劉經(jīng)緯，胡 星，鄒軍榮，鄒曉峰

（1.贛南醫(yī)學院2018級碩士研究生；2.贛南醫(yī)學院2019級碩士研究生；3.贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院泌尿外科研究所，江西 贛州 341000）

雄激素受體（Aandrogen receptor，AR）可通過雄激素實現(xiàn)對靶基因的調(diào)控作用，可被多種細胞因子激活進而調(diào)節(jié)下游基因表達，參與人體多項生命活動，而異常表達的AR 則與腫瘤、不孕不育疾病、反復自然流產(chǎn)、尿道下裂、隱睪、血脂異常等多種疾病相關(guān)。AR 基因的第1 外顯子GGN 重復序列是AR多態(tài)性與疾病研究的一大熱點。近來，關(guān)于GGN 重復序列長度、GGN 表達水平與疾病關(guān)系研究的報道越來越多，同時也在多種疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后等方面存在爭議，且其具體的機制研究尚不明確。本文就近些年雄激素受體基因GGN 重復序列在雄激素相關(guān)腫瘤方面的研究進展作一綜述。

1 AR結(jié)構(gòu)

AR 屬核受體的甾體激素類，是配體依賴性的反式轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白，其基因位于Xq11-12，包括8 個外顯子及7 個內(nèi)含子。AR 由N 末端反式激活域（NTD）、DNA 結(jié)合域（DBD）、C 端配體結(jié)合域（LBD）和鉸鏈區(qū)四個主要功能域組成。NTD 是由第1外顯子編碼，參與AR 基因轉(zhuǎn)錄的激活，該區(qū)包含聚谷氨酰胺（CAG）、聚甘氨酸（GGC）兩個重復序列，且重復序列長度在不同人群中是有差異的。DBD 為DNA結(jié)合區(qū)域，負責DNA 應(yīng)答元件的特異性識別、信號核定位、與多種蛋白質(zhì)的結(jié)合，同時還是一個乙?；⒎核鼗图谆悬c［1］。LBD 可對配體進行識別，引導特定信號通路的選擇，該區(qū)域結(jié)構(gòu)發(fā)生改變可影響AR 對配體的親和力［2］。鉸鏈區(qū)為DBD 和LBD 連接的區(qū)域，具有參與AR 二聚體的形成、調(diào)節(jié)DNA的結(jié)合、AR的轉(zhuǎn)錄活性等重要功能。

2 AR 的激活及其在腫瘤中發(fā)揮作用的機制

正常情況下，AR 與熱休克蛋白HSP90 結(jié)合以無活性狀態(tài)存在于細胞質(zhì)內(nèi)，當其與雙氫睪酮（DHT）結(jié)合后，AR 從熱休克蛋白上脫落，并暴露核定位信號，被引導進入細胞核內(nèi)。入核后特異性識別靶基因，激活多種輔助因子，啟動基因轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮作用。

AR 以多種作用機制在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展等方面發(fā)揮作用。低水平的AR 可能會促進上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT），最終促進腫瘤上皮細胞的轉(zhuǎn)移擴散，并且是復發(fā)性去勢抵抗性腫瘤前列腺癌細胞轉(zhuǎn)移行為的潛在生化基礎(chǔ)。AR 可影響組織因子（TF）的表達水平，促進腫瘤組織血管的生成。AR 活性下降能抑制MAPK家族ERK1/2磷酸化，進而增加腫瘤細胞的遷移和侵襲能力，同時發(fā)揮耐藥作用［3］。AR 可誘導microRNA產(chǎn)生［4］，并調(diào)控microRNA影響腫瘤細胞的生物學行為［5］；AR 還可通過調(diào)控lncRNA、ceRNA，與lncRNA、ceRNA 相互調(diào)控的方式發(fā)揮作用［6］。此外，AR 可通過降低TGF-β 受體水平、降解細胞周期調(diào)節(jié)蛋白、與AR 共激活劑協(xié)同工作、自分泌或旁分泌機制刺激表皮生長因子受體合成等多種途徑發(fā)揮作用。

3 AR與GGN重復序列

AR 的表達水平受AR 基因的多態(tài)性影響，位于AR 基因的NTD 中三核苷酸重復區(qū)域GGC、CAG 直接決定AR 的分子多樣性［7］。重復序列GGN 可變長度在正常人群中為10～30［8］，研究顯示較短的GGN重復序列通常會導致較高的AR 反式激活活性，而較長的重復序列則會導致活性降低［9］；此外，GGN重復序列長度可影響蛋白水平，較短的等位基因形式會產(chǎn)生較高的AR蛋白水平［10］。

4 GGN重復序列與雄激素相關(guān)腫瘤關(guān)系

GGN 重復序列長度是AR 多態(tài)性的重要決定因素，直接影響AR 的轉(zhuǎn)錄活性，且在前列腺癌、睪丸癌、乳腺癌等多種腫瘤中均發(fā)現(xiàn)異常表達，表達情況與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、臨床病理特征及患者的預(yù)后情況密切相關(guān)。

4.1 GGN 重復序列與睪丸癌睪丸生殖細胞癌（SE）主要發(fā)生在15～44歲的男性中，是年輕男性中最常見的癌癥之一。在組織學上可分為兩類：精原細胞瘤（SEs）和非精原細胞瘤（NSE）。AR 與睪丸癌關(guān)系密切，雄激素/AR 信號轉(zhuǎn)導對于睪丸正常發(fā)育和功能發(fā)揮是必不可少的，當AR 基因功能缺失或突變時可導致睪丸腫瘤的發(fā)生［11］。有研究表明AR在SEs 細胞中比在NSE 細胞中表達量更高，雄激素/AR信號的激活在體內(nèi)和體外均能抑制SE細胞的生長，從而抑制雄激素/AR信號以促進SE細胞生長［12］。

JIANG W 等［8］的Meta 分析發(fā)現(xiàn)GGN 重復序列長度＞23 與睪丸癌風險增加有關(guān)，VASTERMARK等［13］的研究給出了截然相反的觀點，認為短GGN重復序列與睪丸癌的危險性、轉(zhuǎn)移性有關(guān)。BOGEFORS K等［14］在AR 基因與睪丸生殖細胞癌治療后精子恢復情況的研究中發(fā)現(xiàn)，雄激素受體基因CAG和GGN的重復序列長度是睪丸生殖細胞癌治療后精子發(fā)生恢復的預(yù)測指標。

4.2 GGN重復序列與前列腺癌前列腺癌是一類雄激素依賴性腫瘤，去勢治療在前列腺癌的早期能發(fā)揮良好的治療效果，晚期由于AR 的異常激活常使去勢效果不滿意。AR 參與了前列腺癌的惡性進展及轉(zhuǎn)移，AR-V1、AR-V4 在前列腺癌中呈高表達，且表達量與腫瘤等級呈正相關(guān)［15］，AR-V7 可作為預(yù)測去勢抵抗性前列腺癌復發(fā)和預(yù)后的一項重要生化指標［16］。

目前GGN 重復序列長度與前列腺癌風險關(guān)系尚存在爭議，但絕大部分研究認為短GGN 重復序列會增加前列腺癌的危險性，ZEEGERS MP 等［17］Meta分析研究發(fā)現(xiàn)GGN重復序列長度≤16的男性患前列腺癌的風險比GGN 重復序列長度≥16 的男性高31%。LI J 等［18］的Meta 分析提出了相反的觀點，認為GGN 重復序列長短不會增加前列腺癌的風險。GGN 重復序列長度與前列腺癌風險關(guān)系尚未達成共識，可能與GGN 重復序列長度的長短劃分暫無統(tǒng)一標準有關(guān)，且地區(qū)和人種不同也可能會帶來結(jié)果上的差異。德國和尼日利亞人種均報道短GGN 重復序列長度與前列腺癌風險無關(guān)，而基于中國人的病例對照研究發(fā)現(xiàn)中國人有較長的GGN 重復序列，重復長度中位值為23，與重復序列長度≥23 的男性相比，GGN重復序列長度短于23的男性患前列腺癌的風險增加了12%［19］；且同一國家不同地區(qū)GGN重復序列長度也存在差異，在中國攜帶23 個GGN 重復序列的漢族女性數(shù)量明顯少于回族女性［20］，印度南部、北部地區(qū)GGN 重復序列與前列腺癌風險的關(guān)系表現(xiàn)出明顯的差異［21］。RODRIGUZE GG［22］通過對72 例前列腺癌根治術(shù)患者的術(shù)后病理標本進行PCR、免疫組織化學及基因測序檢測，發(fā)現(xiàn)AR 基因中較短的CAG和GGN重復序列與人前列腺癌中AR信號強度增加有關(guān)，并與疾病的侵襲性有關(guān)。

4.3 GGN重復序列與乳腺癌乳腺癌是一種激素依賴性腫瘤，AR 正常情況下抑制乳腺上皮細胞增殖，在女性絕經(jīng)、肥胖患者、雌激素水平大幅度下降的情況下，AR 可促進雄激素向雌激素轉(zhuǎn)變；當AR發(fā)生突變時，可與雌激素反應(yīng)原件結(jié)合激活雌激素調(diào)節(jié)基因，與雌激素協(xié)同作用促進乳腺上皮細胞增殖［23］。此外，雄激素的一些代謝產(chǎn)物也可刺激乳腺上皮細胞的增殖，AR 還可通過MAPK-ER/PR 信號通路參與乳腺的上皮細胞的增殖。AR 在乳腺癌所有分子分型中均有表達，早期乳腺癌中AR 的表達量顯著高于晚期乳腺癌，AR 高表達可能作為乳腺癌良好預(yù)后的指標［24］。AR 還與多種分子分型的乳腺癌預(yù)后有著密切的關(guān)系，其中在ERα 陽性乳腺癌中，AR/ER≥2 顯示更具侵襲性的病理生物學特征［25］，提示該比值有可能作為乳腺癌具有更差預(yù)后的獨立指標。

NICOLA MS 等［26］在一項年輕女性乳腺癌風險與雄激素受體（CAG）n 和（GGC）n 多態(tài)性的病例對照研究中發(fā)現(xiàn)：GGN 重復序列長度≥17 與乳腺癌風險顯著降低有關(guān)，且未發(fā)現(xiàn)GGN重復序列和CAG重復序列的組合作用。ANA G 等［27］研究發(fā)現(xiàn)在雄激素受體基因的外顯子1 上攜帶大量CAG 和GGN 重復序列的女性患乳腺癌的風險增加，并對CAG、GGN重復序列長度進行組合，發(fā)現(xiàn)CAG 重復序列長度＞22 且GGN 重復序列長度＞24 組的女性患乳腺癌的風險最高。

4.4 GGN 重復序列與子宮內(nèi)膜癌AR 與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后有密切的關(guān)系。子宮內(nèi)膜癌細胞幾乎均有AR 的表達，AR 在子宮內(nèi)膜癌中的表達隨患者國際婦產(chǎn)科協(xié)會（International federation of gynecology and obstetrics，F(xiàn)IGO）分期、組織病理分級的升高而下降，其中子宮內(nèi)膜癌組織中AR 陽性表達率最高，不典型增生子宮內(nèi)膜AR 表達稍低。此外，AR 的表達與雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）的表達呈正相關(guān)。李凡等［28］對383 例子宮內(nèi)膜癌患者的研究發(fā)現(xiàn)AR 表達陰性患者無復發(fā)生存時間短于AR 表達陽性患者，且子宮內(nèi)膜癌的病理分型及AR 表達情況是子宮內(nèi)膜癌復發(fā)的兩個重要影響因素，通過干預(yù)AR 的表達可延緩或控制子宮內(nèi)膜癌病情的發(fā)展。有研究顯示，子宮內(nèi)膜癌患者的CAG 和GGN 等位基因比正常健康對照組的CAG和GGN 等位基因長［29］，提示雄激素受體基因中CAG和GGN 短重復序列可能與子宮內(nèi)膜癌的良好預(yù)后有關(guān)。

4.5 GGN 重復序列與卵巢癌雄激素/AR 信號轉(zhuǎn)導在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，原發(fā)性惡性卵巢腫瘤約90%是上皮性卵巢癌，在絕大多數(shù)的上皮性卵巢癌中均能檢測到AR 的表達。AR 可通過降低TGF-β 受體水平、降解卵巢癌細胞周期調(diào)節(jié)蛋白P27、與AR 共激活劑協(xié)同工作、自分泌或旁分泌機制刺激表皮生長因子受體（EGFR）的合成等促進細胞增殖、遷移、侵襲和血管生成，抑制腫瘤細胞凋亡［30］。此外，IL-6和IL-8高表達可激活A(yù)R促進上皮性卵巢癌的增殖，且IL-6和IL-8存在交互作用，這可能是通過MAPK途徑和Src活化來實現(xiàn)的［31］；治療上雄激素合成抑制劑、AR 受體阻斷劑已廣泛應(yīng)用于卵巢癌的臨床治療；沉默AR 可下調(diào)多個化療相關(guān)抗性基因的表達，并將紫杉醇抗性細胞對紫杉醇的敏感性提升3倍，AR 可能是預(yù)測患者治療結(jié)果的潛在生物標志物，AR 高表達可改善卵巢癌5年無病生存率和總體生存率，預(yù)示著上皮性卵巢癌預(yù)后良好［32］。

GGN 重復序列與卵巢癌的關(guān)系研究，孟祥瑞等［33］在中國女性上皮性卵巢癌病例對照研究中尚未發(fā)現(xiàn)GGN 重復序列長度與疾病風險的關(guān)系；LUDWIG AH等［34］在對波蘭中部215例卵巢癌和352例對照的GGN 重復序列研究中發(fā)現(xiàn)：高加索女性的GGN 重復序列長度在11～24 之間，GGN 重復長度越長，卵巢癌發(fā)病風險越低，且GGN 重復序列長度每增加1，卵巢癌的患病風險下降16%。

5 展 望

AR 在多種腫瘤中異常表達，大量研究證實AR在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用，GGN 重復序列作為AR 基因的重要組成部分，直接決定了AR 的多態(tài)性。近年來，GGN 重復序列長度和表達水平在腫瘤中的作用受到的關(guān)注越來越多，越來越多有關(guān)的作用機制及與其有交互作用的信號通路被發(fā)現(xiàn)，為腫瘤的診斷和治療提供了更多的理論依據(jù)。然而，目前對GGN 重復序列在腫瘤中的作用尚未完全研究透徹。因此，非常需要進一步的研究做出更透徹的解釋，為腫瘤的診斷和治療提供新的有效手段，并為新型抗癌藥物的研發(fā)提供新的線索和思路。