司譽(yù)豪 馬勇 許奇 李紹爍 郭楊 潘婭嵐 王禮寧 劉孟敏 孫杰 涂鵬程 吳承杰楊光露 王建偉 尹恒*

1.浙江省中醫(yī)院骨傷科，浙江 杭州 310006 2.南京中醫(yī)藥大學(xué)骨傷研究所、骨傷修復(fù)與重建新技術(shù)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210023 3.南京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院·中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院，江蘇 南京 210023 4.南京中醫(yī)藥大學(xué)無錫附院骨傷科，江蘇 無錫 214071

龜鹿二仙膠又名龜鹿二仙膏、龜鹿參芪膠、龜鹿膠等，出自于王三才所著《醫(yī)便》，由龜甲膠、鹿角膠、人參、枸杞子組成，有滋陰養(yǎng)血、填精助陽等功效[1]?！夺t(yī)便》載其：“專治男婦真元虛損，久不孕育……服此膠百日，即有孕……并治男子酒色過度，銷鑠真陰；婦人七情傷損血?dú)?；諸虛百損，五勞七傷，并皆治之?！迸R床常用于陰陽兩虛、虛勞、遺精陽痿、腰膝酸軟、痿軟無力、視物昏花等。中醫(yī)對(duì)于骨質(zhì)疏松癥描述有“骨痿”、“骨枯”、“骨痹”等，其中以“骨痿”癥狀最為貼切，《素問·痿論篇》曰“腎者水藏也……則骨枯而髓虛……發(fā)為骨痿。”張介賓也直言“腎痿者，骨痿也”?？梢?，腎虛髓虧為骨質(zhì)疏松癥的根本中醫(yī)病機(jī)，這與龜鹿二仙膠適應(yīng)癥相合，因此臨床常用于論治骨質(zhì)疏松癥。目前尚無醫(yī)家對(duì)龜鹿二仙膠的現(xiàn)代臨床應(yīng)用與機(jī)制研究進(jìn)行系統(tǒng)總結(jié)，故而筆者整理了相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行綜述，為深入研究龜鹿二仙膠治療骨質(zhì)疏松癥的臨床療效與機(jī)制提供相關(guān)參考。

1 臨床應(yīng)用

當(dāng)代醫(yī)家中，周修通[2-3]于2001年最早公開報(bào)道將龜鹿二仙湯運(yùn)用于骨質(zhì)疏松癥的治療中，他自擬“龜鹿二仙湯”聯(lián)合葡萄酸鈣片/碳酸鈣片用于治療罹患骨質(zhì)疏松癥的老年女性，結(jié)果提示聯(lián)合使用“龜鹿二仙湯”可明顯增強(qiáng)西藥療效。而后楊偉岸[4]運(yùn)用龜鹿二仙湯加味治療老年脊椎骨質(zhì)疏松性腰背部疼痛獲得了92.1 %有效率，黃民興等[5]也觀察到龜鹿二仙膠可明顯降低脊椎骨質(zhì)疏松性腰背痛老年患者VAS評(píng)分。陳治諶[6]的研究將龜鹿二仙膠丸劑與福善美進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)二者在骨代謝指標(biāo)及骨密度(bone mineral density，BMD)方面均具有良好的療效，區(qū)別在于，福善美1年內(nèi)即可顯著提高患者BMD，而龜鹿二仙膠丸劑的療效需3年方可較為明顯。尹恒等[7]亦是將龜鹿二仙膠與西藥單獨(dú)對(duì)比，發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠對(duì)于原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥患者BMD的提升效果顯著優(yōu)于阿爾法骨化醇。王科艇等[8]的研究稍有不同，他們將龜鹿二仙膠與福美加聯(lián)用鈣爾奇作對(duì)比，發(fā)現(xiàn)兩種療法干預(yù)6月后在BMD方面無顯著差異，而龜鹿二仙膠可額外加強(qiáng)患者日常體力、精力，在提升患者健康狀況上略優(yōu)于聯(lián)用福美加與鈣爾奇。

注射用鮭魚降鈣素可以顯著降低高轉(zhuǎn)換型骨丟失[9]，齊潤文[10]發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠聯(lián)合鮭魚降鈣素可明顯緩解骨質(zhì)疏松性腰背痛，且長短期療效均明顯強(qiáng)于單用鮭魚降鈣素。此外，也有將龜鹿二仙膠與抗阻運(yùn)動(dòng)聯(lián)合使用的報(bào)道，結(jié)果顯示抗阻運(yùn)動(dòng)與龜鹿二仙膠均可改善患者高轉(zhuǎn)換型骨代謝，提高腰椎、髖部BMD，而二者聯(lián)用后對(duì)患者破骨細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)的抑制作用明顯優(yōu)于單用其一[11]。齊鵬坤等[12-13]針對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥進(jìn)行了兩種試驗(yàn)方案，既采用龜鹿二仙膠對(duì)比阿侖膦酸鈉，也比較了兩藥聯(lián)用與單獨(dú)阿侖膦酸鈉/龜鹿二仙膠的療效差異，結(jié)果顯示二者聯(lián)用比單用其一可顯著提高患者BMD，緩解疼痛。并且，龜鹿二仙膠抗骨質(zhì)疏松作用可能與調(diào)節(jié)患者體內(nèi)雌二醇、睪酮有關(guān)。張健[14]的研究方案與齊鵬坤等[13]幾乎相同，結(jié)果顯示，龜鹿二仙膠聯(lián)合阿侖膦酸鈉對(duì)于絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的臨床療效優(yōu)于阿侖膦酸鈉，可明顯升高患者腰椎及股骨近端BMD，改善血清IGF-1及TNF-α水平。

2 基礎(chǔ)研究

2.1 在體實(shí)驗(yàn)

對(duì)于龜鹿二仙膠治療骨質(zhì)疏松癥的具體機(jī)制研究目前仍僅見于國內(nèi)學(xué)者及文獻(xiàn)，目前涉及到的動(dòng)物模型包括：去卵巢(OVX)大鼠骨質(zhì)疏松模型[15-21]、激素誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松模型[22-23]、激素誘導(dǎo)斑馬魚骨質(zhì)疏松模型[24-26]。其中，以卵巢切除12周后建立的OVX大鼠骨質(zhì)疏松模型最為常見，張瑤等[17,19-20]以O(shè)VX大鼠為對(duì)象進(jìn)行了三種實(shí)驗(yàn)方案，首先他們對(duì)比了龜鹿二仙膠與戊酸雌二醇片，結(jié)果顯示，與戊酸雌二醇片比較，龜鹿二仙膠治療組 Ca 含量、BMD顯著增高，而P、Ca/P、β-Crosslaps、PINP 含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而后他們比較了包括龜鹿二仙膠在內(nèi)的多個(gè)補(bǔ)腎方對(duì)于OVX大鼠骨質(zhì)疏松模型生物力學(xué)以及骨代謝指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠、補(bǔ)腎健脾方、仙靈骨葆膠囊組的大鼠BMD顯著高于雌二醇組大鼠，而二仙湯組與仙靈骨葆膠囊組的β-Crosslaps顯著降低。在二仙湯、龜鹿二仙膠、補(bǔ)腎健脾湯三者比較中，補(bǔ)腎健脾湯組β-Crosslaps及PINP含量均顯著增高，龜鹿二仙膠組PINP含量顯著增高，Ca/P比值高于仙靈骨葆膠囊組、二仙湯組、補(bǔ)腎健脾湯。在腰椎壓縮試驗(yàn)及股骨三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)中，龜鹿二仙膠組、二仙湯組、補(bǔ)腎健脾湯組的最大負(fù)荷量、最大應(yīng)力、彈性模量明顯高于雌二醇組與仙靈骨葆膠囊組，其中以龜鹿二仙膠組最為顯著，表明其具有提升OVX大鼠生物力學(xué)性能，改善鈣磷代謝，促進(jìn)骨形成與抑制骨吸收的功效。上述三種方案[17,19-20]均使用了同一種干預(yù)劑量，而牛素生等[16,18]研究則將龜鹿二仙膠分為高、中、低劑量進(jìn)行干預(yù)，通過測定OVX大鼠血清E2、血清ALP、TRACP、左側(cè)股骨BMD、最大載荷、骨小梁面積等指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，中劑量(按體表面積換算人臨床用量而來)龜鹿二仙膠對(duì)于調(diào)節(jié)OVX大鼠激素水平，增強(qiáng)骨密度與骨顯微結(jié)構(gòu)效果最佳。陳竑明等[21]的研究方案與張瑤等[17,19-20]類似，但著重檢測了骨骼肌Akt蛋白表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠對(duì)OVX大鼠有顯著的治療作用，能升高腰椎BMD及Akt蛋白和基因的表達(dá)量。王立新[15]將龜鹿二仙膠與倍力美對(duì)比，發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠提取物對(duì)大鼠脛骨上段松質(zhì)骨的靜態(tài)學(xué)參數(shù)及動(dòng)態(tài)學(xué)參數(shù)都有較好的改善作用，在股骨中段的皮質(zhì)骨、遠(yuǎn)段松質(zhì)骨、腰椎松質(zhì)骨的生物力學(xué)改善效果與倍美力相近。

郭建博[22]與徐衛(wèi)峰[23]均采用地塞米松誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松模型，前者檢測血清指標(biāo)與牛素生等[16]的研究相近，包括TRACP-5b、ALP、N-MID-OT、股骨BMD等，結(jié)果表明龜鹿二仙膠對(duì)于激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松大鼠也具有提高骨密度、促成骨、抑破骨的作用，且效果明顯優(yōu)于阿侖膦酸鈉。后者著重探討機(jī)制，將龜鹿二仙膠分為高、低劑量組，發(fā)現(xiàn)兩種劑量均能顯著增加大鼠股骨BMD，降低血清ALP、IL-6、IL-β、TNF-α水平，提高降鈣素與血清E2。Western blot顯示大鼠滑膜Nrf-2、HO-1蛋白表達(dá)顯著升高，而p-IκB、P-NF-κB蛋白表達(dá)明顯下降，表明龜鹿二仙膠發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用可能與調(diào)控Nrf-2/HO-1/NF-κB有關(guān)聯(lián)。

尹恒[25]與錢哲[26]的研究均采用了激素誘導(dǎo)的斑馬魚骨質(zhì)疏松模型。前者證實(shí)了龜鹿二仙膠能夠促進(jìn)激素誘導(dǎo)的斑馬魚骨質(zhì)疏松模型合成I型膠原蛋白，且此機(jī)制是通過上調(diào)TGF-β/Smad信號(hào)通路的上游蛋白TGF-β1、TGF-β2及下游蛋白Smad3實(shí)現(xiàn)的。后者除再次驗(yàn)證龜鹿二仙膠抗骨質(zhì)疏松作用與激活TGF-β/Smad信號(hào)通路有關(guān)外，還發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠可降低IL-6、IL-β、TNF-α等炎癥因子，調(diào)控核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和AP-1抑制炎癥反應(yīng)所致骨量丟失。

2.2 離體實(shí)驗(yàn)

目前龜鹿二仙膠的離體實(shí)驗(yàn)均為細(xì)胞水平研究，涉及成骨細(xì)胞(osteoblasts，OB)/成骨細(xì)胞系(Mc3t3-E1、ROS17/2.8)、破骨細(xì)胞(osteoclasts，OC)、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs)，人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞(human endometrial stromal cells，HESCs)。徐衛(wèi)峰[23]采用地塞米松誘導(dǎo)小鼠成骨細(xì)胞系Mc3t3-E1損傷，觀察龜鹿二仙膠含藥血清對(duì)成骨細(xì)胞系的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)含藥血清組的細(xì)胞上 IL-6、IL-β、TNF-α水平顯著下降。Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)Nrf-2、HO-1蛋白表達(dá)明顯升高，并且p-IκB、P-NF-κB蛋白表達(dá)明顯下降。表明龜鹿二仙膠可顯著改善地塞米松誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松，且機(jī)制與調(diào)控Nrf-2/HO-1/NF-κB有關(guān)，該結(jié)果與其在體實(shí)驗(yàn)結(jié)果相吻合。而錢哲等[27]采用了大鼠成骨肉瘤細(xì)胞系ROS17/2.8，發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠可通過調(diào)控TGF-β而促進(jìn) I 型膠原的表達(dá)起抗骨質(zhì)疏松作用。該結(jié)果與尹恒[25]一致，后者發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠含藥血清可明顯提高ROS17/2.8細(xì)胞株TGF-β1、TGF-β2、Smad3、COL1A1、COL1A2蛋白及基因表達(dá)量。袁明陽[28]同樣采用了ROS17/2.8作為研究對(duì)象，其實(shí)驗(yàn)方案、結(jié)果與尹恒[25]、錢哲等[27]的研究基本一致，在此不做過多贅述。錢康[29-30]的兩項(xiàng)研究均體外分離大鼠原代OB，分別探究了不同濃度龜鹿二仙膠含藥血清(20 %、15 %、10 %)對(duì)OB增殖、周期以及OPG/ODF系統(tǒng)的影響，結(jié)果顯示龜鹿二仙膠含藥血清對(duì)OB具有促進(jìn)增殖和抗凋亡作用，且濃度越高，效果越顯著。同時(shí)當(dāng)含藥血清濃度在20 %時(shí)OPG基因表達(dá)量最高，而ODF基因表達(dá)量最低，亦是呈現(xiàn)出了濃度依賴性。該結(jié)果與朱崇梅[31]的結(jié)果如出一轍，后者亦是發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙湯含藥血清可呈劑量依賴性地促進(jìn)OB增殖分化，并且上調(diào)OPG表達(dá)和抑制ODF表達(dá)。

毛翠平等[32]不但體外分離得到大鼠原代OB，還利用1,25(OH)2D3誘導(dǎo)骨髓單核細(xì)胞獲得原代OC，發(fā)現(xiàn)10 %龜鹿二仙膠含藥血清可增加 IGF-1分泌量，促進(jìn)OB增殖，并且能夠顯著抑制由1,25(OH)2D3誘導(dǎo)的破骨分化，起抗骨質(zhì)疏松作用。楊樹華等[33-34]應(yīng)用龜鹿二仙膠醇提物干預(yù)RAW264.7誘導(dǎo)的破骨樣細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)與生理鹽水組比較，龜鹿二仙膠醇提物含藥血清可降低破骨樣細(xì)胞 CtsK、TRAP基因表達(dá)，提高CTR基因表達(dá)，抑制骨吸收活性。牛素生等[35]觀察了龜鹿二仙膠含藥血清對(duì)BMMSCs成骨分化的作用，發(fā)現(xiàn)10 %龜鹿二仙膠含藥血清與成骨誘導(dǎo)液都可以促進(jìn)BMMSCs向OB分化，且作用機(jī)制可能與增強(qiáng)Fzd-2表達(dá)、抑制Axin-2表達(dá)和激活Wnt/β-catenin通路有關(guān)。不僅如此，徐衛(wèi)峰等[36]還發(fā)現(xiàn)龜鹿二仙膠含藥血清能夠保護(hù)BMMSCs細(xì)胞活性，免受地塞米松損傷，降低炎性反應(yīng)。尚冰等[37]的研究較為與眾不同，他們并未采用常用的含藥血清作為干預(yù)手段，而是觀察了不同濃度龜鹿二仙膏(10-4、10-6、10-8mol /L)對(duì)HESCs增殖和胰島素樣生長因子(IGF)-1表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，高濃度龜鹿二仙膏能夠顯著促進(jìn)HESCs增殖活性，提升 IGF-1基因、蛋白表達(dá)。一定程度上說明了龜鹿二仙膠具有調(diào)節(jié)卵巢相關(guān)激素水平的功效，通過延緩女性衰老從而改善圍絕經(jīng)期女性骨質(zhì)疏松。

3 現(xiàn)代應(yīng)用迷思

3.1 相關(guān)研究量明顯不足

筆者通過檢索PubMed、中國知網(wǎng)(CNKI)、萬方數(shù)據(jù)庫(Wanfang Database)搜集文獻(xiàn)，然而并未檢索到任何相關(guān)英文文獻(xiàn)。此外，作為著名填精益髓、延年益壽的名方，龜鹿二仙膠相關(guān)的中文文獻(xiàn)數(shù)量也明顯不及其他補(bǔ)腎經(jīng)方。以CNKI舊版為例，檢索日期為從建庫至2020年11月11日，以“篇關(guān)摘”檢索“龜鹿二仙”可得結(jié)果共計(jì)286條，同樣方法檢索“左歸丸”(1 346條)、右歸丸(1 322條)、六味地黃丸(5 325條)、地黃飲子(1 102條)、金匱腎氣丸(2 232條)。個(gè)中原因頗多，但筆者推測，如此大的差異最有可能與龜鹿二仙膠藥材價(jià)格相關(guān)。龜甲膠、鹿角膠、人參均為名貴藥材，根據(jù)阿里巴巴自營健康醫(yī)藥旗艦店報(bào)價(jià)，龜甲膠(四方箄)售價(jià)為720元/盒(200 g)，鹿角膠(北京同仁堂)售價(jià)為1 026元/盒(108 g)，而金匱腎氣丸(北京同仁堂)15元/盒(60 g)、六味地黃丸(仲景牌)35元/盒(360丸)，左歸丸(仲景牌)65元/盒(45 g)。原材料價(jià)格昂貴、需長期服用等因素?zé)o疑抬高了龜鹿二仙膠的研究門檻，將研究經(jīng)費(fèi)不甚充裕的科研團(tuán)隊(duì)拒之門外。

3.2 臨床應(yīng)用方法不一

當(dāng)前貫以“龜鹿二仙膠”名稱的研究一定程度上存在名不符實(shí)的現(xiàn)象，不少研究者所用處方的組成、劑量、劑型等與龜鹿二仙膠原方相差較大，難以體現(xiàn)龜鹿二仙膠對(duì)于骨質(zhì)疏松癥的治療作用。例如有早期研究的處方為龜板12 g、鹿角片12 g、仙靈脾12 g、威靈仙12 g、熟地12 g、肉蓯蓉12 g、巴戟天12 g、黃芪12 g、黨參12 g、當(dāng)歸12 g、紅花3 g[2-3]。該方以“龜鹿”為君，另加藥9味，且無人參與枸杞子，龜板與鹿角片皆未制成膠狀，顯然與龜鹿二仙膠原方相去甚遠(yuǎn)。此方雖以“龜鹿二仙”為名，但并不足以代表龜鹿二仙膠。又如陳治堪[6]采用了以淀粉與蜂蜜制成的龜鹿二仙膠(丸劑)，且原藥材仍然是使用了未制膠的龜板與鹿角。無獨(dú)有偶，齊鵬坤等[12-13]所用處方為龜板10 g、鹿角10 g、人參10 g、枸杞15 g，名為龜鹿二仙湯。龜板性寒，味甘咸，可滋腎潛陽，退虛熱。而龜甲膠是由龜甲反復(fù)煎熬、濃縮制成的膠狀物，性平，具有滋陰潛陽、養(yǎng)血補(bǔ)血功效。同理，鹿角制成鹿角膠后藥性與功效也不可避免的發(fā)生改變，因此，所有未將“龜鹿”制成膠狀物的研究能否算作是龜鹿二仙膠的現(xiàn)代應(yīng)用研究仍有待商榷。

此外，當(dāng)代醫(yī)家所用龜鹿二仙膠各藥的配比也是不盡相同。據(jù)第五版高等醫(yī)藥院校教材《方劑學(xué)》記錄的《醫(yī)方考》原藥材配比為，鹿角(5 kg)∶龜板(2.5 kg)∶枸杞子(1.5 kg)∶人參(0.5 kg)=10∶5∶3∶1[38]，但并未言明龜板膠、鹿角膠與人參、枸杞子的具體比例。我們注意到當(dāng)前四藥臨床配比大致為鹿角膠10～18 g、龜板膠10～18 g、人參10～20 g、枸杞子15～30 g[4-5,8,10-11]，所有文獻(xiàn)均未注明如此使用的出處和根據(jù)。還有學(xué)者直接購買中成藥“龜鹿二仙膏”進(jìn)行臨床試驗(yàn)，其配置比例更是難以考證[6-7,14]。總之，雖配比上仍有無法考據(jù)的內(nèi)容，但可以肯定，直接采用龜板、鹿角制成的貫以“龜鹿二仙”名稱的復(fù)方并不能較好的代表龜鹿二仙膠的臨床療效，未來研究的處方仍應(yīng)遵從經(jīng)典原方組成、藥物劑型及藥材配比。

3.3 細(xì)胞水平干預(yù)方式爭議

此次檢索到的所有體外實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)絕大部分均采用了同種屬動(dòng)物含藥血清的方式進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。唯有尚冰等[37]采用了直接體外中藥給藥的方式，龜鹿二仙膠雖僅有四味中藥，組方精簡，但兼具植物藥與動(dòng)物藥，化學(xué)成分十分復(fù)雜?，F(xiàn)有相關(guān)研究數(shù)量稀少，尚無法確定龜鹿二仙膠是通過藥物成分直接起效，還是經(jīng)過肝臟代謝后產(chǎn)物發(fā)揮作用，亦或是憑借第二信使起到間接作用[39-40]。因此，也無法斷言尚冰等[37]的實(shí)驗(yàn)方案就不如其余基于血清藥理學(xué)的研究。單從目前中醫(yī)藥領(lǐng)域研究方法而言，使用血清藥理學(xué)的研究認(rèn)可度更高，更貼近復(fù)雜藥物在內(nèi)環(huán)境中的藥物起效過程。然而在龜鹿二仙膠含藥血清的使用上各學(xué)者間也存在些許不同。一部分學(xué)者以低、中、高三種劑量灌胃大鼠，隨即將所得的相應(yīng)含藥血清定義為低、中、高三種[23,25-28,32,36]。而其余學(xué)者均是由同一濃度中藥灌胃后提取含藥血清，在干預(yù)細(xì)胞時(shí)再調(diào)整相應(yīng)濃度(例如10 %、15 %、20 %等)[29-31,35]。兩種方法均有各自的理論支撐點(diǎn)，前者模擬不同濃度藥物在體內(nèi)代謝，更接近現(xiàn)實(shí)代謝情況，而后者摒除了不同濃度藥物在體內(nèi)代謝的異質(zhì)性，縮小了個(gè)體差異，具備更強(qiáng)的均一性和可重復(fù)性。由此可見，目前無論是從藥物直接發(fā)揮作用，還是借助含藥血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)都存在難以避免的爭議，將來研究除了繼續(xù)探索這兩種方式以外，還可關(guān)注第二信使在龜鹿二仙膠與細(xì)胞間通訊所起的作用，例如時(shí)下較熱門的外泌體、微小囊泡等。

4 小結(jié)與展望

目前龜鹿二仙膠相關(guān)研究仍顯匱乏，且現(xiàn)有研究存在臨床應(yīng)用方法迥異，細(xì)胞水平干預(yù)方式爭議等問題，總體上缺乏準(zhǔn)度與深度。故而將來研究可從如下幾方面入手：①開展多中心、大樣本、高質(zhì)量的臨床試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證療效；②進(jìn)行藥物質(zhì)控研究，規(guī)范和制定相對(duì)精準(zhǔn)化的配方和劑量；③探索細(xì)胞水平給藥方式，如細(xì)胞外囊泡等第二信使在骨細(xì)胞間通訊的作用；④優(yōu)化藥物制備方式，降低成本和研究門檻。龜鹿二仙膠是陰陽雙補(bǔ)，延年益壽的名方，研究其抗骨質(zhì)疏松作用對(duì)拓寬和明確中醫(yī)復(fù)方應(yīng)用范圍大有裨益。此文旨在厘清現(xiàn)狀，拋出重點(diǎn)問題，以待今后同道勠力同心，為此方正名。