羅 鳴，曾慶鴻，李 歡，吳明開*

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 現(xiàn)代中藥材研究所，貴州 貴陽 550006；2.貴州省農(nóng)業(yè)科技發(fā)展中心，貴州 貴陽 550001；3.貴州省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點實驗室，貴州 貴陽 550006)

石斛作為藥用最早始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。石斛味甘，平，無毒。主傷中，除痹，下氣，補五臟虛勞，贏瘦，強陰，久服厚腸胃，輕身延年[1]。鐵皮石斛(Dendrobiumofficinale)是蘭科多年生草本植物，主要自然分布于云南、廣西、貴州等山地半陰濕的巖石、或林木上，喜溫暖濕潤氣候和陰涼的環(huán)境，不耐嚴寒[2]。由于鐵皮石斛藥用價值高，市場需求大，過度的濫采亂挖，導(dǎo)致原生地生境遭到嚴重破壞、野生資源瀕臨滅絕。隨著近年鐵皮石斛產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的快速發(fā)展，市場對種苗的需求量大增。目前，使用鐵皮石斛種子，采用組織培養(yǎng)方式擴繁，是滿足產(chǎn)業(yè)化發(fā)展對種苗需求的一種方式，而在培養(yǎng)室歷經(jīng)數(shù)月培養(yǎng)的組培苗，在移栽大田前需轉(zhuǎn)移至室外煉苗一段時間，以增強其適應(yīng)外界環(huán)境的能力，提高其素質(zhì)，為移栽后的生長奠定基礎(chǔ)。因此，比較鐵皮石斛組培苗不同煉苗時間的主要農(nóng)藝性狀與移栽自然環(huán)境下的成活率差異，明確鐵皮石斛組培苗的適宜煉苗時間，對縮短育苗時間、降低育苗成本有一定的現(xiàn)實意義。

1 材料與方法

1.1 組培苗不同煉苗時間的農(nóng)藝性狀

試驗于2020年8-10月在有60%遮陽網(wǎng)覆蓋的大棚內(nèi)進行。鐵皮石斛組培苗由安龍縣“石斛谷”鐵皮石斛成熟蒴果，經(jīng)無菌播種、組培快繁獲得，組培苗質(zhì)量優(yōu)良。試驗設(shè)煉苗15 d、25 d、35 d共3個處理，每處理240株苗，其中120株用于觀測農(nóng)藝性狀差異，120株用于移栽野外觀測成活狀況。當大棚內(nèi)溫度高或濕度低時，采用揭膜通風(fēng)或每天噴水霧3～5次、每次噴霧1～3 min的方式散熱保濕；當大棚內(nèi)溫度低時，密封大棚四周保溫。

1.2 組培苗不同煉苗時間的移栽成活率

將煉苗15 d、25 d、35 d后的組培苗各120株移栽于野外90 d后觀測成活狀況。移栽地位于貴州省興義市則戎鄉(xiāng)干嘎村鐵皮石斛種植基地。移栽區(qū)地處北緯24°54′40″、東經(jīng)104°59′38″，為典型喀斯特石漠化小喬木、灌木混生林地，海拔1 200 m左右、年均氣溫16℃以上、自然坡度約50°、坡向西偏北286°、降水豐富；移栽方式為附石栽培，載體為石灰?guī)r，蜂窩狀，占周圍林地約35%。

2 結(jié)果與分析

2.1 組培苗各煉苗時間的農(nóng)藝性狀差異

由表1可見，不同煉苗時間對鐵皮石斛組培苗的農(nóng)藝性狀有明顯影響。其中：煉苗15 d，由于8-9月的大棚氣溫較高，與室內(nèi)培養(yǎng)設(shè)置的溫度條件相差不大，且時間短，組培苗的莖、葉仍較鮮嫩，農(nóng)藝性狀與煉苗前的瓶苗相比變化不大。煉苗25 d，葉長、葉寬、根長分別較15 d縮短0.14 mm、0.18 mm、8.57 mm，莖長比煉苗15 d短12.69 mm、只有煉苗15 d莖長的86.1%，莖粗比煉苗15 d增加了0.19 mm、提高了9.7%。煉苗35 d，莖長、根長較15 d分別縮短了11.96 mm、6.9 mm，莖粗、節(jié)間數(shù)、節(jié)間長、葉片數(shù)、葉長、葉寬、根數(shù)則較煉苗15 d分別增加了1.25 mm、0.59個、1.55 mm、1.64個、2.67 mm、0.25 mm、3.79條。同時煉苗35 d較煉苗25 d的主要農(nóng)藝性狀指標均有不同程度的增加。說明隨著鐵皮石斛組培苗煉苗時間的延長，使組培苗從環(huán)境中吸收的營養(yǎng)物質(zhì)不斷積累，促進了各農(nóng)藝性狀指標值的提升。

表1 鐵皮石斛組培苗各煉苗時間的農(nóng)藝性狀

2.2 組培苗各煉苗時間的移栽成活率差異

由圖可見，鐵皮石斛組培苗煉苗15 d移栽野外的成活率僅12.8%，煉苗25 d移栽野外的成活率為51.5%，比煉苗15 d的高38.7百分點；煉苗35 d移栽野外的成活率達78.6%，分別比煉苗15 d和25 d的高65.87百分點和27.1百分點，但略低于移栽于大棚的成活率。

圖1 鐵皮石斛組培苗各煉苗時間移栽野外的成活率

圖2 鐵皮石斛組培苗移栽栽野外的場景(2020.9至2020.12)

3 結(jié)論與討論

試驗初步表明，鐵皮石斛組培苗出瓶后直接移栽野外的做法，雖可省略大棚苗床馴化的過程，但直接移栽野外的成活率很低，而經(jīng)過大棚苗床馴化的組培苗由于其素質(zhì)得到了大幅提升，使適應(yīng)野外環(huán)境的能力更強，能大幅提高移栽成活率。

鐵皮石斛組培苗株體較為脆弱，對野外環(huán)境的適應(yīng)能力有限，因此，移栽野外前煉苗顯得極其重要，煉苗時間的長短是保障移栽后能否成活、正常生長發(fā)育的關(guān)鍵[3]。試驗初步表明，鐵皮石斛組培苗移栽野外前，在室外的煉苗時間不少于35 d，才能達到較高的成活率。另外，鐵皮石斛組培苗移栽野外的環(huán)境選擇也是保障其生長發(fā)育的必要因素。貴州鐵皮石斛組培苗種植，應(yīng)選擇在年均氣溫16～19℃、年降水量1 300～1 600 mm、無霜期280～350 d、海拔1 000 m左右、坡度40°～70°、坡向為西偏北280°左右、中午有散射光、15:00以后有陽光直射的亞熱帶濕潤溫和氣候區(qū)域；要求附生石類型為蜂窩狀石灰?guī)r、占林地面積的30%～40%；667 m2林地有包括石斛在內(nèi)的蘭科植物20～200居群、胸徑小于30 cm的小喬木占面積60%～70%、灌木占面積40%～50%、草本叢占面積20%～30%、苔蘚植物占面積30%～40%、郁閉度為0.5～0.7的小喬木、灌木混生地。