徐 剛，郁愛萍，陸春勝，張學(xué)博，蘇靜，陳云忠，徐 波，倪學(xué)斌*，衛(wèi) 岳，施大鐘

(1.上海市崇明食品藥品檢驗所，上海 202150；2.上海市崇明區(qū)市場監(jiān)督管理局，上海 202150；3.上海市崇明區(qū)經(jīng)濟促進會，上海 202150；4.上海崇明苦草實業(yè)有限公司，上海 202152)

崇明“苦草”是崇明島家喻戶曉、世代相傳的一種藥草，民間將苦草煮雞蛋常作為婦女產(chǎn)后康復(fù)的食療佳品。崇明“苦草”因其味苦而得名“苦草”，且其功效類似益母草，曾被誤認(rèn)為益母草[1]。實際上，崇明“苦草”與益母草在植物形態(tài)上完全不同。本課題通過對崇明“苦草”的民間習(xí)用進行考證，了解其使用歷史、使用習(xí)慣和品種狀況，并通過對其原植物形態(tài)、性狀進行鑒定，利用薄層鑒別與液質(zhì)聯(lián)用分析方法來探究崇明“苦草”的基源，以期達到正本清源的目的。

1 崇明“苦草”民間習(xí)用考證

1.1 崇明“苦草”歷史、品種考證

崇明“苦草”最早見于《上海常用中草藥》[2]收載的秋蒿，土名：苦草、野苦草、香苦草，其原植物為菊科黃花蒿ArtemisiaannuaLinn，藥用全草，苦寒，清熱消暑，用于暑熱發(fā)痧、胸悶、腹痛，也可作為清暑飲料；對瘧疾、疥瘡、風(fēng)疹塊等亦有一定治療功效。崇明習(xí)俗[3-4]為產(chǎn)婦臨產(chǎn)前，家人準(zhǔn)備好蛋、雞、紅糖、苦草，以苦草煮蛋供其產(chǎn)后食用，滋養(yǎng)身體，俗稱“苦草茶蛋”?！犊滴醭缑骺h志》記載有兩種相近藥草：海艾、青蒿[5]?！队赫缑骺h志》記載：“海艾，產(chǎn)婦多用之；青蒿，邑產(chǎn)最佳?！盵6]此后縣志無海艾之名，但青蒿仍有記載。崇明“苦草”植株較高大，與艾是同屬植物，特征相仿，清代縣志上出現(xiàn)的海艾可能就是今之崇明“苦草”。崇明“苦草”在民間相傳沿用數(shù)百年，但歷代縣志僅在近代才出現(xiàn)苦草之名[3]，崇明“苦草”因苦得名，又用于產(chǎn)婦產(chǎn)后康復(fù)，故崇明“苦草”往往與益母草混為一談[1,4]。

1.2 崇明“苦草”種植、采收與使用習(xí)慣

崇明“苦草”一般春三月播種在田間地頭、房前屋后，9-10月開花，11月結(jié)果時采收，從根部切斷，整枝帶花果葉曬干后捆成小扎，晾置于屋檐下或柴房橫梁上，以陳者良。食用時，洗凈加水煎煮，沸后加入煮熟去殼的雞蛋(或再加入紅棗)轉(zhuǎn)為文火燉，吃蛋喝湯。產(chǎn)婦吃苦草煮雞蛋一周后，即可排盡惡露，恢復(fù)元氣。因此，苦草在崇明有“子孫草”之稱。在崇明，男女老少也有食用苦草的習(xí)慣，崇明島是有名的長壽之島，島上大多數(shù)80歲以上老人平常都有喝苦草茶的習(xí)慣。據(jù)老者述說，過去只要有發(fā)熱、皮膚騷癢、肚子疼、腹瀉、飲食無味、頭暈?zāi)垦?、手足無力、精神不振等癥狀，都用吃苦草茶的方法食療，一般一周就會消除癥狀，恢復(fù)元氣。因此，民間又將苦草稱之為“仙草”。正因苦草具備獨特的重振產(chǎn)婦元氣之功能，又有對眾多疾病的食療功效，它才成為崇明家家戶戶數(shù)百年來不離不棄的藥草，也才能在民間生生不息，延續(xù)種植。

2 崇明“苦草”原植物形態(tài)

崇明“苦草”為一年生草本植物，植株有濃烈的揮發(fā)性香氣。莖單生，高100～200 cm，基部直徑可達1 cm，有縱棱，幼時綠色，后變褐色或紅褐色，多分枝。莖、枝、葉兩面及總苞片背面無毛或初時背面微有極稀疏短柔毛，后脫落無毛。莖下部葉寬卵形或三角狀卵形，長3～7 cm，寬2～6 cm，綠色，三回羽狀深裂，每側(cè)有裂片5～8枚，裂片長橢圓狀卵形，再次分裂，小裂片邊緣具多枚櫛齒狀三角形或長三角形的深裂齒，葉柄長1～2 cm，基部有半抱莖的假托葉。中部葉二回羽狀深裂，小裂片櫛齒狀三角形。上部葉與苞片葉一回羽狀深裂，近無柄。頭狀花序球形，多數(shù)，直徑1.5～2.5 mm，有短梗，下垂或傾斜，在分枝上排成總狀或復(fù)總狀花序，并在莖上生有開展、尖塔形的圓錐花序。總苞片3～4層，外層總苞片長卵形或狹長橢圓形，中肋綠色，邊膜質(zhì)，中層、內(nèi)層總苞片寬卵形或卵形，花序托凸起，半球形?；ㄉ铧S色，雌花10～18朵，花冠狹管狀。兩性花10～30朵，結(jié)實或中央少數(shù)花不結(jié)實，花冠管狀。瘦果小，橢圓狀卵形，略扁?；ü?-11月。

3 崇明“苦草“性狀

崇明“苦草”一般為捆扎的小團狀。莖枝為圓柱形，直徑1～6 mm；表面黃綠色至棕黃色，具縱棱線，有的可見互生的枝和葉；切面黃白色，中央有髓；質(zhì)略硬。葉片多皺縮、破碎呈暗綠色至棕黃色，完整者展平后為三回或二回羽狀深裂，裂片及小裂片矩圓形或長橢圓形。頭狀花序，花序梗眾多。氣香特異，味微苦。

4 崇明“苦草”薄層鑒別[7-8]與液質(zhì)聯(lián)用定性定量[9-11]檢測

4.1 儀器與試劑

4.1.1 實驗耗材 硅膠G預(yù)制薄層板、普通預(yù)制薄層板(上海東方藥業(yè)科技實業(yè)有限公司)；高效硅膠預(yù)制薄層板(HSGF 10 cm×10 cm，上海東方藥業(yè)科技實業(yè)有限公司)。

4.1.2 儀器 CAMAG全自動點樣儀；CAMAG薄層攝像儀；1290 UHPLC 6470 QQQ超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國Agilent Technology公司)；MS205DU十萬分之一電子天平、ME104E萬分之一電子天平(瑞士Mettler Toledo公司)；Ultrasonic Cleaner超聲儀(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司)。

4.1.3 對照品與對照藥材 青蒿素對照品、青蒿對照藥材均來源于中國食品藥品檢定研究院。

4.1.4 供試樣品 三批崇明“苦草”(2017年、2018年、2019年)供試樣品由上海崇明苦草實業(yè)有限公司提供。

4.1.5 試劑 石油醚(60～90 ℃)、乙醚為分析純，乙腈、甲酸(≥98%)(HPLC，德國CNW公司)；乙酸銨(GR，國藥集團化學(xué)試劑有限公司)；實驗用水為Thermo Fisher GEN PURE PRO制備的超純水。

4.2 供試溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

4.2.1 薄層色譜供試品溶液的配制 準(zhǔn)確稱取已粉碎的崇明“苦草”樣品3 g，加石油醚(60～90 ℃)50 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加正己烷30 mL使溶解，用20%乙腈溶液振搖提取3次，每次10 mL，合并乙腈液，蒸干，殘渣加乙醇0.5 mL使溶解，供薄層色譜測定。

4.2.2 薄層色譜標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取青蒿素對照品10.0 mg，置于10 mL容量瓶中，用乙醇溶解并稀釋至刻度，得最終濃度為1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.2.3 液質(zhì)檢測供試品溶液的配制 精密稱取已粉碎的崇明“苦草”樣品0.5 g，置100 mL容量瓶中，加入乙腈適量，超聲處理(40 kHz)15 min，用乙腈定容至刻度，取溶液過0.22 μm濾膜后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

4.2.4 液質(zhì)檢測標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 精密稱取青蒿素對照品10.0 mg，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，得最終濃度為100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。準(zhǔn)確吸取1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用乙腈定容至100 mL，作為對照溶液。

4.3 薄層色譜與液質(zhì)檢測結(jié)果

4.3.1 薄層色譜 薄層色譜的展開劑與顯色劑的選擇采用石油醚(60～90 ℃)-乙醚(4∶5)作為展開劑，青蒿素的Rf值在0.7～0.8時，得到了較好的分離度，展開后，薄層板晾干，噴以2%香草醛硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰，見圖1。

注：1.青蒿素對照品(點樣量：5 μg)；2.青蒿對照藥材；3.崇明“苦草”(2017年)；4.青蒿素對照品(點樣量：10 μg)；5.崇明“苦草”(2018年)；6.崇明“苦草”(2019年)

在上述條件下，3批次不同年份崇明“苦草”的薄層色譜具青蒿對照藥材和青蒿素對照品相同位置及相同顏色的斑點(2017年份的崇明“苦草”青蒿素斑點不明顯，隨著崇明“苦草”貯存時間延長，所含青蒿素存在降解的可能)。

4.3.2 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 色譜條件：流動相：乙腈∶5 mmol/L 乙酸銨溶液(含0.1%甲酸)=55∶45(體積比)；流速：0.2 mL/min；進樣量：1 μL；色譜柱：WatersBEH C18(1.7 μm，2.1 mm×50 mm)；柱溫：35 ℃。

質(zhì)譜條件：離子源：電噴霧離子源；掃描方式：正離子掃描(ESI+)；監(jiān)測方式：多反應(yīng)監(jiān)測；離子源電壓：3.5 kV；霧化氣壓力：45 psi；干燥氣流量：5 L/min；干燥氣溫度：300 ℃；鞘氣流量：11 L/min；鞘氣溫度：250 ℃；離子對、Fragmentor電壓及碰撞能見表1。

表1 目標(biāo)化合物主要質(zhì)譜參數(shù)

4.3.3 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用對照品同比測定崇明“苦草”中青蒿素的含量，見表2。

表2 青蒿素含量 (μg/mL)

在上述條件下，3批崇明“苦草”均證明含有青蒿素成分，含量分別為0.066、0.638、0.807 mg/g，與薄層色譜結(jié)果一致，隨著崇明“苦草”貯存時間延長，所含的青蒿素成分存在降解的可能。

5 結(jié)果與討論

崇明“苦草”原植物葉片為三回羽狀深裂，頭狀花序球形，直徑1.5～2.5 mm，花果期9-11月，與黃花蒿ArtemisiaannuaLinn特征相同，而與青蒿ArtemisiacarvifoliaBuch.-Ham.ex Roxb.Hort.Beng.特征有差異[12-14]。經(jīng)薄層鑒別和液質(zhì)聯(lián)用定性定量檢測表明，崇明“苦草”含有黃花蒿ArtemisiaannuaLinn特定成分青蒿素[15]，進一步確定崇明“苦草”基源為菊科蒿屬植物黃花蒿ArtemisiaannuaLinn。

崇明“苦草”的栽培民間已有數(shù)百年的歷史，崇明“苦草”得到了島上特有的土質(zhì)氣候條件的孕育滋養(yǎng)，但崇明“苦草”原植物形態(tài)是否會出現(xiàn)一定變異還有待進一步觀察研究。

崇明“苦草”在民間有特定的采收、貯存和食用習(xí)慣[2-4,16]，常作為產(chǎn)婦產(chǎn)后康復(fù)或體弱多病恢復(fù)元氣之用。因此，應(yīng)加強對崇明“苦草”食療功效的開發(fā)力度，使崇明世代相傳的“苦草”食療傳統(tǒng)煥發(fā)出新時代的活力。

崇明“苦草”中青蒿素含量有隨貯存時間延長而降解的趨勢，但崇明民間有苦草陳者良的說法，有關(guān)崇明“苦草”中青蒿素及揮發(fā)油含量隨時間變化的規(guī)律還有待進一步實驗研究。

崇明“苦草”有利于產(chǎn)后惡露清除，緩解女性痛經(jīng)，似具有活血化瘀、消炎止痛等功效，突破了中藥青蒿(黃花蒿ArtemisiaannuaLinn干燥地上部分)的傳統(tǒng)功效和主治，還有待藥理、藥化和臨床進一步研究驗證。