劉超，張紅，邱正，張瑞軍

（1.山東省淡水漁業(yè)研究院，山東 濟南 250013；2.山東省淡水水產遺傳育種重點實驗室，山東 濟南 250117；3.濟南市蔬菜技術推廣服務中心，山東 濟南 250100）

自2020年起，水產養(yǎng)殖飼料端進入“禁抗”時代，科技人員在積極尋找替代抗生素的有效產品，其中植物提取物被廣泛關注和開發(fā)應用。桑科植物桑，又名家桑、荊桑、桑葚樹、黃桑等，桑葉是桑的干燥葉，是家蠶的主要食物，我國各地廣泛種植桑樹，桑葉產量較高。桑葉具有疏散風熱、清肺潤燥、清肝明目等功效，并具有抗凝血、降血壓、降血糖血脂、降膽固醇、抑菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗衰老等作用。目前，桑葉提取物因含有大量的多糖、生物堿、甾醇類等生物活性物質而被應用到畜牧養(yǎng)殖，但其很少作為水產養(yǎng)殖飼料添加劑[1]。

目前，大鯢人工養(yǎng)殖已初具規(guī)模，原生態(tài)、仿生態(tài)和工廠化等3種養(yǎng)殖模式日趨成熟，但有關大鯢人工配合飼料的研究較少[2-4]。Li等[5]研究表明，在大鯢日糧中添加桑葉提取物可以顯著提高大鯢的采食量和胃腸道消化功能，改善肝臟抗氧化功能，增強機體的免疫力?，F以大鯢為研究對象，分析桑葉提取物對其免疫力的影響，探討最適添加劑量，為在大鯢養(yǎng)殖生產中科學、合理地利用桑葉提取物提供理論數據參考。

1 研究方法

1.1 試驗材料

試驗用桑葉提取物購于南京景竹生物科技有限公司，有效含量>60%；試驗用魚由陜西省漢中市南鄭縣南鄭區(qū)黃官鎮(zhèn)博瑞大鯢養(yǎng)殖家庭農場提供，其生長良好、無病和無傷。

1.2 試驗設計及日糧

選取100尾健康狀態(tài)良好，體質量為（45.20±0.25）g的大鯢，設置飼料中桑葉提取物質量分別為0、4、8和12 g/kg 4個試驗處理組，其中未添加桑葉提取物組為對照組，每組5個重復，并按照單因素隨機分組原則于每重復放養(yǎng)大鯢5尾，試驗周期10周。對照組基礎日糧原料組成和營養(yǎng)成分含量見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗用大鯢先停食靜養(yǎng)2 d，后用基礎日糧飼養(yǎng)7 d，再進行投喂試驗。試驗期間，大鯢飼養(yǎng)在75 cm×55 cm×20 cm的養(yǎng)殖箱中，注意避光。每日早晨定時清除箱內糞便，每日換水量為總水量的1/3。每日09：00投喂1次。飼養(yǎng)期間水溫20~23℃，pH值為6.5~7.5，水中 ρ（溶解氧）>6.2 mg/L。

表1 基礎日糧原料組成和營養(yǎng)成分

1.4 指標測定

檢測的大鯢免疫指標主要包括：血清溶菌酶、補體C3、補體C4、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G。測定用試劑盒購自南京建成生物工程研究所，并嚴格按照試劑盒說明書進行測定。

1.5 數據處理

試驗數據經Excel 2010進行初步整理后，采用SPSS 24.0進行單因素方差分析，并用Duncan’s法對組間數據進行多重比較，以P<0.05作為顯著性判斷標準，實驗數據以平均數和標準誤表示。

2 結果與分析

飼喂不同劑量桑葉提取物后大鯢的免疫性能指標情況見表2。由表2可知，不同劑量的桑葉提取物顯著提高了大鯢的免疫性能。其中8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的補體C4含量較對照組顯著提高28.32%（P<0.05），其余處理組C4含量亦有所提高，但與對照組無顯著差異（P>0.05）；8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的免疫球蛋白M含量比對照組顯著提高53.50%（P<0.05），其余處理組免疫球蛋白M含量也有所提高，但與對照組和8 g/kg處理組均無顯著差異（P>0.05）；8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的免疫球蛋白G含量比對照組、4 g/kg桑葉提取物組、12 g/kg桑葉提取物組分別提高26.55%、19.79%和17.97%，差異均顯著（P<0.05），而后三者間無顯著差異（P>0.05）。添加不同劑量桑葉提取物對大鯢補體C3、免疫球蛋白A含量及溶菌酶活性均無顯著影響（P>0.05）。以上結果表明，在日糧中添加一定劑量的桑葉提取物可提高大鯢的免疫力，且最適添加量為8 g/kg。

表2 不同劑量桑葉提取物對大鯢免疫性能的影響①

3 討論

動物的免疫球蛋白含量直接反映機體免疫功能的強弱，而補體和溶菌酶則是機體內非特異性免疫蛋白。免疫球蛋白、補體、溶菌酶對于魚類抵御外源微生物的入侵具有重要作用，其含量和活性越高代表機體的免疫功能越強[6]。該研究表明，8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的補體C4含量較對照組顯著提高28.32%（P<0.05）；8 g/kg桑葉提取物處理組大鯢的免疫球蛋白M含量比對照組顯著提高53.50%（P<0.05）；8 g/kg桑葉提取物組的免疫球蛋白G含量比對照組、4 g/kg桑葉提取物組、12 g/kg桑葉提取物組分別顯著提高26.55%、19.79%和17.97%（P<0.05）。由此可見，在大鯢日糧中添加一定劑量的桑葉提取物具有提高免疫力的功能，且最適添加量為8 g/kg。盧樺等[7]就桑葉提取物和1-脫氧野尻霉素對大鯢生長性能、肝臟功能及免疫能力的影響研究發(fā)現，桑葉提取物顯著提高了大鯢的免疫球蛋白M含量，與該研究結果基本一致。桑葉提取物對大鯢免疫力的提升功能，可能是由于其含有豐富的糖類、生物堿、植物甾醇類等生物活性物質，而其中的活性物質具有抗菌、抗炎的功能，進而提高了大鯢的免疫能力。

4 結論

在該試驗條件下，日糧中添加桑葉提取物可以顯著提高大鯢的補體C4、免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量，且最適添加量為8 g/kg。