林志健 黃政凱 王雨 楊婷 張冰

摘要 目的：建立中藥防治痛風(fēng)病的藥效評價(jià)平臺，為評價(jià)中藥防治痛風(fēng)病的藥效特點(diǎn)與作用機(jī)制提供技術(shù)支撐。方法：集成“成分-疾病”靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)分析、病證結(jié)合動物模型、器官模型、細(xì)胞模型、分子生物學(xué)5個(gè)層次，從多層次系統(tǒng)構(gòu)建中藥防治痛風(fēng)病的藥效評價(jià)平臺。結(jié)果：本課題組成功構(gòu)建了基于尿酸生成與排泄、尿酸鹽沉積以及沉積致炎的“整合論治”痛風(fēng)病藥效評價(jià)平臺。該平臺已進(jìn)行了中藥菊苣等多個(gè)中藥品種的藥效評價(jià)研究。結(jié)論：該平臺集成了病證結(jié)合、整體動物、組織器官以及細(xì)胞分子生物學(xué)的研究技術(shù)，能夠?qū)χ兴幎喑煞?、多靶點(diǎn)、多層次的整合論治特點(diǎn)進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià)，已展現(xiàn)出較好的痛風(fēng)病防治藥物綜合評價(jià)優(yōu)勢，可為臨床防治痛風(fēng)中藥的研發(fā)提供參考和指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞 痛風(fēng)病;中藥;整合論治;藥效研究平臺;應(yīng)用

Platform Construction and Application of a Research Platform on the Mechanism of Chinese Medicine for Gout

LIN Zhijian，HUANG Zhengkai，WANG Yu，YANG Ting，ZHANG Bing

（School of Chinese Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 102488，China）

Abstract Objective：To establish a platform for evaluating the efficacy of Chinese medicine（TCM）in the prevention and treatment of gout disease.Methods：Our team integrated 5 modules for the gout disease study，the “component-disease” target network analysis，the animal models of combination of disease and syndrome，the organ models，the cell model and the molecular biological analysis module.A platform for evaluating the efficacy of Chinese medicine in preventing and treating gout was established from a multi-level system.Results：Our team had successfully constructed the drug efficacy evaluation platform based on gout disease induced by uric acid production or excretion，urate deposition and urate induced-inflammation.The platform has been used to evaluate the drug efficacy of Cichorium intybus L.and other Chinese herbal medicines.Conclusion：The platform integrates the research technologies of disease and syndrome，whole animals，tissues and organs，and cell and molecular biology.It can systematically evaluate the characteristics of multi-component，multi-target，and multi-level integrated treatment of traditional Chinese medicine，and has shown good advantages in comprehensive evaluation of drugs for the prevention and treatment of gout，which can provide reference and guidance for the development of Chinese medicines for the prevention and treatment of gout.

Keywords Gout disease; Chinese medicines; Integrated treatment; Pharmacological research platform; Application

中圖分類號：R242文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.01.007

痛風(fēng)病是指與高尿酸血癥、尿酸鹽沉積密切相關(guān)的進(jìn)展性代謝疾病，其疾病進(jìn)程包括高尿酸血癥階段、尿酸鹽沉積階段、急性炎癥階段。據(jù)《2019中國痛風(fēng)診療指南》，中國高尿酸血癥的總體患病率達(dá)13.3%，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)病率達(dá)1.1%[1]，臨床治療需求迫切。2019年美國風(fēng)濕病學(xué)會學(xué)術(shù)年會《2020痛風(fēng)臨床實(shí)踐指南（草案）》突破以往痛風(fēng)急性炎癥不可進(jìn)行降尿酸治療的認(rèn)識局限，率先明確指出痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的治療在抗炎的要同時(shí)進(jìn)行降尿酸干預(yù)[2]。然而，目前臨床應(yīng)用的抗痛風(fēng)病藥物多為化藥，作用靶點(diǎn)明確，分別以降低血尿酸、抗炎鎮(zhèn)痛為治療目的，雖階段性療效顯著，但缺乏降尿酸、抗炎的整體干預(yù)，并均存在不同程度的安全風(fēng)險(xiǎn)[3]，難以滿足痛風(fēng)病臨床治療需求。因此，契合疾病特點(diǎn)，可整體干預(yù)痛風(fēng)病，且安全性好的藥物研發(fā)將是未來痛風(fēng)病防治的重要方向。

我們在整體觀指導(dǎo)下，探討中醫(yī)藥在痛風(fēng)病的臨床治療中的特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)祛濕化濁除痹的治療法可取得較好的臨床療效[4]。研究發(fā)現(xiàn)其干預(yù)環(huán)節(jié)不僅涉及高血尿酸的降低[5]、急性炎癥的緩解[6]，亦包括貫穿痛風(fēng)病進(jìn)展始終的尿酸鹽沉積的改善[7]，具多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的整合論治優(yōu)勢。但中醫(yī)藥治療往往具有經(jīng)驗(yàn)性、實(shí)踐性的特點(diǎn)，目前對痛風(fēng)病類復(fù)雜疾病的優(yōu)勢效用尚缺乏一致性的評價(jià)體系。本課題組已從尿酸水平升高、尿酸鹽沉積及沉積致炎三階段，集成“成分-疾病”靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)分析、病證結(jié)合動物模型、器官模型、細(xì)胞模型、分子生物學(xué)5個(gè)層次，建立了痛風(fēng)病中藥效用機(jī)制研究平臺。因此，本文以痛風(fēng)病中藥效用機(jī)制研究平臺為核心，圍繞平臺建設(shè)思路、模塊構(gòu)架及應(yīng)用等方面介紹中藥防治痛風(fēng)病藥效評價(jià)平臺的建設(shè)情況，以期為臨床藥物研究提供參考，滿足痛風(fēng)病臨床治療的迫切需求。

1 平臺建設(shè)思路

我們認(rèn)為痛風(fēng)病中藥效用機(jī)制研究平臺建設(shè)應(yīng)以痛風(fēng)病的病理過程及中醫(yī)藥對痛風(fēng)病的治療原則為基礎(chǔ)。經(jīng)過多年的探索，本課題組成功構(gòu)建了“三階段，五層次”符合中藥特點(diǎn)的痛風(fēng)病中藥效用機(jī)制研究平臺。該平臺切入痛風(fēng)病發(fā)生的整體過程，圍繞血尿酸水平升高階段、尿酸鹽沉積階段以及尿酸鹽沉積致炎3個(gè)階段，集成“成分-疾病靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)分析、病證結(jié)合動物模型、器官模型、細(xì)胞模型及分子生物學(xué)”5個(gè)層次。該研究平臺能夠體現(xiàn)中西醫(yī)對痛風(fēng)病的病理認(rèn)知，中醫(yī)病證結(jié)合的治療思路，以及藥物作用靶點(diǎn)與通路的綜合藥效評價(jià)。同時(shí)可為中藥單方、復(fù)方、有效部位、有效成分等多形式的藥物篩選與藥理藥效及作用機(jī)制提供技術(shù)支持;可針對藥物防治痛風(fēng)病的不同階段、不同層面進(jìn)行藥效評價(jià)與機(jī)制分析，揭示藥物作用的特點(diǎn)與靶點(diǎn)機(jī)制，切實(shí)服務(wù)于痛風(fēng)病防治的藥物篩選與評價(jià)。

2 研究平臺架構(gòu)及關(guān)鍵技術(shù)

中藥防治痛風(fēng)病藥效評價(jià)平臺集多項(xiàng)藥理與生物學(xué)研究技術(shù)為一體，具體包括“成分-疾病”靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)分析、病證結(jié)合動物模型、器官模型、細(xì)胞模型、分子生物學(xué)，符合痛風(fēng)病的動態(tài)發(fā)展與全程干預(yù)的藥效評價(jià)需求。研究平臺的架構(gòu)與功能特點(diǎn)見表1。

2.1 成分-疾病靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)計(jì)算模塊構(gòu)建

課題組圍繞痛風(fēng)病不同病理階段的靶點(diǎn)群，構(gòu)建了痛風(fēng)病的潛在靶點(diǎn)庫;同時(shí)系統(tǒng)梳理古今文獻(xiàn)構(gòu)建抗痛風(fēng)病多個(gè)中藥的成分?jǐn)?shù)據(jù)庫。利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、分子對接、成分-靶點(diǎn)相互作用分析、功能注釋、通路富集等生物信息學(xué)技術(shù)，搭建了成分-疾病靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)計(jì)算模塊。如課題組通過同源建模技術(shù)構(gòu)建腸道濃度型核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（Concentrative Nucleoside Transporter2，CNT2）、分子對接技術(shù)構(gòu)建尿酸生成代謝黃嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase，XOD）、腺苷脫氨酶（Adenosine Deaminase，ADA）、鳥嘌呤脫氨酶（Guanine Deaminase，GDA）、尿酸排泄轉(zhuǎn)運(yùn)體葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9（Glucose Transporter 9，GLUT9）、有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1（Organic Anion Transporter 1，OAT1）、有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體3（Organic Anion Transporter 3，OAT3）及腎臟尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（Urate-anion Exchanger 1，URAT1）等靶點(diǎn)與菊苣、茯苓等多個(gè)中藥及復(fù)方的成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，為開展痛風(fēng)病藥效評價(jià)研究提供有益參考。

2.2 病證結(jié)合動物藥理模型構(gòu)建

課題組利用禽類鵪鶉與人類一樣缺乏尿酸酶，尿酸作為嘌呤代謝的終產(chǎn)物的特點(diǎn)，模擬痛風(fēng)病重要病因，采用添加酵母浸膏粉配制的高嘌呤食餌進(jìn)行飲食誘導(dǎo)，建立鵪鶉高尿酸血癥及痛風(fēng)模型[8-9]。該模型突破和規(guī)避了嚙齒類動物具有尿酸酶的技術(shù)瓶頸與模型缺陷，成功模擬出痛風(fēng)病發(fā)生發(fā)展過程中血尿酸水平升高、尿酸鹽沉積以及沉積致炎的病理特點(diǎn)。該模型具有“病證結(jié)合”的特點(diǎn)，在中藥防治痛風(fēng)病的藥效評價(jià)中具有突出優(yōu)勢，為降低血尿酸、抗痛風(fēng)藥物的實(shí)驗(yàn)研究及開發(fā)提供了穩(wěn)定可靠的動物模型，已用于多種藥物降尿酸及抗痛風(fēng)的藥理評價(jià)，受到同行的認(rèn)可，已被國內(nèi)大型藥理工具書《中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》《中藥藥效研究思路與方法》《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》《痛風(fēng)病學(xué)》收載。

同時(shí)，根據(jù)中醫(yī)對痛風(fēng)病的認(rèn)知，觀察“四診”的證候表現(xiàn)，通過計(jì)算機(jī)軟件輔助的數(shù)字化定量分析方法采集模型動物的“四診”信息，成功建立動物模型“四診”客觀化數(shù)字化診斷技術(shù)[10]。該技術(shù)能較好地從環(huán)境、飲食等綜合因素模擬臨床病因、辨析模型動物證型，可體現(xiàn)痛風(fēng)病的病機(jī)發(fā)展規(guī)律。

2.3 離體器官藥理模型構(gòu)建

課題組切入痛風(fēng)病發(fā)生發(fā)展過程中的靶器官，關(guān)注尿酸排泄的2個(gè)重要靶器官腸道及腎臟，已成功構(gòu)建大鼠離體腎灌流及腸灌流模型，可排除體內(nèi)神經(jīng)-體液因素的干擾，直觀反映藥物在靶器官的藥理效應(yīng)，觀察靶器官對尿酸排泄轉(zhuǎn)運(yùn)的干預(yù)效果，并廣泛應(yīng)用于尿酸排泄及其機(jī)制的研究。如大鼠離體腎灌流器官模型，通過檢測灌流液尿酸水平與離體腎臟輸尿管尿液的尿酸水平，計(jì)算腎臟尿酸排泄率，實(shí)現(xiàn)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)與體外實(shí)驗(yàn)的橋梁銜接，直觀分析中藥小分子化合物對尿酸腎臟排泄途徑的干預(yù)作用，包括腎小球?yàn)V過、腎小管重吸收、腎小管分泌及重吸收環(huán)節(jié)，可用于促進(jìn)腎臟尿酸排泄的藥物的發(fā)現(xiàn)和評價(jià)[11]。腸道是尿酸的腎外排泄途徑，通過離體腸灌流模型可排除腸道菌群對尿酸分解的干擾，在十二指腸及空腸中部形成腸道灌流回路，持續(xù)收集流出灌流液，測定尿酸含量，進(jìn)而評價(jià)尿酸在腸道的排泄過程。離體腎灌流與腸灌流模型綜合模擬了尿酸的排泄過程，在促尿酸排泄藥物的評價(jià)中起到重要的技術(shù)支持。

2.4 細(xì)胞藥理模型構(gòu)建

課題組圍繞尿酸生成、尿酸排泄、沉積致炎病理環(huán)節(jié)，構(gòu)建肝L02細(xì)胞模型、腸IEC-6、腸CaCo-2模型、腎HKC及HK2模型、尿酸鹽致巨噬細(xì)胞炎癥模型體系，可實(shí)現(xiàn)對肝臟尿酸生成代謝、腸道嘌呤吸收、腸道尿酸排泄、腎臟尿酸排泄以及尿酸鹽沉積致炎的藥理觀察與作用靶點(diǎn)機(jī)制分析。多種細(xì)胞藥理模型綜合運(yùn)用，在中藥干預(yù)腸道嘌呤吸收、體內(nèi)尿酸代謝、腸道與腎臟尿酸排泄的靶點(diǎn)及機(jī)制研究中具有突出優(yōu)勢。

2.5 分子生物學(xué)分析構(gòu)建

課題組在整體動物模型、器官模型及細(xì)胞模型的基礎(chǔ)上，以尿酸生成代謝、尿酸排泄及尿酸鹽沉積致炎靶點(diǎn)群為切入點(diǎn)，結(jié)合“成分-疾病靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)計(jì)算結(jié)果，利用分子生物學(xué)技術(shù)手段分析中藥成分對痛風(fēng)病的疾病靶點(diǎn)的綜合調(diào)控與干預(yù)，從蛋白及基因調(diào)控層面闡釋中藥的作用機(jī)制。

該效用機(jī)制研究平臺可涵蓋痛風(fēng)病發(fā)生發(fā)展過程中血尿酸水平升高、尿酸鹽沉積、沉積致炎的病理特點(diǎn)，同時(shí)具有反映中醫(yī)證候特征的客觀指標(biāo)，滿足研究防治痛風(fēng)病的藥物篩選與藥效評價(jià)技術(shù)需求。另外，該平臺各層次的應(yīng)用潛力還體現(xiàn)在與其他藥理基礎(chǔ)研究的聯(lián)合分析，如與基因組學(xué)、腸道組學(xué)、蛋白組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、代謝組學(xué)等現(xiàn)代藥理研究技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用。

3 研究平臺應(yīng)用

3.1 中藥及中藥復(fù)方降尿酸功效與機(jī)制研究

3.1.1 基于“病證結(jié)合”動物模型菊苣及菊苣復(fù)方降尿酸效果及機(jī)制研究

整體動物模型研究提示，菊苣可從多途徑降低血尿酸水平。菊苣提取物5～15 g/kg劑量下可顯著降低高尿酸血癥大鼠或鵪鶉模型的血尿酸水平[12-14]。高尿酸血癥大鼠模型實(shí)驗(yàn)顯示，其一菊苣提取物能上調(diào)空腸和回腸中ATP結(jié)合盒蛋白G蛋白亞家族成員2（ATP-binding Cassette of Half-transporter Protein，ABCG2）的mRNA及蛋白表達(dá)，使腸道肌酐排泄量及腸道尿酸排泄量明顯升高，促進(jìn)腸道尿酸排泄;其二菊苣提取物能降低可腎臟中尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體URAT1和GLUT9蛋白表達(dá)，抑制腎臟尿酸重吸收，從而促進(jìn)肌酐和尿酸的清除，顯著降低血清尿酸和肌酐水平。高尿酸血癥鵪鶉模型實(shí)驗(yàn)顯示，其一菊苣提取物可顯著抑制肝臟尿酸代謝酶XOD及ADA，減少尿酸的生成;其二菊苣提取物可上調(diào)鵪鶉腎臟轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)受體OAT1-LIKE、OAT3-LIKE的mRNA表達(dá)，促進(jìn)鵪鶉腎臟尿酸分泌。

本課題組以菊苣復(fù)方干預(yù)“脾虛濕盛”癥候的高尿酸血癥鵪鶉模型，鵪鶉“四診”表征候改善，表現(xiàn)為糞尿形狀改善，濕中及水分減少，氣味減輕，羽毛光澤、明亮，舌體呈現(xiàn)淡紅色。另外，菊苣顆粒治療鵪鶉高尿酸血癥并腹型肥胖（接近臨床“脾虛痰濕”證）的藥效研究發(fā)現(xiàn)，菊苣顆粒可有效降低鵪鶉血尿酸，并呈現(xiàn)出劑量依賴性，大劑量菊苣顆粒的降尿酸效果優(yōu)于小劑量。而其機(jī)制特點(diǎn)主要體現(xiàn)在菊苣顆?？梢种蒲錢OD活性，減少尿酸的生成，可從尿酸生成代謝環(huán)節(jié)防治高尿酸血癥[15]。

3.1.2 基于離體器官模型中藥降尿酸活性成分篩選及機(jī)制分析

本課題組建立的大鼠離體腎灌流及腸灌流模型在中藥降尿酸研究中提示，菊苣有效成分山萵苣苦素、菊苣萜苷K、菊苣萜苷E、秦皮甲素以及菊苣多糖與其代謝物質(zhì)可調(diào)控腸道尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體ABCG2，調(diào)控腎臟尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體GLUT9、URAT1、OAT1、OAT3等。在離體腎臟灌流及腸灌流模型中，直觀觀察尿酸經(jīng)腸道與腎臟途徑的排泄，檢測到腎臟輸尿管流出液與腸道灌流流出液中尿酸含量增高。

3.1.3 基于細(xì)胞模型中藥降尿酸活性成分確認(rèn)及降尿酸機(jī)制分析

本課題組建立小腸隱窩上皮細(xì)胞（IEC-6）模型，觀察菊苣成分菊苣酸和山萵苣苦素對腸道嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（CNT2）的影響[16]。IEC-6細(xì)胞可內(nèi)源性表達(dá)CNT2，具有生長快速、傳代穩(wěn)定等特點(diǎn)，具有腸上皮細(xì)胞的功能，能較好地模擬正常生理?xiàng)l件下腸道嘌呤核苷的轉(zhuǎn)運(yùn)過程。加入0.1 mmol/L菊苣酸后，腺苷底物轉(zhuǎn)運(yùn)量顯著減少（P<0.01），推測抑制腸道CNT2靶蛋白的活性從而減少腸道嘌呤吸收可能是菊苣降尿酸作用的機(jī)制之一。

3.2 中藥及中藥復(fù)方抑制尿酸鹽沉積的藥效特點(diǎn)及機(jī)制分析

本課題組建立的高鈣高蛋白飲食誘導(dǎo)的尿酸鹽內(nèi)臟沉積鵪鶉已用于參苓白術(shù)散、菊苣及芹槐的干預(yù)研究[17-18]。參苓白術(shù)散干預(yù)后，鵪鶉狀態(tài)逐漸好轉(zhuǎn)，毛色出現(xiàn)光澤，鵪鶉走動次數(shù)增加，舌質(zhì)逐漸恢復(fù)為鮮紅色;腎臟部位的尿酸鹽結(jié)晶隨給藥時(shí)間逐漸減少，在實(shí)驗(yàn)期間已基本消失。菊苣提取物可顯著緩解腎臟的尿酸鹽沉積狀況，同時(shí)表現(xiàn)出顯著的降尿酸效果、能夠顯著降低血清炎性反應(yīng)因子水平，推測菊苣提取物抑制尿酸鹽沉積的療效可能與促進(jìn)尿酸排泄相關(guān)。芹槐提取物可改善鵪鶉模型病理組織損傷，減少腎臟組織的尿酸鹽沉積，但高劑量芹槐提取物藥效不如低劑量芹槐提取物，與此同時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示芹槐低劑量組降尿酸效果也優(yōu)于芹槐高劑量組，提示芹槐提取物治療尿酸鹽沉積存在藥效劑量窗口。

3.3 中藥及中藥復(fù)方緩解尿酸鹽沉積致炎的藥效特點(diǎn)、有效成分及機(jī)制研究

3.3.1 基于動物模型中藥治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎藥效特點(diǎn)及機(jī)制研究

本課題組通過建立耳廓腫脹、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎等多種炎癥模型，采用醋酸扭體法、熱板反應(yīng)等疼痛實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)藥理研究，研究藥物的抗炎鎮(zhèn)痛作用。本課題組的實(shí)驗(yàn)研究表明，菊苣提取物可抑制關(guān)節(jié)腔注射尿酸鹽結(jié)晶誘導(dǎo)的急性痛風(fēng)炎癥。通過觀察菊苣為主的二秦菊苓湯對小鼠耳廓腫脹、醋酸扭體反應(yīng)、熱板反應(yīng)及痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)腫脹度、組織勻漿IL-1水平的影響[19]，證實(shí)二秦菊苓湯可抑制二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳廓腫脹、醋酸誘導(dǎo)的小鼠扭體反應(yīng)，提高小鼠痛閾值，還能干預(yù)關(guān)節(jié)局部炎癥小體NLRP3及IL-1、IL-6與TNF-α介導(dǎo)的炎癥通路，改善痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠的踝關(guān)節(jié)腫脹從而達(dá)到干預(yù)痛風(fēng)的目的。

3.3.2 基于細(xì)胞模型中藥緩解炎性反應(yīng)的有效成分及機(jī)制研究

本課題組從硫代乙醇肉湯處理的大鼠腹腔中分離出的巨噬細(xì)胞，可用于驗(yàn)證痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎與NF-κB、NLRP3信號通路的病理聯(lián)系[20]。經(jīng)過菊苣提取物和菊苣代表性成分菊苣酸干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，均可降低尿酸鹽結(jié)晶誘發(fā)巨噬細(xì)胞分泌的IL-1β水平，證實(shí)了菊苣提取物和菊苣酸的體外抗炎作用。同時(shí)經(jīng)過Western Blot技術(shù)分析NF-κB、NLRP3信號通路相關(guān)蛋白靶點(diǎn)活性，提示菊苣提取物及菊苣酸可抑制p-p65和NLRP3蛋白表達(dá)，通過NF-κB、NLRP3信號通路雙重抑制IL-1β的釋放。

本課題組另從尿酸誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激與“腸-腎”組織炎癥損傷關(guān)聯(lián)角度進(jìn)行探索分析，選用腸道上皮細(xì)胞Caco2、腎臟上皮細(xì)胞HKC塑造高尿酸血癥細(xì)胞模型[21]，觀察Caco2、HKC細(xì)胞中MDA、IL-6水平。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)高尿酸狀態(tài)下的Caco2、HKC細(xì)胞中MDA、IL-6水平均顯著升高，說明高尿酸誘發(fā)的炎癥損傷存在著氧化應(yīng)激的參與。菊苣提取物干預(yù)后，可顯著降低Caco2、HKC細(xì)胞中MDA、IL-6水平，提示菊苣提取物可抑制高尿酸狀態(tài)下氧化應(yīng)激狀況，改善“腸-腎”組織炎癥損傷。

4 結(jié)語與展望

本課題組構(gòu)建的痛風(fēng)病中藥效用機(jī)制研究平臺可作為痛風(fēng)病中藥藥效評價(jià)及篩選的基礎(chǔ)平臺。該平臺主要包括“成分-疾病”靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)分析、病證結(jié)合動物模型、器官模型、細(xì)胞模型、分子生物學(xué)5個(gè)層次，可覆蓋中藥成分驗(yàn)證研究、整體動物的尿酸代謝、尿酸鹽沉積、致炎情況藥理研究、靶器官對尿酸排泄轉(zhuǎn)運(yùn)的干預(yù)研究、細(xì)胞及分子藥理觀察與作用靶點(diǎn)機(jī)制分析等研究過程，貫通痛風(fēng)病發(fā)病全流程，從干預(yù)尿酸生成、排泄，尿酸鹽沉積及尿酸鹽致炎多方面系統(tǒng)評價(jià)中藥防治痛風(fēng)病藥效作用及特點(diǎn)，闡明中藥防治機(jī)制，可為臨床防治痛風(fēng)中藥的研發(fā)提供參考和指導(dǎo)。

目前，該平臺已對菊苣等中藥防治痛風(fēng)病的藥效開展評價(jià)研究及機(jī)制探索，研究結(jié)果提示菊苣可從減少尿酸的生成、促進(jìn)尿酸的排泄以降尿酸，緩解尿酸鹽沉積，抑制尿酸鹽致炎三方面綜合防治痛風(fēng)病的發(fā)生、發(fā)展。該平臺為痛風(fēng)病的中藥開發(fā)研究提供合適實(shí)驗(yàn)方法和科學(xué)依據(jù)等，通過對中藥的藥效進(jìn)行評價(jià)研究，闡明防治痛風(fēng)病中藥的藥理機(jī)制，可為客觀詮釋中藥防治痛風(fēng)藥效提供科學(xué)依據(jù)，為抗痛風(fēng)病中藥的繼承和創(chuàng)新研究提供新思路和新方法，切實(shí)服務(wù)于臨床痛風(fēng)病的治療和藥物研發(fā)。

隨著痛風(fēng)病中藥效用機(jī)制研究平臺建立，活性成分及其藥理作用將得到充分挖掘，中醫(yī)藥防治痛風(fēng)病研究工作的不斷深入，將進(jìn)一步推動痛風(fēng)病病理、藥理研究發(fā)展，為臨床提供可滿足痛風(fēng)病患者需求的優(yōu)質(zhì)中藥，為抗痛風(fēng)病中藥的開發(fā)和利用提供更加廣闊的前景。

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（2020-12-10收稿 責(zé)任編輯：徐穎）

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（U20A20406，81673618）;國家科技重大專項(xiàng)“重大新藥創(chuàng)制”項(xiàng)目（2017ZX09301024）

作者簡介：林志健（1983.05—），男，博士，副教授，執(zhí)業(yè)藥師，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向：中藥防治代謝性疾病研究，E-mail：linzhijian83@126.com

通信作者：張冰（1959.08—），女，博士，教授，主任醫(yī)師，博士研究生導(dǎo)師，研究方向：中藥防治代謝性疾病研究，E-mail：zhangbing6@263.net