） 和芳香族類(lèi)2種（19.90%）。其中芳香族類(lèi)鄰苯二甲酸二丁酯（10.22%） 和鄰苯二甲酸二異辛酯（9.68%） 含量最高，其后依次為2-丙烯酸，3-（4-甲氧基苯基），2-乙基己基酯（2.92%）、亞油酸丙酯 （2.88%）、三十七烷醇 （2.74%）、三十六烷（2.66%） 和亞油酸乙酯 （1.73%） 等。

組分A中含有多種揮發(fā)性成分，但是只有一小部分對(duì)組分A的氣味有重要貢獻(xiàn)，還有一些成分可對(duì)整體氣味進(jìn)行修飾[12]。通常情況下，揮發(fā)性化合物對(duì)食用菌香氣的貢獻(xiàn)由其含量、氣味閾值共同決定，一些含量低但氣味閾值也很低的化合物也可能對(duì)食用菌的整體風(fēng)味起重要作用[13]。組分A揮發(fā)性成分的ROAV見(jiàn)表2。

表2 組分A中的揮發(fā)性成分相對(duì)氣味活度值Tab.2 ROAV of volatile compounds in the A

由表2可知，組分A揮發(fā)性成分中主體揮發(fā)性香味成分（ROAV≥1）有1種，為鄰苯二甲酸二丁酯。鄰苯二甲酸二丁酯微具有芳香氣味[33]，亞油酸、十六烷酸、十六酸乙酯對(duì)組分A的氣味具有極微小的修飾作用。另外，有部分揮發(fā)性化合物因?yàn)闊o(wú)法查詢(xún)到相應(yīng)的感覺(jué)閾值而未作具體分析。

3 討論

目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于紫丁香蘑的研究主要集中在菌絲生物學(xué)特性、抗菌及抗氧化活性等方面，而化學(xué)成分研究較為薄弱。通過(guò)從紫丁香蘑子實(shí)體的石油醚提取物和乙酸乙酯提取物中分離得到了19個(gè)化合物，分別為化合物1，即5α，8α-表二氧-（22E，24R） -麥角甾-6，22-二烯-3β-醇、化合物2肉豆蔻酸異丙酯、化合物3棕櫚酸異丙酯、化合物4 2-十一烷酮、化合物5鄰苯二甲酸二乙酯、化合物6鄰苯二甲酸二丁酯、化合物7軟脂酸、化合物8硬脂酸、化合物9順-17-二十六碳烯酸、化合物10順-15-二十四碳烯酸、化合物11麥角甾醇、化合物12脲、化合物13 β-谷甾醇、化合物14（22E，24R） -5α，8α-過(guò)氧化麥角甾-6，9（11），22-三烯-3β-醇、化合物15 D-甘露醇、化合物16煙酸、化合物17腺嘌呤核苷酸、化合物18苯甲酸和化合物19 2-羥基苯甲酸。除化合物1、化合物8、化合物11外，其他化合物均為首次從紫丁香蘑子實(shí)體中分離得到。此外，除化合物1、化合物8、化合物11、化合物13，其他化合物均為首次從香蘑屬中獲得。

紫丁香蘑因具有特殊的“六六六粉”氣味而備受人們關(guān)注。Mau等[34]研究發(fā)現(xiàn)具有濃烈氣味的1-辛烯-3-醇是食用菌的特征性風(fēng)味物質(zhì)。在分離純化過(guò)程中得到了具有“六六六粉”氣味的組分A，對(duì)其用GC-MS方法進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示該組分主要含有16種化合物，包括脂肪酸類(lèi)2種（2.08%）、酯類(lèi)6種（10.37%）、酮類(lèi)1種（0.29%）、烷烴類(lèi)4種（6.86%）、芳香族類(lèi)2種 （12.98%） 和醇類(lèi)1種（9.68%）。這16種化合物均可揮發(fā)出香味，但是本次研究在組分A中并未檢測(cè)到1-辛烯-3-醇。1-辛烯-3-醇可揮發(fā)出濃烈的蘑菇氣味[13]，但并非單純的“六六六粉”氣味。采用相對(duì)氣味活度值ROAV評(píng)價(jià)各揮發(fā)性成分對(duì)組分A總體風(fēng)味的貢獻(xiàn)，結(jié)果表明鄰苯二甲酸二丁酯為組分A的主體揮發(fā)性香味成分，其他揮發(fā)性成分對(duì)組分A的氣味起到微弱修飾作用，鄰苯二甲酸二丁酯普遍存在于木耳等膠質(zhì)菌中，具有光敏毒性[35]。然而有部分揮發(fā)性化合物因?yàn)闊o(wú)法查詢(xún)到相應(yīng)的感覺(jué)閾值而未作具體分析，其中鄰苯二甲酸二異辛酯和鄰苯二甲酸二丁酯結(jié)構(gòu)類(lèi)似，閾值大小可能也相近，另外一般認(rèn)為酮類(lèi)成分閾值較低[12]，所以6,10,14-三甲基-2-十五烷酮的閾值可能較低，因此也可能對(duì)組分A的風(fēng)味具有重要貢獻(xiàn)。故本研究認(rèn)為紫丁香蘑的“六六六粉”氣味是鄰苯二甲酸二丁酯與眾多成分相互作用的結(jié)果，而具有重要貢獻(xiàn)的其他成分還有待進(jìn)一步研究。