邱 洪，李新順，王 慧

（中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第925 醫(yī)院，貴州 貴陽 550009）

復(fù)方冰甲乳膏為我院皮膚科臨床經(jīng)驗方，系冰片、硫磺、硼砂、甲硝唑、制霉菌素等中西藥結(jié)合的復(fù)方制劑［1－2］，有清熱燥濕、收斂生肌功效，主要用于治療真菌感染引起的手足癬等［3］。本課題組前期已完成了相關(guān)毒理學(xué)研究［4－5］，為驗證其臨床療效，進(jìn)一步對該方進(jìn)行了藥效學(xué)研究。現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

儀器：JM－B 型電子天平（余姚市紀(jì)銘稱重校驗設(shè)備有限公司）；ALC－210.3 型電子天平（上海良平儀器儀表有限公司）；SPX－500 型生化培養(yǎng)箱（常州市金壇高科儀器廠）；N－300M 型生物顯微鏡（南京江南永新光學(xué)有限公司）。

近年來，隨著增減掛鉤項目的試點推廣，如何在增減掛鉤實施過程中降低甚至規(guī)避項目潛在風(fēng)險矛盾，使項目能實現(xiàn)其最大效益，成為了當(dāng)前決策者和執(zhí)行者面臨的重大挑戰(zhàn)，同時逐漸引起學(xué)者們的關(guān)注。相關(guān)研究大都是選擇某一角度分析增減掛鉤在某些特定環(huán)節(jié)中的矛盾沖突，尚缺乏對增減掛項目社會風(fēng)險的系統(tǒng)全面分析。本研究擬立足于增減掛鉤項目整個過程，運用工作分解結(jié)構(gòu)法（WBS）梳理增減掛鉤項目各個環(huán)節(jié)可能存在的風(fēng)險因素，并系統(tǒng)性識別增減掛鉤項目可能存在的社會風(fēng)險點。

試藥：復(fù)方冰甲乳膏（貴陽中醫(yī)學(xué)院中藥制劑研究中心，批號為20150126）；硝酸咪康唑乳膏（達(dá)克寧，西安楊森制藥有限公司，批號為140608107，規(guī)格為每支20 g）；復(fù)方醋酸地塞米松乳膏（皮炎平，華潤三九醫(yī)藥股份有限公司，批號為1405021H，規(guī)格為每支20 g）；二甲苯（天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號為20080921）；卡拉膠（角叉菜膠，上海勁馬生物科技有限公司，批號為20140625）；磷酸組胺（上海源葉生物科技有限公司，批號為YY10165）；蛋白胨（上海申科昆蟲生物科技開發(fā)有限公司，批號為080109）；葡萄糖（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號為20130320）；瓊脂粉（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號為20140726）；馬鈴薯為市售。

動物：豚鼠 130 只、體質(zhì)量 240 ～ 260 g，昆明小鼠60 只、體質(zhì)量 18 ～ 22 g，SD 大鼠 50 只、體質(zhì)量 180 ～220 g，均雌雄各半。由貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（黔）2012－001。飼料為全價顆粒飼料，由同一單位提供。

觀察指標(biāo)：于給藥第 1，3，7，10 天時大體觀察皮損鱗屑、紅斑、膿腫等感染征象，皮損部位行真菌鏡檢及培養(yǎng)，測量皮損直徑，以判斷皮損面積。

1.2 方法

1.2.1 體外抗真菌作用［6－7］

治愈標(biāo)準(zhǔn)：皮損處無任何感染征象，真菌鏡檢、培養(yǎng)均呈陰性。

試驗時從4 ℃冰箱中取出菌株，室溫放置24 h 后接種于SDA 培養(yǎng)基，26 ℃培養(yǎng)10 d 后，挑取菌落接種至 60 mL PDB 培養(yǎng)基中，于 26 ℃ 培養(yǎng) 3 ～ 5 d，取出，作為原液。再用PDA 液體培養(yǎng)基稀釋至濃度為1 ∶100，作為試驗菌液，備用。

首先，大數(shù)據(jù)能夠為學(xué)生的實驗理論學(xué)習(xí)以及實踐學(xué)習(xí)，提供源源不斷的動力。隨著當(dāng)前整個教育改革制度的持續(xù)推進(jìn)，理工類高等院校當(dāng)中的實驗教學(xué)模式也在不斷地發(fā)生著相應(yīng)的變化，以往傳統(tǒng)的以教師講授為主體的教學(xué)模式，被逐漸的淘汰掉了，而更加具有靈活性、更加具有開放性的實驗室教學(xué)逐漸成為主體，學(xué)生在這樣的過程當(dāng)中能夠得到教育工作者的關(guān)注和青睞。而理工類專業(yè)的學(xué)生，在實驗課程上能夠更好地驗證自身理論知識的掌握程度，正是憑借著良好的實驗室環(huán)境以及高效的管理模式，最終也就為學(xué)生的理論學(xué)習(xí)以及實踐能力培養(yǎng)提供了源源不斷的動力。

供試品溶液制備：取樣品適量，用水配制成質(zhì)量濃度為100 mg／mL 的供試品溶液，裝入25 mL 小錐形瓶中，70 ℃加熱溶解2 min，封口，備用。

西王集團以玉米深加工和特鋼為主業(yè)，擁有三家上市公司，其成長歷程堪稱改革開放40年中的標(biāo)志性企業(yè)。其創(chuàng)始人王勇是全國人大代表，也在今年入選改革開放40年感動山東人物。

最低抑菌濃度（MIC）測定：取13 支干燥無菌帶塞小試管，無菌操作，分別加入1 mL SDB 培養(yǎng)基，然后向第1 支試管加入供試品溶液液1 mL，混勻，取1 mL 加入第2 支試管內(nèi)，依次類推至第11 管，制成質(zhì)量濃度依次 為 50.00，25.00，12.50，6.25，3.13，1.56，0.78，0.39，0.20，0.10，0.05 mg ／mL 的系列供試品溶液，每管加入0.1mL 菌液；第12 管不加菌液，作陰性對照；第13 管加菌液，作陽性對照。置生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1 周。以真菌不生長的最高藥物稀釋度為該藥的 MIC。配制過程中每一濃度梯度完成后應(yīng)更換槍頭。每個質(zhì)量濃度重復(fù)3 管。

1.2.4 止癢作用［10］

在基層社會治理的模式構(gòu)建中有三大要素對社會治理效果發(fā)揮著重要作用，分別是基礎(chǔ)保障性要素、創(chuàng)新協(xié)同性要素和工具性要素。誠然，在社區(qū)治理中對社區(qū)治理主體進(jìn)行簡單的分類并沒有實質(zhì)性的意義，在歸類基礎(chǔ)上對其結(jié)構(gòu)和資源的整合以及流程的再造才是要素區(qū)分的要義。

1.2.2 抗模型豚鼠真菌感染作用［8－9］

建模、分組與給藥：將80 只豚鼠背部剃毛，面積9 cm2（3 cm×3 cm），用細(xì)砂紙在剃毛部位擦拭，以出現(xiàn)輕微滲血為度（提高接種成功率），24 h 后用1 mL 注射器在脫毛面中心區(qū)刺入豚鼠皮膚內(nèi)（以不使皮膚出血為度）注入0.1 mL 菌懸混合液（玫瑰毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌。試驗前恢復(fù)其致病力并接種于PDB 培養(yǎng)基，26 ℃培養(yǎng)1 周，制備成菌懸混合液，置4 ℃冰箱保存，備用），再用棉簽蘸取菌懸混合液0.2 mL 涂布于脫毛創(chuàng)傷部位，1 天2 次，共感染3 d，以復(fù)制感染模型。豚鼠脫毛接種區(qū)皮膚出現(xiàn)紅斑、丘疹及水皰，且真菌鏡檢及培養(yǎng)均為陽性為模型復(fù)制成功。于感染模型復(fù)制成功后第2 天隨機分為模型組（A 組），復(fù)方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1組、B2組、B3組 ），陽性對照（達(dá)克寧）組 （C組），各 10 只。B1組、B2組、B3組用棉簽取稱量好的相應(yīng)藥物均勻涂抹于豚鼠皮損部位，劑量分別為0，0.70，0.35，0.18，0.70 g ／kg （后續(xù)試驗中大鼠給藥劑量同）連續(xù)涂藥10 d，1 天1 次。模型組給予賦形劑，以下試驗同。

菌株：玫瑰毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌，均購于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所。

培養(yǎng)基制備：1）SDA 培養(yǎng)基，稱取葡萄糖 40.0 g，蛋白胨 10.0 g，瓊脂粉 20.0 g，加水定容至 1 000 mL，并用玻璃棒不斷攪拌，使各成分溶解，然后煮沸1 min。115 ℃、高壓滅菌 20 min，備用。2）沙氏葡萄糖液體（SDB）培養(yǎng)基，除不加瓊脂粉外，其余制備方法同1）。3）馬鈴薯葡萄糖液體（PDB）培養(yǎng)基：稱取馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨5 g，水1 000 mL。馬鈴薯去皮及芽，加水煮爛（能被玻璃棒戳破即可），3 層紗布過濾。加葡萄糖、蛋白胨、蒸餾水，分裝6 個三角瓶，加塞，包扎，121 ℃滅菌20 min，即得，備用。

楊春梅和鄭巖在研究我國促進(jìn)技術(shù)創(chuàng)新的相關(guān)財稅政策中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)前，我國的財稅政策之間缺乏聯(lián)系，各個稅種之間內(nèi)在聯(lián)系不緊密，一些新出臺的政策和舊政策之間的銜接也不緊密、協(xié)調(diào)性差[9]。如中央和地方之間財稅激勵政策之間銜接的不緊密，上下不統(tǒng)一問題。如中發(fā)〔2015〕8號和國發(fā)〔2016〕16號等“新政”中提出取消科技成果“審批或備案”環(huán)節(jié)，給予企業(yè)、科研院所等更多自主權(quán)。但一系配套制度并未做出相應(yīng)調(diào)整，導(dǎo)致財稅激勵政策上下聯(lián)動受限，也給企業(yè)申報設(shè)置了不小障礙。

首先打開Shadow 數(shù)據(jù)屬性表，選中值為 1的柵格，再選擇 [轉(zhuǎn)換工具][由柵格轉(zhuǎn)出][柵格轉(zhuǎn)面]工具，打開工具對話框，完成矢量轉(zhuǎn)換，如圖11。

對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用：將昆明小鼠隨機分為模型組（A 組），復(fù)方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1組、B2組、B3組），陽性藥（皮炎平）組 （C 組），各 12只。按前述方法用棉簽取稱量好的相應(yīng)藥物均勻涂抹于小鼠耳朵兩面，連續(xù)涂藥7 d，1 天1 次，劑量分別為0，1.00，0.50，0.25，1.00 g ／kg。第 7 天末次涂藥 1 h 后，以水洗去膏藥，用干棉球擦凈。用二甲苯原液0.03 mL 涂于小鼠左耳前后兩面，致炎40 min 后處死，剪取左右兩耳，用直徑8 mm 的打孔器于相同部位打取左右耳耳片，精密稱定質(zhì)量，以左右耳耳片質(zhì)量之差為小鼠耳腫脹度，并計算小鼠耳腫抑制率。

真菌懸液制備：從保存菌種斜面上各挑取菌苔（玫瑰毛癬菌、絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌），分別接種至60 mL PDB 培養(yǎng)基中，于 26 ℃培養(yǎng) 3 ～ 5 d，取出，作為原液。再用PDB 培養(yǎng)基稀釋至濃度為1 ∶100，作為試驗菌液。

抑制率（%）＝（模型組耳腫脹度－給藥組耳腫脹度）／模型組耳腫脹度×100%

對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的作用：將SD 大鼠隨機分為模型組（A 組），復(fù)方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1組、B2組、B3組），陽性藥（皮炎平）組 （C 組），各 10只。按前述方法用棉簽取稱量好的相應(yīng)藥物均勻涂抹于大鼠右后肢足跖處，連續(xù)涂藥7 d，1 天1 次，第7 天末次涂藥1 h 后，以水洗去膏藥，用干棉球擦凈。在大鼠右后肢足跖皮下注射1%角叉菜膠0.1 mL，分別于致炎后1，3，4，5，7 h 時用游標(biāo)卡尺測量大鼠后肢左右足趾厚度，以左右足趾厚度的差值為腫脹度。

最低殺菌濃度（MBC）測定：取抑菌試驗結(jié)果中透明的各試管，再依次取出不生長真菌的供試品溶液培養(yǎng)物0.1 mL，分別移至SDA 培養(yǎng)基中，用涂布棒均勻涂布，倒置于培養(yǎng)箱中，26 ℃培養(yǎng)1 周，以不生長真菌的最高稀釋度為該藥的 MBC。重復(fù)試驗3 次。

將50 只豚鼠隨機分為模型組（A 組），復(fù)方冰甲乳膏高、中、低劑量組（B1，B2，B3組），陽性藥（皮炎平）組（C 組），各10 只。試驗前，各組豚鼠于右后足脫毛約1 cm×2 cm。第2 天，在右后足背脫毛區(qū)皮膚面涂藥，按前述方法用棉簽取稱量好的相應(yīng)藥物均勻涂抹，連續(xù)涂藥7 d，1 天1 次。第7 次涂藥前，用粗砂紙擦傷豚鼠右后足背脫毛處，面積約1 cm2。在擦傷處再按上述所示涂第7 次藥，于末次涂藥 10 min 后在擦傷處滴 0.01% 磷酸組胺0.05 mL，觀察豚鼠回頭舔右后足擦傷處反應(yīng)，若豚鼠無此反應(yīng)，可每隔3 min 重復(fù)滴藥，直至豚鼠出現(xiàn)該反應(yīng)為止，以最后出現(xiàn)該反應(yīng)時的磷酸組胺總量為致癢閾。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

1.2.3 抗炎作用［8－10］

待兩組患者建立靜脈輸液通道后，對其進(jìn)行誘導(dǎo)麻醉，給予患者標(biāo)準(zhǔn)劑量的咪達(dá)唑侖、舒芬太尼，靜脈注射依托咪酯，而后檢查患者睫毛放射和意識是否已經(jīng)消失。對照組接受苯磺順阿曲庫銨（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份；國藥準(zhǔn)字H20060869；規(guī)格：10 mg）靜脈注射，劑量使用如下：0.12 mg/kg；觀察組患者接受羅庫溴銨（荷蘭歐加農(nóng)；國藥準(zhǔn)字H20130486；規(guī)格：5 mL：50 mg）靜脈注射，使用劑量如下：0.5 mg/kg。待肌松藥給藥后，對兩組患者行氣管插管和機械通氣，并給予患者0.15%七氟烷氣體以維持患者處于深度麻醉。

2 結(jié)果

2.1 體外抗真菌作用

結(jié)果見表1?？梢?，絮狀表皮癬菌、玫瑰毛癬菌對復(fù)方冰甲乳膏較敏感，MIC 均為 3.13 mg／mL，而犬小孢子菌的 MIC 為6.25 mg／mL；絮狀表皮癬菌、犬小孢子菌、玫瑰毛癬菌的 MBC 分別為 3.13，6.25，50 mg ／mL。

2.2 抗豚鼠真菌感染作用

用藥第1 天時，各組皮損處出現(xiàn)紅斑，直徑約7 mm，伴有鱗屑、膿腫等感染征象，皮損部位鏡檢可見真菌。復(fù)方冰甲乳膏高、中、低劑量組及陽性對照組于治療第7 天時，皮損感染癥狀已明顯好轉(zhuǎn)，紅斑直徑明顯縮小，鱗屑已消失，至治療第10 天時，部分皮損感染現(xiàn)象已消失，真菌鏡檢及培養(yǎng)均為陰性，且復(fù)方冰甲乳膏存在一定的劑量依賴性，高、中、低劑量組治療率分別為70%，50%，40%（陽性對照組為80%）。模型組病變部位至第7 天時持續(xù)加重，之后逐漸好轉(zhuǎn)，但未見痊愈。試驗組與模型組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜ 0.01）。詳見表2。

有些教師的確是拒絕、懼怕課改的，他們希望按照多年不變的方法教語文，既省力又省心，所以對新的理念和方法本能地有排斥心理。但絕大多數(shù)還是歡迎課改的，他們的困惑反映課改出了問題。毫無疑問，課改以后的語文課，出現(xiàn)許多非常好的變化：學(xué)生的地位突出了，教學(xué)方法豐富了，教學(xué)手段改進(jìn)了，課堂空間拓展了。但一些不正常的理念也開始滋生，一些畸形的課堂教學(xué)觀開始蔓延。

表1 復(fù)方冰甲乳膏體外抗真菌作用Tab.1 Effect of Compound Bingjia Cream against fungal in vitro

表2 復(fù)方冰甲乳膏對模型豚鼠皮損直徑的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.2 Effect of Compound Bingjia Cream on the lesion diameter of guinea pigs（，mm，n ＝ 10）

表2 復(fù)方冰甲乳膏對模型豚鼠皮損直徑的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.2 Effect of Compound Bingjia Cream on the lesion diameter of guinea pigs（，mm，n ＝ 10）

注：與模型組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。表 3 至表 5 同。Note：Compared with those in the model group，* P ＜ 0.05，** P ＜0.01，as well as Tab.3，Tab.4 and Tab.5.

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70治療后1 d 7.43 ±0.70 7.28 ±0.64**7.18 ±0.79**7.31 ±0.84**7.31 ±0.85治療后3 d 10.21 ±1.08 6.63 ±0.65**6.92 ±0.59**7.55 ±0.90**6.79 ±0.77治療后7 d 10.85 ±0.64 4.15 ±0.91**4.71 ±0.96**5.72 ±1.68**3.68 ±0.94治療后10 d 8.34±2.14 0.93±1.52**1.96±2.10**2.32±2.09**0.56±1.19

2.3 抗炎作用

與模型組比較，各給藥組小鼠耳廓腫脹度均明顯減輕（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。詳見表 3。大鼠足跖皮下注射角叉菜膠后3 h 內(nèi)足趾腫脹度持續(xù)升高，之后開始降低。而各給藥組足跖腫脹度的增加均受到抑制，尤其是復(fù)方冰甲乳膏高劑量組，除致炎后5 h 外，其余各個時間點足跖腫脹度與模型組比較均明顯減輕（P ＜0.05，P ＜ 0.01）。詳見表 4。

2.4 止癢作用

與模型組比較，各給藥組大鼠的致癢閾均明顯升高（P ＜0.05，P ＜0.01）。詳見表 5。

表3 復(fù)方冰甲乳膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度的影響（，n ＝ 12）Tab.3 Effect of Compound Bingjia Cream on auricle swelling induced by xylene in mice（，n ＝ 12）

表3 復(fù)方冰甲乳膏對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度的影響（，n ＝ 12）Tab.3 Effect of Compound Bingjia Cream on auricle swelling induced by xylene in mice（，n ＝ 12）

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g ／kg）0 1.00 0.50 0.25 1.00耳腫脹度（mg）19.60 ± 4.60 13.90 ± 2.90**16.60 ± 2.70**15.60 ± 3.50**12.80 ± 3.10耳腫脹抑制率（%）29.08 15.31 20.41 34.69

表4 復(fù)方冰甲乳膏對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹度的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.4 Effect of Compound Bingjia Cream on paw swelling induced by carrageenan in rats（，mm，n ＝ 10）

表4 復(fù)方冰甲乳膏對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹度的影響（，mm，n ＝ 10）Tab.4 Effect of Compound Bingjia Cream on paw swelling induced by carrageenan in rats（，mm，n ＝ 10）

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70治療后1 h 1.52 ±0.45 0.97 ±0.36**1.07 ±0.52*1.25 ±0.75 1.00 ±0.54*治療后3 h 2.14 ±0.32 1.51 ±0.28**1.58 ±0.31**1.66±0.96 1.52 ±0.48**治療后4 h 1.87 ±0.256 1.57 ±0.55*1.47 ±0.76 1.68±0.85 1.60 ±0.32*治療后5 h 1.60 ±0.27 1.40 ±0.32 1.35 ±0.51 1.42±0.83 1.46 ±0.24治療后7 h 1.26 ±0.38 0.87 ±0.29*0.90 ±0.51*1.28±0.57 1.09 ±0.73

表5 復(fù)方冰甲乳膏對模型大鼠致癢閾的影響（，μg，n ＝10）Tab.5 Effect of Compound Bingjia Cream on itch thxeshold in model rats（，μg，n ＝ 10）

表5 復(fù)方冰甲乳膏對模型大鼠致癢閾的影響（，μg，n ＝10）Tab.5 Effect of Compound Bingjia Cream on itch thxeshold in model rats（，μg，n ＝ 10）

組別A 組B1 組B2 組B3 組C 組劑量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70致癢閾9.50 ± 5.00 26.50 ± 7.00**23.00 ± 9.80**16.50 ± 9.70**19.00 ± 12.60

3 討論

復(fù)方冰甲乳膏為中西藥復(fù)方制劑，用于真菌感染引起的手足癬、股癬等的治療。本研究結(jié)果顯示，復(fù)方冰甲乳膏體外有抑菌和殺菌作用；殺菌效果絮狀表皮癬菌優(yōu)于犬小孢子菌，犬小孢子菌優(yōu)于玫瑰毛癬菌；高、中、低劑量復(fù)方冰甲乳膏能明顯縮小真菌感染豚鼠皮損直徑，并使皮損外觀癥狀好轉(zhuǎn)或消失，明顯升高治愈率；能顯著抑制二甲苯導(dǎo)致的小鼠耳廓腫脹及角叉菜膠誘發(fā)的大鼠足腫脹；能明顯提高磷酸組胺致癢模型豚鼠的致癢閾。

綜上所述，復(fù)方冰甲乳膏可通過體內(nèi)、體外抗真菌、抗炎和止癢共同發(fā)揮治療手足癬的作用。本研究為復(fù)方冰甲乳膏的臨床使用提供了實驗室依據(jù)。