石浩，何小娥，丁仁惠，王文龍，黃謙，游靜*

（1.湖南應(yīng)用技術(shù)學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院，湖南 常德 415100；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128；3.岳陽市食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心，湖南 岳陽 414000）

油茶（Camellia oleifera Abel.），別名：茶子樹、茶油樹，為多年生木本糧油作物[1]。油茶適合生長(zhǎng)在山區(qū)丘陵地帶，尤其適合在有機(jī)質(zhì)含量豐富的土壤中，是我國(guó)山區(qū)丘陵地區(qū)分布及栽培的主要經(jīng)濟(jì)林樹種之一[2]。茶油營(yíng)養(yǎng)豐富，含有多種不飽和脂肪酸、天然維生素及多種人體所需的微量元素，且茶油產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益十分可觀[3]。最近幾年我國(guó)的油茶產(chǎn)業(yè)得到快速的發(fā)展，在產(chǎn)量和種植面積方面領(lǐng)先世界，尤其是在湖南、浙江、廣西、江西和貴州等地，產(chǎn)量和面積居全國(guó)前列。隨著油茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，其副產(chǎn)物油茶粕也隨之增加，我國(guó)每年有超過70萬噸油茶粕的產(chǎn)出[4]。油茶粕中含有大量的糖類、皂苷類、蛋白質(zhì)、多酚類和黃酮類物質(zhì)[5-6]。對(duì)油茶粕中功效物質(zhì)的開發(fā)與利用，可有效地提高油茶果的附加值，提高種植戶的經(jīng)濟(jì)效益。近些年來隨著人民生活水平的提高，現(xiàn)代飲食方式和飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了較大的變化，同時(shí)因工作、生活壓力的增加，導(dǎo)致體內(nèi)氧自由基（freeradical，F(xiàn)R）的快速增加[7]，易引起高血壓、高血脂、動(dòng)脈血管硬化、癌癥、早衰等，且相關(guān)疾病也越來越“年輕化”，因此如何通過食療來預(yù)防上述疾病已成為近年來的研究熱點(diǎn)[8-9]。據(jù)相關(guān)研究表明多酚具有改善血液循環(huán)、軟化血管、降血脂[10]、清除氧自由基、預(yù)防肥胖、保肝護(hù)肝、抗菌、抗輻射和預(yù)防誘變的作用[11-12]。本研究以大鼠、油茶多酚提取物為材料，采用多指標(biāo)深入分析油茶多酚對(duì)高脂日糧大鼠降血脂及抗氧化能力的效果，并探索其相關(guān)作用機(jī)理，為今后油茶多酚類物質(zhì)降血脂、保肝護(hù)肝、抗氧化等保健食品、藥品的開發(fā)與利用提供一定理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

油茶餅粕：油茶基地油茶果經(jīng)壓榨所得產(chǎn)物；基礎(chǔ)飼料、高脂飼料、SPF級(jí)雄性 SD大鼠[體質(zhì)量（125±5）g]：湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司；血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminatransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate transaminase，AST）測(cè)定試劑盒：深圳邁瑞醫(yī)療電子有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）測(cè)試盒：南京建成生物工程研究所；阿托伐他汀：北京北大維信生物科技有限公司；焦碳酸二乙酯（diethy pyrocarbonate，DEPC）、Trizol試劑、核糖核酸（ribonucleic acid，RNA）反轉(zhuǎn)錄試劑盒：全式金生物技術(shù)有限公司；引物：上海生物工程技術(shù)有限公司合成；AB-8大孔吸附樹脂、木瓜蛋白酶（120萬U/g）：上海索萊寶生物科技有限公司；乙醇、鎢酸鈉、鉬酸鈉、氫氧化鈉（均為分析純）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 設(shè)備與儀器

BS-200全自動(dòng)生化分析儀：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；JB-P5組織包埋、JJ-12J自動(dòng)脫水機(jī)：俊杰電子有限公司；Wonbio-48R全自動(dòng)樣品快速研磨儀：上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司；SUNRISE全自動(dòng)酶標(biāo)儀：TECAN公司；GDS8000凝膠成像系統(tǒng)：Syngene Gene Genius；Qiagen Rotor-Gene 7500 熒光定量PCR儀：北京北嘉美儀生物科技有限公司；Bio-Rad Power Pac 2000電泳儀：美國(guó)伯樂公司；SW-CJ-2D雙人單面超凈工作臺(tái)：上海書培實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；ZW1105051705紫外可見分光光度計(jì)：上海光譜儀器有限公司；Thermo Savznt冷凍干燥儀：上海智巖科學(xué)儀器有限公司；DR-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；SB-3200D超聲儀：寧波新芝生物科技股份有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 油茶多酚供試材料的制備

參照李嘉偉等[13]的方法，略有修改。取100 g油茶粕粉末于2.5 L的大燒杯中，并加入2 L 40%的乙醇和2 mL 1%的木瓜蛋白酶浸泡1 h，然后在90℃的溫度下水浴超聲1.5 h，將提取液進(jìn)行抽濾后采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀去除溶劑，直至無明顯醇味。將濃縮液調(diào)pH值至4，以3 BV/h的流速上柱（3.0 cm×70 cm、AB-8大孔吸附樹脂），先用蒸餾水洗脫至無色，再采用5 BV體積、60%乙醇、3 BV/h的流速進(jìn)行洗脫，每30 mL為一流分收集洗脫液。洗脫液經(jīng)顯色后合并，濃縮去除洗脫液。將濃縮液冷凍干燥至粉末。通過標(biāo)樣采用鎢酸鈉-鉬酸鈉顯色法測(cè)定其純度達(dá)74.53%。

1.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及分組

健康雄性大鼠60只，體重（125±5）g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，按照體重隨機(jī)分為6組，分別為基礎(chǔ)飼料組：基礎(chǔ)飼料+10 mL/kg BW生理鹽水；高脂飼料組：高脂飼料+10 mL/kg BW生理鹽水；阿托伐他汀處理組：高脂飼料+10 mL/kg BW阿托伐他汀；油茶多酚處理組：高脂飼料+2.5、7.5、15 mL/kg BW油茶多酚。其中阿托伐他汀和油茶多酚濃度均為1 mg/mL。每天上午9∶00左右處理組灌胃藥劑一次，其余時(shí)間均自由飲水進(jìn)食，連續(xù)灌胃6周，最后一次給藥后禁食12 h（不禁水）。飼養(yǎng)結(jié)束后，取血液和組織測(cè)定相應(yīng)酶活指標(biāo)和基因表達(dá)水平。動(dòng)物飼料：分籠喂養(yǎng)，采用基礎(chǔ)飼料及高脂飼料飼喂小鼠。高脂飼料配方為：74.8%基礎(chǔ)飼料、4%膽固醇、6%蛋黃粉、5%白糖、10%豬油、0.2%膽鹽。放于4℃冰箱冷藏保存。飼養(yǎng)條件：室溫（22℃～25℃，濕度40%～70%），12 h周期明暗交替，自由采食飲水，保持良好通風(fēng)，墊料隔天一換，每2周對(duì)籠具清洗并消毒1次。

1.3.3 大鼠體況變化的測(cè)定

每天觀察SD大鼠的毛色、活動(dòng)、飲食狀態(tài)、精神狀況等，每周稱體重一次，記錄。肝體比計(jì)算：肝體比（肝系數(shù)）/%=肝重（g）/體重（g）×100。

1.3.4 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇水平，按照試劑盒說明書用BS-200全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。

1.3.5 肝臟勻漿中抗氧化指標(biāo)的測(cè)定

將制備好的10%勻漿液用高速冷凍離心機(jī)4 000 r/min，離心10 min，取上清液，測(cè)定肝臟超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性及丙二醛含量。SOD、GSH-Px、MDA分別采用WST-1法、比色法、硫代巴比妥酸（thibabituric acid，TBA）法測(cè)定。嚴(yán)格按照南京建成生物工程研究所試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定。

1.3.6 RNA提取與實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析

實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative realtime polymerase chain reaction，qPCR）分析，采用 Trizol試劑盒說明方法提取RNA，RNA逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)脫氧核糖核酸（complementary deoxyribo nucleic acid，cDNA），然后以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物序列見表1。反轉(zhuǎn)錄 PCR（reverse transcription-PCR，RT-PCR）反應(yīng)體系：10 μL SYBR Green qPCR SuperMix，1 μL 模板，1 μL 上游引物（10 nmol/L），1 μL 下游引物（10 nmol/L），滅菌后的雙重蒸餾水補(bǔ)充至20 μL。反應(yīng)條件：94℃條件下預(yù)變性30 s，94℃條件下變性5 s，60℃條件下退火15 s，熒光檢測(cè)15 s，循環(huán)40次。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）作為內(nèi)參，參照Schmittgen[14]的方法，相對(duì)定量2-ΔΔCt分析法計(jì)算樣品中各基因的相對(duì)表達(dá)量。

表1 熒光定量PCR引物序列信息Table 1 Primer sequences used in qPCR analysis

1.3.7 數(shù)據(jù)處理

采用WPS 2018軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理及制圖，采用Statistix 8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有指標(biāo)數(shù)據(jù)均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示，并用最小顯著極差法（least significant difference，LSD）對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性差異檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)高脂日糧大鼠體重影響測(cè)定結(jié)果

油茶多酚或阿托伐他汀處理對(duì)高脂日糧大鼠體重影響的測(cè)定結(jié)果見表2。

表2 對(duì)高脂日糧大鼠體重影響效果Table 2 Effects on body weight of high-fat diet rats

由表2可知，各組大鼠初始體重基本保持在150 g～160 g之間。各組大鼠經(jīng)過6周不同飼料喂養(yǎng)，以及阿托伐他汀或油茶多酚處理后，各組大鼠間的體重具有較大的差異，其中高脂飼料組大鼠體重及肝體比均最大，分別達(dá)到了398.74 g、4.31%，除與2.5 mL/kg BW油茶多酚組大鼠肝體比不具有極顯著性差異外，高脂飼料組與其它處理組均有極顯著性差異（P＜0.01），說明各處理均有一定的效果。經(jīng)過阿托伐他汀、油茶多酚處理后高脂日糧大鼠的體重有了一定量的減少，且油茶多酚處理組效果略好于阿托伐他汀處理組，15mL/kgBW油茶多酚處理的效果最好。

2.2 對(duì)高脂日糧大鼠血脂及相關(guān)酶活性的影響

油茶多酚或阿托伐他汀處理對(duì)高脂日糧大鼠血脂及相關(guān)酶活性影響的測(cè)定結(jié)果見表3。

表3 對(duì)大鼠血脂及相關(guān)酶活性的影響Table 3 Effects on serum lipid levels and related enzyme activities of rats

由表3可知，總膽固醇含量除了2.5 mL/kg BW油茶多酚處理組與高脂飼料組（3.02 mmol/L）不具有極顯著性差異外，其余處理組均有較大程度的降低（P＜0.01），且阿托伐他汀處理組和15 mL/kg BW油茶多酚處理組效果較好，與基礎(chǔ)飼料組不具有極顯著性差異（P＞0.01）。各組大鼠經(jīng)阿托伐他汀或油茶多酚處理后甘油三酯的含量均遠(yuǎn)低于高脂飼料組，但都高于基礎(chǔ)飼料組（P＜0.01），說明有一定降低甘油三酯的效果，但相對(duì)基礎(chǔ)飼料組不能完全清除。除15 mL/kg BW劑量油茶多酚處理組高密度脂蛋白（1.62 mmol/L）相對(duì)于高脂飼料組具有極顯著性升高外，其余處理組均不具有極顯著性。阿托伐他汀和油茶多酚處理組低密度脂蛋白均低于高脂飼料組，且均具有極顯著性差異。高脂飼料組大鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性最高，分別達(dá)到了77.42 U/L、121.36 U/L，說明高脂飼料組大鼠肝臟受損最為嚴(yán)重。各處理組大鼠經(jīng)過阿托伐他汀或油茶多酚處理后，2種酶的活性均有較大程度的降低，較高脂飼料組均具有極顯著性差異（P＜0.01）。但除了15 mL/kg BW劑量處理組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性與基礎(chǔ)飼料組不具有極顯著性差異外，其余處理組谷丙轉(zhuǎn)氨酶活均遠(yuǎn)高于基礎(chǔ)飼料組，且各處理組大鼠谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均遠(yuǎn)高于基礎(chǔ)飼料組。說明阿托伐他汀或油茶多酚處理可緩解及修復(fù)高脂日糧對(duì)大鼠肝臟的損傷，但不能完全阻止其損傷。

2.3 對(duì)高脂日糧大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

油茶多酚或阿托伐他汀處理對(duì)高脂日糧大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)影響的測(cè)定結(jié)果見表4。

由表4可知，ACAT1是導(dǎo)致游離膽固醇向膽固醇酯轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵性酶。ACAT1的過量表達(dá)將導(dǎo)致肝臟酯化膽固醇和總膽固醇的含量增加。高脂飼料組大鼠ACAT1的相對(duì)表達(dá)量非常高（1.51），阿托伐他汀組含量最低，僅為高脂飼料組的64.24%，且低于油茶多酚處理組。DGAT2可催化甘油二酯合成TG并促進(jìn)脂滴（neutrallipids，LDs）的形成。高脂飼料組大鼠DGAT2的相對(duì)表達(dá)量最高（1.45），阿托伐他汀組和15 mL/kg BW多酚處理組相對(duì)表達(dá)量較低，分別為1.10、1.12。LCAT是一種固醇?；D(zhuǎn)移酶，可加強(qiáng)HDL對(duì)外周組織膽固醇的清除能力。高脂飼料組大鼠LCAT的相對(duì)表達(dá)量最低（0.52），阿托伐他汀或油茶多酚處理后LCAT的相對(duì)表達(dá)量均有較大程度的升高（P＜0.01）。

表4 對(duì)大鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因相對(duì)表達(dá)量的影響Table 4 Effect on relative expression of the genes involved in lipid metabolism in rats livers

解偶聯(lián)蛋白UCPs是哺乳動(dòng)物特有的、存在于線粒體內(nèi)膜上的一種具有調(diào)節(jié)質(zhì)子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)作用的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，可提高機(jī)體能量消耗。高脂飼料組大鼠UCP2的相對(duì)表達(dá)量最低（0.53），阿托伐他汀或油茶多酚處理后UCP2的相對(duì)表達(dá)量均有較大程度的升高（P＜0.01）。MCD丙二酰輔酶A脫羧酶是調(diào)節(jié)脂肪酸氧化的重要因子，上調(diào)MCD基因的表達(dá)將有利于減少體內(nèi)游離脂肪酸（free fat acid，F(xiàn)FA）和肝臟中甘油三酯（TG）的含量。高脂飼料組大鼠MCD的相對(duì)表達(dá)量最低（0.28），阿托伐他汀或油茶多酚處理后MCD的相對(duì)表達(dá)量均有較大程度的升高（P＜0.01）。CPT-1肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶在脂肪氧化的初期起到了催化作用，同時(shí)對(duì)脂肪氧化的整個(gè)過程起著調(diào)節(jié)作用。高脂飼料組大鼠CPT-1的相對(duì)表達(dá)量最低（0.56），阿托伐他汀或油茶多酚處理后CPT-1的相對(duì)表達(dá)量均有較大程度的升高（P＜0.01）。FAS是脂肪酸合成的關(guān)鍵酶之一，F(xiàn)AS的基因表達(dá)的下調(diào)，則能減少脂肪合成。高脂飼料組大鼠FAS的相對(duì)表達(dá)量最高（2.37），阿托伐他汀或油茶多酚處理后FAS的相對(duì)表達(dá)量均有較大程度的降低（P＜0.01），其中15 mL/kg BW劑量茶多酚處理組表達(dá)量?jī)H為高脂飼料組的56.54%。SREBP是脂質(zhì)代謝調(diào)控因子，其基因表達(dá)量的減少，可降低細(xì)胞內(nèi)總膽固醇含量。高脂飼料組大鼠SREBP的相對(duì)表達(dá)量最高（1.92），阿托伐他汀或油茶多酚處理后SREBP的相對(duì)表達(dá)量均有較大程度的降低（P＜0.01）。其中15 mL/kg BW劑量茶多酚處理組表達(dá)量?jī)H為高脂飼料組的60.41%。

2.4 對(duì)高脂日糧大鼠肝臟勻漿抗氧化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果

油茶多酚或阿托伐他汀處理對(duì)高脂日糧大鼠肝臟勻漿抗氧化指標(biāo)影響的測(cè)定結(jié)果見表5。

表5 對(duì)高脂日糧大鼠肝臟勻漿抗氧化指標(biāo)的影響Table 5 Effect on antioxidant index of high-fat diet rat liver homogenate

由表5可知，高脂飼料組中SOD、GSH-Px酶活性均最低，分別僅為281.35、509.41 U/mg，大鼠經(jīng)阿托伐他汀或油茶多酚處理后，相應(yīng)的酶活性均有較大程度的提高，相對(duì)于高脂飼料組均具有極顯著性差異（P＜0.01），且15 mL/kg BW茶多酚處理組SOD酶活性增加最多，阿托伐他汀處理組GSH-Px酶活性增加最多。但是阿托伐他汀或油茶多酚處理組SOD、GSH-Px兩指標(biāo)均低于基礎(chǔ)飼料組。高脂飼料組中MDA的含量最高，達(dá)到了3.14 nmol/mg，大鼠經(jīng)過阿托伐他汀或油茶多酚處理后MDA的含量有了較大程度的降低，且阿托伐他汀藥物處理組和15 mL/kg BW茶多酚處理組效果較好，其MDA含量接近了基礎(chǔ)飼料組（P＞0.01），可較大程度地減輕膜脂的過氧化損傷。

2.5 對(duì)高脂日糧大鼠肝臟組織中抗氧化基因表達(dá)量的影響

油茶多酚或阿托伐他汀處理對(duì)高脂日糧大鼠肝臟組織中抗氧化基因表達(dá)量影響的測(cè)定結(jié)果見表6。

表6 對(duì)大鼠肝臟組織中抗氧化基因表達(dá)水平的影響Table 6 Effects on the expression of antioxidant genes in rat livers

由表6可知，高脂飼料組SOD1基因的相對(duì)表達(dá)量最低，僅為0.56，經(jīng)過阿托伐他汀或油茶多酚處理后，大鼠肝臟組織中SOD1基因的表達(dá)有極顯著性增加（P＜0.01），且15 mL/kg BW茶多酚處理組效果最好，相對(duì)于高脂飼料組增加了1.93倍。高脂飼料組CAT基因同樣非常低，僅為0.41，此時(shí)阿托伐他汀處理組效果最好，相對(duì)于高脂飼料組增加了3.07倍。GPX-1調(diào)控著GSH-Px酶的活性，可阻斷活性氧對(duì)機(jī)體造成的進(jìn)一步損傷，高脂飼料組GPX1基因相對(duì)表達(dá)量也非常低，僅為0.68，此時(shí)15 mL/kg BW油茶多酚處理組效果最好，相對(duì)于高脂飼料組增加了1.36倍。谷氨酰半胱氨酸連接酶（glutamatecysteine ligase，GCL）是 GSH-Px生物合成的限速酶，各處理組GCLM基因的相對(duì)表達(dá)量都非常高，均遠(yuǎn)超高脂飼料組和基礎(chǔ)飼料組，其中阿托伐他汀處理組效果最好（1.76），相對(duì)于基礎(chǔ)飼料組提高了0.76倍。

3 結(jié)論與討論

實(shí)驗(yàn)以油茶多酚和大鼠作為研究對(duì)象。大鼠經(jīng)過高脂日糧喂食6周后，相對(duì)于基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大鼠體重有了較大程度的提高，同時(shí)肝體比也相對(duì)于基礎(chǔ)飼料組增加了許多，說明經(jīng)過高脂飼料飼養(yǎng)能讓大鼠在短期時(shí)間內(nèi)快速增重，高脂飼料處理效果較好。當(dāng)采用油茶多酚對(duì)高脂日糧大鼠進(jìn)行按時(shí)灌胃后，相對(duì)于高脂飼料組大鼠體重和肝體比有所下降。大鼠經(jīng)過高脂日糧喂食后肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的活性均具有較大程度的提高，此時(shí)大鼠肝臟受到了一定程度的損傷，且含量越高，損傷越嚴(yán)重，大鼠經(jīng)過油茶多酚處理后，相對(duì)于高脂飼料組兩種酶活性均有較大程度的降低（P＜0.01），說明油茶多酚具有一定保護(hù)肝臟的作用。同時(shí)經(jīng)過油茶多酚喂養(yǎng)高脂飼料處理后的大鼠，大鼠體內(nèi)總膽固醇TC、甘油三酯TG、低密度脂蛋白LDL-C的含量較高脂飼料組具有極顯著水平的降低（P＜0.01），而高密度脂蛋白HDL-C的含量具有一定程度的提高。

相對(duì)于高脂飼料組，油茶多酚處理組大鼠基因ACAT1、DGAT2、FAS、SREBP 的相對(duì)表達(dá)量具有明顯的降低（P＜0.01）。ACAT1是一種具有催化作用的多聚體變構(gòu)酶，也是形成膽固醇酯的唯一性關(guān)鍵酶，ACAT1基因的下調(diào)表達(dá)將有利于總膽固醇TC含量的降低[15]。DGAT2可以促進(jìn)腸道對(duì)脂肪的吸收作用，同時(shí)能夠催化甘油二酯合成TG并促進(jìn)LDs的形成，通過下調(diào)DGAT2基因的表達(dá)可以避免甘油三酯和膽固醇在肝臟中的大量形成與堆積[16]。SREBP是導(dǎo)致甘油三酯重新合成途徑的重要轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，同時(shí)也是調(diào)控脂質(zhì)代謝的重要轉(zhuǎn)錄因子，其基因表達(dá)量的減少，可有效降低細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量[17]。同時(shí)通過減少FAS基因的表達(dá)，可抑制肝臟中脂肪酸的合成，減少了脂質(zhì)的聚集[18]。相對(duì)于高脂飼料組，油茶多酚處理組大鼠基因LCAT、UCP2、MCD、CPT-1 的相對(duì)表達(dá)量具有明顯的升高（P＜0.01）。LCAT基因使HDL表面游離膽固醇的酯化增加，LCAT基因的上調(diào)表達(dá)，可加強(qiáng)HDL對(duì)外周組織膽固醇的清除能力，降低膽固醇含量[19]。通過增強(qiáng)UCP2基因表達(dá)，可提高機(jī)體能量消耗，從而避免白色脂肪過度蓄積及肥胖的發(fā)生，這也可能是其具有或可增強(qiáng)減肥效果的原因之一[20]。MCD是調(diào)節(jié)脂肪酸氧化的重要因子，它能催化丙二酰輔酶A轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴］o酶A和二氧化碳，上調(diào)MCD基因的表達(dá)則有利于減少體內(nèi)的游離脂肪酸（FFA）和肝臟中甘油三酯（TG）的積累[21]。CPT-1能夠介導(dǎo)調(diào)控將長(zhǎng)鏈脂肪酸從細(xì)胞質(zhì)胞液運(yùn)送至線粒體進(jìn)行β-氧化，上調(diào)CPT-1基因的表達(dá)可提高脂肪酸在肝細(xì)胞中的氧化，降低細(xì)胞中脂質(zhì)的積累[22]。

肝臟作為食物、藥物甚至毒素的主要代謝器官，含有豐富的綜合功能抗氧化酶。相對(duì)于高脂飼料組，茶多酚處理組大鼠肝臟體內(nèi)SOD、GSH-Px酶活性極顯著升高，MDA含量極顯著降低。SOD和GSH-Px是抗氧化酶系統(tǒng)，具有較強(qiáng)清除自由基的作用。MDA是脂質(zhì)氧化后的產(chǎn)物，可通過MDA含量的多少間接反映膜脂過氧化的程度。油茶多酚具有很好的抗氧作用，可提高體內(nèi)抗氧化酶的活性，提高機(jī)體抗氧化能力。相對(duì)于高脂飼料組，油茶多酚處理組大鼠抗氧化基因SOD1、GPX1、CAT、GCLM的相對(duì)表達(dá)量具有明顯的升高（P＜0.01）。SOD 可將 O2-快速還原成 H2O2，從而達(dá)到清除超氧自由基的作用，同時(shí)H2O2再經(jīng)過GSH-Px和CAT的作用還原成H2O[23]。GPX1是GSH-Px家族中存在最為廣泛的一種酶，可有效地阻止活性氧對(duì)機(jī)體組織的損傷。谷氨酰半胱氨酸連接酶在GSH生物合成的過程中起到了限速酶的作用，同時(shí)GCL的調(diào)節(jié)亞基（GCLM）和催化亞基（GCLC）是一種重要的抗氧化蛋白酶[24]，GCLM上調(diào)表達(dá)將有利于自由基的清除。

同時(shí)15 mL/kg BW油茶多酚和10 mL/kg BW阿托伐他汀對(duì)高脂日糧大鼠均具有較強(qiáng)降血脂和抗氧化的作用。目前本文對(duì)茶多酚降血脂、抗氧化的實(shí)驗(yàn)還處在大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，后期可對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物代謝實(shí)驗(yàn)作進(jìn)一步的研究。從而為今后相關(guān)降血脂、抗氧化功能產(chǎn)品的開發(fā)提供一定理論依據(jù)，以進(jìn)一步的促進(jìn)油茶資源開發(fā)、利用，提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。