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白肉靈芝化學(xué)成分及體外抗氧化活性分析

2021-06-25 10:24劉秀嶶石萍萍周繼偉
食品工業(yè)科技 2021年9期
關(guān)鍵詞:白肉三萜靈芝

潘 俊,劉秀嶶,石萍萍,周繼偉,曲 媛,田 浩, ,李 宏,

(1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,云南昆明 650223;2.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,云南昆明 650504)

靈芝(Ganoderma lucidum)屬多孔菌科靈芝屬大型真菌,為我國名貴中藥材[1]。靈芝品種豐富,目前已鑒定的有80余種,其中紫芝Ganoderma sinenseZhao,Xu et Zhang和赤芝Ganoderma lucidum(Leyss. ex Fr.) Karst.收錄于2015版《中國藥典》,具有補氣安神、止咳平喘的功效。靈芝產(chǎn)地分布于全國各地,包括浙江省、山東省、黑龍江省、云南省等地。靈芝主要活性成分為多糖、三萜等[2]。除此之外,靈芝還含有蛋白質(zhì)、氨基酸、多肽等成分[3-4]。現(xiàn)代藥理研究表明,靈芝具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老、保護肝臟、調(diào)節(jié)心血管等作用[5-9]。

白肉靈芝(Ganoderma leucocontextum)作為我國西南地區(qū)靈芝屬的一個重要種類,主要分布于云南、西藏等地,已經(jīng)實現(xiàn)人工栽培。目前,對于紫芝、赤芝的研究較為廣泛、深入,而對于白肉靈芝的研究較少,主要集中于生物學(xué)鑒定[10]、化學(xué)成分[11]及神經(jīng)保護作用[12]等研究。Zhao等[11]從白肉靈芝子實體中分離得到18個三萜類化合物,但這些成分均為微量成分,未對白肉靈芝的主要成分進行研究。據(jù)報道,靈芝具有顯著的延緩衰老的作用,具有潛在的抗氧化應(yīng)激的作用[13],但白肉靈芝抗氧化作用尚屬空白。

因此,本研究以白肉靈芝為對象,赤芝、紫芝為參考,對比分析白肉靈芝中化學(xué)成分及抗氧化活性,為白肉靈芝的綜合開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

白肉靈芝、赤芝及紫芝樣品 采自云南,樣品來源見表1,白肉靈芝、赤芝及紫芝樣品分別經(jīng)云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所張金渝研究員鑒定為多孔菌科真菌白肉靈芝Ganoderma leucocontextum、赤芝Ganoderma lucidum(Leyss. ex Fr.) Karst.、紫芝Ganoderma sinenseZhao, Xu et Zhang的干燥子實體;葡萄糖、齊墩果酸、靈芝酸A、人參皂苷Rb1純度98%以上 上海金穗生物科技有限公司;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) 分析純,上海麥克林生化科技有限公司;蒽酮、冰醋酸、香草醛、磷酸、硫酸亞鐵、雙氧水、水楊酸鈉 分析純,上海阿拉丁生化科技股份有限公司;乙腈 色譜純,美國Sigma公司。

表1 樣品的來源信息Table 1 The source of samples

UPT-I-20T優(yōu)普系列超純水器 成都超純科技有限公司;AX124ZH型電子分析天平 上海奧豪斯儀器有限公司;BL10-250A超聲波清洗機 上海比朗儀器有限公司;島津LC-20AB高效液相色譜儀 日本島津公司;TD25-WS臺式低速離心機 湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司;T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計 云南悅分環(huán)境檢測有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 靈芝中營養(yǎng)成分含量測定 水分含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.3-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測定》[14];灰分含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.4-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測定》[15];粗蛋白含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.5-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》[16];粗脂肪含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.6-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測定》[17];總淀粉含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.9-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中淀粉的測定》[18];粗纖維含量測定參照國標(biāo)《GB/T 5009.10-2003植物類食品中粗纖維的測定》[19];氨基酸含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.124-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸的測定》[20];礦質(zhì)元素鋅、鐵、錳、鎂、鈣、銅的測定參照國標(biāo)《GB 5009.268-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中多元素的測定》[21]。

1.2.2 靈芝中多糖含量測定 多糖含量測定參照《中華人民共和國藥典 2015年版 一部》中靈芝多糖的測定方法進行測定[22]。按干品計算,含靈芝多糖以無水葡萄糖(C6H12O6)計。

1.2.3 靈芝中三萜及甾醇含量測定 三萜及甾醇含量測定參照《中華人民共和國藥典 2015年版 一部》中靈芝三萜及甾醇的測定方法進行測定。按干品計算,含三萜及甾醇以齊墩果酸(C30H48O3)計[22]。

1.2.4 靈芝中總皂苷含量測定 總皂苷含量測定參考楊道強等[23]的測定方法。取人參皂苷Rb1適量,精密稱定,加50%乙醇制成濃度為0.2 mg/mL的人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)液。分別吸取0.2、0.6、1.0、1.4、1.8 mL人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)液至試管,水浴揮干溶劑,加入新配制的5%香草醛-冰醋酸0.2 mL,高氯酸0.8 mL,搖勻,于70 ℃水浴加熱20 min,取出置冰浴5 min,加入冰醋酸5 mL搖勻,以相應(yīng)試劑為空白,照紫外-可見分光光度法,在548 nm波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),對照品含量為橫坐標(biāo)。得到回歸方程Y=0.0039x-0.0044(R2=0.9995)。測定樣品時,取適量待測溶液1 mL,加入50%乙醇2 mL,取0.2 mL樣品溶液于試管中,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法,自“揮干”起,同法操作,測定吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Rb1的含量,計算,即得。

1.2.5 HPLC法測定靈芝中靈芝酸A含量 靈芝酸A的測定參考周丹英等[24]的測定方法。色譜條件:色譜柱(YMC-Tridrt C18,4.6 mm×250 mm,5 μm),柱溫35 °C,流速1 mL/min,檢測波長252 nm,進樣量20 μL。流動相A-0.05%磷酸水溶液,B-乙腈。梯度洗 脫 程 序:0~10 min,5%~20%B;10~15 min,20%~30%B;15~35 min,30%~40%B;35~55 min,40%~60%B;55~80 min,60%~80%B。取 靈 芝 酸A標(biāo)準(zhǔn)品5 mg,精密稱定,加甲醇配制成5 mg/mL靈芝酸A標(biāo)準(zhǔn)液。分別精密量取不同濃度靈芝酸A對照品溶液20 μL進樣,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。靈芝酸A的回歸方程為Y=6000000X-10097(R2=0.9991),靈芝酸A在10~500 μg/mL間與峰面積具有良好線性關(guān)系。取靈芝樣品粉末0.5 g于10 mL具塞錐形瓶中,加入5 mL甲醇,超聲提取30 min,離心,取上清液,濾渣再提取,合并上清液,并轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中,定容至刻度,搖勻,取續(xù)濾液,0.45 μL微孔濾膜濾過,作為供試液。精密量取供試品溶液20 μL進樣測定,外標(biāo)法計算靈芝酸A的含量。

1.2.6 靈芝提取物抗氧化活性的測定 稱定不同品種不同產(chǎn)地靈芝樣品10 g,加入乙醇200 mL,超聲處理30 min,離心,濾渣再次提取,合并濾液,減壓濃縮干燥后,得靈芝甲醇提取物。分別將不同靈芝甲醇提取物、VC配成濃度為0.05、0.25、0.5、1.25、2.5和5 mg/mL 6個濃度的溶液進行DPPH自由基及羥基自由基清除能力的測定。

分別取不同濃度靈芝、VC樣品2 mL,與0.1 mmol/L DPPH甲醇溶液按1∶1的體積比例混合均勻;室溫避光反應(yīng)30 min,照紫外-可見分光光度法,于517 nm波長下測定吸光值[25-26],記為A樣品??瞻捉M取2 mL甲醇加入2 mL 0.1 mmol/L DPPH甲醇溶液,以同樣方式操作得到的吸光值,記為A空白;本底組取2 mL待測品,加入2 mL甲醇溶液,以同樣方式操作得到的吸光值,記為A本底。DPPH自由基清除率公式如下:

DPPH自由基清除率(%)=(A空白-(A樣品-A本底))/A空白×100

式中:A空白表示空白組的吸光值;A樣品為樣品組的吸光值;A本底為本底組的吸光值。

分別取2 mL待測樣品與1.4 mL 6 mmol/L的H2O2混勻,再將0.6 mL 20 mmol/L水楊酸鈉和2 mL 1.5 mmol/L硫酸亞鐵加入其中,振蕩均勻,于37 ℃水浴反應(yīng)1 h。按照紫外-可見分光光度法,在562 nm測量其吸光值[27],記為A樣品??瞻捉M用等量的超純水代替樣品,以同樣方式操作得到的吸光值,記為A空白;本底組用等量的超純水代替H2O2,以同樣方式操作得到的吸光值,記為A本底。羥基自由基清除能力具體計算公式如下:

·OH清除能力(%)=(A空白-(A樣品-A本底))/A空白×100

式中:A空白表示空白組的吸光值;A樣品為樣品組的吸光值;A本底為本底組的吸光值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS Statistics 19.0軟件進行數(shù)據(jù)分析,每組重復(fù)3次,結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,實驗數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 19.0進行方差分析,P<0.05表明差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 白肉靈芝的營養(yǎng)成分分析

靈芝為食藥用真菌,不同品種靈芝營養(yǎng)成分和活性成分之間有較大的差異,可根據(jù)靈芝子實體中的主要活性成分和營養(yǎng)成分含量不同對其進行全面的功能評價[28]。由表2可以看出,白肉靈芝的水分、灰分、粗纖維、粗脂肪、總淀粉的含量分別為4.37%~6.68%、2.50%~2.78%、14.30%~20.05%、4.25%~6.49%、1.65%~2.03%,與紫芝、赤芝相似。白肉靈芝中粗蛋白的含量為18.02%~19.02%,顯著高于赤芝(8.96%)、紫芝(13.47%)(P<0.05),且與一些常見蘑菇中粗蛋白含量相當(dāng),如香菇20.3%、杏鮑菇21.44%、美味蘑菇22.75%[29-30]。白肉靈芝中粗纖維的含量雖與紫芝、赤芝相似,但明顯高于美味蘑菇6.68%、香菇4.5%,略低于杏鮑菇34.03%[31-32]。不同產(chǎn)地的白肉靈芝中水分、粗纖維、粗脂肪、總淀粉含量差異顯著(P<0.05),其中楚雄地區(qū)白肉靈芝的水分、灰分含量最低,分別為4.37%、2.50%,粗蛋白、粗纖維、粗脂肪、總淀粉含量最高,分別為19.02%、20.05%、6.49%、2.03%。因此,白肉靈芝具有高蛋白、高纖維的特性,是一種營養(yǎng)均衡的物質(zhì),可以應(yīng)用于食品產(chǎn)品開發(fā)領(lǐng)域。

表2 白肉靈芝的一般營養(yǎng)成分含量(±s ,n=3)Table 2 Nutritional components of G. leucocontextum (±s , n=3)

表2 白肉靈芝的一般營養(yǎng)成分含量(±s ,n=3)Table 2 Nutritional components of G. leucocontextum (±s , n=3)

注:不同小寫字母表示不同品種不同產(chǎn)地靈芝間存在顯著差異(P<0.05);表3~表5同。

編號 水分(%) 灰分(%) 粗蛋白(%) 粗纖維(%) 粗脂肪(%) 總淀粉(%)GLC-1 5.08±0.14b 2.78±0.08b 18.80±0.77a 17.02±0.68c 4.25±0.12c 1.79±0.06b GLC-2 4.37±0.16c 2.50±0.09c 19.02±0.68a 20.05±0.53b 6.49±0.08a 2.03±0.05a GLC-3 6.68±0.42a 2.68±0.06c 18.02±0.48a 14.30±0.28d 5.24±0.19b 1.65±0.03c GL-1 5.78±0.15a 3.78±0.05a 8.96±0.67c 22.47±0.78a 6.78±0.24a 1.85±0.02b GS-1 4.65±0.19b 2.96±0.06b 13.47±0.42b 15.48±0.44d 3.25±0.15d 1.96±0.05a

2.2 白肉靈芝的多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量分析

靈芝化學(xué)成分復(fù)雜,其中多糖類、三萜類物質(zhì)是靈芝的主要活性成分。云南白肉靈芝中多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量如表3所示。從表3可以看出,白肉靈芝中三萜及靈芝酸A含量為1.22%~1.40%、0.069%~0.084%,顯著高于紫芝、赤芝(P<0.05),與文獻報道一致[33-34]。楚雄和怒江地區(qū)的白肉靈芝多糖含量顯著高于其它靈芝(P<0.05)。而白肉靈芝中總皂苷含量與紫芝、赤芝差別不大。云南三個產(chǎn)地白肉靈芝三萜、靈芝酸A含量差異不顯著(P>0.05),其中怒江地區(qū)的白肉靈芝多糖含量最高,為1.42%;楚雄地區(qū)的總皂苷、三萜及靈芝酸A含量最高,分別為2.83%、1.40%、0.084%。以上結(jié)果可以看出,云南三個產(chǎn)地白肉靈芝中多糖及總皂苷含量有一定差異,而三萜、靈芝酸A含量差異不大,這可能是栽培方式及多糖、三萜及皂苷的生物合成代謝途徑不同所致[35]。

表3 白肉靈芝的多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量(±s ,n=3)Table 3 The contents of polysaccharides, total saponins, triterpenes and ganoderic acid A of G. leucocontextum (±s , n=3)

表3 白肉靈芝的多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量(±s ,n=3)Table 3 The contents of polysaccharides, total saponins, triterpenes and ganoderic acid A of G. leucocontextum (±s , n=3)

編號 多糖(%) 總皂苷(%) 三萜(%) 靈芝酸A(%)GLC-1 0.99±0.02b 2.72±0.63a 1.22±0.18a 0.069±0.02a GLC-2 1.24±0.08a 2.83±0.57a 1.40±0.09a 0.084±0.03a GLC-3 1.42±0.04a 2.30±0.28b 1.25±0.07a 0.072±0.02a GL-1 0.90±0.06b 2.84±0.61a 1.01±0.07b 0.054±0.04b GS-1 0.12±0.05c 2.19±0.21b 0.75±0.07c 0.032±0.03c

2.3 白肉靈芝的氨基酸成分分析

不同產(chǎn)地白肉靈芝中氨基酸含量如表4所示。由表4可以看出,不同產(chǎn)地的白肉靈芝中共檢出17種氨基酸,總氨基酸含量為113.61~163.51 mg/g,顯著高于赤芝76.45 mg/g、紫芝76.11 mg/g(P<0.05)。其中谷氨酸含量最高,變幅為16.12~22.62 mg/g,顯著高于赤芝4.82 mg/g、紫芝8.64 mg/g(P<0.05);其次為天門冬氨酸,變幅為12.02~15.61 mg/g,顯著高于赤芝4.81 mg/g、紫芝6.51 mg/g(P<0.05);含量最低的是胱氨酸和蛋氨酸,分別為0.68~1.25 mg/g、1.32~5.26 mg/g。3個產(chǎn)地的白肉靈芝中總氨基酸含量最高的是怒江地區(qū),為163.51 mg/g,其含量為赤芝和紫芝的兩倍。不同產(chǎn)地的白肉靈芝中必需氨基酸與總氨基酸比值為0.34~0.41,與紫芝和赤芝比例相似,接近于FAO/WHO所提出的0.40的比值[36],3個產(chǎn)地的白肉靈芝之間必需氨基酸與總氨基酸比值的差異不顯著,說明白肉靈芝中必需氨基酸組成比例相對均衡。

表4 白肉靈芝的氨基酸含量(±s ,n=3)Table 4 Amino acids contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

表4 白肉靈芝的氨基酸含量(±s ,n=3)Table 4 Amino acids contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

注:*為必需氨基酸。

氨基酸含量(mg/g)GLC-1 GLC-2 GLC-3 GL-1 GS-1天門冬氨酸 12.02±0.54b 14.92±1.45a 15.61±0.99a 4.81±0.59d 6.51±0.37c蘇氨酸* 5.82±0.24b 7.43±0.98a 7.84±0.36a 3.79±0.16c 4.03±0.26c絲氨酸 5.73±0.67c 7.28±0.68b 11.91±0.45a 5.45±0.49c 3.62±0.54d谷氨酸 16.12±1.57c 20.41±0.79b 22.62±0.68a 4.82±0.29e 8.64±0.48d甘氨酸 6.23±0.46b 7.73±0.85a 5.94±0.47b 3.53±0.38c 3.41±0.32c丙氨酸 7.87±0.35c 9.72±0.47b 11.38±0.35a 7.25±0.46c 4.75±0.27d胱氨酸 1.13±0.09a 1.25±0.58a 0.68±0.04b 0.48±0.05c 0.59±0.02b纈氨酸* 7.48±0.86b 8.21±0.37b 10.82±0.46a 6.71±0.77b 4.51±0.19c蛋氨酸* 1.32±0.36b 1.58±0.57b 5.26±0.79a 0.82±0.04c 0.81±0.06c異亮氨酸* 5.07±0.28c 5.73±0.68c 8.22±0.27b 3.71±0.36d 14.52±0.98a亮氨酸* 8.64±0.47c 10.17±0.25b 14.16±0.87a 5.79±0.26d 5.82±0.34d酪氨酸 2.34±0.24c 2.52±0.35c 6.94±0.45a 4.61±0.38b 3.61±0.28b苯丙氨酸* 5.27±0.25c 6.56±0.17b 8.98±0.26a 4.44±0.36d 3.62±0.88d組氨酸 8.32±0.35b 14.06±1.57a 5.16±0.37c 7.41±0.58b 1.82±0.36d賴氨酸* 6.51±0.32c 8.13±0.26b 11.52±0.27a 3.74±0.84d 3.61±0.26d精氨酸 7.75±0.45c 8.83±0.57b 10.44±0.19a 7.22±0.48c 3.62±0.57d脯氨酸 5.54±0.87b 6.69±0.36a 6.03±0.38a 1.87±0.28c 2.62±0.09c必需氨基酸總量 40.11±0.34c 47.81±0.51b 66.80±0.48a 29.00±0.33e 36.92±0.35d非必需氨基酸總量 73.05±0.56c 93.41±0.77b 96.71±0.44a 47.45±0.40d 39.19±0.33e氨基酸總量 113.16±0.47c 141.22±0.66b 163.51±0.46a 76.45±0.37d 76.11±0.34d藥用氨基酸 66.20±0.54c 80.85±0.66b 101.47±0.60a 39.78±0.35d 39.65±0.35d必需氨基酸/氨基酸總量 0.35 0.34 0.41 0.38 0.49

藥用氨基酸是由天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、精氨酸組成,一般在植物中含量少,部分在人體不能合成,但又是維持機體氮平衡所必需的。不同產(chǎn)地白肉靈芝中藥用氨基酸含量具有顯著差異(P<0.05),變幅為66.20~101.47 mg/g,顯著高于赤芝39.78 mg/g、紫芝39.65 mg/g(P<0.05),其中怒江地區(qū)的白肉靈芝藥用氨基酸含量最高,為101.47 mg/g。白肉靈芝中藥用氨基酸含量占氨基酸總量均高于50%。其中天門冬氨酸和谷氨酸是白肉靈芝中含量較高的藥用氨基酸,也是其中重要的鮮味物質(zhì)[37-38]。天門冬氨酸有緩解疲勞,預(yù)防心臟病、高血壓等疾病的功能[39]。谷氨酸是一種重要的功能性氨基酸,具有調(diào)節(jié)神經(jīng)中樞及大腦皮質(zhì)功能[40]。這些說明白肉靈芝氨基酸含量豐富,營養(yǎng)和藥用價值高。

2.4 白肉靈芝的礦質(zhì)元素分析

礦物質(zhì)元素對人體的細(xì)胞代謝及生理功能起著重要的作用,鈣可參與新陳代謝,促進骨骼發(fā)育[41];鐵是血紅蛋白的重要部分,可以預(yù)防和治療缺鐵性貧血[42]。白肉靈芝中礦質(zhì)元素含量如表5所示。由表5可以看出,白肉靈芝中鎂、鈣、鐵含量豐富,分別為914.25~942.56、575.18~807.25、380.00~465.35 mg/kg,顯著高于赤芝(659.14、496.15、285.65 mg/kg)、紫芝(835.92、378.82、325.68 mg/kg)(P<0.05),而不同品種靈芝中鋅、錳、銅含量差異不顯著(P>0.05)。不同產(chǎn)地白肉靈芝中鎂、鈣、鐵含量所有差異,其中昆明地區(qū)的白肉靈芝鎂、鈣含量最高,分別為942.56、807.25 mg/g;楚雄地區(qū)的白肉靈芝鐵含量最高,為465.35 mg/g。白肉靈芝具有高鈣、高鎂、高鐵的特點,營養(yǎng)價值豐富,可以作為食品進行開發(fā)利用。

2.5 白肉靈芝的抗氧化活性

氧化應(yīng)激反應(yīng)對人體衰老和健康具有非常重大的影響,各種因素導(dǎo)致的過量自由基可以引發(fā)和加劇多種疾病,應(yīng)用抗氧化劑來維持人體健康具有廣泛的需求[43-44]。羥基自由基(·OH)作為最活潑、氧化性最大的自由基,會造成細(xì)胞的突變或壞死[45]。DPPH通常可以用來檢測活性物質(zhì)對自由基的清除能力[46]。白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基、羥基自由基清除率如圖1和圖2所示。由圖1可知,白肉靈芝、赤芝、紫芝均具有一定的清除DPPH自由基能力,其中在濃度低于2.5 mg/mL時,赤芝最強,白肉靈芝次之,紫芝最弱。當(dāng)靈芝提取物濃度在0.5 mg/mL時,不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基的清除率已經(jīng)達到65.02%~76.09%,高于紫芝(50.36%),低于赤芝(87.40%)及VC(96.25%),說明3個產(chǎn)地白肉靈芝對DPPH自由基具有很好的清除作用。經(jīng)計算得出不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基清除率的IC50值為0.13~0.19 mg/mL,其中楚雄地區(qū)的白肉靈芝的IC50值最低,為0.13 mg/mL;赤芝的IC50值為0.07 mg/mL;紫芝的IC50值為0.46 mg/mL;VC的IC50值為0.01 mg/mL。

由圖2可知,白肉靈芝對羥基自由基具有一定的清除能力,其活性強于紫芝,與赤芝相似,其清除能力與樣品濃度呈現(xiàn)良好的劑量關(guān)系。當(dāng)靈芝提取物濃度在1.25 mg/mL時,不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對羥基自由基的清除率已經(jīng)達到46.87%~59.98%,高于紫芝(39.86%),低于VC(75.30%)。經(jīng)計算得出不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對羥基自由基清除率的IC50值為0.54~0.89 mg/mL;赤芝的IC50值為0.60 mg/mL;紫芝的IC50值為1.70 mg/mL;VC的IC50值為0.15 mg/mL。以上結(jié)果說明白肉靈芝具有一定的抗氧化活性,其活性與赤芝相似。

3 結(jié)論

白肉靈芝含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),通過成分分析得到其粗蛋白含量為18.02%~19.02%,粗纖維含量為14.30%~20.05%。白肉靈芝中主要活性成分多糖、三萜及靈芝酸A含量分別為0.99%~1.42%、1.22%~1.40%、0.069%~0.084%,明顯高于紫芝、赤芝。白肉靈芝中總氨基酸含量為113.61~163.51 mg/g,其中谷氨酸和天門冬氨酸的含量較高,分別為16.12~22.62 mg/g、12.02~15.61 mg/g。白肉靈芝中藥用氨基酸含量占氨基酸總量均高于50%。白肉靈芝具有高鈣、高鎂、高鐵的特點,營養(yǎng)價值豐富,其鎂、鈣、鐵含量分別為914.25~942.56、575.18~807.25、380.00~465.35 mg/kg。體外抗氧化活性實驗表明,白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基、羥基自由基清除率的IC50值分別為0.13~0.19和0.54~0.89 mg/mL,并呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系,其抗氧化活性高于紫芝。本研究為云南白肉靈芝食用價值提供了參考依據(jù),為今后進一步開發(fā)利用白肉靈芝提供了數(shù)據(jù)支持。

表5 白肉靈芝的礦質(zhì)元素含量(±s ,n=3)Table 5 Mineral elements contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

表5 白肉靈芝的礦質(zhì)元素含量(±s ,n=3)Table 5 Mineral elements contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

微量元素含量(mg/kg)GLC-1 GLC-2 GLC-3 GL-1 GS-1 Zn 37.82±0.52b 29.20±0.51c 41.40±1.02a 29.85±0.69c 38.50±1.22b Fe 450.24±3.28b 465.35±3.75a 380.00±2.21c 285.65±1.67e 325.68±4.56d Mn 37.82±0.68b 37.42±0.77b 37.50±1.26b 42.57±0.93a 24.67±0.25c Mg 942.56±6.23a 914.25±4.45c 927.46±8.92b 659.14±6.55e 835.92±9.01d Ca 807.25±15.29a 575.18±7.97c 672.00±10.28b 496.15±13.74d 378.82±15.59e Cu 6.92±0.18b 7.28±0.39b 8.84±0.86a 5.68±0.67c 8.34±0.74a

圖1 白肉靈芝對DPPH自由基的清除能力Fig.1 DPPH free radical scavenging ability of Ganoderma leucocontextum

圖2 白肉靈芝對羥基自由基的清除能力Fig.2 Scavenging ability of hydroxyl radical in Ganoderma leucocontextum

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