向婷穎　田茂燕　鐘川　王鵬　陽燕娟　于文進(jìn)

摘要：【目的】探討低溫對砧用茄子幼苗生理的影響，篩選出耐冷性強(qiáng)的種質(zhì)，為選育適合華南地區(qū)秋冬番茄嫁接栽培的耐冷砧木提供參考依據(jù)。【方法】以16份砧用茄子種質(zhì)為材料，設(shè)置10、15和20 ℃不同低溫處理，通過種子發(fā)芽及幼苗低溫脅迫試驗(yàn)，根據(jù)發(fā)芽指標(biāo)、冷害指數(shù)和生理指標(biāo)鑒定評價砧用茄子種質(zhì)的耐冷性。【結(jié)果】10 ℃低溫明顯抑制砧用茄子種子萌發(fā)，除J61的發(fā)芽率為18.33%外其余種質(zhì)的發(fā)芽率均在10.00%以下，種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、發(fā)芽勢與幼苗冷害指數(shù)均無顯著相關(guān)性（P>0.05）。種質(zhì)BC05和J13的幼苗冷害指數(shù)分別為0.16和0.20，表現(xiàn)強(qiáng)耐低溫，種質(zhì)BC06、J60、AQ和A的幼苗冷害指數(shù)為0.27～0.40，表現(xiàn)中耐低溫，BC01、BC02和BC03等8份種質(zhì)的冷害指數(shù)為0.40～0.56，表現(xiàn)耐低溫。10 ℃低溫脅迫下，幼苗葉綠素含量降低，電導(dǎo)率、丙二醛（MDA）和脯氨酸（Pro）含量增高，超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）和過氧化氫酶（CAT）活性增加，不同種質(zhì)的響應(yīng)程度不同。幼苗冷害指數(shù)分別與葉綠素含量、MDA含量的變化率呈極顯著（P<0.01，下同）和顯著（P<0.05，下同）正相關(guān)，與Pro含量及SOD、POD、CAT活性的變化率呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān)。對供試種質(zhì)的耐冷性進(jìn)行隸屬函數(shù)綜合分析，以上表現(xiàn)強(qiáng)耐低溫、中耐低溫的6份種質(zhì)的綜合耐冷性排序前6，聚類分析將這6份種質(zhì)歸類為強(qiáng)耐低溫類、耐低溫類?！窘Y(jié)論】種子發(fā)芽指標(biāo)不應(yīng)作為砧用茄子耐冷性的鑒定指標(biāo)，幼苗冷害指數(shù)及葉綠素、MDA、Pro含量和SOD、POD、CAT活性6項(xiàng)生理指標(biāo)可作為耐冷性的鑒定指標(biāo)。綜合評價結(jié)果，BC05、J13、BC06、J60、AQ和A等6份種質(zhì)耐冷性強(qiáng)，可作為選育耐冷砧木新品種的骨干種質(zhì)材料加以利用。

關(guān)鍵詞： 砧用茄子;低溫脅迫;耐冷性;生理響應(yīng);隸屬函數(shù)

中圖分類號： S641.103? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：2095-1191（2021）01-0163-09

Abstract：【Objective】The purpose of this study is to explore the effects of low temperature on the physiology of eggplant seedlings for rootstock， select the germplasms with strong cold resistance，? and to provide a reference for the bree-ding of cold tolerant rootstocks suitable for grafting cultivation of autumn and winter tomato in South China. 【Method】Sixteen eggplant germplasms for rootstock were used as materials， and the low temperature treatment temperatures of 10， 15? and 20 ℃ were set. The cold tolerance of eggplant germplasms for rootstock was evaluated according to germination index， chilling injury index and physiological index in the germonation and old temperature stress experiment. 【Result】The low temperature of 10 ℃ significantly inhibited the germination of eggplant seeds for rootstock， and the germination rates were all less than 10.00% except that germination rate of J61 was 18.33%. There was no significant correlation among seed germination rate， germination index， germination potential and seedling chilling injury index（P>0.05）. The seedling chilling injury indexes of germplasm BC05 and J13 were 0.16， 0.20 respectively， showing high resistance（HR） to low temperature. The seedling chilling injury indexes of germplasm BC06， J60， AQ and A were 0.27-0.40， which showed moderate resistance（MR） to low temperature. The chilling injury index of 8 germplasms such as BC01， BC02 and BC03 ranged from 0.40-0.56， which showed resistance（R） to low temperature. Under low temperature stress at 10 ℃， the chlorophyll content of the tested germplasm seedlings decreased， while the conductivity， malondialdehyde（MDA） and proline（Pro） contents increased， and the activities of superoxide dismutase（SOD）， peroxidase（POD） and catalase（CAT） increased， but the response degree of different germplasms were different. The chilling injury index of seedlings was extremely significantly（P<0.01，the same below） or significantly（P<0.05，the same below） positively correlated with the change rate of chlorophyll content and MDA content. It was significantly or extremely significantly negatively correlated with the change rate of Pro content， activities of SOD， POD and CAT， respectively. The subordinate function value of the low temperature resistance of the tested germplasms were analyzed. The above six germplasm with HR and MR were ranked in the top six for their comprehensive low temperature resistance. And the above six germplasms were classified as high resistance to low temperature or resistance to low temperature by cluster analysis. 【Conclusion】The index of seed germination should not be used as the identification index of cold tolerance of eggplant for rootstock. The seedlings chilling injury index， chlorophyll， MDA and Pro contents， SOD， POD and CAT activities can be used as the identification indexes of cold tolerance. The results of comprehensive evaluation show that BC05， J13， BC06， J60， AQ and A have high resistance to low temperature. And above six gemplasms can be used as backbone germplasm mate-rials for breeding new varieties of cold-tolerant rootstocks.

Key words： eggplant for rootstock; low temperature stress; cold tolerance; physiological response; subordinate function

Foundation item： National Natural Science Foundation of China（31660568）; Guangxi Science and Technology Major Project（Guike AA17204039-2，Guike AA17204026-1）

0 引言

【研究意義】茄子（Solanum melongena）是我國重要的大宗蔬菜之一。茄子性喜溫暖，較耐高溫，不耐低溫，生長發(fā)育的日間適宜溫度為22～30 ℃，氣溫10 ℃以下會引起代謝失調(diào)，發(fā)生低溫障礙，因此冬春季栽培茄子容易受到低溫脅迫，給生產(chǎn)造成損失（李樹德，1995）。2017年在華南地區(qū)利用抗病和耐熱性強(qiáng)的野生茄或栽培茄（統(tǒng)稱砧用茄子）作為番茄嫁接砧木，有效解決了秋種番茄生產(chǎn)上易受青枯病危害和高溫影響開花坐果的問題（莫天利等，2017;郭詩源，2018）。但砧用茄子嫁接的番茄在生長后期常遇上短時低溫，引起植株葉片黃化，影響后期產(chǎn)量。因此，迫切需要篩選出較耐低溫的砧用茄子，研究其對低溫逆境的耐性生理響應(yīng)，為番茄嫁接栽培提供耐冷砧木?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】國外較早選育出茄子、番茄和黃瓜等蔬菜抗病砧木（Kyriacou et al.，2017），我國從20世紀(jì)90年代開始快速發(fā)展茄果類蔬菜嫁接栽培（郝微麗和彭相儒，2002）。托魯巴姆（S. torvum）、赤茄（S. integrifolium）等野生茄常作為茄子或番茄嫁接砧木被廣泛運(yùn)用（張紅浩等，2015;Yang et al.，2017），還有利用茄子栽培種或變種作為茄子和番茄通用砧木的報道（莫天利等，2017;王岳霞等，2018;趙文宗等，2019a）。根系發(fā)達(dá)、抗病性強(qiáng)的砧用茄子能促進(jìn)嫁接植株生長發(fā)育，提高營養(yǎng)物質(zhì)吸收能力（韓忠才，2007;田迎宇和李世平，2015），改善果實(shí)品質(zhì)（莫天利等，2017;郭詩源，2018;鄒敏等，2019），有效減少青枯病、黃萎病、枯萎病、根結(jié)線蟲病等土傳病害的危害（Gousset et al.，2004;劉富中等，2005;劉俊武等，2017;趙文宗等，2019b），還能提高植株耐鹽性和耐重金屬毒害能力（邰翔，2009;葛青，2015）。茄子喜溫不耐寒，在有關(guān)茄子耐冷性的研究中，以探討鑒定方法及指標(biāo)居多，而涉及砧用茄子耐冷種質(zhì)的研究鮮見報道。李彩霞等（2018）提出電導(dǎo)率、丙二醛（MDA）和可溶性糖含量可作為鑒定茄子苗期耐冷性指標(biāo);劉飛等（2019）的研究表明，低溫發(fā)芽能力可作為栽培茄的耐冷性鑒定指標(biāo)，但不適用于鑒定野生茄的耐冷性，建議采用苗期生理指標(biāo)鑒定野生茄的耐冷性。上述研究說明茄子耐冷性的鑒定方法和指標(biāo)因供試材料不同而存在差異?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】華南地區(qū)秋冬季茄果類蔬菜生產(chǎn)上經(jīng)常遭受異常低溫影響，要求嫁接砧木具有一定耐冷性，但目前涉及耐冷砧木的研究較少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】對16份砧用茄子種質(zhì)資源進(jìn)行低溫脅迫試驗(yàn)，研究低溫對砧用茄子種子萌發(fā)和幼苗生理的影響，根據(jù)幼苗冷害表型和相關(guān)生理指標(biāo)鑒定砧木種質(zhì)對低溫的耐受力，以期獲得能評價砧用茄子種質(zhì)耐冷性的可靠指標(biāo);通過隸屬函數(shù)和聚類分析對供試種質(zhì)的耐冷性進(jìn)行排序和歸類，篩選出耐冷性強(qiáng)的種質(zhì)，為選育耐冷砧木新品種提供骨干材料。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

于2018年11月—2019年9月在廣西南寧市廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。供試材料為課題組從國內(nèi)外收集保存的16份多代自交的砧用茄子種質(zhì)資源，編號BC01、BC02、BC03、BC04、BC05和BC06等6份種質(zhì)來源于國內(nèi)，編號A、B、A01、AQ、J12、J13、J14、J15、J60和J61等10份種質(zhì)來源于日本。其中，BC05、J12和J13為茄子野生種，其余種質(zhì)為茄子栽培種或變種。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 種子萌發(fā)期耐冷性試驗(yàn) 每份供試種質(zhì)選取飽滿種子100粒，用1 g/L的赤霉素溶液浸種6 h后，將種子點(diǎn)播于墊有2層濾紙的培養(yǎng)皿中，保持濾紙濕潤，置恒溫箱內(nèi)進(jìn)行不同低溫催芽處理。以茄子發(fā)生新陳代謝失調(diào)的10 ℃為最低溫度，設(shè)置10、15和20 ℃不同低溫處理，以華南地區(qū)夏季平均溫度30 ℃為對照，試驗(yàn)重復(fù)3次。催芽14 d，每天統(tǒng)計(jì)發(fā)芽種子數(shù)，計(jì)算發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)，以第7 d的發(fā)芽率為發(fā)芽勢。

發(fā)芽率（%）=發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100

發(fā)芽指數(shù)=∑（Gt/Dt）

式中，Gt為第t d的發(fā)芽數(shù)，Dt為發(fā)芽天數(shù)。

1. 2. 2 幼苗期低溫脅迫試驗(yàn) 每份供試種質(zhì)選取飽滿種子100粒，在30 ℃條件下催芽，種子露白后播種于50孔的穴盤進(jìn)行育苗，育苗基質(zhì)按泥炭∶椰糠∶珍珠巖=2∶1∶1的比例配制。幼苗長至4～5片真葉時，移入人工氣候箱內(nèi)，在溫度30 ℃、相對濕度75%、每天光照16 h及光照強(qiáng)度7000 lx的條件下預(yù)培養(yǎng)2 d，第3 d開始將溫度調(diào)低為10 ℃進(jìn)行低溫脅迫處理，以30 ℃為對照。每份種質(zhì)處理幼苗30株，試驗(yàn)重復(fù)3次。預(yù)培養(yǎng)和低溫處理的相對濕度和光照條件一致，統(tǒng)一進(jìn)行水肥管理。低溫脅迫處理7 d后，調(diào)查幼苗冷害級別及株數(shù)，計(jì)算冷害指數(shù)（CI）。冷害癥狀分級標(biāo)準(zhǔn)及冷害指數(shù)計(jì)算參考脫飛飛（2016）的方法略有改動。冷害癥狀分為5級（圖1）：0級，植株葉片正常，未出現(xiàn)明顯冷害癥狀;1級，1～2張葉片出現(xiàn)輕度皺縮或萎蔫;2級，3張葉片萎蔫;3級，4張以上葉片萎蔫;4級，全株葉片萎焉皺縮或死亡。

冷害指數(shù)（CI）=∑（n×Sn）/（處理株數(shù)×最高冷害

級別）

式中，n為冷害級別，Sn為對應(yīng)冷害級別的幼苗株數(shù)。

參考丁夢佳等（2019）的方法，根據(jù)冷害指數(shù)大小將苗期耐冷性分為5級，分別為：強(qiáng)耐低溫（HR）（0.0≤CI≤0.2），中耐低溫（MR）（0.2

1. 2. 3 生理生化指標(biāo)測定及方法 低溫脅迫處理前和處理7 d后，分別取樣測定植株生理生化指標(biāo)，計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)脅迫處理7 d后與處理前相比的變化率。采用便攜式葉綠素測定儀（SPAD502 KONICA MINOLTA）測定葉片SPAD值，采用電導(dǎo)法（高俊鳳，2006）測定相對電導(dǎo)率，TBA測定法（高俊鳳，2006）檢測MDA含量，酸性茚三酮顯色法（李合生，2002）測定脯氨酸（Pro）含量;超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）和過氧化氫酶（CAT）的活性分別采用氯化硝基四氮唑藍(lán)光化還原法、愈創(chuàng)木酚法和紫外吸收法測定。

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

參考齊曉花等（2011），用隸屬函數(shù)法綜合評價耐冷性。隸屬函數(shù)值計(jì)算式為R（Xi）=（Xi-Xmin）/（Xmax-Xmin），Xi為某一指標(biāo)測定值，Xmin、Xmax分別為所有參試種質(zhì)某一指標(biāo)的最小值和最大值。如果為負(fù)相關(guān)，則用反函數(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)換，計(jì)算式為R（Xi）=1-（Xi-Xmin）/（Xmax-Xmin）。根據(jù)上述公式計(jì)算出供試種質(zhì)各項(xiàng)生理指標(biāo)的隸屬函數(shù)值，以各項(xiàng)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的平均值大小排序，綜合評價種質(zhì)的耐冷性強(qiáng)弱。采用Excel 2010對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，分析種子萌發(fā)、冷害和生理指標(biāo)在不同溫度處理?xiàng)l件下的差異顯著性。通過SPSS 25.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行皮爾遜雙變量相關(guān)性分析及聚類分析，分析生理指標(biāo)與冷害指數(shù)的相關(guān)性，根據(jù)相關(guān)性進(jìn)行分類。

2 結(jié)果與分析

2. 1 低溫脅迫對砧用茄子種子萌發(fā)的影響

如表1所示，在常溫條件（30 ℃）下，參試種質(zhì)的發(fā)芽率除J14為79.67%外，其余均高于80.00%，其中的8份種質(zhì)高于90.00%。20 ℃時，BC06、J60、J61、AQ、A和B等6份種質(zhì)的發(fā)芽率保持在90.00%以上，3份種質(zhì)的發(fā)芽率降至20.00%以下;15 ℃時，以上6份種質(zhì)的發(fā)芽率仍保持在84.00%以上，其余種質(zhì)的發(fā)芽率均明顯下降，其中BC05、J12、A01的發(fā)芽率均為0。10 ℃時，除J61的發(fā)芽率為18.33%外，其余種質(zhì)的發(fā)芽率均降至10.00%以下，其中9份種質(zhì)的發(fā)芽率為0。所有種質(zhì)的發(fā)芽指數(shù)均隨著溫度的降低而降低。20 ℃時，9份種質(zhì)的發(fā)芽指數(shù)降至10.00～20.00，7份種質(zhì)降至10.00以下;15 ℃時，BC06、J60、J61和B等4份種質(zhì)的發(fā)芽指數(shù)為10.00～12.00，其余種質(zhì)的發(fā)芽指數(shù)降至10.00以下;10 ℃時，所有種質(zhì)的發(fā)芽指數(shù)降至0～2.00。發(fā)芽勢與發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)的變化類似，低溫脅迫下發(fā)芽率較高的種質(zhì)，發(fā)芽勢也較高。上述結(jié)果說明，低溫脅迫抑制了砧用茄子的種子發(fā)芽，不同砧木種質(zhì)的發(fā)芽力對低溫脅迫的反應(yīng)不同;15 ℃脅迫下，有6份種質(zhì)保持84.00%以上的發(fā)芽率，表現(xiàn)具有一定耐冷性，而10 ℃脅迫下，15份種質(zhì)的發(fā)芽率為0%～10.00%，表明10 ℃低溫明顯抑制砧用茄子種子的萌發(fā)。

2. 2 低溫脅迫對砧用茄子幼苗冷害發(fā)生的影響

10 ℃低溫脅迫7 d，砧用茄子幼苗的冷害發(fā)生情況如表2所示。其中，種質(zhì)BC05和J13的冷害發(fā)生率為48.89%，冷害指數(shù)分別為0.16和0.20，表現(xiàn)強(qiáng)耐低溫;BC06、J60、AQ和A等4份種質(zhì)的冷害指數(shù)為0.27～0.40，表現(xiàn)中耐低溫;BC01、BC02、BC03、BC04、J61、J12、J14和B等8份種質(zhì)的冷害指數(shù)為0.40～0.56，表現(xiàn)耐低溫;J15和A01的冷害指數(shù)分別為0.64和0.62，表現(xiàn)低溫敏感。

2. 3 砧用茄子幼苗對低溫脅迫的生理響應(yīng)

10 ℃低溫脅迫7 d，砧用茄子幼苗各項(xiàng)生理指標(biāo)相較于常溫30 ℃的變化情況如表3所示。全部參試種質(zhì)的葉綠素含量均降低，電導(dǎo)率、MDA含量、Pro含量、SOD活性、POD活性和CAT活性均增加。其中，BC05、J60和J61的葉綠素含量降幅小于10.00%，說明光合作用受低溫脅迫影響小;BC02、BC03、BC06、J60、J61、AQ和A等7份種質(zhì)的電導(dǎo)率增幅低于10.00%，說明細(xì)胞膜系統(tǒng)受損程度較其他種質(zhì)輕;種質(zhì)A的MDA含量增幅（6.56%）最小，其次為BC06、J60、J61和J13，增幅分別為14.60%、23.68%、22.27%和21.76%，說明細(xì)胞受低溫傷害相對較輕;BC05、BC06、J60和J61等4份種質(zhì)的Pro含量增幅大于200.00%，說明細(xì)胞調(diào)節(jié)滲透能力較強(qiáng);BC05、BC06、J60、J12、J13、AQ和A等7份種質(zhì)的SOD活性增加100.00%以上;除A01外，其余15份種質(zhì)的POD活性均增加100.00%以上，其中BC05、J13和AQ增幅超過200.00%;有10份種質(zhì)的CAT活性增加100.00%以上，其中BC06增幅（209.23%）最高。上述分析說明供試種質(zhì)調(diào)節(jié)抗氧化保護(hù)酶系統(tǒng)抵抗低溫脅迫的能力不同。

2. 4 砧用茄子種質(zhì)耐冷性指標(biāo)的相關(guān)性

對10 ℃低溫脅迫的幼苗冷害指數(shù)與種子萌發(fā)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明幼苗冷害指數(shù)與種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、發(fā)芽勢無顯著相關(guān)性（P>0.05，下同）（表4），說明供試砧用茄子的幼苗耐冷性與種子萌發(fā)力不相關(guān)。對10 ℃低溫脅迫幼苗的冷害指數(shù)及7項(xiàng)生理指標(biāo)的變化率進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示（表5），冷害指數(shù)與葉綠素含量變化率呈極顯著正相關(guān)（P<0.01，下同），與MDA含量變化率呈顯著正相關(guān)（P<0.05，下同），與Pro含量變化率呈顯著負(fù)相關(guān)，與POD活性、SOD活性和CAT活性的變化率均呈極顯著負(fù)相關(guān)，與電導(dǎo)率變化率無顯著相關(guān)性。因此，可用與10 ℃低溫脅迫幼苗冷害指數(shù)顯著相關(guān)的6項(xiàng)生理指標(biāo)的變化率對砧用茄子種質(zhì)的耐冷性進(jìn)行綜合評價。

2. 5 砧用茄子種質(zhì)耐冷性綜合評價

2. 5. 1 隸屬函數(shù)值分析 用上述6項(xiàng)生理指標(biāo)進(jìn)行隸屬函數(shù)分析，根據(jù)隸屬函數(shù)值的平均值大小對供試種質(zhì)的耐冷性進(jìn)行排序，結(jié)果（表6）顯示，種質(zhì)BC05、BC06、J13、J60、AQ和A依次排序第1～第6，冷害指數(shù)分級（表2）為強(qiáng)耐低溫和中耐低溫;種質(zhì)J61、BC03、BC02、B、J12、BC01、BC04和J14依次排序第7～第14，冷害指數(shù)分級為耐低溫;種質(zhì)A01和J15排序最后2位，冷害指數(shù)分級為低溫敏感。因此，可用6項(xiàng)生理指標(biāo)的隸屬函數(shù)值綜合評價砧用茄子種質(zhì)耐冷性，其結(jié)果與冷害指數(shù)分級一致，且能細(xì)分種質(zhì)耐冷性強(qiáng)弱的次序。

2. 5. 2 聚類分析 用低溫脅迫下6項(xiàng)生理指標(biāo)的變化率進(jìn)行聚類分析，結(jié)果顯示當(dāng)歐式距離為10時，可將供試砧木種質(zhì)劃分為3類（圖2）。對比隸屬函數(shù)值分析結(jié)果（表5），耐冷性強(qiáng)弱排序第1～第3位的種質(zhì)BC05、BC06和J13歸為強(qiáng)耐低溫類（I類），排序第4～第11位的種質(zhì)J60、AQ、A、J61、BC03、BC02、B和J12歸為耐低溫類（II類），排序第12～第16位的種質(zhì)BC01、BC04、J14、A01和J15歸為低溫敏感類（III類）。

3 討論

溫度是影響作物生長發(fā)育和產(chǎn)量形成的重要環(huán)境因子。采用耐低溫的砧木進(jìn)行嫁接栽培，可提高番茄對低溫環(huán)境的抗逆性（程群科，2012）。朱晨曦等（2015）認(rèn)為辣椒種子在18 ℃下的相對發(fā)芽指數(shù)，14 ℃下的相對發(fā)芽率能一定程度體現(xiàn)辣椒種質(zhì)耐冷性;韓敏等（2018）認(rèn)為可用20 ℃時各番茄砧木的相對發(fā)芽率與相對活力指數(shù)鑒定耐冷性。本研究發(fā)現(xiàn)，供試砧用茄子種質(zhì)在低溫下其種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)、發(fā)芽勢與幼苗冷害指數(shù)的相關(guān)性不顯著，說明發(fā)芽指標(biāo)不應(yīng)作為砧用茄子耐冷性的鑒定指標(biāo)。該結(jié)果與前人認(rèn)為低溫發(fā)芽能力與植株耐冷性相關(guān)的觀點(diǎn)不完全一致，可能是因?yàn)楣┰囌栌们炎拥姆N子和幼苗對低溫耐性機(jī)制存在差異，這與苗永美等（2013）研究得出黃瓜耐冷性在不同發(fā)育時期可能由不同的基因控制，會因不同生育期的基因差異表達(dá)引起耐冷性不同的觀點(diǎn)類似。作物受低溫脅迫時，植株外部形態(tài)表現(xiàn)為葉片黃化脫水，凋萎卷曲，植株矮化，甚至整株干枯死亡（Jompuk et al.，2005），形態(tài)變化能直觀反應(yīng)植株被低溫脅迫傷害程度。因此，普遍將冷害指數(shù)作為鑒定作物耐冷性的表型指標(biāo)（徐光東等，2012）。本研究通過10 ℃低溫脅迫幼苗，根據(jù)冷害指數(shù)對16份砧用茄子的耐冷性進(jìn)行了分級評價，鑒定出強(qiáng)耐低溫種質(zhì)2份、中耐低溫種質(zhì)4份、耐低溫種質(zhì)8份、低溫敏感種質(zhì)2份。結(jié)果說明，幼苗冷害指數(shù)分級根據(jù)表型指標(biāo)，能直觀區(qū)分供試種質(zhì)的耐冷性。

在植物耐冷性生理機(jī)制方面，有學(xué)者認(rèn)為低溫對植物產(chǎn)生的影響始于細(xì)胞膜，電導(dǎo)率能一定程度反映細(xì)胞膜的損害程度（周雙，2015）。低溫導(dǎo)致植物體內(nèi)自由基積累，膜脂過氧化的加劇導(dǎo)致代謝產(chǎn)物MDA增加（Gill and Tuteja，2010）。植物在低溫脅迫下，脯氨酸作為體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，通過不同程度升高來抵御低溫傷害。植物體內(nèi)的酶促防御系統(tǒng)是影響植物對外界不良環(huán)境耐受能力的重要因素（Penella et al.，2017）。雋加香（2015）在番茄上的研究表明，低溫脅迫引起植株葉片脯氨酸含量和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)增加，抗氧化酶活性增強(qiáng)。本研究結(jié)果表明，10 ℃低溫脅迫砧用茄子幼苗7 d，參試種質(zhì)的葉綠素含量均降低，而電導(dǎo)率、MDA含量、Pro含量、SOD活性、POD活性和CAT活性均增加，不同種質(zhì)的各項(xiàng)指標(biāo)變化率不同。本研究結(jié)果與前人研究基本相同，說明不同砧用茄子幼苗的光合作用、細(xì)胞膜系統(tǒng)、細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)和抗氧化保護(hù)酶系統(tǒng)對低溫脅迫的響應(yīng)不同。低溫導(dǎo)致細(xì)胞膜電解質(zhì)外滲，引起電導(dǎo)率增高，電導(dǎo)率增幅越小，細(xì)胞膜受損害程度越輕;耐冷性較強(qiáng)的種質(zhì)能保持較低的MDA含量適應(yīng)低溫脅迫，產(chǎn)生更多Pro參與體內(nèi)調(diào)節(jié)，減輕細(xì)胞受損程度;低溫導(dǎo)致抗氧化酶活性上升，種質(zhì)耐冷性越強(qiáng)，其體內(nèi)酶活性越強(qiáng)，氧代謝平衡能力越強(qiáng)。

趙楊等（2015）利用隸屬函數(shù)法和聚類分析將早稻品種歸類為3個不同的耐冷性類別;張曼等（2016）在葫蘆砧木上的研究顯示，SOD活性、POD活性和MDA含量等生理指標(biāo)與冷害指數(shù)不相關(guān)，認(rèn)為耐低溫性是復(fù)雜性狀;李彩霞等（2018）對茄子耐冷性的研究表明，電導(dǎo)率及MDA和可溶性糖含量可作為判斷茄子耐低溫能力的指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，10 ℃低溫脅迫下，供試砧用茄子的幼苗冷害指數(shù)分別與葉綠素含量和MDA含量的變化率呈顯著或極顯著正相關(guān)，分別與Pro含量、SOD活性、POD活性和CAT活性的變化率呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān)，而與電導(dǎo)率變化率無顯著相關(guān)性。利用相關(guān)性生理指標(biāo)進(jìn)行隸屬函數(shù)分析，得出供試種質(zhì)的耐冷性強(qiáng)弱排序，與冷害指數(shù)分級評價一致。通過聚類分析，將供試種質(zhì)分為強(qiáng)耐低溫、耐低溫和低溫敏感三類。利用多項(xiàng)生理指標(biāo)進(jìn)行隸屬函數(shù)分析、聚類分析得出綜合評價結(jié)果，可避免表型觀測中主觀判斷造成的誤差，更準(zhǔn)確地評價種質(zhì)耐冷性強(qiáng)弱，與前人觀點(diǎn)一致。

4 結(jié)論

砧用茄子的種子發(fā)芽指標(biāo)不應(yīng)作為耐冷性的鑒定指標(biāo)，幼苗冷害指數(shù)以及葉綠素、MDA、Pro含量和SOD、POD和CAT活性6項(xiàng)生理指標(biāo)可作為耐冷性的鑒定指標(biāo)。鑒定篩選出耐冷性強(qiáng)的6份種質(zhì)BC05、J13、BC06、J60、AQ和A，可作為選育耐冷砧木新品種的骨干種質(zhì)材料加以利用。

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（責(zé)任編輯 鄧慧靈）