普麗花 金顯棟 鄒豐才 祝軍華 程文杰 翟國蓮 李永華 段彥明 張繼才 楊建發(fā) 亐開興*

1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，昆明650201；2.云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院，昆明650212；3.云南省臨滄市永德縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南臨滄677600；4.云南省武定縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南武定651600

牦牛是高寒地區(qū)獨(dú)有的畜種，其生命力和適應(yīng)性極強(qiáng)，具有耐寒、耐粗飼和耐勞等特點(diǎn)，被稱作“高原之舟”[1]。中國是世界上擁有牦牛種群和數(shù)量最多的國家，90%以上的牦牛主要生活在我國青藏高原地區(qū)，是高寒地區(qū)人民的主要畜種和重要的生產(chǎn)生活資料[2]。牦牛經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，具有肉用、役用、奶用等多種用途，其中牦牛的奶用價(jià)值也是養(yǎng)殖戶的重點(diǎn)關(guān)注對(duì)象，牦牛乳具有干物質(zhì)和脂肪含量高等特點(diǎn)，用來加工成各種乳制品進(jìn)入商業(yè)區(qū)，給養(yǎng)殖戶帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)效益[3]。中甸牦牛是云南省迪慶州高原地區(qū)特有的畜種，主要在香格里拉縣中北地區(qū)的建塘鎮(zhèn)、小中甸、尼汝、東旺、格咱、德欽縣等地方分布，是我國優(yōu)良牦牛類型之一[4]。2018年度迪慶州存欄牛16.6 萬頭，而香格里拉市存欄牛8.2 萬頭，其中牦牛3.7 萬頭，主要生活于海拔3 000～4 300 m高原和高山垂直帶[5]，黃牛4.5 萬頭。

牦牛養(yǎng)殖業(yè)是高度適應(yīng)高寒地區(qū)生態(tài)條件的一種生態(tài)養(yǎng)殖模式，因其具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，養(yǎng)殖規(guī)模也日漸擴(kuò)大。然而，隨著牦牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，牦牛寄生蟲病的危害性卻日益突出，寄生蟲感染造成牦牛體能消耗而生產(chǎn)性能下降、肉質(zhì)差、成活率降低等，極大影響藏牧民的經(jīng)濟(jì)收入，嚴(yán)重制約當(dāng)?shù)仃笈ｐB(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展[6]。因此，為了解香格里拉社區(qū)中甸牦牛的寄生蟲感染情況，針對(duì)中甸牦牛在不同飼養(yǎng)環(huán)境下的群體進(jìn)行抽樣調(diào)查和比較分析，以期更好地為中甸牦牛寄生蟲病防治提供科學(xué)應(yīng)對(duì)措施。

1 材料與方法

1.1 材 料

從昆明小哨示范牧場（異地馴養(yǎng)）和香格里拉社區(qū)某養(yǎng)殖場隨機(jī)采集106 份牦牛糞便樣品，其中小哨牧場采集異地馴養(yǎng)糞樣33 份，伊維菌素針劑驅(qū)蟲后2月采樣；香格里拉采集圈養(yǎng)24 份，為伊維菌素粉劑混料驅(qū)蟲后2 周采樣；49 份采自放牧牛群。分別記錄好采樣信息，用保鮮袋分裝，逐一編號(hào)登記，4 ℃冷藏保存。

1.2 方 法

1）飽和食鹽水配制。稱取400 g 氯化鈉，加入1 000 mL 沸騰的開水中，然后加入食鹽，用玻璃棒進(jìn)行攪拌，直至食鹽不再溶解，將其放置幾分鐘冷卻，觀察是否有結(jié)晶生成，這種方法配制的溶液即為飽和食鹽水。

2）飽和食鹽水漂浮法。取10 g 左右糞便放入1個(gè)燒杯中，先加入少量飽和食鹽水將糞便攪拌調(diào)勻，然后向燒杯中加入約為糞便的10 倍量飽和食鹽水，并用玻璃棒攪拌均勻，用0.3 mm 的銅絲篩將糞樣過濾到青霉素小瓶內(nèi)，在瓶口輕輕蓋1 個(gè)載玻片，濾液靜置約15 min，然后將載玻片提起進(jìn)行鏡檢。

3）自然沉淀法。取20 g 糞便與少量清水于100 mL 燒杯中攪拌混勻，用0.3 mm 銅篩將其濾于廣口瓶中，倒入清水約廣口瓶4/5 處，靜置30 min，然后過濾廣口瓶中3/5 上清液，加水于廣口瓶4/5處，靜置20 min。用此種方法連續(xù)重復(fù)3 次，用吸管將留下的沉淀物吸出，用低倍鏡進(jìn)行鏡檢、計(jì)數(shù)。

4）數(shù)據(jù)處理與分析。將所得數(shù)據(jù)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件計(jì)算卡方值，分析牦牛腸道寄生蟲感染率與不同養(yǎng)殖方式等因素之間存在的差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 顯微鏡下的蟲卵形態(tài)

通過飽和食鹽水漂浮法和自然沉淀法，在低倍顯微鏡下觀察可清晰看見線蟲卵和吸蟲卵，如圖1和圖2所示。

圖1 線蟲卵（10×10）

圖2 吸蟲卵（10×10）

2.2 飽和鹽水漂浮法和自然沉淀法鏡檢結(jié)果

1）中甸牦牛寄生蟲感染情況。不同養(yǎng)殖方式下中甸牦牛消化道寄生蟲感染率存在顯著差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過飽和食鹽水漂浮法和自然沉淀法對(duì)106 份中甸牦牛糞樣進(jìn)行檢測，共檢測出49 份樣品感染寄生蟲，感染率為46.23%（表1）。

表1 不同養(yǎng)殖方式下中甸牦牛寄生蟲感染率

2）不同養(yǎng)殖方式下中甸牦牛寄生蟲感染情況。在檢測的中甸牦牛糞樣中，通過伊維菌素驅(qū)蟲效果顯著，自由放牧牛群的感染率達(dá)79.59%，顯著高于圈養(yǎng)的感染率（30.30%）（P<0.01），經(jīng)過驅(qū)蟲2 周的未檢出感染（0%）；自由放牧中甸牦牛牛群的線蟲感染率（69.39%）顯著高于吸蟲感染率（34.69%）（P<0.01），圈養(yǎng)的牛群通過一段時(shí)間會(huì)再次感染；自由放牧的中甸牦牛線蟲和吸蟲混合感染率為24.49%，顯著高于經(jīng)過驅(qū)蟲的牛只（P<0.01）。

3 討 論

3.1 牦牛的寄生蟲感染情況分析

調(diào)查顯示，自由放牧的中甸牦牛寄生蟲感染率高，為79.59%，線蟲和吸蟲感染率分別為69.39%和34.69%，與馬媛等[7]和楊曉春[8]前期調(diào)查相比，波動(dòng)范圍較大，本調(diào)查研究中甸牦牛線蟲卵檢出率比以往高，但吸蟲卵檢出率明顯下降，這可能與迪慶州不同區(qū)域、飼養(yǎng)管理和預(yù)防措施有關(guān)?？傮w來說，我國藏區(qū)牦牛的寄生蟲感染情況較為嚴(yán)重，甘肅省天祝白牦牛寄生蟲感染率達(dá)100%，其中球蟲、圓線蟲及其混合感染率分別高達(dá)75.40%、87.00%和68.50%[9]；而瑪曲縣牦牛消化道線蟲感染率為72.20%，天?？h牦牛的感染率卻較低，為29.00%[10]。川西北高原部分地區(qū)牦牛體內(nèi)寄生蟲中，總感染率為76.39%，線蟲、吸蟲的感染率平均分別為21.14%和42.79%。其中，紅原地區(qū)牦牛線蟲的感染率為11.59%，吸蟲的感染率為42.45%，吸蟲是紅原的優(yōu)勢寄生蟲蟲種。理塘地區(qū)牦牛體內(nèi)寄生蟲中，線蟲、吸蟲的感染率分別為52.38%、20.24%，線蟲為該地區(qū)的優(yōu)勢蟲種[11]。天山地區(qū)牦牛線蟲、球蟲、吸蟲感染率分別為48.80%、17.07%、4.88%，其中線蟲感染率最高[12]。青海省海晏縣牦牛消化道寄生蟲總感染率57.20%[13]；果洛州牦牛線蟲感染率為50.00%左右，球蟲感染率為30%左右[14]。新疆巴州本土黑牦牛和白絨牦牛子二代寄生蟲感染率分別為80.20%、78.30%[15]；巴州牦牛蠕蟲感染率為78.40%[16]；和靜縣天然牧場牦牛寄生蟲感染率為80.20%，圈養(yǎng)牦牛寄生蟲感染率為78.30%[17]。四川省甘孜州五大牧區(qū)縣牦牛的腸道寄生蟲總體感染率為79.70%[18]。可以看出，不同地區(qū)牦牛消化道寄生蟲感染率有所差異，這可能與各地區(qū)的氣候條件、地理位置、飼養(yǎng)模式等因素對(duì)寄生蟲的生長情況影響不同有關(guān)，但總體上牦牛受寄生蟲困擾嚴(yán)重，開展藏區(qū)牛群寄生蟲聯(lián)合防治亟待解決。

3.2 不同養(yǎng)殖方式下中甸牦牛寄生蟲感染情況分析

不同養(yǎng)殖方式對(duì)牦牛消化道寄生蟲感染率有明顯差異，自由放牧的中甸牦牛寄生蟲感染率（79.59%），顯著高于圈養(yǎng)牦牛寄生蟲感染率（30.30%）。這一方面表明中甸牦牛對(duì)于驅(qū)蟲藥較為敏感，驅(qū)蟲效果較好，同時(shí)需要持續(xù)做好驅(qū)蟲工作；另一方面，由于長期將牦牛放牧飼養(yǎng)導(dǎo)致草原草地和水源等環(huán)境中散播大量蟲卵，容易造成重復(fù)感染和交叉感染。此外，飼養(yǎng)管理中無法規(guī)劃草原草地的輪牧制，同時(shí)也不注重預(yù)防性驅(qū)蟲或者未能及時(shí)選用適合的藥物來防治寄生蟲病等，都易造成牦牛消化道寄生蟲的大量滋生。

3.3 防控措施

中甸牦牛寄生蟲感染的防控措施：①加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好養(yǎng)殖場各項(xiàng)飼養(yǎng)管理和防疫工作，抓好引種和轉(zhuǎn)場等工作，減少感染。及時(shí)清掃圈舍及運(yùn)動(dòng)場，對(duì)糞便進(jìn)行無害化處理。②規(guī)劃放牧輪牧制，盡量減少野外放牧次數(shù)，在同一個(gè)草場內(nèi)不宜頻繁反復(fù)放牧或重牧；種植優(yōu)質(zhì)的牧草或青貯玉米制作青貯飼料適度規(guī)模圈養(yǎng)牦牛，提高出欄率，減少冬春季死亡率，達(dá)到提質(zhì)增效。③依據(jù)寄生蟲生活史和實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果，開展預(yù)試驗(yàn)，篩選驅(qū)蟲藥，針對(duì)線蟲選用伊維菌素、左旋咪唑、丙硫苯咪唑等，1 個(gè)月驅(qū)蟲1 次，連續(xù)3 次；吸蟲可選用丙硫苯咪唑、三氯苯達(dá)唑等，3 個(gè)月驅(qū)蟲1 次，連續(xù)2 次。④加大宣傳和培訓(xùn)力度，結(jié)合聯(lián)合防治，不斷提高對(duì)寄生蟲病的危害與防范意識(shí)，掌握驅(qū)蟲的基本方法，大幅度控制寄生蟲感染面[19-20]。