馬曉穎，呂立濤，楊 濤，姚 瀾，李長田，肖 軍**

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所遼寧省食用菌優(yōu)質(zhì)栽培重點實驗室，遼寧 沈陽 110161；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 130118）

先天免疫是指機體先天具有的正常的生理防御功能，對各種不同的病原微生物和異物的入侵都能作出相應(yīng)的免疫應(yīng)答，在引發(fā)炎癥反應(yīng)和宿主防御反應(yīng)中至關(guān)重要。研究表明，巨噬細胞是免疫系統(tǒng)的重要成員，其不僅是局部炎癥最典型的啟動者，也是組織微環(huán)境的主要成分產(chǎn)生者，在抵御病原微生物入侵方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用[1-3]。巨噬細胞已成為治療炎癥性和感染性疾病的重要靶點，目前一些化學(xué)合成的化合物已經(jīng)被用作免疫調(diào)節(jié)劑來調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的巨噬細胞功能，然而，一些不良反應(yīng)，如肝毒性、腎毒性和超敏反應(yīng)，限制了其臨床應(yīng)用[4]。因此迫切需要開發(fā)無毒、免疫活性強的天然免疫調(diào)節(jié)劑。

大型真菌在自然界分布廣泛，有些可食用，有些還具有重要的藥用價值[5-6]。桑黃（Sanghuangporus Sheng H.Wu，L.W.Zhou&Y.C.Dai）子實體在東亞地區(qū)被用作傳統(tǒng)藥材，其具有多種生物學(xué)功能，如抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移[7-8]，多年來一直受到人們的極大關(guān)注[9-10]，桑黃水提取物能夠增強小鼠免疫力的免疫調(diào)節(jié)活性[11]，還可以誘導(dǎo)細胞凋亡[12]以及分泌細胞因子來參與巨噬細胞的反應(yīng)[13]。鮑姆纖孔菌（Sanghuangporus baumii）是廣義桑黃的一個品種，其子實體黃褐色，無柄、木栓質(zhì)，菌蓋呈馬蹄形[14]。目前人工栽培鮑姆纖孔菌獲得子實體的難度較大，而菌絲發(fā)酵是一種可產(chǎn)生大量菌絲體的人工培養(yǎng)方法，其發(fā)酵產(chǎn)物與子實體功效接近。研究其液體發(fā)酵菌絲中三萜的相關(guān)藥理活性，為其產(chǎn)業(yè)化和應(yīng)用方向提供理論依據(jù)。

通過利用不同濃度的鮑姆纖孔菌菌絲三萜對小鼠巨噬細胞RAW264.7進行建模，在脂多糖（lipopolysaccharide） 與三萜共培養(yǎng)的模型下，體外處理小鼠巨噬細胞RAW264.7，測定其對巨噬細胞細胞活力以及分泌一氧化氮和免疫因子的影響。為鮑姆纖孔菌的進一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)，也為免疫調(diào)節(jié)劑的研發(fā)提供一個新的方向。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

鮑姆纖孔菌菌種，遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所育種研究室；小鼠腹腔巨噬細胞（RAW264.7），吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程研究中心實驗室；DMEM高糖培養(yǎng)基、PBS磷酸鹽緩沖液、胎牛血清，美國Gibco公司；脂多糖（LPS）、地塞米松（DXMS），美國Sigma公司；cck-8(Cell Counting Kit-8細胞計數(shù)試劑)，美國MP Biomedicals生物醫(yī)藥公司；一氧化氮檢測試劑盒，酶聯(lián)免疫試劑有限公司；細胞因子ELISA試劑盒，酶聯(lián)免疫試劑有限公司。

主要儀器設(shè)備有超凈工作臺，蘇州智凈凈化設(shè)備有限公司；Cytoperm2型二氧化碳培養(yǎng)箱，美國Thermo公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋，常州市江南實驗儀器廠；低速離心機，美國BECMAN公司；多功能酶標儀，美國Biotek公司；倒置顯微鏡，日本Nikon公司；微型旋渦混合儀，上海滬西分析儀器廠。

1.2 樣品的制備

1.2.1 鮑姆纖孔菌培養(yǎng)

將實驗室保藏的鮑姆纖孔菌菌株活化接種于馬鈴薯液體培養(yǎng)基中，25℃、180 r·min-1搖床培養(yǎng)7 d。

1.2.2 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜的獲得

將發(fā)酵后的菌絲體用無菌水沖洗3次，放入烘箱60℃烘干，稱取1 g放入50 mL離心管中，加入30 mL無水乙醇，用勻漿機打勻，超聲提取30 min，用濾紙過濾2次。加入同體積的乙酸乙酯，萃取3次。取乙酸乙酯層濃縮干燥成粉末，獲得總?cè)疲芄?℃低溫保存。

1.3 試驗分組

巨噬細胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期后按以下處理分組：空白組（CK）、LPS模型組為添加0.1 μg·mL-1的脂多糖；藥物對照組（DXMS） 為添加50 μg·mL-1的地塞米松；試驗組為使用脂多糖與不同濃度的三萜（25 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1和800 μg·mL-1）處理，分別編號為SGC25、SGC50、SGC100、SGC200、SGC400、SGC800。

1.4 試驗方法

1.4.1 巨噬細胞的培養(yǎng)

將小鼠巨噬細胞（RAW264.7） 接種于50 mL培養(yǎng)瓶中，加入含10% PBS、1%青霉素和鏈霉素的DMEM培養(yǎng)液中，在37°C、CO2濃度5%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細胞呈單層貼壁生長，待細胞貼壁生長達80%時傳代一次。

1.4.2 巨噬細胞的傳代

待小鼠巨噬細胞（RAW264.7）長到培養(yǎng)瓶底部80%左右時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液倒棄，瓶底細胞用胰酶消化后，用PBS進行沖洗，離心管中低速離心5 min，棄上清液，加入新鮮的培養(yǎng)液，在37°C、CO2濃度5%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.4.3 CCK-8法檢測鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞生長的影響

全部試驗用細胞均使用進入指數(shù)生長期的細胞。取對數(shù)生長期的巨噬細胞 RAW264.7，按1×104個/孔的濃度接種于96孔板，每孔加100 μL細胞懸液，置于37℃、5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，空白組加入100 μL的完全培養(yǎng)液，LPS模型組加入培養(yǎng)液和脂多糖 (0.1 μg·mL-1) 各 100 μL，試驗組分別加入培養(yǎng)液和濃度為 20 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1和 800 μg·mL-1的三萜溶液各100 μL，每組設(shè)3個重復(fù)。培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 24 h后，每孔加入細胞培養(yǎng)液體積 1/10的CCK-8，2 h后在450 nm處測定OD值。細胞存活率（H，%） 的計算公式為：

式中：SOD為試驗組OD值；COD為空白組OD值。

1.4.4 不同濃度鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對LPS誘導(dǎo)下巨噬細胞釋放一氧化氮的影響

取對數(shù)生長期的巨噬細胞RAW264.7，按1×105個/孔的濃度接種于12孔板中，按照1.3步驟分組，每孔加1 mL處于對數(shù)生長期的巨噬細胞，藥物干預(yù)之后，在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h后無菌收集上清液，按照ELISA檢測試劑盒說明書的方法，檢測培養(yǎng)上清中的一氧化氮的含量。

1.4.5 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對脂多糖誘導(dǎo)巨噬細胞IL-1α、TNF-α、IL-6分泌量的影響

IL-1α是活化巨噬細胞分泌的重要細胞因子，低濃度時可以對機體產(chǎn)生調(diào)節(jié)作用，高濃度持續(xù)時對引發(fā)炎癥反應(yīng)[19]。IL-6是一種多功能細胞因子，能夠刺激活化B細胞增殖，分泌抗體，參與炎癥反應(yīng)，還能有效地促進TNF和IL-1誘導(dǎo)的惡性病變[20]。TNF-α是一種腫瘤壞死因子，可以直接殺傷腫瘤細胞，并且能夠刺激一系列免疫調(diào)節(jié)介質(zhì)和炎癥介質(zhì)的表達[21]。

INF-r干擾素是一種糖蛋白，具有抗病毒、抑制細胞增殖、調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤作用[22]。但有研究表明干擾素是免疫系統(tǒng)中的雙刃劍，既可以抑制病毒復(fù)制，又可以參與病毒的復(fù)制[23]。

取對數(shù)生長期的巨噬細胞RAW264.7，按1×105個/孔的濃度接種于12孔板中，按照1.3步驟分組；每孔加1 mL巨噬細胞，按照炎癥模型藥物干預(yù)后，在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h后無菌條件收集上清液；按照ELISA檢測試劑盒說明書的方法，檢測培養(yǎng)上清中各細胞因子的含量。

2 結(jié)果分析

2.1 不同濃度菌絲三萜對巨噬細胞生長的影響

不同處理下的巨噬細胞RAW264.7的細胞形態(tài)變化見圖1，不同濃度的鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對小鼠巨噬細胞RAW264.7細胞生長的影響見圖2。

圖1 不同處理下的巨噬細胞RAW264.7的細胞形態(tài)變化Fig.1 The morphological changes of macrophages RAW264.7 with different treatments

圖2 不同濃度的鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對小鼠巨噬細胞RAW264.7細胞生長的影響Fig.2 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on the growth of mice macrophages RAW264.7 cells

由如圖1可知，CK組的巨噬細胞呈圓形，細胞與細胞間會連接在一起；LPS模型組的細胞呈現(xiàn)較為明顯的梭型狀態(tài)，細胞發(fā)生極化；而SGC200組的細胞，梭型數(shù)量明顯少于LPS模型組，表明菌絲三萜可以減少LPS處理后的巨噬細胞的極化狀態(tài)。由圖 2 可知，25 μg·mL-1～800 μg·mL-1鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞無明顯的毒副作用。在藥物濃度達到100 μg·mL-1時，巨噬細胞的數(shù)量增加了18.22%。當(dāng)藥物濃度大于100 μg·mL-1時，細胞存活率呈下降趨勢，說明鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞生長作用存在最適濃度。

2.2 不同濃度三萜對巨噬細胞產(chǎn)一氧化氮的影響

一氧化氮是一種重要的生理活性分子，能夠調(diào)控細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞因子分泌和淋巴細胞分化等，可以發(fā)揮細胞自我保護作用抵抗微生物感染和抑制腫瘤生長[18]。將試劑盒中的標準品稀釋至48 μmol·L-1、24 μmol·L-1、12 μmol·L-1、6 μmol·L-1、3 μmol·L-1，按照說明書配制，試驗操作方法與樣品組一樣參見說明書。一氧化氮含量的標準曲線見圖3，鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞中一氧化氮含量的影響見圖4。

圖3 一氧化氮含量的標準曲線Fig.3 The standard curve of nitric oxide content

圖4 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞中一氧化氮含量的影響Fig.4 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on nitric oxide content in macrophages

由圖3、圖4可知，當(dāng)菌絲三萜的濃度為200 μg·mL-1時，巨噬細胞分泌一氧化氮含量最低；當(dāng)菌絲三萜濃度達到800 μg·mL-1時一氧化氮活性最高。但是所有鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲試驗組分泌一氧化氮含量均低于藥物對照組。菌絲三萜的質(zhì)量濃度為400 μg·mL-1和 800 μg·mL-1時，一氧化氮含量高于LPS模型組4.8%和8.6%。試驗表明，高濃度的鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞分泌一氧化氮的含量具有促進作用。

2.3 不同濃度菌絲三萜對巨噬細胞分泌IL-1α、IL-6、TNF-α和INF-r的影響

鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對小鼠巨噬細胞分泌細胞因子的影響見表1。

由表1可知，當(dāng)巨噬細胞被脂多糖誘導(dǎo)后，其產(chǎn)生細胞因子的含量較空白組上升，但是加入DXMS后，各促炎因子的分泌有所下降，這表明激素類物質(zhì)可以降低促炎因子的分泌量。且不同濃度的菌絲三萜處理組也會降低巨噬細胞中細胞因子的產(chǎn)生，從而減緩炎癥的發(fā)展，且不同細胞因子存在不同最佳處理濃度，25 μg·mL-1和 200 μg·mL-1的菌絲三萜處理濃度表現(xiàn)最好。

表1 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對小鼠巨噬細胞分泌各細胞因子的影響Tab.1 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on the secretion of cytokines by mouse macrophages

2.3.1 菌絲三萜對巨噬細胞分泌IL-1α的影響

白介素IL-1α含量的標準曲線見圖5，鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細中白介素IL-1α含量的影響見圖6。

圖5 白介素IL-1α含量的標準曲線Fig.5 The Standard curve of IL-α content

圖6 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細中白介素IL-1α含量的影響Fig.6 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on interleukin IL-1α in macrophages

由圖5、圖6可知，以不同的對照組來看，經(jīng)過脂多糖誘導(dǎo)的LPS模型組，其IL-1α的分泌量比空白組有所上升，與藥物對照組相比也有所上升。當(dāng)菌絲三萜刺激巨噬細胞后，25 μg·mL-1～800 μg·mL-1濃度范圍的試驗組與LPS模型組相比，除了菌絲三萜濃度為800 μg·mL-1的處理組外，其他試驗組均能夠顯著抑制脂多糖誘導(dǎo)下的巨噬細胞釋放IL-1α （P＜0.05）；濃度為 25 μg·mL-1和 200 μg·mL-1的菌絲三萜試驗組對巨噬細胞釋放IL-1α抑制性最強，抑制率達到19.3%。與藥物對照組持平。由上述數(shù)據(jù)可知，菌絲三萜能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)下的巨噬細胞分泌 IL-1α，濃度為 25 μg·mL-1和 200 μg·mL-1的菌絲三萜抑制效果最好。

2.3.2 菌絲三萜對巨噬細胞分泌IL-6的影響

白介素IL-6含量的標準曲線見圖7，鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞中白介素IL-6含量的影響見圖8。

圖7 白介素IL-6含量的標準曲線Fig.7 The standard curve of IL-6 content

圖8 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞中白介素IL-6含量的影響Fig.8 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on interleukin IL-6 content in macrophages

由圖7、圖8可知 ，以不同的對照組來看，經(jīng)過脂多糖誘導(dǎo)的模型組，其分泌IL-6的量比空白組有所上升，與藥物對照組相比也有所上升。當(dāng)菌絲三萜刺激巨噬細胞后，25 μg·mL-1～800 μg·mL-1濃度范圍的試驗組與LPS模型組相比，除了菌絲三萜濃度為800 μg·mL-1處理組外，其他試驗組均能夠顯著的抑制脂多糖誘導(dǎo)下的巨噬細胞釋放IL-6(P＜0.05)；濃度200 μg·mL-1的試驗組對巨噬細胞釋放IL-6抑制性最強，抑制率達到35%。與藥物對照組持平。由上述數(shù)據(jù)可知，菌絲三萜能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)下的巨噬細胞分泌IL-6，濃度200 μg·mL-1的菌絲三萜抑制效果最好。

2.3.3 菌絲三萜對巨噬細胞分泌TNF-α的影響

腫瘤壞死因子TNF-α含量的標準曲線見圖9，鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬胞中腫瘤壞死因子TNF-α含量的影響見圖10。

圖9 腫瘤壞死因子TNF-α含量的標準曲線Fig.9 The standard curve of TNF-α content

圖10 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬胞中腫瘤壞死因子TNF-α含量的影響Fig.10 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on the content of tumor necrosis factor TNF-α in macrophages

由圖9、圖10可知，以不同的對照組來看，經(jīng)過脂多糖誘導(dǎo)的LPS模型組，其分泌TNF-α的值比空白組有所上升，與藥物對照組相比也有所上升。菌絲三萜刺激巨噬細胞后，25 μg·mL-1～800 μg·mL-1濃度范圍的試驗組與LPS模型組相比，菌絲三萜濃度為 200 μg·mL-1和 400 μg·mL-1的處理組能夠顯著的抑制脂多糖誘導(dǎo)下的巨噬細胞釋放TNF-α(P＜0.05)；濃度200 μg·mL-1的試驗組對巨噬細胞釋放TNF-α抑制性最強，抑制率達到22%。由上述數(shù)據(jù)可知，菌絲三萜能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)下的巨噬細胞分泌TNF-α，濃度為200 μg·mL-1的菌絲三萜抑制效果最好。

2.3.4 菌絲三萜對巨噬細胞分泌INF-r的影響

干擾素INF-r含量的標準曲線見圖11，鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞中干素INF-r含量的影響見圖12。

由圖11、圖12可知，以不同的對照組來看，經(jīng)過脂多糖誘導(dǎo)的LPS模型組，其分泌INF-r的量比空白組有所上升，比藥物對照組也有所上升。當(dāng)脂多糖刺激巨噬細胞后，25 μg·mL-1～800 μg·mL-1濃度范圍的試驗組與LPS模型組相比，除了濃度為50 μg·mL-1和 800 μg·mL-1外，其他處理組能夠顯著的抑制LPS誘導(dǎo)下的巨噬細胞釋放INF-r(P＜0.05)；濃度25 μg·mL-1的試驗組對巨噬細胞釋放INF-r抑制性最強，抑制率達到33.25%。由上述數(shù)據(jù)可知，菌絲三萜能夠抑制LPS誘導(dǎo)下的巨噬細胞分泌INF-r，濃度25 μg·mL-1的菌絲三萜抑制效果最好。

圖11 干擾素INF-r含量的標準曲線Fig.11 The standard curve of INF-r content

圖12 鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞中干素INF-r含量的影響Fig.12 The effect of mycelium triterpenes extraction from fevmentation of Sanghuangporus baumii on the content of interferon INF-r in macrophages

3 討論

巨噬細胞是慢性炎癥和自身免疫性疾病的關(guān)鍵細胞，在這些疾病中，活化的巨噬細胞可能發(fā)揮重要作用，促進炎癥反應(yīng)，并介導(dǎo)損傷的解決[24]。脂多糖可以激活巨噬細胞，并產(chǎn)生一氧化氮和釋放細胞免疫因子等生物活性物質(zhì)，適量的免疫因子可提高機體免疫力，而過量持續(xù)的刺激產(chǎn)生的免疫活性物質(zhì)則會導(dǎo)致細胞的損傷和凋亡，引起細胞的炎癥反應(yīng)[25]。這表明巨噬細胞的有益或有害作用取決于其激活狀態(tài)，而激活狀態(tài)又由被占領(lǐng)的組織微環(huán)境所決定[26]。脂多糖所引起的過度炎癥反應(yīng)，極容易將細胞因子的保護性作用轉(zhuǎn)化為損傷性作用，造成炎癥過程失控，使得機體的免疫功能嚴重受抑，對器官造成不可逆的損害，因此需要研發(fā)更為安全有效的免疫調(diào)節(jié)劑。

一些真菌可以積累多種次生代謝物，包括有機酸、生物堿，萜類化合物、甾體化合物、酚類化合物和黃酮類化合物，這些次生代謝物具有廣泛的用途，包括化妝品、醫(yī)藥和食品[27-28]。食用菌菌絲體、子實體和濾液中的多糖、糖蛋白、多肽、萜類和麥角甾醇等活性成分具有較強的抗腫瘤活性。早在20世紀60年代Chihara[29]就首次對食用菌活性成分多糖的抗腫瘤活性進行了評價，Kim等[30-31]從桑黃子實體中分離到一種糖蛋白，其不僅在體外選擇性地刺激小鼠腹腔巨噬細胞的增殖，而且顯著地提高了抗腫瘤的信息化學(xué)物質(zhì)（NO和H2O2）的產(chǎn)生。Kim等[32]還證明了桑黃子實體中的提取物顯著增加了B細胞增殖，刺激巨噬細胞釋放細胞因子和一氧化氮。此外，從桑黃深層發(fā)酵菌絲體中的提取物通過促進淋巴細胞增殖和增加細胞因子TNF-α和信息化學(xué)物質(zhì)一氧化氮的產(chǎn)生在體內(nèi)表現(xiàn)出抗腫瘤活性[33-35]。但是對發(fā)酵菌絲三萜還缺乏比較系統(tǒng)的藥理研究。

以鮑姆纖孔菌（Sanghuangporus baumii）發(fā)酵的菌絲體作為研究對象，考慮到栽培需要更多的時間來產(chǎn)生子實體，利用固態(tài)菌絲體獲得生物活性成分是目前比較適用的方法，也被用作膳食補充劑或保健品的來源[36]。結(jié)果表明鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜對巨噬細胞RAW264.7的細胞沒有毒性，并且不同的濃度可以提高細胞中溶菌酶、谷胱甘肽、糖原的含量，但是并不是隨著濃度升高呈依懶性的增長，與一些多糖的作用結(jié)果不同[37]。有些化合物通過多種途徑起作用，有些化合物的作用機理尚未明確[38]，有可能是由于發(fā)酵菌絲三萜為混合物，里面含有的不同單體對細胞的作用有所抑制。對ATP酶試驗中，隨著化合物濃度增加，其ATP酶含量有所減小，有可能是在激活小鼠腹腔巨噬細胞的過程中，同時存在較高水平的糖酵解[39]，需要較高的能量分解，隨著化合物濃度的增加糖分解速度加大，導(dǎo)致ATP酶含量有所減少。

在分泌一氧化氮試驗中，發(fā)現(xiàn)高濃度的發(fā)酵菌絲三萜可以促進巨噬細胞產(chǎn)一氧化氮的能力；鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜可以抑制小鼠巨噬細胞RAW264.7細胞產(chǎn)細胞因子，在設(shè)計的空白組、LPS模型組和藥物對照組中，發(fā)現(xiàn)在脂多糖誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)細胞因子的過程中，模型組與空白組相比細胞因子的分泌會增加，而加入地塞米松的藥物對照組與LPS模型組相比，會抑制其分泌過多的細胞因子。這說明鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲三萜可以緩解巨噬細胞進入過度激活的狀態(tài)，在一定程度上可以保護巨噬細胞。

目前對鮑姆纖孔菌研究仍不夠深入，有必要對其進行活性成分系統(tǒng)研究，探索其有效成分與菌齡、菌種、培養(yǎng)條件和藥效的關(guān)系[40]。分離純化鮑姆纖孔菌發(fā)酵菌絲其他組分，明確鮑姆纖孔菌不同的有效成分在提高人體免疫機能，預(yù)防和治療疾病方面的作用機制。這些深入細致的基礎(chǔ)研究對合理地開發(fā)利用其在提高機體免疫力及其他藥理活性方面的價值有著非常重要的意義。