高 晗，宋孟澤，崔璐璐，孫淑紅

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271018）

丁酸梭菌是芽孢類革蘭氏陽(yáng)性菌，在1992年由黑龍江省科學(xué)院微生物研究所從俄羅斯研究機(jī)構(gòu)引進(jìn)并在我國(guó)應(yīng)用發(fā)展[1]。丁酸梭菌在生長(zhǎng)過(guò)程不易受到胃酸、消化酶和膽汁酸等因素的影響、其代謝產(chǎn)物為丁酸、乳酸等物質(zhì)，有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用[2-3]。目前，丁酸梭菌廣泛應(yīng)用于家禽業(yè)，在飼糧中添加丁酸梭菌可以提高產(chǎn)蛋后期蛋雞的生長(zhǎng)性能和蛋品質(zhì)，改善腸道微生態(tài)[4-6]。

據(jù)《中國(guó)家禽遺傳資源志·家禽志》收錄，我國(guó)家禽遺傳資源地方雞種已經(jīng)高達(dá)100 余種[7]，地方雞種在當(dāng)今越來(lái)越成為社會(huì)所關(guān)注的熱點(diǎn)[9]，其中汶上蘆花雞為山東地方品種雞群代表之一，其體型似元寶，脛細(xì)短、橫斑羽。已有研究表明汶上蘆花雞在生產(chǎn)性能、免疫功能、抗病力等方面的優(yōu)勢(shì)[9-10]。本試驗(yàn)在產(chǎn)蛋后期汶上蘆花雞飼糧中添加丁酸梭菌，研究丁酸梭菌對(duì)汶上蘆花雞生長(zhǎng)性能和蛋品質(zhì)的影響，為提高產(chǎn)蛋后期汶上蘆花雞生產(chǎn)效益的調(diào)控方案提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 330 日齡汶上蘆花雞120 只，由山東金秋農(nóng)牧科技股份有限公司提供。

1.1.2 菌株 丁酸梭菌菌粉大連三儀公司提供，每克菌粉中含2.67×109CFU 丁酸梭菌；復(fù)合益生菌由市場(chǎng)購(gòu)進(jìn)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧管理 動(dòng)物試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，按照汶上蘆花雞飼養(yǎng)管理規(guī)范進(jìn)行試驗(yàn)管理。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧由艾地盟動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)（美國(guó)ADM 飼料）有限公司提供，其組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。120 只體重相近的330 日齡汶上蘆花雞，分為5 組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6只雞，自由采食。丁酸梭菌首先與預(yù)混物混合，然后與其他成分混合，存放在干燥通風(fēng)的庫(kù)房中。試驗(yàn)周期為8 周。試驗(yàn)分組：（1）對(duì)照組，只喂基礎(chǔ)日糧；（2）復(fù)合益生菌組，在基礎(chǔ)日糧中添加由市場(chǎng)購(gòu)進(jìn)的含有復(fù)合益生菌的添加劑；（3）丁酸梭菌組，分3 個(gè)不同水平107CB 組、108CB 組、109CB 組，分別在基礎(chǔ)日糧中添加1×107CFU/kg、1×108CFU/kg、1×108CFU/kg 丁酸梭菌。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2.2 樣品采集及檢測(cè)指標(biāo) 每天記錄雞只數(shù)量、產(chǎn)蛋數(shù)、稱取蛋重；計(jì)算產(chǎn)蛋量，產(chǎn)蛋率，平均蛋重；在試驗(yàn)的2、4、6、8 周每組重復(fù)隨機(jī)收集2～5 枚蛋，檢測(cè)雞蛋的蛋品質(zhì)。

1.2.3 蛋品質(zhì)測(cè)定 試驗(yàn)的2、4、6、8 周每重復(fù)隨機(jī)選取2～5 枚雞蛋，連續(xù)選取3 d 進(jìn)行測(cè)定，取平均值進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。蛋重：以電子天平稱?。坏靶沃笖?shù)：以電子數(shù)顯卡尺量取雞蛋橫徑和縱徑的長(zhǎng)度，按公式“橫徑/縱徑”計(jì)算蛋形指數(shù)；蛋殼硬度：使用蛋殼厚度測(cè)定儀測(cè)定雞蛋尖端、鈍端和中間蛋殼硬度，取平均值；蛋殼厚度：使用蛋殼強(qiáng)度（N）測(cè)定儀測(cè)定蛋殼厚度。蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃等級(jí)：使用多功能蛋品檢測(cè)儀測(cè)定；蛋黃比重：完整分離蛋清和蛋黃，并去除系帶，使用電子天平稱取蛋黃重量，按公式“蛋黃重/蛋重×100”計(jì)算蛋黃比重；蛋殼比重：使用紙巾擦拭蛋殼，將蛋殼上殘留的蛋清去除干凈，晾干，以電子天平稱取蛋殼重，按公式“蛋殼重/蛋重×100”計(jì)算蛋殼比重。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用 SAS（Version 8e，SAS Institute，1998）軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各均數(shù)之間采用Tukey 法進(jìn)行多重比較，以P<0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞生產(chǎn)性能的影響

2.1.1 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞產(chǎn)蛋率的影響飼糧中添加1×107CFU/kg、1×108CFU/kg、1×109CFU/kg 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞產(chǎn)蛋率均無(wú)顯著影響（P>0.05），與對(duì)照組相比，108CB 組和109CB 組產(chǎn)蛋率有增加的趨勢(shì)（P>0.05），見(jiàn)表2。

表2 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞產(chǎn)蛋率的影響（%）

2.1.2 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞平均蛋重的影響 飼糧中添加1×107CFU/kg、1×108CFU/kg、1×109CFU/kg 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞平均蛋重均無(wú)顯著影響（P>0.05），見(jiàn)表3。

表3 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞平均蛋重的影響（g）

2.2 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋品質(zhì)的影響

2.2.1 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞外在蛋品質(zhì)的影響 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼重量和蛋殼指數(shù)的影響見(jiàn)表4 ～ 8。在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，復(fù)合益生菌組和 108丁酸梭菌組蛋形指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在試驗(yàn)的第6 周，108CB 組和109CB組蛋形指數(shù)顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。與對(duì)照組相比，飼糧中添加丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋殼厚度和蛋殼重量無(wú)顯著影響（P>0.05）。在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，復(fù)合益生菌組、107CB 組、108CB 組和109CB 組蛋殼指數(shù)均顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；在試驗(yàn)開(kāi)始的第6 周，107CB 組、108CB 組和109CB 組蛋殼指數(shù)均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。

表4 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋形指數(shù)的影響（%）

表5 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋殼厚度的影響 （0.01mm）

表6 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋殼強(qiáng)度的影響（N）

表7 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋殼重量的影響（g）

表8 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋殼指數(shù)的影響（%）

2.2.2 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞內(nèi)在蛋品質(zhì)的影響 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞哈氏單位、蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃重量、蛋黃指數(shù)的影響見(jiàn)表9～13。在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，復(fù)合益生菌組哈氏單位顯著低于對(duì)照組（P<0.05），108CB 組和109CB 組哈氏單位極顯著低于對(duì)照組（P<0.01）；在試驗(yàn)開(kāi)始的第8 周，107CB 組哈氏單位顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。對(duì)于蛋白高度，在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，復(fù)合益生菌組蛋白高度顯著低于對(duì)照組（P<0.05），107CB 組、108CB 組和109CB組蛋白高度均極顯著低于對(duì)照組（P<0.01）；在試驗(yàn)的第8 周，107CB 組和109CB 組蛋白高度顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。對(duì)于蛋黃顏色，在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，107CB 組、108CB 組和109CB組蛋黃顏色顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在試驗(yàn)的第8 周，107CB 組蛋黃顏色顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。對(duì)于蛋黃重量和蛋黃指數(shù)，在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，107CB 組和109CB 組蛋黃重量顯著高于對(duì)照組（P<0.05），108CB 組的蛋黃指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；在試驗(yàn)的第8 周，復(fù)合益生菌組蛋黃重量和蛋黃指數(shù)顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。

表9 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞哈氏單位的影響（g）

表10 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋白高度的影響 （mm）

表11 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋黃顏色的影響

表12 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋黃重量的影響（g）

表13 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋黃指數(shù)的影響 （%）

3 討論

3.1 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞生產(chǎn)性能的影響

以往研究表明，丁酸梭菌可以促進(jìn)蛋雞生長(zhǎng)發(fā)育，提高產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能[11-12]。Xiang 等人試驗(yàn)結(jié)果表明，添加丁酸梭菌可以顯著降低產(chǎn)蛋初期蛋雞的平均日采食量，提高蛋雞飼料轉(zhuǎn)化率[13]；張秀江等研究發(fā)現(xiàn)，蛋雞飼糧中添加0.01 % 丁酸梭菌，可以極顯著提高蛋重和產(chǎn)蛋率，同時(shí)極顯著降低料蛋比[14]。然而本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加1×107CFU/kg、1×108CFU/kg、1×109CFU/kg丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞生產(chǎn)性能均無(wú)顯著影響，這與本實(shí)驗(yàn)室前期在產(chǎn)蛋初期汶上蘆花雞飼糧中添加1×108CFU/kg 丁酸梭菌顯著提高平均蛋重和產(chǎn)蛋率的結(jié)果不同，這可能與不同蛋雞產(chǎn)蛋階段、個(gè)體差異大、飼養(yǎng)環(huán)境不同有關(guān)。丁酸梭菌在提高產(chǎn)蛋后期汶上蘆花雞生產(chǎn)性能的具體調(diào)控方案，需要進(jìn)一步探索。

3.2 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期蘆花雞蛋品質(zhì)的影響

蛋形指數(shù)直接影響到破蛋率和孵化率，不同品種種蛋的蛋形指數(shù)差異非常明顯[15]。黃金山指出，壩上長(zhǎng)尾雞種蛋的蛋形指數(shù)對(duì)孵化率有顯著影響[16]；馮靜等研究發(fā)現(xiàn)蛋形指數(shù)集中在1.3 時(shí)，拉薩白雞種蛋可以達(dá)到較理想的孵化效果[17]。本研究發(fā)現(xiàn)，在試驗(yàn)開(kāi)始的第2 周，108CB 組蛋形指數(shù)相比對(duì)照組顯著提高，效果優(yōu)于商品益生菌。蛋殼強(qiáng)度是關(guān)系雞蛋的保存和運(yùn)輸?shù)闹匾笜?biāo)，同時(shí)也是影響雞蛋孵化和價(jià)格的重要因素，本研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加丁酸梭菌可以顯著提高蛋殼強(qiáng)度，這可能是由于丁酸梭菌促進(jìn)了蛋雞對(duì)鈣，鐵、錳等營(yíng)養(yǎng)元素的吸收，使蛋殼厚度增加。蛋白高度顯示雞蛋的新鮮程度，并關(guān)聯(lián)雞蛋的大小[18]，蛋白的濃稠度由哈氏單位反應(yīng)，同時(shí)關(guān)系著種蛋的受精率和育雛率[19]。本研究發(fā)現(xiàn)在試驗(yàn)的第8 周，107CB 組的蛋白高度和哈氏單位顯著高于對(duì)照組，這與鄭超等在蛋雞飼糧中添加丁酸梭菌的研究結(jié)果相似[12]，原因可能是丁酸梭菌產(chǎn)生的酶類、氨基酸等物質(zhì)提高了飼料利用率。蛋黃顏色反應(yīng)了蛋黃中脂溶性色素的含量，含量越高，顏色越深，與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值無(wú)直接關(guān)系，但影響市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)飼糧中添加1×107CFU/kg、1×108CFU/kg、1×109CFU/kg 丁酸梭菌均可以顯著增加產(chǎn)蛋后期蘆花雞雞蛋的蛋黃色澤，表明丁酸梭菌可以在一定程度上改善內(nèi)在蛋品質(zhì)，提高蛋禽經(jīng)濟(jì)效益。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加1×107CFU/kg、1×108CFU/kg、1×109CFU/kg 丁酸梭菌對(duì)產(chǎn)蛋后期汶上蘆花雞產(chǎn)蛋率無(wú)顯著影響（P>0.05），添加1×107CFU/kg 丁酸梭菌有助于提高產(chǎn)蛋后期汶上蘆花雞雞蛋品質(zhì)，提高蛋禽經(jīng)濟(jì)效益。