努爾麥麥提·麥麥提敏，姜水兵，郭良帥

（塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆 阿拉爾 843300）

棘球蚴?。‥chinococcosis）俗稱包蟲?。℉ydatidosis），是人畜體內(nèi)寄生的棘球?qū)俳{蟲幼蟲引起的一種嚴(yán)重危害人民健康和畜牧業(yè)發(fā)展的人畜共患寄生蟲病［1］，我國將其列為二類動(dòng)物疫病［2］。我國是世界上棘球蚴病流行嚴(yán)重的國家之一，主要流行囊型棘球蚴病與泡型棘球蚴病，由細(xì)粒棘球絳蟲和多房棘球絳蟲感染所致［3］。其中，細(xì)粒棘球絳蟲中絳期幼蟲細(xì)粒棘球蚴寄生在人和牛、羊等草食動(dòng)物的肝、肺和其他器官，導(dǎo)致牛、羊等家畜和人的細(xì)粒棘球蚴??；成蟲細(xì)粒棘球絳蟲寄生在犬科動(dòng)物的小腸內(nèi)，引起犬科動(dòng)物的細(xì)粒棘球絳蟲病。細(xì)粒棘球絳蟲對(duì)中間宿主的危害嚴(yán)重，引起寄生部位發(fā)生機(jī)械性壓迫，囊液毒素作用及其因溢出而導(dǎo)致過敏反應(yīng)等臨床癥狀［4］，對(duì)終末宿主的臨床癥狀不太明顯，主要受蟲體數(shù)量的影響。犬與羊、牛、人等中間宿主的關(guān)系密切，隨犬糞排出的孕節(jié)和蟲卵能夠污染人和動(dòng)物的生活環(huán)境，增高人畜被蟲卵感染的風(fēng)險(xiǎn)，從而引起嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。因此，犬只的管理、驅(qū)蟲和定期檢測對(duì)包蟲病的預(yù)防與控制有重大意義。本次調(diào)查從喀什地區(qū)各縣（市）采集犬糞樣品共760份，檢測細(xì)粒棘球絳蟲犬糞抗原，旨在掌握喀什地區(qū)2019 年犬細(xì)粒棘球絳蟲的感染狀態(tài)，從而對(duì)本地區(qū)包蟲病的防控和研究工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

樣品：分別從喀什地區(qū)各縣（市）采集新鮮（排糞24 h 內(nèi)）犬糞樣品（10 g/份）共760 份，分別裝入20 mL 離心管，記錄標(biāo)記，于-80 ℃冰箱冷凍7 d，室溫解凍，取1 g 犬糞樣品加入1 mL 工作濃度的稀釋液，混勻形成懸濁液，3 000 r/min 離心10 min，取上清備用。

試劑：細(xì)粒棘球絳蟲犬糞抗原ELISA 檢測試劑盒，重慶澳龍生物制品有限公司（生產(chǎn)批號(hào)：20190502）。

儀器：HBS-1096A 型酶標(biāo)分析儀（南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；H-1650-W 型臺(tái)式離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司）；DHP-9080 型恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

（1）按照說明書要求配好試劑后，取出檢測板，記錄加樣順序。

（2）按順序依次加入2 孔陽性、2 孔陰性對(duì)照和待檢樣品，每孔加入100 μL，覆封板膜，置37 ℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育30 min。

（3）孵育完后取出檢測板，棄去板內(nèi)液體，每孔200 μL 洗滌液靜置1 min 后棄去板內(nèi)液體，拍干。重復(fù)3次。

（4）每孔加入100 μL 工作濃度的單抗液，覆封板膜，放置37 ℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育30 min。重復(fù)步驟（3）。

（5）每孔加入工作濃度的酶標(biāo)抗體100 μL，覆封板膜，放置37 ℃的恒溫培養(yǎng)箱孵育30 min。重復(fù)步驟（3）。

（6）底物溶液A 與底物溶液B 等體積混合后每孔加入100 μL，避光顯色10 min。

（7）每孔加入50 μL 終止液，10 min 內(nèi)在酶標(biāo)儀上測定450 nm波長處的吸光度值。

1.3 結(jié)果判定

同時(shí)滿足陽性對(duì)照OD450nm平均值≥0.60，且陽性對(duì)照OD450nm平均值＞陰性對(duì)照OD450nm平均值的2.1倍，方可進(jìn)行判定。當(dāng)陰性不足0.15時(shí)按0.15計(jì)算。

陽性判定：樣品OD450nm值＞陰性對(duì)照OD450nm平均值×2.1。

陰性判定：樣品OD450nm值≤陰性對(duì)照OD450nm平均值×2.1。

2 結(jié)果與分析

通過細(xì)粒棘球絳蟲犬糞抗原ELISA檢測試劑盒對(duì)喀什地區(qū)所采集的760 份犬糞樣品進(jìn)行犬糞抗原ELISA 檢測，檢測結(jié)果顯示，共27 份犬糞樣品檢出陽性，總感染率為3.55%（27/760）。其中巴楚縣、塔什庫爾干縣、岳普湖縣、葉城縣犬糞抗原檢測呈陽性，陽性率為1.11%～8.33%，其余縣（市）未檢出陽性樣品。760份樣品中，從農(nóng)區(qū)采集的389份樣品共檢測出8 份陽性樣品，陽性率為2.06%（8/389），從牧區(qū)（塔什庫爾干縣）采集的371 份樣品共檢測出19份陽性樣品，陽性率為5.12%（19/371）（表1）。

表1 喀什地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲的感染情況

3 討論

新疆是我國包蟲病主要流行地區(qū)之一［5］，伍衛(wèi)平等［6］2012—2016 年對(duì)新疆、西藏等西部9 個(gè)省（自治區(qū)）進(jìn)行棘球蚴病抽樣調(diào)查，調(diào)查顯示人群總檢出率為0.51%，家畜檢出率為4.68%，犬檢出率為4.25%，初步明確了我國棘球蚴病流行區(qū)的范圍和流行程度。祖力胡馬力·尼拉木丁等［7］在2007—2010 期間對(duì)全疆犬進(jìn)行檢測調(diào)查，結(jié)果顯示，全疆總感染率為28.0%，其中喀什地區(qū)的感染率為45.0%。努斯來提等［8］在2014 年進(jìn)行了新疆14 地州棘球蚴病感染情況調(diào)查，結(jié)果顯示全疆范圍內(nèi)犬的總感染率為9.84%，其中喀什地區(qū)犬的感染率為23.33%。趙江山等［9］在2012—2013 年進(jìn)行的全疆不同生產(chǎn)方式條件下犬細(xì)粒棘球絳蟲感染情況調(diào)查，結(jié)果顯示農(nóng)區(qū)感染率為1.98%，牧區(qū)感染率為3.75%。說明我國西部地區(qū)人、牛、羊等的包蟲病檢出率高，無論是人還是動(dòng)物方面都應(yīng)做好防控，保護(hù)人畜生命安全。

本次調(diào)查顯示，喀什地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲的總感染率為3.55%（27/760），感染程度較為嚴(yán)重，而且不同縣（市）、農(nóng)區(qū)和牧區(qū)之間感染程度的差別較大。其中，巴楚縣感染率最高（8.33%），其次為塔什庫爾干縣（5.12%），岳普湖縣（5.00%）和葉城縣（1.11%），其余的縣（市）均未檢測出陽性樣品；陽性縣占喀什地區(qū)總縣（市）的36.36%（4/11）；農(nóng)區(qū)和牧區(qū)相比，牧區(qū)感染率（5.12%）高于農(nóng)區(qū)（2.06%）。本次調(diào)查結(jié)果與祖力胡馬力·尼拉木丁等［7］、努斯來提等［8］對(duì)新疆地區(qū)犬進(jìn)行的調(diào)查結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn)，曾經(jīng)喀什地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲的感染率高于全疆的平均感染率，2019 年喀什地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲的感染率比往年有所下降，感染率隨年數(shù)的增長而降低，說明喀什地區(qū)包蟲病的防控工作比往年有所進(jìn)步。本次調(diào)查的農(nóng)區(qū)犬（2.06%）和牧區(qū)犬（5.02%）感染率與趙江山等［9］的調(diào)查結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn)，2 次調(diào)查結(jié)果都顯示牧區(qū)感染率高于農(nóng)區(qū)，說明牧區(qū)包蟲病的防控工作更應(yīng)該抓緊。

根據(jù)本次調(diào)查中犬只感染數(shù)量可以看出，犬的感染率比往年有所降低，而且部分地區(qū)達(dá)到了陽性率為零的水平。棘球蚴病被納入《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020）》，在新疆地區(qū)實(shí)施包蟲病免疫及犬驅(qū)蟲以來，喀什地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲感染率轉(zhuǎn)變?yōu)橄陆祽B(tài)勢。各縣（市）應(yīng)不斷加強(qiáng)防控工作，避免包蟲病流行率的再次增長。

4 結(jié)語

包蟲病是給畜牧業(yè)發(fā)展和人體健康帶來嚴(yán)重危害的人獸共患寄生蟲病，在人畜方面都有很大的公共衛(wèi)生意義。本次調(diào)查顯示喀什地區(qū)犬細(xì)粒棘球絳蟲的感染程度較為嚴(yán)峻，各縣之間及農(nóng)區(qū)和牧區(qū)之間差別較大。該地區(qū)應(yīng)加強(qiáng)免疫和驅(qū)蟲工作，加大宣傳力度，提高人民和相關(guān)工作人員的防范意識(shí)，從而降低人畜被棘球絳蟲感染的風(fēng)險(xiǎn)。