李葆林，楊夢婷，支雅婧，姚宇晴，王鑫國，張鐵軍，牛麗穎*

1.河北中醫(yī)學院，河北 石家莊 050091

2.河北省中藥配方顆粒創(chuàng)新中心，河北 石家莊 050091

3.河北省中藥材品質(zhì)評價與標準化工程研究中心，河北 石家莊 050091

4.天津藥物研究院 天津市中藥質(zhì)量標志物重點實驗室，天津 300462

徐長卿為蘿摩科植物徐長卿Cynanchum paniculatum(Bge.)Kitag.的干燥根和根莖，性辛、溫，歸肝、胃經(jīng)，屬于祛風寒濕藥，廣泛種植栽培在我國中部地區(qū)，如河北、遼寧、陜西等，具有極大的藥用價值[1]。徐長卿又名鬼督郵、三百根、藥王、九頭獅子草、鈴柴胡、蛇草等，是常用中藥和民間草藥，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中首次出現(xiàn)。研究表明徐長卿具有鎮(zhèn)痛、解痙、利水、活血、解毒之功效，其主要成分丹皮酚兼具抗炎、抗病毒、抗蛇毒、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、保護心血管等作用。本文主要對徐長卿的化學成分和藥理作用的研究進展進行綜述，并對其質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）進行預測分析，以期為徐長卿的深入研究和臨床應用提供參考。

1 化學成分

徐長卿中化學成分以揮發(fā)油類、C21甾體類成分和多糖為主，同時含有少量生物堿、糖醚、呋喃、甾醇和脂類物質(zhì)。徐長卿中所含化學成分已見報道的有168 種，其中揮發(fā)油類成分86 種、C21甾體類成分47 種、多糖類成分8 種、其他類成分27 種。

1.1 揮發(fā)油類

徐長卿中富含大量揮發(fā)油類化合物，包括苯乙酮類、酚類、萜類及其含氧衍生物、脂肪族化合物、芳香族化合物、含硫及含氮化合物等。受入藥部位不同影響，其總揮發(fā)油成分中，丹皮酚占90.00%、對羥基苯乙酮占8.32%，其余各成分占1.68%。見表1。

表1 徐長卿中揮發(fā)油類成分Table 1 Volatile oil components in Cynanchi Paniculati Radix et Rhizoma

續(xù)表1

1.2 C21 甾體類

C21甾體類化合物是苷元為孕甾烷或其異構(gòu)體，基本骨架有5 種（圖1），其A/B 環(huán)反式，B/C 環(huán)、C/D 環(huán)順式或反式排列，在C5、C6位多數(shù)有雙鍵，C3位有β-OH，C20位可能有羰基，C11位和C12位羥基，可與醋酸、桂皮酸和苯甲酸等結(jié)合成酯，具旋光性，易溶于極性溶劑。徐長卿中C21甾體類化合物見表2。

圖1 徐長卿中C21 甾體類化合物的基本骨架Fig.1 Basic skeleton of C21 steroids in Cynanchi Paniculati Radix et Rhizoma

表2 徐長卿中C21 甾體類化合物Table 2 C21 steroids in Cynanchi Paniculati Radix et Rhizoma

續(xù)表2

1.3 多糖及其他類成分

研究發(fā)現(xiàn)，徐長卿中含有多類葡聚糖和雜多糖成分，由阿拉伯糖、木糖、鼠李糖和半乳糖以特定的連接方式組成，結(jié)構(gòu)復雜，見表3。此外，徐長卿中還含有少量其他類等成分，如黃酮類、木脂素類、生物堿類、酚類等成分，見表4。

表3 徐長卿中多糖類成分Table 3 Polysaccharides in Cynanchi Paniculati Radix et Rhizoma

表4 徐長卿中其他類成分Table 4 Other components in Cynanchi Paniculati Radix et Rhizoma

2 藥理作用

現(xiàn)代藥理學研究表明，徐長卿具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、神經(jīng)保護等藥理作用，其研究方向已由最初的臨床藥理作用逐漸向藥效機制研究過渡。

2.1 鎮(zhèn)痛作用

臨床研究表明，徐長卿提取物可廣泛用于治療各種疼痛，療效良好。許青松等[35]研究發(fā)現(xiàn)，徐長卿水煎液，可有效減少小鼠扭體次數(shù)，增強疼痛閾值。Tang 等[36]以盆腔炎小鼠為模型，發(fā)現(xiàn)徐長卿煎劑能顯著降低血清白細胞介素（interleukin，IL）-1β、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、

細胞間黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）和血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）水平，降低小鼠子宮和輸卵管組織中ICAM-1 和VEGF 的表達。孫奮治等[37]發(fā)現(xiàn)，從徐長卿中分離得到的3-羥基-4-甲氧苯乙酮兼具鎮(zhèn)痛和抑制胃腸蠕動的作用，其效果與丹皮酚相仿。此外，徐長卿還可與其他藥物聯(lián)用，增強其鎮(zhèn)痛作用。王曙東等[38]以徐長卿與紅茴香1∶1 配比入藥，鎮(zhèn)痛效果最佳。沈之嶒[39]以徐長卿為主藥，配合復原活血湯，治療小兒水痘后遺神經(jīng)痛療效顯著。

2.2 心血管系統(tǒng)作用

徐長卿可以有效增加冠脈血流量，緩解心肌細胞功能損傷，改善心肌舒張能力，增強心肌收縮，防治心肌功能障礙。Li 等[40]研究發(fā)現(xiàn)，徐長卿中揮發(fā)油成分豐富，尤以丹皮酚為甚，其對電壓依賴性和受體操縱型鈣通道以及細胞內(nèi)鈣釋放均有抑制作用，并通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)鈣離子濃度，產(chǎn)生血管舒張作用。孫平龍等[41]研究發(fā)現(xiàn)，于內(nèi)關(guān)穴注射徐長卿注射液，能對心臟疾病引起的系列損傷，如心功能受損，血壓、血流量降低起到明顯的治療作用，且該法相較于肌內(nèi)注射和靜脈注射，作用更迅速，效果更優(yōu)。

此外，徐長卿還可參與體內(nèi)血脂調(diào)節(jié)，對動脈粥樣硬化具有一定的防治作用。周曉霞等[42]采用高血脂癥兔模型，發(fā)現(xiàn)徐長卿可調(diào)節(jié)血液中血脂水平、膽固醇及脂蛋白，抑制平滑肌細胞異常增殖，對動脈粥樣硬化具有治療作用。

2.3 抗炎和抗病毒作用

研究表明，徐長卿提取物在體內(nèi)外均表現(xiàn)出明顯的抗炎、抗病毒的活性，其抗病毒活性與提取溶劑及提取工藝相關(guān)[43-45]。Wei 等[22]研究發(fā)現(xiàn)，徐長卿中白薇苷A 和白薇苷C 能通過調(diào)節(jié)核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）和絲裂原活化蛋白激酶信號通路，抑制流感病毒A/FM/1/47 感染小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞，降低體內(nèi)TNF-α、IL-6 和IL-1β水平，降低小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞表達的IL-1mRNA，弱化p38 蛋白、細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶和c-Jun 氨基末端激酶的磷酸化，表現(xiàn)出較強的抗炎和抗病毒作用。Li 等[46]研究發(fā)現(xiàn)，徐長卿乙醇提取物通過降低腦組織中TNF-α 和一氧化氮（nitric oxide，NO）水平，可提高單純皰疹病毒感染小鼠的存活率，預防單純皰疹病毒感染后神經(jīng)細胞損傷，降低腦細胞死亡率，對單純皰疹病毒性腦炎細胞損傷有保護作用。

2.4 抗腫瘤作用

現(xiàn)代藥理學研究表明，惡性腫瘤因病因復雜死亡率高、預后較差，已嚴重威脅人類生命安全。丹皮酚作為徐長卿中含量最高的揮發(fā)油成分，可在體內(nèi)外抑制腫瘤細胞增殖[47-49]。Cheng 等[50]發(fā)現(xiàn)，丹皮酚的腫瘤抑制作用機制，是通過上調(diào)鈣黏附蛋白E、下調(diào)鈣黏附蛋白N 和波形蛋白水平，抑制上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，同時下調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor，TGF-β1），p-Smad2/Smad2 和 p-Smad3/Smad3水平，抑制TGF-β1/Smad1信號通路。

安托芬為徐長卿中天然存在的菲并吲哚里西啶生物堿成分，其可誘導腫瘤細胞阻滯于G0/G1期，抑制細胞周期蛋白（cyclin）D1、cyclin E 和周期素依賴激酶4 的表達，下調(diào)糖蛋白mRNA 和蛋白表達水平，抑制腫瘤細胞增殖，同時兼具延緩腫瘤細胞耐藥性的優(yōu)良特性[51-52]。此外，徐長卿中多糖類成分對小鼠腫瘤細胞的增殖也有一定的抑制作用[53]。

2.5 神經(jīng)保護作用

Weon 等[4,9]以80%甲醇對徐長卿根部進行提取，分離得到2,3-二羥基-4-甲氧基苯乙酮和4,5-二甲氧基鄰苯二酚。通過評價其對谷氨酸誘導的海馬HT22細胞毒性，發(fā)現(xiàn)其可通過氧化應激作用降低HT22細胞內(nèi)活性氧含量和鈣離子濃度，起到神經(jīng)保護的作用。

2.6 抗蛇毒作用

林麗珊等[54]發(fā)現(xiàn)徐長卿提取物對眼鏡蛇毒引起的炎癥及毒性有明顯的抑制作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)，腹腔注射徐長卿提取物能顯著抑制眼睛蛇毒心臟毒素毒性，但對眼鏡蛇毒神經(jīng)毒素毒性作用不明顯[55]。Xiong 等[56]評價了徐長卿提取物對尖吻蝮毒液的抗毒作用，發(fā)現(xiàn)在毒液-提取物質(zhì)量比為1∶100和1∶50 的孵育條件下，徐長卿提取物能抑制蛋白酶活性，中和磷脂酶A2 和纖溶酶活性，起到抗蛇毒作用。GC-MS 研究表明，提取物中包括亞油酸、棕櫚酸、γ-谷甾醇在內(nèi)的5 個活性成分為抗蛇毒有效成分。

2.7 其他作用

2.7.1 調(diào)脂作用 Jang 等[57]研究發(fā)現(xiàn)，安托芬可通過抑制過氧化物酶體增殖物激活受體γ 蛋白的表達，抑制aP2 啟動子活性，下調(diào)成脂基因的表達，抑制脂肪細胞分化以及脂滴形成，具有較強的調(diào)脂作用，該作用在一定范圍內(nèi)呈劑量相關(guān)性。

2.7.2 A 治療軟組織損傷 Wang 等[58]采用錘擊法建立大鼠后肢肌肉急性閉合性模型，對八角茴香-徐長卿止痛噴霧劑進行了研究。研究發(fā)現(xiàn)，該制劑可抑制軟組織損傷引起的NF-κB p65 及其下游基因表達增加，抑制肌肉腫脹，降低機體前列腺素E2、IL-1β、NO 等炎癥介質(zhì)的水平，抑制炎癥反應，緩解細胞損傷。

2.7.3 抗血小板聚集作用 血小板可參與體內(nèi)凝血過程，其數(shù)量、功能異常時，會造成止血困難及各類變態(tài)炎性反應，進而發(fā)展成為動脈粥樣硬化及血栓等疾病[59]。吉中強等[60]發(fā)現(xiàn)徐長卿能減輕血小板的聚集，同時不影響紅細胞的形變能力。李薇等[61]對比丹皮酚和阿司匹林發(fā)現(xiàn)，丹皮酚具有降低血小板和紅細胞聚集的特性，可全方面提升降低血液流變學指標，優(yōu)于阿司匹林的作用。

2.7.4 免疫調(diào)節(jié)作用 免疫調(diào)節(jié)是機體通過調(diào)節(jié)相關(guān)細胞、分子及生理系統(tǒng)間的相互作用，維持自身穩(wěn)定的狀態(tài)。朱世權(quán)等[62]研究發(fā)現(xiàn)，徐長卿中多糖CPBB 能顯著降低放化療對骨髓的毒性作用，預防白細胞減少。王順春等[28-30]證明徐長卿的多糖成分具有增殖脾細胞和淋巴細胞的作用，增強T 細胞及B 細胞等免疫細胞的功能，提高機體免疫功能。此外，研究表明，徐長卿還有抗過敏[63]、抗精子抗體陽性的不育不孕[64]及抗寄生蟲作用[65-66]。

3 Q-Marker 預測分析

為進一步規(guī)范中藥的質(zhì)量研究及質(zhì)量標準的建立，劉昌孝院士[67-68]提出了Q-Marker 概念，即存在于中藥材或中藥產(chǎn)品（如中藥飲片、中藥煎劑、中藥提取物、中成藥制劑）中固有的或加工制備過程中形成的、與中藥功能屬性密切相關(guān)的化學物質(zhì)，并以此作為反映中藥安全性和有效性的標示性物質(zhì)。本文以Q-Marker 的影響因素和確定原則為出發(fā)點，從植物親緣學及化學成分特有性、藥效及藥性因素、化學成分可測性、制劑因素等幾個方面對徐長卿的Q-Marker 進行預測。

3.1 基于植物親緣學及化學成分特有性的 QMarker 預測分析

徐長卿為蘿摩科植物徐長卿的干燥根和根莖，其化學成分種類豐富，已見報道的化學成分達168種，以揮發(fā)油類、C21甾體類成分及多糖為主，同時含有少量生物堿、糖醚、呋喃、甾醇和脂類物質(zhì)，其藥理作用主要與其揮發(fā)油類成分相關(guān)。

徐小娜等[6]采用GC-MS 的分析方法，測定徐長卿地上和地下部分，發(fā)現(xiàn)其揮發(fā)油成分主要為丹皮酚和鄰羥基苯乙酮，且含量差異明顯，其中地下部分丹皮酚和鄰羥基苯乙酮質(zhì)量分數(shù)分別為88.45%、8.89%，地上部分分別為66.30%、16.99%。趙超等[2]采用固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜（SPME-GC-MS）聯(lián)用技術(shù)測定徐長卿根揮發(fā)油的占比，驗證其主要成分分別為丹皮酚（90.00%）、對羥基苯乙酮（8.32%）。綜上所述，徐長卿中揮發(fā)油類成分丹皮酚和鄰羥基苯乙酮可作為Q-Marker 篩選的參考成分。

3.2 基于藥效藥性的Q-Marker 預測分析

徐長卿性溫，味辛，歸肝、胃經(jīng)，《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載其主鬼物，百精，蠱毒，疫疾邪惡氣，溫瘧，久服，強悍輕身。現(xiàn)代藥理學研究表明，徐長卿具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗癌、神經(jīng)保護、調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)等藥理作用，其主要發(fā)揮藥效的成分為揮發(fā)油類和C21甾體類成分。研究表明，辛味藥所含的化學成分主要概括為3 類：一是揮發(fā)油（83 種），二是氨基酸、有機酸（80 種），三是苷類、生物堿（40 種）；溫性藥所含的化學成分主要有揮發(fā)油、酯類、有機酸、糖類、無機物、生物堿等，輔以萜類等[69-70]。綜上所述，徐長卿中揮發(fā)油類成分可作為Q-Marker篩選的參考成分。

3.3 基于化學成分可測性的Q-Marker 預測分析

Q-Marker 應具有明確的化學結(jié)構(gòu)，且可通過現(xiàn)代檢測手段，如SPME、HPLC、GC、UV、MS、NMR 等進行定性鑒別和定量測定。鄒傳生等[12]運用多種色譜檢測技術(shù)，從徐長卿根中萃取分離出18個成分并完成檢測，分別為橙皮苷、柚皮素、丁香脂素、(-)-南燭木樹脂酚、5-甲氧基-(＋)-異落葉松脂素、(＋)-異落葉松脂醇、2-羥甲基-5-羥基吡啶、鄰苯二甲酸二丁酯、大理白前苷A、川橙皮素、橘紅素、cynanoside K、cynanoside J、hirundigoside C、stauntoside O、白薇苷D、atratcynoside B、白薇苷E。杜躍中等[7]運用GC-MS 對包括丹皮酚、棕櫚酸、油酸在內(nèi)的20 個揮發(fā)油類化學成分進行測定，占揮發(fā)油總量的99.4%。綜上所述，徐長卿中多類成分如揮發(fā)油類、C21甾體類、黃酮類可通過NMR、MS等檢測手段進行定性定量分析，可作為Q-Marker 篩選的參考成分。

3.4 基于制劑因素的Q-Marker 預測分析

丹皮酚為徐長卿中主要藥效成分，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗腫瘤、抗過敏等藥理作用，但其水溶性較差、易揮發(fā)、不穩(wěn)定，成為限制其應用的影響因素。高杰等[71]以丹皮酚為評價指標，采用Box-Behnken響應面法，優(yōu)化其揮發(fā)油-β-CD 包合物的制備工藝，最終選定工藝參數(shù)為質(zhì)量比1∶8.34，包合溫度50.2 ℃，包合時間2.17 h。張東京等[72]采用超聲飽和溶液法制備丹皮酚-β-環(huán)糊精包合物，分別考察了包和溫度、包和時間、投料比和分散溶劑濃度等工藝，優(yōu)化工藝參數(shù)為，包合溫度30 ℃、包合時間1 h、料液比1∶10。綜上所述，丹皮酚可作為Q-Marker 篩選的參考成分。

4 結(jié)語

徐長卿在我國分布廣泛，藥效突出，是我國本草中一味重要的傳統(tǒng)中藥。目前而言，圍繞徐長卿的研究大多局限于定性分析研究和臨床實驗研究，定量研究及藥效機制研究的開展還有待于進一步拓展。本文總結(jié)了國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，并預測了丹皮酚和鄰羥基苯乙酮可作為其Q-Marker 的參考成分，以期為進一步開展藥效物質(zhì)研究提供理論及數(shù)據(jù)上的參考。相信隨著現(xiàn)代分析手段，如分子生物學、代謝組學、網(wǎng)絡藥理學等不斷發(fā)展，徐長卿的藥用價值還會進一步挖掘研究。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突