周心晨，解鴻青，李聰慧，崔詩遙，但彩云，劉 雪，李文樂，金 潔，時連根

（浙江大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院，浙江 杭州 310058）

白僵蠶是蠶蛾科家蠶（Bombyxmori）幼蟲感染白僵菌（Beauveriabassiana（Bals.）Vuill）后致死的干燥菌蟲體，亦稱僵蟲、天蟲和姜蟲等，作為我國名貴的傳統(tǒng)中藥資源，其利用已有數(shù)千年歷史［1，2］。白僵蠶具有鎮(zhèn)定、退熱、止咳化痰、消腫、松弛肌肉、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)及脂肪代謝等作用，目前其藥用十分廣泛，513余種人用成藥中含有白僵蠶的有49余種，其中64余種兒科成藥中有29余種用白僵蠶［3，4］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，白僵蠶的藥理作用與白僵蠶的活性成分和營養(yǎng)成分密切相關(guān)。查明白僵蠶的營養(yǎng)成分，對于探明其藥用機理具有積極意義。

本試驗參照《中華人民共和國藥典》和《中華人民共和國國家標準》，對白僵蠶的常規(guī)成分、微量元素、氨基酸的含量進行測定分析，結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 白僵蠶粉

取5齡起蠶，均勻噴灑濃度為1.0×105分生孢子/mL的家蠶病原白僵菌分生孢子液，于25℃、90%濕度條件下飼養(yǎng)48 h后，于常規(guī)條件下飼養(yǎng)，4 d～5 d后蠶陸續(xù)發(fā)病僵死，收集僵死蠶于25℃、90%濕度條件下培養(yǎng)，直至蠶體覆滿白色的白僵菌分生孢子，收集白僵蠶并于35℃烘箱中烘干，中藥粉碎機粉碎后過100目篩，制成白僵蠶粉，-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要儀器和試劑

DHG-9140A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精密實驗設(shè)備有限公司）；高溫爐（德國納博熱工業(yè)爐有限公司）；索式脂肪提取器（北京金紫光儀器儀表公司）；電熱恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械五廠）；Buchi343凱氏定氮儀（瑞士Buchi有限公司）；日立L-8800型氨基酸自動分析儀（日本日立公司）；METTLER TOLEDO B-N天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）。

硼酸、濃硫酸、乙醚、石油醚、苯等試劑均為分析純，購自中國醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司。

1.3 水分測定

參照《中華人民共和國藥典》（2000年部）附錄Ⅸ水分測定的烘干法［5］。取白僵蠶粉2 g～5 g，平鋪于干燥至恒重M2的扁形瓶中，精密稱定重量M3。打開蓋在100℃～105℃干燥5 h，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30 min，精密稱定重量M1。根據(jù)減失的重量，按下公式計算白僵蠶含水率（%）。

式中：X為白僵蠶含水率（%）；M1為第二次烘后扁形瓶和白僵蠶的質(zhì)量（g）；M2為扁形瓶的質(zhì)量（g）；M3為烘前扁形瓶和白僵蠶的質(zhì)量（g）。

1.4 灰分測定

參照《中華人民共和國藥典》（2000年部）附錄Ⅸ灰分測定的灼燒法［5］。取大小適宜的瓷坩堝，置高溫爐中，在600℃下灼燒0.5 h，冷至200℃以下后取出，放入干燥器中冷至室溫，精密稱量M2。

取白僵蠶粉1 g，放入瓷坩堝中，精密稱量得M3。先以小火加熱使樣品充分炭化至無煙，然后置高溫爐中，在550℃-600℃下灼燒至無炭粒，即灰化完全。冷至200℃以下后取出，放入干燥器中冷卻至室溫，稱得重量為M1。按下公式計算白僵蠶灰分含量：

式中：X為白僵蠶灰分含量（%）；M1為坩堝和灰分的質(zhì)量（g）；M2為坩堝的質(zhì)量（g）；M3為坩堝和白僵蠶的質(zhì)量（g）。

1.5 粗脂肪測定

取約1.5 g白僵蠶粉，精密稱量后記為M0；把白僵蠶粉小心放入濾紙筒中，用線綁住筒口，放入烘箱中（105℃）烘約2 h，取出放入干燥器中冷卻0.5 h并稱重記為M1；將濾紙包小心放入索式脂肪抽提管內(nèi)，注入乙醚，于約80℃溫度水浴下抽提約20 h；取出濾紙筒，放在培養(yǎng)皿中于105℃烘箱中烘約1 h，冷卻0.5 h后稱量記為M2。按以下公式計算白僵蠶粗脂肪含量（%）：

1.6 粗蛋白測定

依據(jù)《中華人民共和國國家標準》GB/T 6432-1994中的凱氏定氮法［6］，用全自動Buchi343凱氏定氮儀測定白僵蠶中粗蛋白含量。

1.7 微量元素含量的測定

白僵蠶中銅、鋅、鐵、錳、鉀、鈉、鉻、磷、硒、鎳、鈣、鎂含量，分別參照《中華人民共和國國家標準》GB/T5009.13-2003、GB/T5009.14-2003、GB/T5009.90-2003、GB/T5009.90-2003、GB/T5009.91-2003、GB/T5009.91-2003、GB/T5009.123-2003、GB/T5009.87-2003、GB/T5009.93-2003、GB/T5009.138-2003、GB/T5009.92-2003、GB/T5009.90-2003的檢測方法測定。

1.8 氨基酸含量的測定

參照《中華人民共和國國家標準》GB/T18246-2000中的鹽酸水解法，用日立L-8800型氨基酸自動分析儀測定白僵蠶粉中氨基酸組成及含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 白僵蠶中的常規(guī)成分含量

采用烘干法、灼燒法、乙醚抽提法、凱氏定氮法分別測定白僵蠶的水分、灰分、粗脂肪和粗蛋白含量，結(jié)果白僵蠶水分含量為8.62%、灰分含量為8.40%、粗脂肪含量為4.9%、粗蛋白含量為69.3%（表1）。

2.2 白僵蠶的微量元素含量

測定了白僵蠶中的12種微量元素含量，結(jié)果如表2所示。表2顯示，在所測的12種微量元素中，磷、鈣、鎂、鋅和錳的含量較高，分別為4911.7 mg/kg、4610.8 mg/kg、3346.1 mg/kg、121.4 mg/kg和30.4 mg/kg，同時硒含量為0.24 mg/kg。

表1 白僵蠶中水分、灰分、粗脂肪和粗蛋白的含量Table 1 Moisture,Ash,Crude Fat and Crude Protein Contents in the Powder Of Bombyx Batryticatus

表2 白僵蠶中微量元素的含量Table 2 Trace Elements in the Powder of Bombyx Batryticatus

表3 白僵蠶中氨基酸的種類和含量Table 3 Amino Acid Contents in the Powder of Bombyx Batryticatus

2.3 白僵蠶的氨基酸含量

白僵蠶的氨基酸組成和含量如表3所示。表3顯示，白僵蠶富含天門冬氨酸、絲氨酸、谷氨酸等17種氨基酸，總含量為32.87%，其中甘氨酸含量最高為4.89%，其次為丙氨酸、絲氨酸、天門冬氨酸和谷氨酸，其含量分別為3.37%、2.95%、2.84%和2.78%，蛋氨酸含量最低為0.40%，氨和胱氨酸未檢測到；人體所必需的蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸和色氨酸以及嬰兒所必需的組氨酸和精氨酸在白僵蠶中均含有，其必需氨基酸占總氨基酸的比率為27.60%。

3 討論

鋅是人體近百種酶的激活劑，且能促進RNA、DNA及胰島素的合成，同時有機鋅有促進兒童智力發(fā)育、增強記憶功能、促進細胞繁殖與分泌性激素、增強性功能等作用，醫(yī)學(xué)臨床公認鋅對維持皮膚、粘膜的正常結(jié)構(gòu)和功能以及促進蛋白質(zhì)的合成和利用、身體的生長發(fā)育、傷口的愈合等均具有重要作用［7］。鐵作為血紅素和肌紅蛋白所必需的成分，與細胞內(nèi)的生物氧化過程有密切聯(lián)系，可用于預(yù)防和治療貧血以及增強骨髓的造血機能［8］。錳在三羧酸循環(huán)中作為多種酶的活化劑和組成成分，與碳水化合物和脂肪代謝有關(guān)，為骨骼的正常發(fā)育所必需。磷參與機體各種代謝過程和能量轉(zhuǎn)換，人體神經(jīng)系統(tǒng)含有大量的磷脂，缺磷可影響其代謝功能［9］。硒是人體必需的微量元素之一，是生物體內(nèi)重要抗氧化酶——谷胱甘肽過氧化物酶的一個組成成分，將氧化性很強的過氧化氫和脂質(zhì)過氧化物氧化成水和羥基化物，以保護組織免遭氧化損害中起重要作用；作為抗氧化劑用于清除自由基，以預(yù)防和治療自由基誘發(fā)的疾病如衰老、心血管疾病等；促進體內(nèi)免疫球蛋白的產(chǎn)生，增強機體免疫功能和抗病能力；還具有抗癌功效［10］。本試驗檢測了白僵蠶中12種微量元素含量，發(fā)現(xiàn)白僵蠶富含人體需要量較大的鋅、鐵、銅、錳這四種必需元素，其含量分別為121.4 mg/kg、57.5 mg/kg、6.69 mg/kg、30.4 mg/kg，均超過了人體日需必要量；白僵蠶還富含磷，其含量高達4911.7 mg/kg；同時白僵蠶中硒含量為0.24 mg/kg，是富硒抗癌中藥黃芪（含硒0.108 mg/kg）的2.22倍。由此可見，白僵蠶具有較好的滋補防病功效。

氨基酸除營養(yǎng)價值外，還具有特殊的藥理功能，必需氨基酸占總氨基酸的比率的高低是評價蛋白質(zhì)氨基酸優(yōu)劣的一個重要指標。谷氨酸和天門冬氨酸可促進T淋巴細胞前體分化而發(fā)育為成熟T淋巴細胞，清除氧自由基，促進人體內(nèi)消化液的分泌，具有預(yù)防貧血、解毒和抗衰老等作用；精氨酸可增加NO的合成，對抗自由基過氧化，促進人體激素分泌，顯著增加中性白細胞、單核吞噬細胞的吞噬功能，加強B淋巴細胞和NK細胞的功能，起到延緩衰老和免疫調(diào)節(jié)的作用；蘇氨酸在人體內(nèi)有轉(zhuǎn)變氨基酸達到平衡的作用；甘氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸被稱為藥效氨基酸，均具有重要的藥理作用［11～17］。張士善等（1991）研究發(fā)現(xiàn)，谷氨酸、酪氨酸和色氨酸對小鼠自發(fā)性活動具有明顯的抑制作用，其中色氨酸的抑制作用有量效關(guān)系，50 mg/kg開始有效，200 mg/kg抑制效果明顯［18］。本研究結(jié)果顯示，白僵蠶富含天門冬氨酸、谷氨酸等17種氨基酸，總含量為32.87%，其中甘氨酸含量高達4.89%，谷氨酸、天門冬氨酸、酪氨酸、精氨酸、蘇氨酸、色氨酸的含量分別為2.78%、2.84%、2.12%、1.70%、1.41%、0.36%，人體所必需氨酸占總氨基酸的比率為27.60%。研究結(jié)果不僅為白僵蠶的優(yōu)良中藥材提供了理論依據(jù)，也為將白僵蠶開發(fā)成臨床上優(yōu)良的新類型鎮(zhèn)靜催眠的有效候選藥物提供了可能。