韓 雪， 曾慶鴻， 牛敏敏， 常凡群，孔 嬌， 楊麗麗， 宋智琴， 劉 海， 吳明開(kāi)*

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 現(xiàn)代中藥材研究所/貴州省農(nóng)作物品種資源研究所， 貴州 貴陽(yáng) 550006； 2.安順學(xué)院， 貴州 安順 561000； 3.貴州省農(nóng)業(yè)科技發(fā)展中心， 貴州 貴陽(yáng) 550006； 4.貴州省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 貴州 貴陽(yáng) 550006)

白及(Bletillastriata)為傳統(tǒng)名貴中藥材，歷代本草以及《中國(guó)藥典》均有收錄[1-3]，具有收斂止血，養(yǎng)肺生津的功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，白及還具有消腫生肌功效，用于內(nèi)外出血諸證及癰腫、燙傷、手足皸裂等[4-8]。一直以來(lái)白及依賴(lài)野生資源，在大肆采挖后野生資源稀缺，而貴州省作為白及的道地產(chǎn)區(qū)，近幾年白及種植面積達(dá)6 000余hm2，占全國(guó)種植面積的70%以上。貴州省各地均適合種植白及，種植面積廣，因此黔產(chǎn)白及具有很高的研究?jī)r(jià)值。

硫酸苯酚法作為多糖的常用方法，經(jīng)常用于中藥中多糖成分含量測(cè)定[9]。多糖成分一直以來(lái)被認(rèn)為是白及的主要有效成分[10-12]，可為白及質(zhì)量評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)，對(duì)貴州省內(nèi)不同產(chǎn)地的白及間多糖成分差異研究，揭示其差別，為鮮品白及的質(zhì)量控制評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 白及 白及塊莖由國(guó)家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品“安龍白及”種子經(jīng)組培快繁、大棚馴化獲得白及馬鞍型馴化苗，2017年進(jìn)行大田移栽于貴州義龍新區(qū)龍廣鎮(zhèn)、安龍縣、紅花崗區(qū)、施秉縣、普安縣、平塘縣，安徽省樅陽(yáng)縣，2020年7月采集以上各基地的白及塊莖。

1.1.2 儀器 HP8453型紫外分光光度計(jì)，數(shù)顯恒溫水浴鍋 (上海梅香儀器有限公司)。

1.1.3 試藥 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)為P-012-140730)購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，苯酚、硫酸均為分析純，超純水為自制。

1.2 方法

1.2.1 樣品的制備 將100 g白及切碎至大小均勻的顆粒，隨機(jī)取2份，每份取2 g，加60 mL純水，水浴90℃回流2 h后補(bǔ)足損失液體，取20 mL提取液，加20 mL無(wú)水乙醇，離心后取白色的沉淀，用純水溶解后定容至100 mL，即為供試品溶液。取供試品1.0 mL，平行3份，分別加入5%苯酚溶液1.0 mL，震蕩混勻后各加濃硫酸6.0 mL，迅速震蕩混勻，于室溫放置30 min后測(cè)定490 nm處吸光度。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 將葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品置于105℃的干燥箱中干燥至恒重，待冷卻后用分析天平稱(chēng)取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，將其置于100 mL容量瓶中，加蒸餾水溶解稀釋至刻度線(xiàn)，充分振搖，搖勻后即得。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 分別取標(biāo)準(zhǔn)品溶液0 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL、0.7 mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入純水1.0 mL、0.9 mL、0.8 mL、0.7 mL、0.6 mL、0.5 mL、0.4 mL、0.3 mL后，再各加5%苯酚溶液1.0 mL，震蕩混勻后各加濃硫酸6.0 mL，迅速震蕩混勻，于室溫放置30 min后在490 nm處測(cè)定吸光度。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

所得數(shù)據(jù)分別以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和吸光度為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程為y=12.512x+0.001 72，r=0.998 299(圖1)。

2.2 鮮品白及多糖含量

通過(guò)供試品的吸光度，得到不同產(chǎn)地鮮品白及多糖的含量，其中貴州安龍白及的多糖含量最高，達(dá)23.20%；安徽省樅陽(yáng)縣白及次之，為21.65%；而貴州普安縣(19.29%)、平塘縣(17.08%)、紅花崗區(qū)(15.84%)、義龍新區(qū)龍廣鎮(zhèn)(12.23%)的白及均高于貴州施秉縣白及(11.70%)。

3 小結(jié)

貴州不同產(chǎn)地鮮品白及的多糖含量差異較大，其中安龍白及的多糖含量最高，達(dá)23.20%；最低的為施秉白及，僅11.70%。白及的多糖含量與不同的采收時(shí)間、生長(zhǎng)年限、產(chǎn)地處理方式的關(guān)系有待深入研究，揭示白及中多糖的含量變化規(guī)律及其藥效關(guān)系。該研究結(jié)果為鮮品白及的質(zhì)量控制提供了理論依據(jù)。