王 瓊，劉遠(yuǎn)杰，陳江格，李志猛，劉 瑋，姜雪茹，喻蘇琴

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 林學(xué)院/江西省森林培育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330045）

【研究意義】Pb 污染是最常見(jiàn)的土壤重金屬污染之一[1]。城市中由于交通、工業(yè)、商業(yè)等活動(dòng)導(dǎo)致土壤Pb 污染尤為嚴(yán)重[2-3]。Pb 是植物非必需元素，微量就會(huì)對(duì)植物造成毒害[4]，輕則紊亂植物的代謝過(guò)程，重則導(dǎo)致植物死亡[5]。叢枝菌根真菌（Arbuscular mycorrhizalfungi，AMF）是土壤中的重要微生物，能與90%以上的植物形成共生關(guān)系，不僅可以改善宿主植物的生長(zhǎng)發(fā)育，而且可以提高植物的抗重金屬脅迫能力[6-8]。樟樹(shù)[Cinnamomum camphor（L.）Presl]是樟科樟屬常綠喬木，是我國(guó)珍貴的綠化、用材和經(jīng)濟(jì)樹(shù)種[9]。作為城市園林中普遍應(yīng)用的綠化樹(shù)種，其生長(zhǎng)環(huán)境易受Pb污染脅迫。因此，研究樟樹(shù)的耐Pb能力及其與AMF 的關(guān)系具有重要意義，可為探索菌根化育苗在Pb 污染環(huán)境中的應(yīng)用提供參考，同時(shí)豐富AMF在城市生態(tài)環(huán)境中應(yīng)用的理論和技術(shù)?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】AMF可通過(guò)菌絲對(duì)重金屬過(guò)濾、吸收和固持等降低重金屬對(duì)植物組織造成的傷害，或者通過(guò)改善植物營(yíng)養(yǎng)條件、調(diào)節(jié)生理狀態(tài)進(jìn)而促進(jìn)生長(zhǎng)，間接增強(qiáng)植物的重金屬耐受性[10-11]。Pb 脅迫下玉米接種AMF 后，植株生物量提高，土壤中Pb 的生物有效性降低，改善了玉米的光合生理和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)[12]。Pb脅迫下接種AMF提高景天三七的葉綠素含量，增強(qiáng)酶活性，降低丙二醛含量和體內(nèi)Pb積累量，明顯緩解Pb對(duì)景天三七的傷害，增強(qiáng)其抗逆性[13]。有關(guān)Pb脅迫對(duì)樟樹(shù)生長(zhǎng)的影響，已有研究表明低濃度Pb 對(duì)樟樹(shù)幼苗沒(méi)有明顯傷害甚至促進(jìn)生長(zhǎng)，高濃度Pb 會(huì)導(dǎo)致幼苗長(zhǎng)勢(shì)衰弱，生長(zhǎng)量下降，生長(zhǎng)緩慢，甚至死亡[14]?？梢?jiàn)樟樹(shù)幼苗對(duì)Pb 脅迫有一定的抗性，但是當(dāng)Pb 濃度較高時(shí)其生長(zhǎng)和生理都受影響?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】長(zhǎng)期生長(zhǎng)在重金屬污染土壤中的植物會(huì)逐漸產(chǎn)生一定的耐受性，而接種AMF 可能會(huì)進(jìn)一步提高這種耐受性[15-16]。研究表明，AMF 能夠促進(jìn)樟樹(shù)幼苗的生長(zhǎng)，也可以緩解樟樹(shù)幼苗的輕度Al 脅迫傷害[17]。但是，AMF 與樟樹(shù)幼苗Pb 耐受性關(guān)系的相關(guān)研究還未見(jiàn)報(bào)道。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究擬通過(guò)盆栽試驗(yàn)，探究不同Pb 濃度下接種AMF 對(duì)樟樹(shù)幼苗生長(zhǎng)和生理的影響，闡明AMF 對(duì)樟樹(shù)幼苗Pb耐受性的影響及機(jī)制，為菌根化樟樹(shù)幼苗在Pb污染環(huán)境中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以樟樹(shù)二年生實(shí)生幼苗為研究對(duì)象進(jìn)行盆栽試驗(yàn)。盆規(guī)格：上口徑、下口徑和高分別是24 cm、17 cm和13 cm。盆栽基質(zhì)用園土、泥炭、河沙、珍珠巖和石英砂5 種按2∶1∶1∶1∶1 的體積比混合而成，過(guò)2 mm篩，經(jīng)高溫（121 ℃）高壓（0.1 MPa）蒸汽滅菌0.5 h，自然冷卻，備用?；A(chǔ)性狀：全氮0.94 g/kg，有效磷7.23 mg/kg，速效鉀114 mg/kg，有效Pb 1.25 mg/kg，pH為7.02。

1.2 試驗(yàn)方法

采用雙因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)因素一為AMF 處理，分為接種與不接種處理（CK），其中接種處理的菌種為近明球囊霉（Claroideoglomus claroideum）。試驗(yàn)因素二為Pb 濃度處理，設(shè)置4 個(gè)梯度，分別是0（Pb0）、1（Pb1）、2（Pb2）、4 mmol/L（Pb3），以Pb（NO3）2作為Pb 源。一共8 個(gè)處理，每個(gè)處理17 株樟樹(shù)幼苗，共136株。

2019 年3 月17 日進(jìn)行上盆和接種處理。具體過(guò)程為：先在盆底墊上一張濾紙，每盆先統(tǒng)一填入1.3 kg 滅菌基質(zhì)，然后接種組放入44 g接種劑，不接種組放入44 g滅菌基質(zhì)，放入樟樹(shù)幼苗1株，最后覆蓋0.8 kg滅菌基質(zhì)。栽植好后每盆統(tǒng)一澆純水500 mL，放置于江西農(nóng)業(yè)大學(xué)（28°45'N，115°50'E）苗圃基地溫室進(jìn)行正常養(yǎng)護(hù)。

2019 年4 月30 日進(jìn)行Pb 濃度處理。按設(shè)置好的濃度配置Pb（NO3）2溶液，同時(shí)加入不等量的NH4NO3，其添加量的原則要使得所有樟樹(shù)苗獲得的氮素養(yǎng)分等量。將配好的溶液澆灌樟樹(shù)盆土，每盆500 mL。Pb 處理只進(jìn)行1 次。按盆土質(zhì)量（2.144 kg）折算后，4 個(gè)Pb 濃度梯度分別相當(dāng)于0（Pb0）、48.32（Pb1）、96.64（Pb2）、193.19 mg/kg（Pb3）。后期正常養(yǎng)護(hù)，其中澆水管理均采用純水澆灌。

1.3 葉片生理指標(biāo)測(cè)定

2019 年7 月16 日采集植株葉片。選擇枝條中部健康無(wú)病蟲(chóng)害的成熟葉片，每個(gè)處理17 株中，混合采樣3 份，作為3 個(gè)重復(fù)。葉片采下后立即用液氮速凍，然后保存于-80 ℃冰箱中，用于生理指標(biāo)測(cè)定。測(cè)定方法：氮藍(lán)四唑光化還原法測(cè)定超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD），高錳酸鉀滴定測(cè)定過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT），愈創(chuàng)木酚氧化法測(cè)定過(guò)氧化物酶（Peroxidase，POD），硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛（Malondialdehyde，MDA），酸性茚三酮法測(cè)定脯氨酸（Proline，Pro），蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖，考馬斯亮藍(lán)G-250蛋白染色法測(cè)定可溶性蛋白。

1.4 植株生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

2019年7月29日測(cè)量株高和地徑。株高采用鋼卷尺測(cè)定，地徑采用游標(biāo)卡尺測(cè)量。

2019 年8 月4 日收苗，進(jìn)行根系形態(tài)和生物量測(cè)定。將樟樹(shù)苗從花盆中取出，用水將根系洗凈。利用EPSON Scan 根系掃描儀對(duì)根系掃描，用WinRHIZO Pro 2016a 根系圖像分析軟件分析根系各形態(tài)指標(biāo)。將所有苗分成根、莖、葉三部分，分別裝入信封，放進(jìn)烘箱進(jìn)行烘干處理（先在105 ℃下烘0.5 h，殺青，然后在70 ℃下烘干至恒重），稱(chēng)量各部分干質(zhì)量，獲得各器官生物量數(shù)據(jù)，3 個(gè)器官相加得全株的生物量干質(zhì)量數(shù)據(jù)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2019進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和圖表繪制，SPSS 26.0進(jìn)行雙因素方差分析和Duncan多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 Pb脅迫下接種AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗株高和地徑的影響

結(jié)果表明（圖1），接種AMF 和Pb 濃度處理對(duì)幼苗的株高和地徑都有極顯著影響，2個(gè)因素之間也存在顯著的交互作用。

圖1 Pb脅迫下AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗株高和地徑的影響Fig.1 Effects of AMF on plant height and ground diameter of Cinnamomum camphora（L.）Presl Seedlings under Pb stress

在CK 組，不同Pb 濃度下的幼苗株高和地徑無(wú)顯著差異；而AMF 組，與Pb0 相比，株高在Pb3 處理顯著降低，地徑從Pb1 處理開(kāi)始下降。與CK 組相比，在Pb0～Pb3 的梯度處理中，AMF 組幼苗的株高分別增加145%、141%、155%和96%，地徑分別增加73%、61%、59%和53%（P＜0.05）。說(shuō)明AMF 在0～4 mmol/L 的Pb 濃度對(duì)幼苗植株的高、粗生長(zhǎng)都有明顯的促進(jìn)作用，但是高Pb 濃度下這種促進(jìn)作用會(huì)減小。

2.2 Pb脅迫下接種AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗根系形態(tài)的影響

圖2可知，AMF接種處理對(duì)幼苗各根系形態(tài)指標(biāo)均有極顯著影響，Pb濃度處理只對(duì)幼苗的根系表面積和根體積有顯著影響，交互作用除根平均直徑不顯著外，其余根系指標(biāo)均呈極顯著效應(yīng)。

圖2 Pb脅迫下AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗根形態(tài)的影響Fig.2 Effects of AMF on root morphology of Cinnamomum camphora（L.）Presl Seedlings under Pb stress

在CK 組，幼苗的根系形態(tài)在不同Pb 濃度下變化不大，僅Pb3 濃度的總根表面積和平均根直徑顯著高于Pb1 處理。在AMF 組，與Pb0 相比，各濃度的Pb 處理對(duì)幼苗的根系都產(chǎn)生了不同程度的抑制作用，以Pb3 濃度的抑制程度最大，表現(xiàn)為它的4 個(gè)根系形態(tài)指標(biāo)都顯著小于Pb0。與株高和地徑一樣，相比CK 組，AMF 接種后在所有Pb 處理中都顯著增大了幼苗的總根長(zhǎng)、根表面積、根體積和平均根直徑。說(shuō)明AMF在0～4 mmol/L的Pb濃度都可以有效促進(jìn)幼苗的根系生長(zhǎng)。

2.3 Pb脅迫下接種AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗生物量的影響

結(jié)果表明（表1），AMF 接種處理對(duì)幼苗的莖生物量影響不顯著外，各器官及全株生物量都有極顯著影響，Pb處理只對(duì)葉的生物量有顯著影響，交互作用除了對(duì)莖生物量不顯著外，對(duì)根、葉生物量和總生物量都有顯著或極顯著影響。

表1 Pb脅迫下AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗生物量的影響Tab.1 Effects of AMF on biomass of Cinnamomum camphora（L.）Presl Seedlings under Pb stress

在CK 組，幼苗的各器官生物量和總生物量均未受到Pb 處理的影響。在AMF 組，與Pb0 相比，各濃度的Pb 處理均減小了根系生物量。莖、葉生物量隨Pb 濃度升高呈先增大后減小的變化規(guī)律，莖生物量在Pb1 達(dá)到最大，葉生物量在Pb2 達(dá)到最大，同時(shí)它們都在Pb3 最小。從全株總生物量來(lái)看，Pb1 和Pb2處理的總生物量與Pb0沒(méi)有差異，Pb3處理下總生物量顯著減小。

與CK 組相比，在各個(gè)Pb 濃度處理中，AMF 組幼苗的根、莖、葉生物量和全株總生物量都顯著高于CK 組，且提高幅度都比較大。就總生物量而言，在Pb0～Pb3的濃度梯度中，AMF接種后總生物量分別提高4.60 倍、4.59 倍、5.57 倍和3.65 倍，Pb2 處理提高最多，Pb3 處理提高最少。說(shuō)明AMF 在4 種Pb 處理下對(duì)幼苗的生物量都有非常明顯的促進(jìn)作用，但是當(dāng)Pb濃度較高時(shí)會(huì)抑制這種促進(jìn)作用。

結(jié)合前面的株高、地徑和根系形態(tài)指標(biāo)，雖然在CK組中，Pb濃度處理基本未對(duì)幼苗的生長(zhǎng)造成負(fù)面影響，但是植株的大小和生長(zhǎng)量整體都很小，遠(yuǎn)低于AMF 組。接種AMF 在4 種Pb 處理中都能對(duì)幼苗的生長(zhǎng)起到很大的促進(jìn)作用，但是當(dāng)Pb濃度達(dá)到4 mmol/L時(shí)會(huì)減小這種促進(jìn)作用。

2.4 Pb脅迫下接種AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗葉片生理指標(biāo)的影響

不同Pb 濃度、AMF 接種處理以及二者的交互作用均極顯著影響幼苗葉片的生理指標(biāo)（表2）。首先從抗氧化酶指標(biāo)來(lái)看，與CK 組比，AMF 組在所有Pb 處理下均降低了SOD 活性，但是極大增強(qiáng)了POD 活性。CAT 活性的變化則在不同Pb 濃度下表現(xiàn)不同，在Pb0 和Pb2 處理中接種組的CAT 活性更大，在Pb1和Pb3處理中CK組的CAT活性更大。在CK組中，POD活性沒(méi)有變化；SOD活性隨著Pb濃度的梯度先降低后升高，Pb1處理最小，Pb3處理最大，顯著高于Pb0；CAT活性的變化沒(méi)有規(guī)律，Pb2處理與Pb0沒(méi)有差異，Pb1、Pb3 處理下CAT 活性增大。在AMF 組，POD 活性在不同Pb 濃度下有差異，Pb2、Pb3 處理的POD活性高于Pb0和Pb1處理；SOD活性與CK組一樣，也是以Pb1處理最小，但是Pb2、Pb3處理與Pb0相比沒(méi)有差異；CAT活性隨Pb濃度梯度逐漸降低，在Pb0最大，Pb3最小?？梢?jiàn)，兩組幼苗中抗氧化酶活性對(duì)Pb的響應(yīng)存在很大差異。

表2 Pb脅迫下AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗生理指標(biāo)的影響Tab.2 Effects of AMF on physiological parameters of Cinnamomum camphora（L.）Presl Seedlings under Pb stress

丙二醛（MDA）是細(xì)胞膜脂過(guò)氧化的最終產(chǎn)物，其含量的變化可反映組織的過(guò)氧化程度，間接反映細(xì)胞的受損程度，是抗性生理研究中的常用指標(biāo)。AMF 組與CK 組的MDA 含量在Pb0時(shí)沒(méi)有差異，但是在Pb1～Pb3處理下，AMF組的MDA含量都顯著低于CK組。說(shuō)明在Pb脅迫環(huán)境下，AMF幫助宿主植物減小了膜脂過(guò)氧化程度，減輕了Pb 帶來(lái)的傷害。從Pb 的影響來(lái)看，與Pb0 相比，CK 組中Pb1 處理MDA 含量降低，Pb2、Pb3處理沒(méi)有變化；AMF組中3種濃度的Pb處理的MDA 含量都降低?？梢?jiàn)，兩組幼苗的MDA含量都沒(méi)有隨Pb濃度升高而增大，說(shuō)明本試驗(yàn)設(shè)置的Pb濃度范圍內(nèi)，兩組幼苗都沒(méi)有受到明顯的Pb毒害。但是AMF組產(chǎn)生的MDA更少，反映出AMF的存在使得幼苗更有利于在含Pb環(huán)境中生長(zhǎng)。

在所有Pb處理中，與CK組相比，AMF組幼苗的Pro和可溶性蛋白含量顯著降低，可溶性糖含量顯著增加。植物在逆境或遭受脅迫時(shí)，通常會(huì)主動(dòng)積累一些物質(zhì)來(lái)提高細(xì)胞液濃度，降低滲透勢(shì)，提高細(xì)胞吸水或保水能力，從而適應(yīng)脅迫環(huán)境。Pro、可溶性蛋白和可溶性糖都是植物體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，同時(shí)可溶性糖還是植物生長(zhǎng)發(fā)育的能量物質(zhì)。上述結(jié)果說(shuō)明，無(wú)論在何種Pb條件下，CK 相比AMF接種而言對(duì)樟樹(shù)幼苗都是更不利的生長(zhǎng)環(huán)境，因而產(chǎn)生了更多的Pro 和可溶性蛋白進(jìn)行滲透調(diào)節(jié)。而AMF組可能主要通過(guò)積累可溶性糖來(lái)應(yīng)對(duì)Pb脅迫環(huán)境，同時(shí)可溶性糖含量的增加還為促進(jìn)幼苗的生長(zhǎng)提供能量保障。在兩組幼苗中，Pro、可溶性蛋白和可溶性糖在不同Pb濃度處理的變化規(guī)律也不相同。在CK組，Pb1 處理的3 種物質(zhì)的含量與Pb0 相比無(wú)差異，Pb2、Pb3 處理的可溶性蛋白含量增加，可溶性糖含量減少，Pb3 處理的Pro 含量也減少。AMF 組中，與Pb0 相比，3 種含Pb 處理下可溶性蛋白無(wú)顯著變化，而Pro含量都顯著增加。說(shuō)明AMF影響了幼苗應(yīng)對(duì)Pb脅迫的滲透調(diào)節(jié)策略。

3 討論

3.1 不同Pb濃度下AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗生長(zhǎng)的影響

Pb 脅迫下的玉米[18]、小麥[19]等研究均發(fā)現(xiàn)接種AMF 可以緩解Pb 脅迫對(duì)宿主植物生長(zhǎng)造成的傷害。與這些研究結(jié)果一致，本研究發(fā)現(xiàn)在不同Pb濃度處理中，接種AMF均顯著增大樟樹(shù)幼苗的株高和地徑，促進(jìn)根系發(fā)育，提高生物量，明顯促進(jìn)樟樹(shù)幼苗生長(zhǎng)。一般認(rèn)為，AMF 能夠通過(guò)影響植物對(duì)重金屬的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和積累，加強(qiáng)植物對(duì)土壤中水分、養(yǎng)分的吸收，影響植物的生理生化代謝等方面，來(lái)促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高宿主植物對(duì)重金屬的耐性[20-21]。

有關(guān)Pb脅迫對(duì)植物生長(zhǎng)的影響，前人已有許多研究。馬英超[22]發(fā)現(xiàn)構(gòu)樹(shù)幼苗在低Pb濃度（150 mg/kg）下生長(zhǎng)良好，起促進(jìn)作用；而中高Pb 濃度（450～1 500 mg/kg）脅迫對(duì)構(gòu)樹(shù)幼苗的生長(zhǎng)造成傷害，起抑制作用。趙英鵬[13]指出當(dāng)Pb 濃度為250 mg/kg 時(shí)景天三七的根長(zhǎng)和莖粗未受Pb 處理影響，但隨著Pb 濃度增加，其根長(zhǎng)和莖粗顯著減少，在1 000 mg/kg時(shí)達(dá)到最低。本試驗(yàn)的結(jié)果表明，AMF組幼苗在最高Pb濃度（4 mmol/L）下與Pb0相比生長(zhǎng)受到一定抑制，CK組幼苗的生長(zhǎng)在4種不同Pb濃度之間沒(méi)有明顯的差異，但是整體長(zhǎng)勢(shì)比AMF 組差很多（從生長(zhǎng)數(shù)據(jù)可知）。CK 組幼苗的生長(zhǎng)沒(méi)有受到明顯的Pb 脅迫影響，一方面是由于本研究中所設(shè)置的Pb濃度不高，而樟樹(shù)本身對(duì)Pb有一定的耐性[14]。另一方面在試驗(yàn)中觀察到CK 組幼苗植株矮小，葉片偏黃，長(zhǎng)勢(shì)較弱，因而推測(cè)其根系吸收能力較差，導(dǎo)致對(duì)土壤中的Pb吸收不多。而AMF 組幼苗相對(duì)長(zhǎng)勢(shì)旺盛，根系吸收能力強(qiáng)，并且AMF 的菌絲對(duì)土壤Pb 也會(huì)有一定的吸收，因而可能有更多的Pb進(jìn)入幼苗體內(nèi)，致使高濃度下生長(zhǎng)受到抑制。黃麗[23]在關(guān)于AMF對(duì)刺槐耐Pb能力的研究結(jié)果中也表明，接種刺槐的根部總Pb含量明顯高于不接種處理。本試驗(yàn)中接種的樟樹(shù)幼苗在高濃度（4 mmol/L）下生長(zhǎng)受限的具體原因還有待于進(jìn)一步探索。

3.2 不同Pb濃度下AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗生理的影響

在重金屬脅迫環(huán)境中，影響植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要原因之一是植物體內(nèi)產(chǎn)生了大量的活性氧集團(tuán)，使細(xì)胞膜系統(tǒng)受到傷害，甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡[24]。同時(shí)植物會(huì)通過(guò)激活抗氧化酶和增加Pro等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來(lái)消除活性氧，防止細(xì)胞膜質(zhì)過(guò)氧化，減輕細(xì)胞傷害。SOD、POD 和CAT是植物體內(nèi)最主要的抗氧化酶，它們?cè)诜烙矬w氧化損傷方面起到重要作用[25]。有關(guān)Pb脅迫下AMF 對(duì)宿主植物抗氧化酶的影響，大部分研究認(rèn)為接種AMF 后植物的抗氧化酶活性提高。譚靈杰等[26]發(fā)現(xiàn)Pb 污染環(huán)境下接種AMF 的美洲黑楊葉片的POD 和SOD 活性均提高。趙英鵬[13]也發(fā)現(xiàn)，Pb脅迫下接種AMF 后，景天三七的SOD、POD 與CAT 活性提高，降低了自由基的產(chǎn)生速度，對(duì)景天三七起到了一定的保護(hù)作用。而本研究結(jié)果表明，在所有Pb 處理中，AMF 接種后樟樹(shù)幼苗葉片的SOD 活性顯著降低，POD 活性極大提高，CAT 活性因Pb 濃度而異。可見(jiàn)，不同共生體系（宿主植物與AMF）以及Pb濃度的不同都會(huì)導(dǎo)致抗氧化酶系統(tǒng)的應(yīng)激響應(yīng)不同。POD活性增強(qiáng)是本試驗(yàn)中AMF對(duì)Pb環(huán)境下生長(zhǎng)的樟樹(shù)幼苗的重要生理調(diào)節(jié)之一。

MDA是反映植物遭受逆境傷害程度的重要指標(biāo)[7]。與一些研究[19,27]的結(jié)果不太一致，本研究發(fā)現(xiàn)CK組和AMF 組幼苗的MDA 含量都沒(méi)有隨Pb 濃度升高而增大。這主要與本試驗(yàn)設(shè)置的Pb 濃度不高有關(guān)。在低Pb 濃度下，MDA 含量甚至低于Pb0 處理，這可能是植物在Pb 脅迫下的一種自我保護(hù)能力，與趙英鵬[13]在景天三七上的研究結(jié)果類(lèi)似。但是，與CK 組相比，AMF 接種處理在3 種Pb 濃度下都顯著降低了MDA 含量，表明AMF可以減緩樟樹(shù)幼苗葉片中的細(xì)胞膜氧化，減輕Pb帶來(lái)的傷害。MDA 含量減少也是AMF對(duì)樟樹(shù)幼苗耐Pb能力提升的關(guān)鍵調(diào)節(jié)指標(biāo)之一。

Pro是一種有效的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。逆境脅迫下，Pro含量會(huì)增加，用以維持細(xì)胞膨壓、減輕滲透脅迫，增加蛋白可溶性，還可以清除過(guò)多的自由基[28]。與牛振川[29]在玉米上的研究結(jié)果一致，在所有Pb 處理下，AMF 接種組的Pro 含量都低于未接種組（CK），說(shuō)明接種AMF 后降低了Pb 對(duì)樟樹(shù)幼苗生理毒害中產(chǎn)生的游離Pro含量，CK組幼苗為了應(yīng)對(duì)Pb脅迫必須產(chǎn)生更多的Pro?？扇苄缘鞍滓彩侵匾臐B透調(diào)節(jié)物質(zhì)，同時(shí)又是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。與Pro一樣，AMF接種組的可溶性蛋白含量也低于CK組。這一方面同樣是因?yàn)榻臃N條件下植物受到的脅迫更輕，從而不需要過(guò)多的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)；也有可能是樟樹(shù)幼苗在與AMF的共生過(guò)程中消耗掉了一些可溶性的養(yǎng)分[30]。有研究指出，植物內(nèi)的蛋白成分可能會(huì)參與合成AMF 分泌到土壤中的球囊霉素蛋白[31-32]，這也可能是本試驗(yàn)中接種組幼苗Pro 和可溶性蛋白降解的原因之一?？扇苄蕴且彩菨B透調(diào)節(jié)物質(zhì)。與Pro 和可溶性蛋白的變化不一樣，接種組的可溶性糖含量顯著高于CK 組。說(shuō)明接種組幼苗主要通過(guò)積累可溶性糖來(lái)應(yīng)對(duì)Pb 脅迫環(huán)境，也為生長(zhǎng)發(fā)育提供充足的能量，從而促進(jìn)生長(zhǎng)，提高了生物量。

4 結(jié)論

在0～4 mmol/L 的Pb濃度，接種AMF 均顯著促進(jìn)樟樹(shù)幼苗的生長(zhǎng)，但4 mmol/L Pb 濃度下促進(jìn)作用減小。接種AMF也顯著影響樟樹(shù)幼苗的生理指標(biāo)。在各Pb濃度中，AMF組SOD活性、Pro和可溶性蛋白含量降低，MDA 含量減少（Pb0除外），POD 活性和可溶性糖含量增加。因此，POD 活性增強(qiáng)、可溶性糖積累以及MDA 含量減少是AMF 在Pb 脅迫下促進(jìn)樟樹(shù)幼苗生長(zhǎng)的生理調(diào)節(jié)機(jī)制。在類(lèi)似的土壤Pb 環(huán)境中，可通過(guò)接種AMF來(lái)促進(jìn)樟樹(shù)幼苗生長(zhǎng)，提高其耐Pb能力。