劉 寧 徐 屹 段丁瑜

(口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,國(guó)家口腔疾病臨床研究中心,四川大學(xué)，成都 610041)

機(jī)體受抗原入侵感染后，抗原特異性初始T細(xì)胞活化,分化成效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞。細(xì)胞分化過(guò)程伴隨細(xì)胞的快速增殖、轉(zhuǎn)錄、表觀遺傳及代謝活性重編程,并獲得效應(yīng)T細(xì)胞的基本功能,包括細(xì)胞增殖及遷移能力的增強(qiáng)。效應(yīng)T細(xì)胞在活化擴(kuò)增、清除抗原、控制炎癥反應(yīng)及感染后大部分死亡,小部分轉(zhuǎn)為記憶性T細(xì)胞長(zhǎng)期存在。初始T細(xì)胞活化和分化是緊密協(xié)調(diào)的過(guò)程,取決于與抗原呈遞細(xì)胞相互作用的特征、抗原刺激的持續(xù)時(shí)間、T細(xì)胞受體(T cell receptor,TCR)信號(hào)傳導(dǎo)的強(qiáng)度和微環(huán)境[1]。在急性感染清除后,記憶T細(xì)胞具有很多不同于初始T細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞或其他T細(xì)胞亞群的性質(zhì),包括再次遇到抗原后重新激活效應(yīng)功能、高增殖潛能和在沒(méi)有抗原刺激的情況下通過(guò)白細(xì)胞介素7(interleukin 7，IL-7)和IL-15驅(qū)動(dòng)的穩(wěn)態(tài)增殖能力。這些特性隨著感染時(shí)間的推移逐漸獲得,并使T細(xì)胞能夠行使保護(hù)性免疫功能[2]。然而,在一些慢性感染過(guò)程中,抗原特異性T細(xì)胞雖然最初獲得了相應(yīng)的效應(yīng)功能,但隨著抗原刺激的長(zhǎng)時(shí)間持續(xù),這些效應(yīng)功能逐漸減弱至喪失,無(wú)法轉(zhuǎn)換成非抗原依賴性記憶T細(xì)胞,這種功能障礙狀態(tài)代表了一種T細(xì)胞獨(dú)特的分化狀態(tài),稱為T(mén)細(xì)胞耗竭[3]。T細(xì)胞耗竭的狀態(tài)通常表現(xiàn)為以下幾個(gè)特征：①效應(yīng)功能的逐步缺失;②多種抑制性受體持續(xù)上調(diào)和共表達(dá);③關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)和功能發(fā)生改變;④免疫代謝紊亂,耗竭的T細(xì)胞無(wú)法轉(zhuǎn)化為非抗原依賴性記憶T細(xì)胞[4]。1998年,GALLIOMRE等[5]和ZAJAC等[6]在小鼠慢性病毒感染的研究中將T細(xì)胞耗竭描述為病毒慢性感染期間抗原特異性T細(xì)胞的功能障礙。 從那以后,T細(xì)胞耗竭在多種動(dòng)物模型和人類慢性病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)感染以及癌癥中得到證實(shí)[7]。近年來(lái)T細(xì)胞的耗竭機(jī)制及耗竭狀態(tài)的逆轉(zhuǎn)已經(jīng)成為慢性感染、腫瘤及自身免疫性疾病等多個(gè)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

研究表明,持續(xù)性的慢性感染如結(jié)核分歧桿菌(mycobacterium tuberculosis，MTB)感染、布魯桿菌感染等可誘導(dǎo)T細(xì)胞進(jìn)入耗竭狀態(tài),以逃避宿主免疫機(jī)制。慢性牙周炎是口腔內(nèi)最常見(jiàn)的持續(xù)性的慢性感染,多種牙周致病菌通過(guò)不同的方式抑制或逃避宿主防御功能,如產(chǎn)生降解IgA和IgG的酶,抑制白細(xì)胞的吞噬功能,侵入牙齦上皮細(xì)胞并增殖以躲避宿主防御機(jī)制,導(dǎo)致感染慢性化,疾病遷延不愈。既往研究表明，在慢性牙周炎中T細(xì)胞耗竭相關(guān)標(biāo)志分子存在變化,因此,本文對(duì)T細(xì)胞耗竭的機(jī)制和研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述,并總結(jié)和展望其與慢性牙周炎發(fā)生發(fā)展可能的聯(lián)系,為相關(guān)研究提供新的切入點(diǎn)和新思路。

1 耗竭T細(xì)胞的特征

1.1功能障礙和功能喪失 在效應(yīng)功能方面,耗竭T細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)逐步漸進(jìn)的功能障礙和功能喪失。通常,產(chǎn)生IL-2、高增殖能力和離體殺傷等功能首先喪失,其他功能如產(chǎn)生腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)的能力往往在功能障礙的中間階段喪失。嚴(yán)重耗竭最終會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞部分或在某些情況下完全缺乏產(chǎn)生大量IFN-γ、β-趨化因子或脫顆粒的能力。耗竭的最后階段是T細(xì)胞的消失[2]。

1.2抑制性受體的表達(dá) 抑制性受體的持續(xù)性表達(dá)上調(diào)和多種抑制性受體的共表達(dá)是耗竭T細(xì)胞在慢性感染或腫瘤免疫應(yīng)答過(guò)程中的重要特點(diǎn)。最先發(fā)現(xiàn)的抑制性受體是CD28家族的跨膜蛋白受體：程序性死亡受體-1(programmed cell death 1,PD-1),其兩種已知的配體是PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)[8]。PD-1/PD-L1免疫檢查點(diǎn)在外周組織中起作用并且充當(dāng)T細(xì)胞的負(fù)調(diào)節(jié)劑以幫助控制局部炎癥反應(yīng)并維持自身耐受性[9]。 FREEMAN等[10]研究發(fā)現(xiàn)PD-L1信號(hào)傳導(dǎo)可以抑制TCR介導(dǎo)的T細(xì)胞增殖。PD-1-PD-L1相互作用會(huì)下調(diào)CD3/CD28 T細(xì)胞對(duì)抗原刺激的反應(yīng)能力。而后,BARBER等[11]對(duì)淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)慢性感染期間病毒特異性CD8+T細(xì)胞的基因表達(dá)譜進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn),功能耗竭的CD8+T細(xì)胞的PD-1 表達(dá)上調(diào),并且體內(nèi)施用抗體阻斷該抑制性受體與其配體PD-L1的相互作用可以改善耗竭T細(xì)胞的效應(yīng)功能。隨后發(fā)現(xiàn)在其他持續(xù)性病毒、非病毒感染以及癌癥中，PD-1途徑在抑制抗原特異性T細(xì)胞的有效性方面也具有重要作用[7,12]。 另一CD28家族成員T 細(xì)胞殺傷相關(guān)抗原4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA-4)也被發(fā)現(xiàn)與T細(xì)胞耗竭相關(guān)。研究顯示,機(jī)體感染人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)或丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)后,CTLA-4的高表達(dá)可以影響T細(xì)胞應(yīng)答功能的質(zhì)量[13-15]。此外,在HIV、HCV和LCMV感染期間,T細(xì)胞表達(dá)T細(xì)胞免疫球蛋白及黏蛋白分子-3(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-3,Tim-3)的頻率和水平與細(xì)胞耗竭狀態(tài)和感染嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[16-18]。除了上述幾種抑制性受體之外,越來(lái)越多的研究將B和T淋巴細(xì)胞衰減因子(B and T lymphocyte attenuator，BTLA)、CD160和CD244等抑制性受體的表達(dá)與慢性感染、自身免疫性疾病(如系統(tǒng)性紅斑狼瘡)及某些癌癥(如胸腺瘤、肺癌)中的T細(xì)胞耗竭現(xiàn)象聯(lián)系起來(lái)[19]。

在LCMV慢性感染過(guò)程中,研究者發(fā)現(xiàn)在相同的病毒特異性CD8+T細(xì)胞上存在多種抑制性受體的大量共表達(dá),且抑制性受體共表達(dá)的程度與感染的嚴(yán)重程度相關(guān)[3]。共表達(dá)Tim-3和PD-1(Tim3+PD1+)的CD8+T細(xì)胞比僅表達(dá)PD-1(Tim3-PD1+)的CD8+T細(xì)胞表現(xiàn)出更嚴(yán)重的耗竭現(xiàn)象。與僅阻斷其中任一途徑相比,同時(shí)對(duì)Tim-3和PD-1途徑進(jìn)行體內(nèi)阻斷在恢復(fù)T細(xì)胞的抗病毒免疫和病毒控制方面具有協(xié)同效應(yīng)[20]。此外,在感染邊緣蟲(chóng)的牛體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了PD-1和淋巴細(xì)胞活化基因3( lymphocyte activation gene 3,LAG-3)的共表達(dá)，且兩種受體的共表達(dá)可促進(jìn)T細(xì)胞耗竭[21]。這些研究提示多種抑制性受體可共同表達(dá),并且在T細(xì)胞耗竭過(guò)程中可能起協(xié)同作用。

1.3表觀遺傳學(xué)特點(diǎn)的改變 T細(xì)胞發(fā)生耗竭后也會(huì)表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄譜及染色質(zhì)的廣泛改變。一些轉(zhuǎn)錄因子如NR4A、T-bet、 Eomes、Blimp-1、NFAT、 BATF 和 VHL雖然也在正常效應(yīng)T細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用,但在耗竭T細(xì)胞內(nèi)的功能卻不同于其他T細(xì)胞亞群[22]。比如近期研究發(fā)現(xiàn)NR4A是誘導(dǎo)T細(xì)胞耗竭的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子[23-24]。耗竭CD8+T細(xì)胞缺少幾個(gè)存在于正常效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞fng基因座上的開(kāi)放染色質(zhì)區(qū)域(chromatin accessible region,ChAR),然而卻檢測(cè)到耗竭CD8+T細(xì)胞的特異性ChAR,該區(qū)域位于編碼PD-1的Pdcd1基因的上游23.8 kb堿基處,在該區(qū)域發(fā)現(xiàn)了調(diào)節(jié)基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子(RAR,T-bet和Sox3)的潛在結(jié)合位點(diǎn)。當(dāng)這些轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生突變后,淋巴細(xì)胞的PD-1表達(dá)受到抑制。這表明 -23.8 kb ChAR 存在于耗竭T細(xì)胞但不存在于正常T細(xì)胞中,并作為增強(qiáng)子維持耗竭CD8+T細(xì)胞PD-1的高表達(dá)[25-26]。相關(guān)領(lǐng)域有待進(jìn)一步研究，以為慢性感染性疾病的防治提供新思路。

2 T細(xì)胞耗竭發(fā)生發(fā)展的相關(guān)因素

2.1抗原刺激水平和持續(xù)時(shí)間 抗原水平和抗原持續(xù)刺激時(shí)間是誘導(dǎo)T細(xì)胞耗竭的重要因素。在小鼠中發(fā)現(xiàn),持續(xù)抗原呈遞直接驅(qū)動(dòng)慢性病毒感染期間的T細(xì)胞耗竭[27]。小鼠感染LCMV慢性株后,如果早期(感染后大約1周)將CD8+T細(xì)胞從持續(xù)抗原刺激中分離出來(lái),則這些細(xì)胞可分化成功能完全的CD8+記憶T細(xì)胞。然而，如果這些T細(xì)胞暴露于持續(xù)存在的抗原2～4周,T細(xì)胞耗竭變得確立,這些細(xì)胞則不能簡(jiǎn)單地通過(guò)從抗原暴露中移除而恢復(fù)正常記憶分化[28-29]。持久痰抗酸陽(yáng)性空洞型肺結(jié)核患者體內(nèi)大量結(jié)核分枝桿菌持續(xù)感染也可能引起T細(xì)胞功能耗竭的發(fā)生[30]。此外,慢性抗原刺激還通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子NFAT導(dǎo)致PD-1的持續(xù)表達(dá)[31]。 上述研究表明慢性抗原刺激、感染的水平以及持續(xù)時(shí)間可能是導(dǎo)致T細(xì)胞耗竭的關(guān)鍵因素,并且與慢性感染期間功能障礙的嚴(yán)重程度相關(guān)。

2.2CD4+T細(xì)胞及NK細(xì)胞 在慢性感染中,CD4+T細(xì)胞對(duì)調(diào)節(jié)CD8+T細(xì)胞的應(yīng)答起重要作用。CD4+T細(xì)胞通過(guò)CD40和CD40配體相互作用激活專職抗原呈遞細(xì)胞如樹(shù)突狀細(xì)胞,分泌趨化因子和細(xì)胞因子,其將初始T細(xì)胞引導(dǎo)至次級(jí)淋巴器官中并激活,誘導(dǎo)T細(xì)胞至感染部位,同時(shí)CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,包括IL-2和IL-21,可直接作用于CD8+T細(xì)胞[32]。病毒慢性感染的小鼠體內(nèi)CD8+T細(xì)胞初次免疫應(yīng)答時(shí)，CD4+T細(xì)胞的短時(shí)缺失可以導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞出現(xiàn)嚴(yán)重耗竭和高病毒載量[33]。在LCMV小鼠的研究中發(fā)現(xiàn),初始和抗原特異性效應(yīng)CD4+T細(xì)胞的有效輔助作用可逆轉(zhuǎn)體內(nèi)已經(jīng)出現(xiàn)耗竭現(xiàn)象的CD8+T細(xì)胞[34]。近期研究發(fā)現(xiàn)，感染引起免疫反應(yīng)的初期CD4+T細(xì)胞通過(guò)誘導(dǎo)對(duì)記憶性T細(xì)胞回憶反應(yīng)來(lái)限制T細(xì)胞的耗竭[35]。此外,CD8+T細(xì)胞耗竭狀態(tài)也受到NK細(xì)胞的影響,NK細(xì)胞可通過(guò)直接殺傷限制APC的活化能力,產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子如IL-10,以及剔除有助于應(yīng)答的CD4+T細(xì)胞等方式來(lái)抑制抗病毒CD8+T細(xì)胞的免疫功能[36-37]。

2.3可溶性細(xì)胞因子和抑制性受體 可溶性細(xì)胞因子如IL-10和TGF-β也影響T細(xì)胞的免疫功能狀態(tài)。IL-10是一種可減弱炎癥反應(yīng)的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子[38]。研究發(fā)現(xiàn),IL-10在幾種病毒持續(xù)感染期間(包括EBV、HBV、HCV、HIV和LCMV)表達(dá)水平上調(diào)。而IL-10的阻斷可增強(qiáng)病毒控制并改善耗竭T細(xì)胞的應(yīng)答。提示IL-10在限制免疫介導(dǎo)的病毒控制和T細(xì)胞耗竭發(fā)展中發(fā)揮作用[2,22]。TGF-β通過(guò)影響多種免疫細(xì)胞譜系的增殖、分化和存活來(lái)控制免疫應(yīng)答并維持免疫穩(wěn)態(tài)[38]。病毒特異性CD8+T細(xì)胞中指示TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物Smad2在慢性LCMV感染中的磷酸化比在控制良好的感染期中更強(qiáng)[39]。而阻斷T細(xì)胞接受TGF-β信號(hào)的通路可改善慢性LCMV感染期間CD8+T細(xì)胞的功能,并防止CD8+T嚴(yán)重耗竭和某些CD8+T細(xì)胞特異性的缺失[39]。在腫瘤微環(huán)境中也發(fā)現(xiàn)IL-10和TGF-β的存在可以抑制T細(xì)胞的功能[38]。

與細(xì)胞因子相似,抑制性受體也影響慢性感染及腫瘤中T細(xì)胞的功能及狀態(tài)。耗竭CD8+T細(xì)胞表達(dá)多種抑制性受體,抑制性受體共表達(dá)的模式影響慢性感染期間這些T細(xì)胞的功能質(zhì)量，且慢性感染的嚴(yán)重程度與表達(dá)的抑制性受體的數(shù)量和強(qiáng)度相關(guān)[3]。抑制性受體可以在幾個(gè)水平上抑制T細(xì)胞功能：與共刺激受體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合共享配體或干擾形成微團(tuán)聚體和脂筏;干擾共激活TCR;上調(diào)參與T細(xì)胞功能障礙的基因[19]。

耗竭T細(xì)胞的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多種因素相互影響的復(fù)雜過(guò)程。CD4+T細(xì)胞、NK細(xì)胞、B細(xì)胞或細(xì)胞因子應(yīng)答等任何方面的改變都可能導(dǎo)致機(jī)體對(duì)感染或腫瘤的有效控制變差,由此導(dǎo)致更高的抗原載量,從而進(jìn)一步推動(dòng)耗竭狀態(tài)的發(fā)展。而每種影響因素對(duì)耗竭T細(xì)胞發(fā)生與發(fā)展產(chǎn)生影響的具體作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

3 耗竭T細(xì)胞功能狀態(tài)的逆轉(zhuǎn)。

3.1逆轉(zhuǎn)耗竭T細(xì)胞功能狀態(tài)的方法 耗竭T細(xì)胞雖然表現(xiàn)出免疫功能障礙,對(duì)慢性感染和腫瘤細(xì)胞會(huì)失去有效控制,但T細(xì)胞耗竭并不是不可逆的終末狀態(tài)。目前大量實(shí)驗(yàn)及臨床研究顯示通過(guò)阻斷抑制性受體、阻斷抑制性細(xì)胞因子或基因靶向療法等方法均可以在一定程度上改善T細(xì)胞的功能狀態(tài),提高對(duì)病毒、腫瘤細(xì)胞及細(xì)菌的清除率。

PD-1的治療性阻斷通過(guò)重新編碼代謝過(guò)程、促進(jìn)增殖和上調(diào)效應(yīng)分子的表達(dá)來(lái)重新激活耗竭T細(xì)胞的免疫反應(yīng)[4]。在腫瘤微環(huán)境的研究中發(fā)現(xiàn),抗PD-L1的治療性阻斷可重新激活及改善部分耗竭CD8+T細(xì)胞的代謝功能[40]。慢性病毒感染相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn),在T細(xì)胞耗竭發(fā)生后施用抗PD-L1或抗PD-1阻斷抗體可提高CD8+T細(xì)胞增殖能力,增加細(xì)胞因子產(chǎn)生和增強(qiáng)細(xì)胞溶解活性并減少病毒載量[11]。此外,在實(shí)驗(yàn)性腫瘤模型中,抗CTLA-4或抗PD-1抗體可以增強(qiáng)耗竭CD8+T細(xì)胞的糖酵解能力和效應(yīng)功能[40]。除了阻斷單一的抑制性受體,近年來(lái)研究也發(fā)現(xiàn)Tim-3、LAG-3或TIGIT與PD-1途徑同時(shí)阻斷對(duì)逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭具有協(xié)同作用,可以更有效地改善T細(xì)胞功能并有助于病毒和腫瘤細(xì)胞的清除[21,41-42]。從免疫療法的角度來(lái)看,調(diào)節(jié)細(xì)胞因子對(duì)耗竭CD8+T細(xì)胞的作用也是改善慢性感染和癌癥期間生物學(xué)結(jié)果的有前景的治療方法。 例如，IL-2給藥在1992年被批準(zhǔn)用于治療轉(zhuǎn)移性腎癌,并且在證明IL-2治療在這些疾病中有一定功效后于1998年用于轉(zhuǎn)移性黑素瘤,而阻斷IL-10受體也可以改善病毒控制并減少T細(xì)胞耗竭程度[21,43-44]。

3.2影響耗竭T細(xì)胞功能狀態(tài)逆轉(zhuǎn)的因素 雖然通過(guò)阻斷抑制性受體及配體或某些細(xì)胞因子來(lái)逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞耗竭狀態(tài)的方法在臨床上已經(jīng)成為慢性感染和腫瘤的治療性干預(yù)措施,但其效果受到很多因素的影響。首先,治療開(kāi)始前T細(xì)胞耗竭的程度不同會(huì)導(dǎo)致治療效果的不同[22]。而且PD-1阻斷的有效性取決于T細(xì)胞群的性質(zhì),如PD-1阻斷可以逆轉(zhuǎn)PD-1intT細(xì)胞(PD-1中量表達(dá)T細(xì)胞)的耗竭,但不能逆轉(zhuǎn)終末分化的PD-1hiT細(xì)胞(PD-1高表達(dá)T細(xì)胞)[45]。且阻斷PD-1后耗竭CD8+T細(xì)胞的再活化必須依賴于CD28信號(hào)的傳導(dǎo)[46]。此外,耗竭T細(xì)胞的再激活可能依賴于T細(xì)胞與B7+造血細(xì)胞的相互作用,如樹(shù)突狀細(xì)胞[47-48]。盡管阻斷抑制性受體對(duì)細(xì)胞免疫應(yīng)答具有改善作用,但也可能發(fā)生不利影響。這些不利影響可以由增強(qiáng)的T細(xì)胞應(yīng)答引起的免疫病理改變引起,如果在慢性LCMV感染過(guò)程中過(guò)早阻斷PD-1受體通路,則會(huì)發(fā)生這種免疫病理改變。在感染猴免疫缺陷病毒的獼猴體內(nèi)阻斷CTLA-4會(huì)出現(xiàn)其他抑制性分子使淋巴細(xì)胞反應(yīng)降低,導(dǎo)致CD4+T細(xì)胞的損失和病毒載量的增加,反而降低了抗病毒治療的效果[49]。

4 耗竭T細(xì)胞與細(xì)菌感染性疾病的關(guān)系

對(duì)耗竭T細(xì)胞的研究主要集中在慢性病毒感染和腫瘤方面,但已有研究表明在多種細(xì)菌感染中也存在T細(xì)胞耗竭現(xiàn)象。

在幽門(mén)螺桿菌感染的體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),當(dāng)胃上皮細(xì)胞受到幽門(mén)螺桿菌持續(xù)性刺激時(shí)會(huì)出現(xiàn)PD-L1高表達(dá),PD-L1可以抑制T細(xì)胞增殖,用特異性抗體阻斷PD-L1后可以逆轉(zhuǎn)該抑制作用[50]。體內(nèi)研究中同樣發(fā)現(xiàn)了T細(xì)胞耗竭現(xiàn)象。在小鼠布魯氏桿菌感染實(shí)驗(yàn)中,與急性感染或非感染小鼠相比,來(lái)自慢性感染小鼠的脾臟中耗竭表型的CD8+PD-1+LAG-3+細(xì)胞明顯增加,而這些耗竭表型的CD8+T細(xì)胞缺乏IFN-γ的表達(dá)。 這些結(jié)果表明,布魯氏桿菌慢性感染導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞出現(xiàn)耗竭狀態(tài)從而限制其免疫功能[51]。在感染MTB的小鼠模型中發(fā)現(xiàn),MTB慢性感染期間T細(xì)胞高表達(dá)Tim-3,且這些T細(xì)胞同時(shí)表達(dá)包括PD-1在內(nèi)的其他抑制性受體,同時(shí)IFN-γ表達(dá)降低,IL-10表達(dá)增高,并表現(xiàn)出功能障礙,無(wú)法有效清除細(xì)菌。而阻斷Tim-3可逆轉(zhuǎn)T細(xì)胞的功能并且改善對(duì)MTB的控制[52]。

在相關(guān)臨床研究中同樣發(fā)現(xiàn)了T細(xì)胞的耗竭現(xiàn)象?；顒?dòng)性肺結(jié)核患者與健康人相比，PD-1在CD4+T細(xì)胞中表達(dá)增加而在CD8+T細(xì)胞中沒(méi)有增加。此外,與健康對(duì)照相比,PD-L1和PD-L2在MTB感染患者的單核細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)。阻斷CD4+T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞上的PD-1/PD-L1途徑增強(qiáng)了巨噬細(xì)胞體外吞噬作用和細(xì)胞內(nèi)殺滅MTB的作用,表明PD-1在MTB感染中具有免疫負(fù)調(diào)節(jié)作用[53]。在敗血癥患者體內(nèi)也有類似的發(fā)現(xiàn)。在多重藥物耐藥性( multidrug-resistant,MDR)細(xì)菌性膿毒血癥患者中發(fā)現(xiàn),與非膿毒血癥患者相比,感染MDR細(xì)菌的膿毒血癥患者的抑制性受體PD-1及其配體PD-L1的表達(dá)上調(diào)。3種免疫佐劑包括IL-7、抗PD-L1和OX-40L,在MDR細(xì)菌性膿毒血癥患者中有效增加了T細(xì)胞的IFN-γ產(chǎn)生率[54]。

在口腔研究領(lǐng)域，耗竭T細(xì)胞重要的分子標(biāo)記物之一PD-1/PD-L1與慢性口腔疾病之間的關(guān)系也引起了關(guān)注。相關(guān)臨床研究發(fā)現(xiàn)，PD-1、PD-L1、CTLA-4在慢性根尖周炎病損部位的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組。牙周炎患者外周血單核細(xì)胞中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的PD-1表達(dá)量明顯高于牙齦炎患者和健康人,而經(jīng)過(guò)牙周基礎(chǔ)治療后PD-1及PD-L1的表達(dá)量較治療前有不同程度的降低[55-56]。也有研究表明 T 淋巴細(xì)胞表面 PD-1的表達(dá)量與血清及齦溝液中 IL-1β、IL-8、TNF-α、sICAM-1、sVCAM-1、MMP-1、MMP-7、MMP-13等致炎因子的含量呈正相關(guān)[57]。

5 展望

目前關(guān)于耗竭T細(xì)胞發(fā)生與發(fā)展機(jī)制已有大量研究,相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究也為免疫靶向治療揭示了新的可能性。然而,對(duì)耗竭T細(xì)胞的研究及應(yīng)用主要集中在病毒及腫瘤領(lǐng)域,在許多慢性感染性疾病中的研究尚不充分。細(xì)菌感染后若不能被宿主盡快清除,可能通過(guò)各種不同途徑限制宿主的免疫功能,細(xì)菌感染性疾病由此在宿主體內(nèi)變得遷延不愈,使感染和炎癥慢性化，T細(xì)胞的耗竭可能是其中重要原因之一。為慢性感染性疾病的防治提供新思路。