黃 河
(遼寧省鹽堿地利用研究所, 遼寧 盤錦 124010)
水稻是中國一半以上人口的主糧,世界人均四分之一的食物熱量來源,也是全球最主要的糧食作物之一[1]。 隨著人民生活水平的提高,膳食結(jié)構(gòu)和食用習(xí)慣發(fā)生了重大改變,對稻米品質(zhì)的要求越來越高[2]。 種質(zhì)資源是水稻品種選育的基礎(chǔ)。 但隨著育種時間的推移,水稻親本應(yīng)用愈加向少數(shù)骨干親本集中。 而僅利用少數(shù)骨干親本,勢必帶來育成品種遺傳單一性的問題。 同時,水稻品種推廣的單一化,導(dǎo)致大量優(yōu)良基因喪失和遺傳基礎(chǔ)狹窄,進(jìn)而造成產(chǎn)量水平難以突破和抗性的遺傳脆弱性[3]。 因此,廣泛收集水稻種質(zhì)資源并進(jìn)行深入評價與鑒定對水稻育種及稻作發(fā)展具有重要的現(xiàn)實意義。 Frankel[4]于1984 年首先提出“核心樣品”的概念,并與Brown[5]將其進(jìn)一步發(fā)展。 即從整個種質(zhì)遺傳資源中選擇一部分樣本,以最小的資源數(shù)量和遺傳重復(fù),盡可能最大限度代表整個資源的多樣性。 核心種質(zhì)的提出為遺傳資源的研究和利用提供了嶄新的解決途徑。本研究旨在對遼寧省部分育成水稻品種品質(zhì)性狀多樣性進(jìn)行分析,并初步構(gòu)建可利用的核心樣品,為今后水稻品質(zhì)育種中親本選擇提供依據(jù)。
選用170 份1981~2015 年遼寧省審定的部分水稻品種。 2020 年將全部品種種植于遼寧省鹽堿地利用研究所試驗田,順序排列,行株距30.0 cm×13.3 cm,每小區(qū)面積7.2 m2,田間管理與大田相同。
1.2.1 品質(zhì)性狀測定 依據(jù)農(nóng)業(yè)部部頒標(biāo)準(zhǔn)NY147-88[6]方法對供試品種的糙米率、精米率、整精米率、粒長、籽粒長寬比、堊白粒率、堊白度、堿消值、膠稠度、直鏈淀粉含量、 蛋白質(zhì)含量等11 項品質(zhì)性狀進(jìn)行測定。 透明度由SDT-A 型稻米透明度測定儀直接測出。
1.2.2 多樣性指數(shù) 采用Shannon-Wiener 多樣性指數(shù)計算不同性狀多樣性。先計算各群體全部材料各性狀的總體平均值(X)和標(biāo)準(zhǔn)差(δ),劃分為10 級,從第1 級[Xi<(X-2δ)]到第10 級[Xi>(X+2δ)],每0.5δ 為一級,每一級的相對頻率用于計算多樣性指數(shù)。
式中,H′為多樣性指數(shù),pi為某性狀第i 個級別內(nèi)材料份數(shù)占總份數(shù)的百分?jǐn)?shù),ln 為自然對數(shù)[7]。
1.2.3 主坐標(biāo)分析 將全部品種12 個品質(zhì)性狀值在NTSYS2.10e 軟件上進(jìn)行主坐標(biāo)分析(PCO),并依據(jù)引起變異的第1、2、3 主坐標(biāo)作出全部品種的3D 散點(diǎn)分布圖。1.2.4 核心樣本選擇 在品質(zhì)性狀主坐標(biāo)分析的基礎(chǔ)上,對170 份水稻品種進(jìn)行分類。 取樣比例設(shè)為25%。 每個類群內(nèi)品種在所有性狀值標(biāo)準(zhǔn)化后根據(jù)歐氏距離大小,采用類平均法進(jìn)行系統(tǒng)聚類;聚類后用優(yōu)先取樣法找出最大值和最小值的試材,并作為核心材料保留,其余核心材料則用隨機(jī)取樣法抽取。 采用平均性狀極差符合率(CR)、變異系數(shù)變化率(VR)、多樣性指數(shù)率(H)3 個參數(shù)作為核心親本種質(zhì)群體優(yōu)劣的評價指標(biāo)[8]。
式中:n 為性狀個數(shù),RiC、RiI分別為核心樣本群體和初始群體對應(yīng)各性狀極差,CViC、CViI分別為核心樣本群體和初始群體對應(yīng)各性狀變異系數(shù),H'iC、H'iI分別為核心樣本群體和初始群體對應(yīng)各性狀多樣性指數(shù)。
由表1 可見, 所分析的170 份水稻品種12 個品質(zhì)性狀變異系數(shù)在1.18%~100%。其中堊白度、堊白粒率變異最大,變異系數(shù)分別為100%和63.69%,變幅分別為0.1%~16.8%、2%~57%;其次為膠稠度變異系數(shù)為13.32%,變幅為52~100;糙米率、精米率、粒長、整精米率、籽粒長寬比、堿消值、直鏈淀粉含量、透明度、蛋白質(zhì)含量變異系數(shù)在1.18%~9.05%, 變 幅 分 別 為80.5%~85.8%、70.3%~80%、4.4mm~5.7mm、54.5%~76%、1.6~2.2、4.8 級~7.0 級、13.9%~22.2%、0.51~0.82、5.9%~10.4%。從Shannon-Wiener 多樣性指數(shù)上看,直鏈淀粉含量、精米率、蛋白質(zhì)含量、糙米率、膠稠度多樣性指數(shù)大于2.0;粒長、整精米率、堊白粒率、透明度多樣性指數(shù)在1.809~1.952;籽粒長寬比、堊白度多樣性指 數(shù) 分 別 為1.435、1.514, 而 堿 消 值 多 樣 性 指 數(shù) 只 有0.693。 表明,170 份水稻品種品質(zhì)性狀具有一定的形態(tài)變異和多樣性水平,可為優(yōu)質(zhì)育種親本選擇提供豐富的親本來源。
表1 170 份水稻品種品質(zhì)性狀表現(xiàn)
由圖1 可見,170 份水稻品種對品質(zhì)性狀進(jìn)行主坐標(biāo)分析,可劃分為5 個類群。 第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ類群包括品種數(shù)分別占品種總數(shù)的8.81%、24.71%、24.71%、34.12%、7.65%。 對不同類群品種進(jìn)行核心樣本構(gòu)建,第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ類群品種中核心樣本品種分別4 份、10 份、10 份、15份、3 份,共42 份水稻品種。
圖1 核心樣本用非核心樣本品質(zhì)性狀主坐標(biāo)排序
由表2 可見,42 份水稻核心樣本品種12 個品質(zhì)性狀變異系數(shù)在1.40%~81.11%。 其中堊白度、堊白粒率變異最大,變異系數(shù)分別為81.11%和62.56%,變幅分別為0.2%~10.7%和2%~55%; 其次為膠稠度變異系數(shù)為15.81%,變幅為52~100;糙米率、精米率、整精米率、粒長、堿消值、籽粒長寬比、直鏈淀粉含量、透明度、蛋白質(zhì)含量變異系數(shù)在1.40%~9.04%, 變幅分別為80.5%~85.8%、70.3%~78.4%、59.6% ~73.3% 、4.4mm ~5.7mm、5.3 級~7.0 級、1.6 ~2.2、13.9%~21.4%、0.55~0.80、5.9%~9.4%。 從Shannon-Wiener多樣性指數(shù)上看, 只有糙米率多樣性指數(shù)大于2.0; 堊白度、堊白粒率、蛋白質(zhì)含量、直鏈淀粉含量、精米率、透明度、膠稠度多樣性指數(shù)在1.834~1.987;籽粒長寬比、粒長、整精米率多樣性指數(shù)分別為1.505、1.741、1.796,堿消值多樣性指數(shù)也只有0.739。
表2 42 份水稻核心樣本品種品質(zhì)性狀表現(xiàn)
由表3 可見,極差符合率(CR)在62.87%~100%,其中糙米率、粒長、籽粒長寬比、膠稠度最大均為100%,透明度、精米率、直鏈淀粉含量、堊白粒率在80.65%~96.36%,堊白度、 整精米率、 堿消值、 蛋白質(zhì)含量在62.87%~77.78%, 平均值為86.04%。 變異系數(shù)變化率 (VR)在81.11%~128.44%,其中透明度、堿消值、籽粒長寬比、糙米率、 膠稠度、 精米率、 直鏈淀粉含量、 粒長在100%~128.44%, 堊白度、 整精米率、 堊白粒率、 蛋白質(zhì)含量在81.11%~99.89%,平均值為109.31%。 多樣性指數(shù)率(H)在94.41%~121.14%,其中透明度、籽粒長寬比、堿消值、堊白度在101.64%~121.14%,蛋白質(zhì)含量、膠稠度、整精米率、粒長、糙米率、精米率、直鏈淀粉含量、堊白粒率在94.41%~99.27%,平均值為100.75%。
表3 42 份水稻核心樣本群體評價參數(shù)
由表4 可見,核心樣本品種不同類群在糙米率、精米率、粒長、籽粒長寬比、堊白度、堿消值共6 個性狀上的差異達(dá)到顯著或極顯著水平。 其中,第Ⅰ類群糙米率、精米率、堿消值較高,粒長較短,籽粒長寬比較小,堊白度較低;第Ⅱ類群糙米率、精米率較低,籽粒長寬比較小,堿消值較高;第Ⅲ類群粒長較長,籽粒長寬比較大,堿消值較高;第Ⅳ類群粒長較長,籽粒長寬比較大;第Ⅴ類群粒長較短,籽粒長寬比較大,堊白度較高,堿消值較低。 表明,不同類群水稻核心樣本品種在部分品質(zhì)性狀上區(qū)別明顯,并形成具有不同特點(diǎn)的類型組合。
表4 水稻核心樣本不同類群品種品質(zhì)性狀比較
林世成等[9]對212 個早粳品種原始親本進(jìn)行追溯,發(fā)現(xiàn)97.2%的選育品種都具有日本品種的親緣。 劉傳光等[10]分析了95 個華南地區(qū)不同年代常規(guī)秈稻主栽品種的親緣關(guān)系,結(jié)果顯示華南地區(qū)秈稻品種的遺傳多樣性狹窄且隨年代而變化,20 世紀(jì)70 年代以后呈下降趨勢,并且華南地區(qū)各時期的常規(guī)稻品種遺傳改良都是圍繞少數(shù)骨干親本進(jìn)行。 因此,廣泛收集各種優(yōu)異稻種資源和拓寬水稻品種遺傳基礎(chǔ),提高品種遺傳多樣性是水稻育種的現(xiàn)實性問題。
核心樣本為育種者提供一個規(guī)模相對較小、遺傳多樣性相對較大的遺傳育種資源群體。在此基礎(chǔ)上利用核心種質(zhì)的代表性,發(fā)展新的種質(zhì)評價方法,篩選需要的性狀,可提高育種效率[11-12]。 李自超等[13]對國家作種質(zhì)庫編目入庫的50 526 份中國地方稻種資源研究, 以計算機(jī)提取6%,加上人工定向取樣增加優(yōu)異種質(zhì)和極值材料約2%, 使初級核心種質(zhì)總數(shù)達(dá)4 000 份。 孫強(qiáng)等[14]等構(gòu)建了包括477份稻種的吉林省稻種資源核心種質(zhì)庫。 黎毛毛等[15]等以3 187 份江西地方稻種資源為材料, 利用SSR 標(biāo)記對進(jìn)行遺傳多樣性和聚類分析,建立了包括296 份種質(zhì)的江西地方稻種資源核心種質(zhì)庫。 為種質(zhì)資源利用提供了必要條件。
本研究中170 份水稻品種12 個品質(zhì)性狀變異系數(shù)在1.18%~100%,平均值為18.87%。 多樣性指數(shù)在在1.809~1.952,平均值為1.786。具有較好的表型多樣性。而構(gòu)建的核心樣本群體12 個品質(zhì)性狀變異系數(shù)在1.40%~81.11%,平均值為17.81%。多樣性指數(shù)在在0.739~2.036,平均值為1.783。 平均性狀極差符合率(CR)、變異系數(shù)變化率(VR)、多 樣 性 指 數(shù) 率 (H)3 個 參 數(shù) 分 別 為86.04%、109.31%、100.75%。 表明,本研究中構(gòu)建的42 個水稻品質(zhì)核心樣本群體可代表原始群體80%以上表型多樣性,這對核心樣本的利用程度具有現(xiàn)實的指示作用。 同時,主坐標(biāo)及方差分析表明,42 個核心樣本所形成品質(zhì)性狀有明顯差異的5個品質(zhì)性狀類群,為具體親本選擇指明了方向。