曹 慜,楊東智,吳忠蘭,馬學(xué)旻

近年來(lái)，隨著聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署“三個(gè)90%”艾滋病防治目標(biāo)的提出，寧夏艾滋病監(jiān)測(cè)和檢測(cè)不斷加強(qiáng)，人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體檢測(cè)數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng)。為進(jìn)一步了解寧夏HIV抗體檢測(cè)工作現(xiàn)狀，提高針對(duì)性和檢測(cè)工作質(zhì)量，本研究對(duì)寧夏2017-2019年HIV抗體確證結(jié)果及相關(guān)資料進(jìn)行分析，為寧夏艾滋病防治工作提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般材料：2017-2019年寧夏確證中心實(shí)驗(yàn)室轄區(qū)內(nèi)各艾滋病網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室送檢的初篩陽(yáng)性樣本，通過(guò)系統(tǒng)重查排除既往陽(yáng)性。

1.2 方法：按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》(2015年版)，使用酶聯(lián)免疫法(珠海麗珠HIV抗原抗體診斷試劑盒)和膠體硒法(美國(guó)雅培HIV 1+2型抗體診斷試劑盒)對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)檢。任何1種復(fù)檢試劑檢測(cè)有反應(yīng)，均使用新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太有限公司生產(chǎn)的HIV-1+2抗體免疫印跡試劑進(jìn)行補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)。依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》(2015年版)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合試劑說(shuō)明書進(jìn)行結(jié)果判定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：使用Excel 2003建立數(shù)據(jù)庫(kù)，運(yùn)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 各年份抗體檢測(cè)結(jié)果：2017-2019年，排除既往陽(yáng)性43例后，共收到初篩陽(yáng)性樣本1 231例。經(jīng)酶聯(lián)免疫和膠體硒2種試劑復(fù)檢后，至少1種試劑復(fù)檢有反應(yīng)的樣本共計(jì)735例，復(fù)檢陽(yáng)性率為59.71%；2017-2019年復(fù)檢陽(yáng)性率分別為73.68%、56.61%、52.18%，線性趨勢(shì)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=35.618，P<0.05)。采用免疫印跡法(WB)，對(duì)735例復(fù)檢有反應(yīng)的樣本進(jìn)行補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)，HIV-1抗體陽(yáng)性561例，復(fù)檢樣本的確證陽(yáng)性率為76.33%，陰性106例(14.42%)，不確定68例(9.25%)。各年份HIV-1復(fù)檢樣本確證陽(yáng)性率分別為71.83%、76.64%、80.75%，線性趨勢(shì)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.412，P<0.05)。2017-2019年送檢樣本確證陽(yáng)性率分別為52.92%、43.39%、42.14%，線性趨勢(shì)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.525，P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 2017-2019年HIV-1抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同送檢機(jī)構(gòu)抗體檢測(cè)結(jié)果：1 231份樣本由四類送檢機(jī)構(gòu)送檢，來(lái)自醫(yī)療機(jī)構(gòu)的樣本最多，共計(jì)818份；其次為采供血機(jī)構(gòu)、疾控機(jī)構(gòu)和出入境檢疫機(jī)構(gòu)，送檢樣本量分別為257份、149份、7份。各送檢機(jī)構(gòu)送檢樣本的陽(yáng)性符合率，由高到低分別為疾控機(jī)構(gòu)(73.15%)、出入境檢疫機(jī)構(gòu)(71.43%)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)(51.10%)、采供血機(jī)構(gòu)(11.28%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=179.48，P<0.05)，見(jiàn)表2。各機(jī)構(gòu)確證陽(yáng)性樣本占全部確證陽(yáng)性樣本的比例，由高到低分別為醫(yī)療機(jī)構(gòu)(74.5%)、疾控機(jī)構(gòu)(19.4%)、采供血機(jī)構(gòu)(5.2%)、出入境檢疫機(jī)構(gòu)(0.6%)。

表2 4類送檢機(jī)構(gòu)HIV-1抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 確證陽(yáng)性樣本人群及地域分布特征：送檢樣本中，男性以21～50歲為主，女性在21～30歲年齡段占比較高。而確證陽(yáng)性樣本中，男性31～40歲確證陽(yáng)性率最高，41～50歲、21～30歲次之；女性51～60歲確證陽(yáng)性率最高。寧夏區(qū)內(nèi)樣本共計(jì)735例，其中銀川市356例、中衛(wèi)市157例、吳忠市88例、固原市87例、石嘴山市47例。

2.4 確證陽(yáng)性樣本的WB帶型分析：在 561例確證為HIV-1抗體陽(yáng)性的標(biāo)本中，有 383 例(68.27%) 在WB確證實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)全帶型，141例(25.13%) 出現(xiàn)7～9條帶帶型，33例(5.88%) 出現(xiàn)4～6條帶帶型，還有4例(0.71%) 為3條帶帶型。從WB條帶分布分析，條帶 gp160、gp120出現(xiàn)率為 100.0%，條帶 p17、p55出現(xiàn)的概率低，分別為79.68% 和76.47%。HIV-1抗體確證陽(yáng)性樣本中，還有12例樣本出現(xiàn)HIV-2特定帶，其中11例為全帶型，僅1例未見(jiàn) p17、p55條帶，見(jiàn)表3。

表3 確證陽(yáng)性樣本帶型分布

2.5 不確定樣本的WB帶型及隨訪復(fù)檢情況：68例 HIV 抗體不確定樣本中，共有18種帶型，較常見(jiàn)1條env帶(17/68)、1條p24帶(15/68)、1條env帶與p24帶同時(shí)存在(14/68)。僅有10例隨訪復(fù)檢，2例轉(zhuǎn)陽(yáng)，見(jiàn)表4。

表4 不確定樣本帶型及隨訪情況

帶型組合模式條帶n隨訪例數(shù)陽(yáng)轉(zhuǎn)例數(shù)2條gag帶17.244101條pol6610/1條gag帶+1條pol帶+1條env24.66.16010/1條pol+1條env51.16010/66.16010/

3 討論

針對(duì)當(dāng)前艾滋病防治形勢(shì)提出的3個(gè)90%目標(biāo)中，經(jīng)診斷發(fā)現(xiàn)并知曉自身感染狀況的感染者比例達(dá)到90%的這一目標(biāo)，對(duì)HIV抗體檢測(cè)提出了更高的要求[1]。本研究結(jié)果顯示，復(fù)檢陽(yáng)性樣本的確證陽(yáng)性率為76.33%，與2013-2017 年廈門市的檢測(cè)結(jié)果相近[2]。2017-2019年，HIV抗體初篩陽(yáng)性樣本數(shù)、確證陽(yáng)性樣本數(shù)及復(fù)檢陽(yáng)性樣本的確證陽(yáng)性率均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，但初篩陽(yáng)性樣本的復(fù)檢陽(yáng)性率和確證陽(yáng)性率都呈逐年下降趨勢(shì)，提示隨著本地區(qū)擴(kuò)大檢測(cè)策略的實(shí)施，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性樣本數(shù)有所增加，但檢測(cè)效率有待提高。

本研究在不同送檢機(jī)構(gòu)樣本分析中顯示，采供血機(jī)構(gòu)送檢的標(biāo)本確證陽(yáng)性率最低，疾控中心確證陽(yáng)性率最高，與杭州市的研究結(jié)果一致[3]。醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢樣本最多，且確證陽(yáng)性樣本占全部確證陽(yáng)性樣本的比例也最高，與廣西[4]、天津[5]的研究結(jié)果一致。而就診患者在接受其他醫(yī)學(xué)檢測(cè)時(shí)更愿意接受HIV抗體篩查[6]，醫(yī)務(wù)人員主動(dòng)提供HIV檢測(cè)咨詢可促進(jìn)HIV的早發(fā)現(xiàn)[7]。故應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步提高醫(yī)療機(jī)構(gòu)艾滋病網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的覆蓋率，加快推動(dòng)有條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)建立HIV確證實(shí)驗(yàn)室，加大其HIV抗體檢測(cè)工作力度，提高HIV抗體檢測(cè)的覆蓋面和可及性。

本研究結(jié)果顯示，男性送檢樣本與確證陽(yáng)性樣本的年齡分布較為一致，而女性送檢樣本與確證陽(yáng)性樣本的年齡分布差異較大，送檢樣本占比較高的為21～30歲年齡段，但確證陽(yáng)性樣本占比最大的為51～60歲年齡段。結(jié)果提示本地區(qū)中老年女性的HIV防控工作需要重點(diǎn)關(guān)注，在今后的擴(kuò)大檢測(cè)、宣傳教育及干預(yù)防控工作中提高針對(duì)性。地域分布情況來(lái)看，居住地在銀川市的送檢樣本最多，但確證陽(yáng)性率居后；居住地為中衛(wèi)市的送檢樣本量及確證陽(yáng)性率在寧夏5市中均位居前二。結(jié)果提示各市縣網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)效率存在差異，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化管理，盡量消除引起初篩試驗(yàn)假陽(yáng)性結(jié)果的影響因素，加大對(duì)自愿咨詢檢測(cè)等主動(dòng)檢測(cè)的工作力度，在擴(kuò)大檢測(cè)的同時(shí)盡可能提高檢測(cè)效率。

隨著病程進(jìn)展，WB試驗(yàn)會(huì)呈現(xiàn)不同的帶型分布特征，在一定程度上從體液免疫的角度展現(xiàn)HIV能對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生破壞程度，因而WB帶型中蘊(yùn)含著疾病進(jìn)程信息[8]。研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)感染期的大部分病例p17抗體呈陽(yáng)性，而進(jìn)入感染中期及AIDS期后，p17抗體陽(yáng)性率明顯下降[9]。另一研究也顯示，AIDS期p17和p55的檢出率在低于原發(fā)感染者和感染中期[8]。本研究顯示，p17與p55檢出率較低，該結(jié)果是否說(shuō)明本地區(qū)新發(fā)現(xiàn)感染者的臨床分期偏向于感染中末期，還有待結(jié)合CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)、臨床表現(xiàn)等進(jìn)一步分析。另外，研究表明含有g(shù)p160、p24帶型的不確定標(biāo)本提示有較大感染風(fēng)險(xiǎn)[10-11]，僅有g(shù)p160和gp120條帶應(yīng)高度懷疑為急性感染期[12]。本研究68例不確定樣本中，僅有10例隨訪復(fù)檢。而未隨訪病例中，高達(dá)15例為有g(shù)p160、p24帶型。結(jié)果提示本地區(qū)不確定樣本的隨訪工作亟待加強(qiáng)，針對(duì)HIV抗體不確定者，應(yīng)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析及流行病學(xué)調(diào)查，從而評(píng)估感染風(fēng)險(xiǎn)，輔以病毒載量檢測(cè)、CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)、臨床表現(xiàn)等及早診斷，及早準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)HIV感染，降低傳播風(fēng)險(xiǎn)。

HIV-2感染者在我國(guó)為1998年首次在福建省發(fā)現(xiàn)[13]，隨后多為散發(fā)病例，且絕大部分為HIV-1和HIV-2混合感染，這些感染者主要來(lái)自HIV-2流行地區(qū)或曾在HIV-2流行區(qū)并有過(guò)高危行為[14]。2017-2019年，寧夏共12例樣本出現(xiàn)HIV-2特定帶，而寧夏相關(guān)研究報(bào)道僅見(jiàn)于2005年[15]，故而應(yīng)盡快對(duì)此類樣本進(jìn)行回顧性分析，探明我區(qū)HIV-2的流行狀況。