張 力，張 旭，趙 莉，劉潔瓊，王冰潔，殷 濤，李 杰，李 巖，班萬里

(1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站，烏魯木齊 830052；2.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所(新疆畜牧科學(xué)院動(dòng)物臨床醫(yī)學(xué)研究中心)，烏魯木齊 830011)

布魯氏菌病(下文簡稱為布病)是一種因感染布魯氏菌而引起的慢性人獸共患傳染性疾病，嚴(yán)重危害現(xiàn)代畜牧業(yè)生產(chǎn)，被世界衛(wèi)生組織(WHO)及世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為不容忽視的一種人獸共患傳染病[1,2]，我國將其列為二類動(dòng)物疫病。

目前，布病呈世界性的流行發(fā)生，全球約有170余個(gè)國家報(bào)道人畜間布病的暴發(fā)與流行[3]。據(jù)保守的估計(jì)，每年全球人間布病病例大約會(huì)新增50萬例[4,5]。

本研究對2016-2020年間新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)的家畜牛、羊、豬開展布病的感染抗體檢測，其結(jié)果將為科學(xué)的判斷家畜布病主要流行趨勢，確保家畜布病主要防控措施的嚴(yán)格落實(shí)，逐步降低家畜間布病疫情的發(fā)生，防止其蔓延擴(kuò)散提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 檢測樣品的采集

2016-2020年間，檢測樣品的采集來源于新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)的18 463個(gè)監(jiān)測場點(diǎn)，共收集牛、羊、豬血清2 185 312份，其中奶牛：583 146份，其他品種牛：181 148份，羊：1 405 091份，豬：15 927份。

1.2 主要檢測試劑

布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)使用的抗原及標(biāo)準(zhǔn)陰、陽性對照均為青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.3 血清檢測樣品的制備

采血部位消毒后，用5 mL采血器采集全血樣品，傾斜放置于冷藏采樣箱中，減少震動(dòng)，防止溶血，盡快轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室靜置1 h后，分離上層清亮的血清，登記編號，備檢。

1.4 虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）

依據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646-2018《動(dòng)物布魯氏菌診斷技術(shù)》[6]中規(guī)定的方法，按照虎紅平板凝集試驗(yàn)操作程序要求，對備檢血清樣品進(jìn)行檢測。

1.5 試管凝集試驗(yàn)（SAT）

依據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646-2018《動(dòng)物布魯氏菌診斷技術(shù)》[6]中規(guī)定的方法，按照試管凝集試驗(yàn)操作程序要求，對虎紅平板凝集試驗(yàn)陽性血清樣品進(jìn)行檢測。

1.6 結(jié)果判定

虎紅平板凝集試驗(yàn)：血清檢測樣品未發(fā)生凝集，液體呈現(xiàn)均勻的粉紅色，判定為陰性。血清檢測樣品發(fā)生凝集，有菌叢狀凝集塊，液體清亮，判定為疑似陽性，進(jìn)一步做試管凝集試驗(yàn)判定感染抗體陽性結(jié)果。

試管凝集試驗(yàn)：血清檢測樣品未發(fā)生凝集，液體呈現(xiàn)均勻白色，判定為陰性。血清檢測樣品發(fā)生凝集，有白色凝集塊沉淀，液體清亮，判定為陽性。以試管凝集試驗(yàn)陽性結(jié)果做為本次監(jiān)測分析的最終感染抗體陽性判定依據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 2016-2020年新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)牛、羊、豬布病樣品監(jiān)測結(jié)果

2016-2020年五年間，兵團(tuán)共累計(jì)監(jiān)測布病樣品2 185 312份，感染抗體陽性15 928份，抗體陽性率達(dá)0.73%；奶牛布病總陽性率達(dá)0.18%(1 071/583 146)，其他品種牛布病總陽性率達(dá)0.24%(436/181 148)，羊布病總陽性率達(dá)1.03%(14 413/1 405 091)，豬布病總陽性率達(dá)0.05%(8/15 927)。經(jīng)多重比較，奶牛、其他牛、羊、豬抗體陽性率之間差異極顯著(χ2=4 805.56，P<0.01)，結(jié)果表明兵團(tuán)畜間布病呈現(xiàn)明顯的下降趨勢。

2016-2020年，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，奶牛5年間陽性率差異顯著(χ2=542.11，P<0.01)；其他品種牛5年間陽性率差異顯著(χ2=140.46，P<0.01)；羊5年間陽性率差異顯著(χ2=724.16，P<0.01)；豬5年間陽性率差異顯著(χ2=17.15，P<0.01)。 見圖1。

圖1 2016-2020年新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)布魯氏菌病陽性率統(tǒng)計(jì)（%）

2.2 2016-2020年新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)牛、羊、豬布病場點(diǎn)監(jiān)測結(jié)果

2016-2020年，共監(jiān)測場點(diǎn)18 463個(gè)，陽性1 531個(gè)，平均陽性率8.29%。其中奶牛監(jiān)測場點(diǎn)2 507個(gè)，陽性206個(gè)，平均陽性率8.22%(206/2 507)；其他品種牛監(jiān)測場點(diǎn)4 483個(gè)，陽性133個(gè)，平均陽性率2.97%(133/4 483)；羊監(jiān)測場點(diǎn)10 962個(gè)，陽性1 188個(gè)，平均場陽性率10.84%(1 188/10 962)；豬監(jiān)測場點(diǎn)511個(gè)，陽性4個(gè)，平均陽性率0.78%(4/511)。見圖2。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，奶牛五年間各場點(diǎn)的感染率差異顯著(χ2=37.27，P<0.01)；其他品種牛差異顯著(χ2=84.90，P<0.01)；羊差異顯著(χ2=122.64，P<0.01)；豬差異顯著(χ2=6.08，P<0.01)。

圖2 2016-2020年新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)各場點(diǎn)牛布魯氏菌病血清學(xué)統(tǒng)計(jì)（%）

3 討 論

2011年后，以“疫苗免疫、檢測鑒別、凈化維持、撲殺染病動(dòng)物”為防控指導(dǎo)思想，對畜間的布病進(jìn)行綜合防控[7，8]。隨著人們生活水平提高，物流流通速度快，部分陽性畜存在多次倒賣、多次檢測、大量傳染同群畜的情況，使得布病陽性家畜捕殺難度增大，也增加了通過檢疫-淘汰完成布病凈化工作的難度。家畜布病疫苗是由減毒活菌制成，現(xiàn)有的免疫疫苗種類和免疫方法，容易造成人員感染布病安全事件發(fā)生，影響家畜布病免疫工作的推進(jìn)。同時(shí)，監(jiān)測工作開展不及時(shí)，不到位，存在死角，外購家畜不及時(shí)向動(dòng)物防疫監(jiān)督機(jī)構(gòu)申報(bào)監(jiān)測和私自引進(jìn)，導(dǎo)致了布魯氏菌病等人畜共患傳染病的傳播。有的養(yǎng)殖戶不了解布病的傳播途徑和健康危害知識，預(yù)防與保護(hù)的意識較為淡薄。牛、羊等易感染動(dòng)物混群飼養(yǎng)，對家畜疫病的監(jiān)測存在抵觸思想，拒絕監(jiān)測鑒別，造成該病的病原在不同畜種間交叉感染與傳播[9]。

由于以上原因，牛、羊、豬等家畜布病感染率呈現(xiàn)不斷上升趨勢。2016-2018年對轄區(qū)內(nèi)的羊及陽性牛場(戶)進(jìn)行全面免疫，佩戴免疫標(biāo)識，陰性牛場進(jìn)行“凈化驗(yàn)收、無疫認(rèn)證”，2018年后布病感染率開始明顯下降，2019年全面停止免疫，并進(jìn)行布病感染監(jiān)測，實(shí)施全面凈化，牛、羊、豬布病感染率和總體平均感染率明顯下降，并逐漸趨于平穩(wěn)。

4 結(jié) 論

對布病陽性率超過2%的規(guī)模化牛場，應(yīng)用布魯氏菌A19活疫苗免疫，陽性率低于2%的規(guī)?；鰧?shí)施檢疫凈化措施，定期檢疫，淘汰陽性牛，同時(shí)加強(qiáng)補(bǔ)欄牛的檢疫和隔離，確保牛群健康。免疫動(dòng)物與自然感染動(dòng)物的鑒別診斷問題需進(jìn)一步研究。

強(qiáng)化免疫抗體抽樣監(jiān)測，加強(qiáng)監(jiān)測頻率，擴(kuò)大監(jiān)測覆蓋面；加強(qiáng)產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫制度；嚴(yán)格落實(shí)檢疫申報(bào)現(xiàn)場審核和檢測報(bào)告制度；建立溯源管理制度和責(zé)任追究制度；養(yǎng)殖、屠宰、運(yùn)輸各環(huán)節(jié)層層把關(guān)，加強(qiáng)檢疫人員的個(gè)人防護(hù)[10]，才能確保兵團(tuán)布病防控工作的有效開展。