劉志華，王金蘭,2*，趙明,2，李軍,2，時(shí)志春,2，王丹,2，張樹(shù)軍,2

1.齊齊哈爾大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006

2.黑龍江省工業(yè)大麻加工技術(shù)創(chuàng)新中心，黑龍江 齊齊哈爾 161006

工業(yè)大麻Cannabis sativaL.為?？拼舐閷僖荒晟荼局参?， 其植株中四氫大麻酚（tetrahydrocannabinal，THC）質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于0.3%，不具備提取毒性成分THC 或直接作為毒品吸食的價(jià)值，其又名漢麻，在我國(guó)各地均廣泛分布[1]?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》[2]記載：“麻蕡，味辛，平。主五勞七傷，利五臟，下血寒氣。多食令見(jiàn)鬼狂走。久服通神明，輕身。一名麻勃”“麻子，味甘，平，主補(bǔ)中益氣，肥健不老”。近年來(lái)人們對(duì)工業(yè)大麻進(jìn)行了廣泛的研究，結(jié)果表明其提取物具有抗腫瘤[3]、抗氧化[4]、抗菌[5]、抗炎[6]、抗驚厥[7]和神經(jīng)保護(hù)[8]等作用。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用工業(yè)大麻資源，本研究對(duì)工業(yè)大麻地上部分甲醇提取液醋酸乙酯萃取物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到30 個(gè)化合物，分別鑒定為13S-羥基-9Z,11E,15E-十八碳三烯酸甲酯（methyl 13S-hydroxy-9Z,11E,15E- octadecatrienoic acid，1）、Δ9-四氫次大麻酚酸（cannabidivarinic acid，2)、二氫獼猴桃內(nèi)脂（dihydroactinidiolide，3）、苯甲酸（benzoic acid，4）、對(duì)羥基肉桂酸甲酯（methylp-hydroxycinnamate ， 5 ）、二氫阿魏酸甲酯（dihydroferulic acid methyl ester，6）、9,10-二氫- 2,3,5,6-四甲氧基菲-1,4-二酮（9,10-dihydro-2,3,5,6- tetramethoxyphenanthrene-1,4- dione，7）、脫鎂葉綠素甲酯（methyl phaeophorbidea，8）、對(duì)羥基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid，9）、大麻黃素A（cannflavin A，10）、反式對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺 [N-(trans-p-coumaroyl) tyramine，11]、黑麥草素（epiloliolide，12）、3S-羥基-5α,6α-環(huán)氧-β-紫羅蘭酮（3S-hydroxy-5α,6α-epoxy-β- ionone，13）、大麻艾爾松酸B（cannabielsoic acid B，14）、3-吲哚甲酸（indole-3-carboxylic acid，15）、亞油酸單甘油酯（glycerin linoleate，16）、反式對(duì)羥基肉桂酸（trans-p-hydroxy-cinnamic acid，17）、松脂醇（pinoresinol，18）、琥珀酸（succinic acid，19）、反式肉桂酸（trans-cinnamic acid，20）、胡蘿卜苷（daucosterol，21）、β-谷甾醇（β-sitosterol，22）、順式對(duì)羥基肉桂酸（cis-p-hydroxy-cinnamic acid，23）、順式阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺 [N-(cis-feruloyl) tyramine，24]、木犀草素（luteolin，25）、甘油-1-（13-羥基-9Z,11E,5E-十八碳三烯酸）酯 [glycerin- 1-(13-hydroxy-9Z,11E,15E-octadecatrienoic acid ）ester，26]、6S,9R-二羥基-3-酮-α-紫羅蘭醇 [(6S,9R)- vomifoliol，27]、反式阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺 [N-(trans-feruloyl) tyramine，28]、布盧姆醇 B（blumenol B，29）以及兒茶素（catechin，30），其中化合物26 為新化合物，命名為大麻三烯酸A，結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1；化合物1 首次作為天然產(chǎn)物分離得到，化合物6、8、12、13、16、27 為首次從該屬植物中分離得到。

圖1 化合物26 的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structure of compound 26

1 材料與儀器

X-6 顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（北京泰克儀器有限公司）；Bruker AV-600 型核磁共振波譜儀（瑞士Bruker公司，TMS 為內(nèi)標(biāo)）；AUTOPOL V 型旋光儀（美國(guó)魯?shù)婪蚬荆?；半制備高壓液相色譜儀（日本日立公司，LC-6AD 泵，Shodex RI SE-61 視差折光檢測(cè)器）；PREP-SIL（250 mm×10 mm，5 μm）不銹鋼色譜柱；柱色譜用硅膠（200～300 目）為青島海洋化工廠產(chǎn)品；薄層色譜硅膠板為煙臺(tái)化工廠生產(chǎn)。有機(jī)溶劑為國(guó)藥集團(tuán)上海試劑廠產(chǎn)品，其他試劑為分析純。

工業(yè)大麻于2018年7月采自于黑龍江省大興安嶺地區(qū)，經(jīng)大興安嶺金億順漢麻種植專(zhuān)業(yè)合作社劉祥忠高級(jí)農(nóng)藝師鑒定為工業(yè)大麻C.sativaL.。標(biāo)本（CSL-201807）收藏于齊齊哈爾大學(xué)天然產(chǎn)物研究室。

2 提取與分離

干燥的工業(yè)大麻地上部分5.5 kg，用甲醇室溫浸泡3 d 后濾過(guò)，重復(fù)3 次，合并甲醇浸提液濃縮至小體積加水混懸，依次用正己烷和醋酸乙酯萃取5 次，合并醋酸乙酯萃取液并減壓濃縮至恒定質(zhì)量，得醋酸乙酯萃取物87.7 g。

取醋酸乙酯萃取物32.0 g，用硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（6∶4，8.5 L；3∶7，7.0 L），醋酸乙酯-甲醇（8∶2，4.0 L；5∶5，4.0 L），甲醇（3.0 L）洗脫，經(jīng)TLC 檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到12 個(gè)組分（F1～F12）。F3（7.37 g）用硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（9∶1，6.0 L；7∶3，5.0 L），醋酸乙酯（2.0 L），醋酸乙酯-甲醇（5∶5，2.0 L）洗脫，經(jīng)TLC 檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到13 個(gè)組分（F3-1～F3-13）。F3-7（1.31 g）經(jīng)2 次硅膠柱色譜分離，再用正相高效液相色譜[正己烷-醋酸乙酯（97∶3），體積流量4 mL/min]分離得化合物1（1.6 mg，tR＝66.76 min）。F4（4.0 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（8∶2，4.0 L；6∶4，1.5 L；3∶7，3.0 L），醋酸乙酯-甲醇（5∶5，1.0 L）洗脫，經(jīng)TLC 檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到9 個(gè)組分（F4-1～F4-9）。F4-3（480.2 mg）經(jīng)正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（9∶1），體積流量4 mL/min]分離得化合物2（3.9 mg，tR＝13.99 min）。F4-4（232.0 mg）經(jīng)正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（8∶2），體積流量4 mL/min]分離得化合物3（1.0 mg，tR＝9.85 min）。F4-5（1.0 g）用正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（8∶2），體積流量4 mL/min]分離得到化合物4（2.8 mg，tR＝5.54 min）、5（2.7 mg，tR＝8.42 min）、6（1.6 mg，tR＝9.03 min）、7（3.3 mg，tR＝10.89 min）。F4-7（693.0 mg）用醋酸乙酯重結(jié)晶，得到化合物8（80.3 mg）。F5（2.3 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（7∶3，2.0 L；5∶5，1.5 L；1∶9，1.0 L），醋酸乙酯-甲醇（5∶5，1.0 L）洗脫，經(jīng)TLC 檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到10 個(gè)組分（F5-1～F5-10）。F5-6（678.3 mg）用正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（7∶3），體積流量4 mL/min] 分離得化合物9（6.9 mg，tR＝

10.43 min）、10（4.1 mg，tR＝14.94 min）。F6（2.01 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（65∶35，2 L；6∶4，1.5 L；1∶9，1.0 L）洗脫，經(jīng)TLC 檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到15 個(gè)組分（F6-1～F6-15）。F6-13（375.5 mg）用醋酸乙酯重結(jié)晶，得到化合物11（279.8 mg）。F6-9（93.0 mg）用正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（4∶6），體積流量4 mL/min] 分離得化合物12（2.5 mg，tR＝9.83 min）、13（1.6 mg，tR＝11.59 min）、14（3.3 mg，tR＝9.75 min）。F6-10（688.0 mg）用正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（6∶4），體積流量 4 mL/min] 分離得化合物15（1.0 mg，tR＝8.59 min）、16（1.9 mg，tR＝15.28 min）、17（1.9 mg，tR＝16.98 min、18（6.4 mg，tR＝17.98 min）。F6-11（132.8 mg）用正相高效液相色譜 [正己烷-醋酸乙酯（55∶45），體積流量4 mL/min] 分離得化合物19（1.6 mg，tR＝35.43 min）。F7（600.0 mg）經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次用正己烷-醋酸乙酯（4∶6，1.5 L；1∶9，0.7 L），醋酸乙酯-甲醇（5∶5，0.5 L）洗脫，經(jīng)TLC 檢測(cè)合并相同流分，濃縮得到10 個(gè)組分（F7-1～F7-10）。F7-3（33.8 mg）用醋酸乙酯重結(jié)晶，得到化合物20（7.8 mg）。F7-9（38.3 mg）用醋酸乙酯重結(jié)晶，得到化合物21（5.1 mg）。F7-1（23.4 mg）用正相高效液相色譜分離 [正己烷-醋酸乙酯（8∶2），體積流量4 mL/min] 得到化合物22（1.0 mg，tR＝4.43 min）。F7-5（117.7 mg）經(jīng)正相高效液相色譜分離 [正己烷-醋酸乙酯（4∶6），體積流量4 mL/min] 得到化合物23（1.0 mg，tR＝4.98 min）、24（4.1 mg，tR＝15.79 min）、25（1.4 mg，tR＝29.15 min）。F7-6（70.7 mg）經(jīng)正相高效液相色譜分離 [正己烷-醋酸乙酯（4∶6），體積流量4 mL/min] 得到化合物26（2.1 mg，tR＝24.37 min）、27（2.7 mg，tR＝25.16 min）、28（6.3 mg，tR＝41.33 min）。F7-8（104.4 mg）經(jīng)正相高效液相色譜分離 [正己烷-醋酸乙酯（3∶7），體積流量4 mL/min] 得到化合物29（1.0 mg，tR＝13.74 min）、30（1.2 mg，tR＝19.95 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物26：淡黃色脂狀物；[α]25D?21.5° (c0.05, CHCl3)，HR-ESI-MSm/z: 391.245 8 [M＋H]+（計(jì)算值391.245 5），推得分子式為C21H36O5；其1H-NMR、13C-NMR 譜（表1）與化合物1 對(duì)比，除甲氧基消失，增加了甘油單酯的結(jié)構(gòu)單元 H-1′ (δ4.23, 4.15)/C-1′ (δ6.52); H-2′ (δ3.91)/C-2′ (δ70.3), H-3′ (δ3.70, 3.60)/C-3′ (δ63.3) 以外，其余基本一致，由此推得化合物26 的為甘油-1-(13-羥基-9Z,11E,15Z-十八碳三烯酸) 酯。為1 個(gè)新化合物，命名為大麻三烯酸A，結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

化合物1：淡黃色脂狀物；[α]25D?33.3° (c0.09, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 6.52 (1H, dd,J= 15.2, 11.5 Hz, H-11), 5.97 (1H, brd,J= 11.0 Hz, H-10), 5.70 (1H, dd,J= 15.2, 6.4 Hz, H-12), 5.57 (1H, dd,J= 10.5, 7.5 Hz, H-16), 5.44 (1H, dt,J= 10.6, 7.6 Hz, H-9), 5.37 (1H, dt,J= 10.5, 7.6 Hz, H-15), 4.22 (1H, dt,J= 6.4, 5.9 Hz, H-13), 3.67 (3H, s, H-1′), 2.33 (2H, m, H-14), 2.30 (2H, t,J= 7.5 Hz, H-2), 2.18 (2H, m, H-8), 2.08 (2H, m, H-17), 1.62 (2H, m, H-3), 1.39 (2H, m, H-7), 1.31 (6H, m, H-4～6), 0.97 (3H, t,J= 7.5 Hz, H-18)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 174.4 (C-1), 135.2 (C-16), 135.1 (C-12), 132.9 (C-9), 127.8 (C-10), 125.9 (C-11), 123.8 (C-15), 72.1 (C-13), 51.5 (C-1′), 35.3 (C-14), 34.1 (C-2), 29.5 (C-7), 29.1 (C-5), 29.1 (C-6), 29.0 (C-4), 27.7 (C-8), 24.9 (C-3), 20.8 (C-17), 14.2 (C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[9]，故鑒定化合物1為13S-羥基-9Z,11E,15E-十八碳三烯酸甲酯。經(jīng)系統(tǒng)查閱文獻(xiàn)，該化合物僅由人工合成得到，未見(jiàn)作為植物的次級(jí)代謝產(chǎn)物報(bào)道。

表1 化合物1、26 的核磁共振波譜數(shù)據(jù) (600/150 MHz, CDCl3)Table 1 NMR data of compounds 1 and 26 (600/150 MHz, CDCl3)

化合物2：白色粉末，mp 102～105 ℃；[α]25D?78.0° (c0.1, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 11.84 (1H, s, 2′-OH), 6.67 (1H, s, 6′-OH), 6.27 (1H, s, H-5′), 5.57 (1H, s, H-2), 4.55 (1H, s, H-9a), 4.39 (1H, s, H-9b), 4.10 (1H, brs, H-1), 2.92 (1H, m, H-1′′a),2.82 (1H, m, H-1′′b), 1.80 (3H, s, H-7), 1.72 (3H, s,H-10), 0.96 (3H, t,J= 7.8 Hz, H-3′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 176.7 (-COOH), 164.2(C-2′), 161.0 (C-6′), 147.4 (C-8), 147.1 (C-4′), 140.6 (C-3), 123.9 (C-2), 114.5 (C-1′), 112.2 (C-5′), 111.4 (C-10), 102.6 (C-3′), 46.6 (C-6), 38.6 (C-1), 35.4 (C-1′′), 30.2 (C-4), 27.7 (C-5), 24.6 (C-7), 21.1 (C-2′′), 18.9 (C-9), 14.2 (C-3′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[10]，故鑒定化合物2 為Δ9-四氫次大麻酚酸。

化合物3：淡黃色油狀物，[α]25D＋120.0° (c0.1, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 5.65 (1H, s, H-7), 2.24 (1H, brd,J= 11.9 Hz, H-2a), 1.55 (3H, s, H-9), 1.27 (3H, s, H-10), 1.22 (3H, s, H-11)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 182.5 (C-8), 172.0 (C-6), 112.4 (C-7), 87.3 (C-1), 41.7 (C-2), 40.1 (C-4), 36.5 (C-5), 29.8 (C-9), 24.4 (C-10), 24.2 (C-11), 19.7 (C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[11]，故鑒定化合物3 為二氫獼猴桃內(nèi)酯。

化合物4：白色針狀結(jié)晶（醋酸乙酯），mp 120～122 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 8.12 (2H, d,J= 7.8 Hz, H-2, 6), 7.62 (1H, t,J= 7.4 Hz, H-4), 7.49 (2H, dd,J= 7.8, 7.4 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 171.4 (C-7), 133.8 (C-4), 130.2 (C-2, 6), 129.2 (C-1), 128.5 (C-3, 5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物4 為苯甲酸。

化合物5：白色粉末，mp 134～138 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 7.64 (1H, d,J= 16.2 Hz, H-7), 7.43 (2H, d,J= 9.0 Hz, H-2, 6), 6.85 (2H, d,J= 9.0 Hz, H-3, 5), 6.31 (1H, d,J= 16.2 Hz, H-8), 3.80 (3H, s, 9-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 167.9 (C-9), 157.6 (C-4), 144.6 (C-7), 130.0 (C-2, 6), 127.2 (C-1), 115.9 (C-3, 5), 115.2 (C-8), 51.7 (8-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[13]，故鑒定化合物5 為反式對(duì)羥基肉桂酸甲酯。

化合物6：淡黃色粉末，mp 105～107 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 6.83 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-5), 6.70 (2H, m, H-2, 6), 5.48 (1H, s, 4-OH), 3.88 (3H, s, 3-OCH3), 3.67 (3H, s, 9-OCH3), 2.88 (2H, t,J= 7.8 Hz, H-8), 2.60 (2H, t,J= 7.8 Hz, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 173.4 (C-9), 146.4 (C-3), 144.0 (C-4), 132.5 (C-1), 120.8 (C-6), 114.3 (C-5), 110.9 (C-2), 55.9 (OCH3-3), 51.6 (OCH3-9), 36.1 (C-8), 30.7 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[14]，故鑒定化合物6 為二氫阿魏酸甲酯。

化合物7：淡黃色粉末，mp 113～115 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 6.92 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-8), 6.90 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-7), 4.07 (3H, s, H-12), 4.04 (3H, s, H-11), 3.93 (3H, s, H-13), 3.86 (3H, s, H-14), 2.63 (2H, t,J= 7.2 Hz, H-9), 2.54 (2H, brs, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 182.6 (C-1), 182.4 (C-4), 151.8 (C-6), 146.9 (C-5), 146.1 (C-3), 143.3 (C-2), 139.9 (C-1a), 139.8 (C-4a), 132.2 (C-8a), 123.0 (C-5a), 122.1 (C-7), 114.2 (C-8), 61.1 (C-12), 61.0 (C-13), 60.6 (C-11), 56.0 (C-14), 27.8 (C-9), 20.5 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[15]，故鑒定化合物7為9,10-二氫-2,3,5,6-四甲氧基菲-1,4-二酮。

化合物8：黑色粉末，mp 118～120 ℃；[α]25D?375.0°(c0.006 4, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 9.46 (1H, s, H-10), 9.30 (1H, s, H-5), 8.55 (1H, s, H-20), 7.93 (1H, m, H-31), 6.26 (1H, s, H-132), 6.25 (1H, d,J= 17.8 Hz, H-32a), 6.15 (1H, d,J= 17.8 Hz, H-32b), 4.46 (1H, m, H-18), 4.20 (1H, m, H-17), 3.88 (3H, s, H-132), 3.65 (3H, s, H-121), 3.61 (3H, m, H-81), 3.58 (3H, s, H-17), 3.38 (3H, s, H-21), 3.16 (3H, s, H-71), 2.63 (1H, m, H-172a), 2.51 (1H, m, H-172b) , 2.31 (1H, m, H-171a), 2.23 (1H, m, H-171b), 1.81 (3H, d,J= 7.4 Hz, H-181), 1.65 (3H, t,J= 7.7 Hz, H-82)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 189.6 (C-131), 173.4 (C-173), 172.2 (C-19), 169.6 (C-133), 161.2 (C-16), 155.6 (C-6), 150.9 (C-9), 149.7 (C-14), 145.2 (C-8), 142.1 (C-1), 137.9 (C-11), 136.5 (C-3), 136.2 (C-4), 136.2 (C-7), 131.9 (C-2), 129.1 (C-12), 129.1 (C-13), 129.0 (C-31), 122.8 (C-32), 105.2 (C-15), 104.4 (C-10), 97.5 (C-5), 93.1 (C-20), 64.7 (C-132), 52.9 (C-134), 51.7 (C-174), 51.1 (C-17), 50.1 (C-18), 31.1 (C-172), 29.9 (C-171), 23.1 (C-181), 19.4 (C-81), 17.4 (C-82), 12.1 (C-21), 12.1 (C-121), 11.2 (C-71)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)基本一致[16]，故鑒定化合物8 為脫鎂葉綠素甲酯。

化合物9：無(wú)色粉末，mp 213～214 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 12.43 (1H, br s, -COOH), 10.22 (1H, brs, Ar-OH), 7.79 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-2, 6), 6.82 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 167.6 (C-7), 162.1 (C-1), 132.2 (C-3, 5), 121.8 (C-4), 115.8 (C-2, 6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[17]，故鑒定化合物9 為對(duì)羥基苯甲酸。

化合物10：淡黃色粉末，mp 182～183 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 13.23 (1H, s, 5-OH), 11.30 (1H, s, 7-OH), 10.34 (1H, s, 4′-OH), 7.55 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-6′), 7.54 (1H, s, H-2′), 6.93 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 6.90 (1H, s, H-3), 6.55 (1H, s, H-8), 5.18 (1H, t,J= 7.1 Hz, H-2′′), 5.03 (1H, t,J= 7.3 Hz, H-6′′), 3.89 (1H, s, -OCH3), 3.22 (2H, d,J= 7.1 Hz, H-1′′), 2.00 (2H, m, H-5′′), 1.92 (2H, t,J= 7.9 Hz, H-4′′), 1.73 (3H, s, H-9′′), 1.58 (3H, s, H-10′′), 1.52 (3H, s, H-8′′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 182.3 (C-4), 163.9 (C-2), 162.3 (C-5), 158.9 (C-7), 155.6 (C-9), 151.1 (C-4′), 148.5 (C-3′), 134.6 (C-3′′), 131.1 (C-7′′), 124.6 (C-6′′), 122.5 (C-1′), 122.1 (C-2′′), 120.8 (C-6′), 116.2 (C-5′), 111.4 (C-6), 110.7 (C-2′), 104.0 (C-10), 103.6 (C-3), 93.7 (C-8), 56.4 (-OCH3), 40.5 (C-4′′), 26.6 (C-5′′), 25.9 (C-9′′), 21.4 (C-1′′), 18.0 (C-10′′), 16.4 (C-8′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[18]，故鑒定化合物10 為大麻黃素A。

化合物11：白色粉末，mp 261～262 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 9.95 (1H, brs, 7-OH), 8.25 (1H, brs, 6′-OH), 8.09 (1H, brs, N-H), 7.37 (2H, d,J= 8.1 Hz, H-5, 9), 7.30 (1H, d,J= 15.7 Hz, H-3), 7.01 (2H, d,J= 7.8 Hz, H-4′, 8′), 6.81 (2H, d,J= 8.1 Hz, H-6, 8), 6.69 (2H, d,J= 7.8 Hz, H-5′, 7′), 6.42 (1H, d,J= 15.7 Hz, H-2), 3.32 (2H, m, H-1′), 2.65 (2H, t,J= 7.2 Hz, H-2′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 165.8 (C-1), 159.3 (C-7), 156.2 (C-6′), 139.0 (C-3), 130.0 (C-3′), 129.9 (C-5, 9), 129.6 (C-4′, 8′), 126.3 (C-4), 119.2 (C-2), 116.2 (C-6, 8), 115.6 (C-5′, 7′), 41.2 (C-1′), 34.9 (C-2′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[19]，故鑒定化合物11 為反式對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

化合物12：無(wú)色針狀結(jié)晶（醋酸乙酯），mp 147～148 ℃，[α]25D?61.0°(c0.1，CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 5.70 (1H, s, H-7), 4.33 (1H, m, H-3), 2.46 (1H, brd,J= 13.9 Hz, H-2a), 1.98 (1H, brd,J= 13.9 Hz, H-2b), 1.78 (3H, s, H-9), 1.47 (3H, s, H-11), 1.28 (3H, s, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 182.4 (C-6), 171.9 (C-8), 113.0 (C-7), 86.7 (C-1), 66.9 (C-3), 47.3 (C-2), 45.6 (C-4), 35.9 (C-5), 30.7 (C-10), 27.0 (C-9), 26.5 (C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[20]，故鑒定化合物12 為黑麥草素。

化合物13：無(wú)色油狀物，[α]25D?69.8°(c0.1, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 7.03 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-7), 6.29 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-8), 3.91 (1H, m, H-3), 2.38 (1H, dd,J= 14.3, 4.6 Hz, H-4a), 2.28 (3H, s, H-10), 1.64 (1H, m, H-4b), 1.19 (6H, s, H-12, 13), 0.98 (3H, s, H-11)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 197.4 (C-9), 142.4 (C-7), 132.6 (C-8), 69.5 (C-3), 67.3 (C-6), 64.0 (C-5), 46.7 (C-2), 40.6 (C-1), 35.1 (C-4), 29.4 (C-11), 28.3 (C-10), 25.0 (C-12), 19.9 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[21]，故鑒定化合物13 為3S-羥基-5α,6α-環(huán)氧-β-紫羅蘭酮。

化合物14：白色粉末，mp 219～221 ℃；[α]25D＋20.6°(c0.1, CHCl3)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 6.42 (1H, s, H-4), 5.08 (2H, d,J= 7.0 Hz, H-13), 4.35 (1H, d,J= 5.8 Hz, H-5a), 3.44 (1H, dd,J= 11.1, 5.8 Hz, H-9a), 2.97 (2H, m, H-1′), 1.84 (3H, s, H-14), 1.53 (3H, s, H-11), 8.82 (3H, t,J= 7.8 Hz, H-5′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 164.8 (C-12), 160.11(C-1), 155.3 (C-9b), 152.9 (C-10), 149.5 (C-2), 116.9 (C-4a), 114.0 (C-4), 111.8 (C-13), 105.4 (C-3), 91.2 (C-5a), 68.7 (C-6), 48.0 (C-9), 41.5 (C-9a), 34.7 (C-1′), 34.6 (C-7), 32.0 (C-3′), 31.1 (C-2′), 28.1 (C-11), 25.6 (C-8), 22.7 (C-4′), 22.6 (C-14), 14.1 (C-5′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[22]，故鑒定化合物14 為大麻艾爾松酸B。

化合物15：白色針狀結(jié)晶（醋酸乙酯），mp 209～210 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 11.92 (1H, brs, -NH), 11.80 (1H, brs, -COOH), 8.00 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-8), 7.99 (1H, s, H-2) , 7.46 (1H, d,J= 7.7 Hz, H-5), 7.17 (2H, m, H-6, 7)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 166.4 (-COOH), 136.9 (C-9), 132.7 (C-2), 126.5 (C-8), 122.6 (C-5), 121.4 (C-4), 121.0 (C-7), 112.6 (C-6), 107.8 (C-3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[23]，故鑒定化合物15 為3-吲哚甲酸。

化合物16：無(wú)色脂狀物；[α]25D＋147.2°(c0.3, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 5.36 (4H, m, H-9′, 10′, 12′, 13′), 4.21 (1H, dd,J= 11.6, 4.6 Hz, H-1a), 4.15 (1H, dd,J= 11.6, 6.2 Hz, H-1b), 3.94 (1H, m, H-2), 3.70 (1H, dd,J= 11.4, 3.7 Hz, H-3a), 3.61 (1H, dd,J= 11.4, 5.8 Hz, H-3b), 2.81 (2H, m, H-11′), 2.35 (2H, t,J= 7.5 Hz, H-2′), 2.04 (4H, m, H-8′, 14′), 1.63 (2H, m, H-3′), 0.97 (3H, t,J= 7.1 Hz, H-18′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 174.4 (C-1′), 130.3 (C-9′), 130.1 (C-13′), 128.2 (C-12′), 127.8 (C-10′), 70.8 (C-2), 65.6 (C-1), 63.8 (C-3), 34.3 (C-2′), 31.7 (C-16′), 29.8 (C-4′), 29.6 (C-5′), 29.4 (C-6′), 29.3 (C-7′), 29.3 (C-15′), 27.4 (C-8′), 27.4 (C-14′), 25.8 (C-11′), 25.1 (C-3′), 22.8 (C-17′), 14.3 (C-18′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)基本一致[24]，故鑒定化合物16 為單亞油酸甘油酯。

化合物17：白色粉末，mp 211～213 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.51 (2H, d,J= 7.9 Hz, H-2, 6), 7.49 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-7), 6.79 (2H, d,J= 7.9 Hz, H-3, 5), 6.28 (1H, d,J= 15.8 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 168.4 (C-9), 160.1 (C-4), 144.6 (C-7), 130.6 (C-2, 6), 125.7 (C-1), 116.2 (C-3, 5), 115.8 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[25]，故鑒定化合物17 為反式對(duì)羥基肉桂酸。

化合物18：淡黃色脂狀物；[α]25D＋65°(c0.1, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 6.89 (4H, d,J= 8.2 Hz, H-2, 2′, 6, 6′), 6.82 (2H, dd,J= 8.2, 1.7 Hz, H-5, 5′), 4.74 (2H, d,J= 4.1 Hz, H-7, 7′), 4.25 (2H, dd,J= 9.1, 6.8 Hz, H-9b, 9′b), 3.91 (6H, s, -OCH3), 3.88 (2H, dd,J= 9.1, 3.5 Hz, H-9a, 9′a), 3.10 (2H, m, H-8, 8′)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 146.7 (C-3, 3′), 145.2 (C-4, 4′), 132.9 (C-1, 1′), 119.0 (C-6, 6′), 114.3 (C-5, 5′), 108.6 (C-2, 2′), 85.9 (C-7, 7′), 71.7 (C-9, 9′), 56.0 (-OCH3), 54.2 (C-8, 8′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[26]，故鑒定化合物18 為松脂醇。

化合物19：白色針狀結(jié)晶（氯仿），mp 181～183 ℃；不同的薄層展開(kāi)劑展開(kāi)，與琥珀酸對(duì)照品比較，其Rf值一致，混合后熔點(diǎn)不下降，鑒定為琥珀酸。

化合物20：白色粉末，mp 127～130 ℃；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 7.81 (1H, d,J= 16.2 Hz, H-7), 7.56 (2H, m, H-2, 6), 7.42 (3H, m, H-3, 4, 5), 6.47 (1H, d,J= 16.2 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 172.5 (C-9), 147.2 (C-7), 134.0 (C-1), 130.8 (C-4), 129.0 (C-2, 6), 128.4 (C-3, 5), 117.3 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[27]，故鑒定化合物20 為反式肉桂酸。

化合物21：白色粉末，mp 280～282 ℃；乙酸酐-濃硫酸反應(yīng)先紫紅色漸變?yōu)槲劬G色，不同的薄層展開(kāi)劑展開(kāi)，與胡蘿卜苷對(duì)照品比較，其Rf值一致，混合后熔點(diǎn)不下降，鑒定為胡蘿卜苷。

化合物22：白色針狀結(jié)晶（氯仿），mp 135～136 ℃；薄層噴硫酸-乙醇溶液加熱顯紫紅色，不同的薄層展開(kāi)劑展開(kāi)，與β-谷甾醇對(duì)照品比較，其Rf值一致，混合后熔點(diǎn)不下降，鑒定為β-谷甾醇。

化合物23：白色粉末，mp 136～138 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.64 (2H, d,J= 8.4 Hz, H-2, 6), 6.77 (1H, d,J= 13.2 Hz, H-7), 6.75 (2H, d,J= 8.4 Hz, H-3, 5), 5.72 (1H, d,J= 13.2 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 168.1 (C-9), 159.0 (C-4), 142.1 (C-7), 132.8(C-2, 6), 126.2 (C-1), 117.4 (C-8), 115.6 (C-3, 5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[28]，故鑒定化合物23 為順式對(duì)羥基肉桂酸。

化合物24：無(wú)色酯狀物；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 9.29 (1H, brs, 7-OH), 9.17 (1H, brs, 6′-OH), 8.11 (1H, brs, N-H), 7.70 (1H, s, H-5), 7.09 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-9), 6.99 (2H, d,J= 7.5 Hz, H-4′, 8′), 6.71 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-8), 6.67 (2H, d,J=7.5 Hz, H-5′, 7′), 6.49 (1H, d,J= 13.4 Hz, H-3), 5.77 (1H, d,J= 13.4 Hz, H-2), 3.74 (3H, s, -OCH3), 3.26 (2H, m, H-1′), 2.62 (2H, t,J= 7.4 Hz, H-2′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 166.7 (C-1), 156.1 (C-6′), 147.8 (C-7), 147.3 (C-6), 137.3 (C-3), 130.0 (C-3′), 129.9 (C-4′, 8′), 127.3 (C-4), 124.8 (C-9), 121.5 (C-2), 115.6 (C-5′, 7′), 115.3 (C-8), 114.7 (C-5), 55.9 (-OCH3), 41.4 (C-1′), 34.7 (C-2′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[29]，故鑒定化合物24 為順式阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

化合物25：淡黃色粉末，mp 324～326 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.41 (1H, dd,J= 8.4, 2.2 Hz, H-6′), 7.39 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-2′), 6.88 (1H, d,J= 8.4 Hz, H-5′), 6.67 (1H, s, H-3), 6.44 (1H, d,J= 1.9 Hz, H-8), 6.18 (1H, d,J= 1.9 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 182.1 (C-4), 165.0 (C-2), 164.3 (C-5), 161.9 (C-7), 157.8 (C-9), 150.3 (C-3′), 146.3 (C-4′), 121.9 (C-1′), 119.4 (C-2′), 116.5 (C-5′), 113.8 (C-6′), 104.0 (C-3), 103.3 (C-10), 99.4 (C-6), 94.4 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[30]，故鑒定化合物25 為木犀草素。

化合物27：無(wú)色油狀物，[α]25D＋23.0°(c0.01, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 5.90 (2H, m, H-4), 5.85 (1H, dd,J= 15.6, 4.8 Hz, H-8), 5.77 (1H, d,J= 15.6 Hz, H-7), 4.42 (1H, m, H-9), 2.46 (1H, d,J= 17.0 Hz, H-2a), 2.25 (1H, d,J= 17.0 Hz, H-2b), 1.91 (1H, d,J= 1.0 Hz, H-13), 1.30 (3H, d,J= 6.4 Hz, H-10), 1.08 (3H, s, H-11), 1.02 (3H, s, H-12)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 198.2 (C-3), 163.1 (C-5), 135.6 (C-8), 129.0 (C-7), 126.9 (C-4), 79.1 (C-6), 68.1(C-9), 49.7 (C-2), 41.2 (C-1), 24.1 (C-11), 23.8 (C-12), 22.9 (C-10), 19.0 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[31]，故鑒定化合物27 為6S,9R-二羥基-3-酮-α-紫羅蘭醇。

化合物28：白色粉末，mp 81～83 ℃；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 9.42 (1H, brs, OH-7), 9.17 (1H, brs, OH-6′), 7.99 (1H, brs, N-H), 7.30 (1H, d,J= 15.7 Hz, H-3), 7.11 (1H, s, H-5), 7.01 (2H, d,J= 7.7 Hz, H-4′, 8′), 6.98 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-9), 6.78 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-8), 6.68 (2H, d,J= 7.7 Hz, H-5′, 7′), 6.42 (1H, d,J= 15.7 Hz, H-2), 3.74 (3H, s, -OCH3), 3.32 (2H, m, H-1′), 2.64 (2H, t,J= 7.2 Hz, H-2′)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 165.8 (C-1), 156.1 (C-6′), 148.7 (C-7), 148.3 (C-6), 139.3 (C-3), 130.0 (C-3′), 129.9 (C-4′, 8′), 126.9 (C-4), 122.0 (C-9), 119.5 (C-2), 116.1 (C-8), 115.6 (C-5′, 7′), 111.2 (C-5), 56.0 (-OCH3), 41.1 (C-1′), 34.9 (C-2′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[32]，故鑒定化合物28 為反式阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺。

化合物29：無(wú)色油狀物，[α]25D?11.0°(c0.06, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, CDCl3)δ: 5.86 (1H, s, H-4), 3.80 (1H, m, H-9), 2.50 (1H, d,J= 18.0 Hz, H-2a), 2.25 (1H, d,J= 18.0 Hz, H-2b), 2.06 (3H, s, H-13), 1.91 (2H, m, H-7), 1.53 (2H, m , H-8), 1.22 (3H, d,J= 6.4 Hz, H-10), 1.10 (3H, s, H-11), 1.06 (3H, s, H-12)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ: 198.2 (C-3), 168.4 (C-5), 126.2 (C-4), 77.8 (C-6), 68.8 (C-9), 50.0 (C-2), 41.7 (C-1), 34.7 (C-7), 33.5 (C-8), 24.2 (C-11), 23.9 (C-10), 23.7 (C-12), 21.6 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[33]，故鑒定化合物29為布盧姆醇B。

化合物30：淡黃色粉末，mp 92～94 ℃；[α]25D?27.2°(c0.1, MeOH)；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 9.18 (1H, s, 5-OH), 8.94 (1H, s, 7-OH), 8.87 (1H, s, 3′-OH), 8.82 (1H, s, 4′-OH), 6.72 (1H, d,J= 1.9 Hz, H-2′), 6.68 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.59 (1H, dd,J= 8.0, 1.9 Hz, H-6′), 5.88 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-6), 5.69 (1H, d,J= 2.2 Hz, H-8), 4.87 (1H, d,J= 5.1 Hz, OH-3), 4.47 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-2), 3.81 (1H, m, H-3), 2.67 (1H, dd,J= 16.0, 5.3 Hz, H-4a), 2.35 (1H, dd,J= 16.0, 8.1 Hz, H-4b)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 156.9 (C-9), 156.6 (C-5), 155.8 (C-7), 145.3 (C-4′), 145.3 (C-3′), 131.1 (C-1′), 118.9 (C-6′), 115.5 (C-5′), 115.0 (C-2′), 99.5 (C-10), 95.6 (C-6), 94.3 (C-8), 81.5 (C-2), 66.8 (C-3), 28.3 (C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[30]，故鑒定化合物30 為兒茶素。

4 討論

工業(yè)大麻在抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗炎、抗驚厥和神經(jīng)保護(hù)等方面具有極高的藥理研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用價(jià)值，其中以大麻二酚（cannabidiol，CBD）等大麻素類(lèi)成分最受人們關(guān)注。由于這類(lèi)成分極性較小，易溶于正己烷等非極性有機(jī)溶劑，所以關(guān)于工業(yè)大麻化學(xué)成分的研究更多集中在正己烷提取物。為進(jìn)一步探討工業(yè)大麻藥效基礎(chǔ)物質(zhì)，本研究對(duì)工業(yè)大麻醇提液醋酸乙酯萃取物化學(xué)成分進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，從工業(yè)大麻醋酸乙酯萃取物中得到大麻素類(lèi)化合物2 個(gè)，非大麻素類(lèi)化合物28個(gè)：包括苯丙素類(lèi)5 個(gè)、降倍半萜類(lèi)5 個(gè)、酰胺類(lèi)3 個(gè)、黃酮3 個(gè)、不飽和脂肪酸3 個(gè)、甾體2 個(gè)、芳香酸類(lèi)2 個(gè)、生物堿類(lèi)1 個(gè)、木脂素類(lèi)1 個(gè)、其他類(lèi)3 個(gè)。這些次生代謝產(chǎn)物大多具有較強(qiáng)的生物活性，如酰胺類(lèi)成分：反式對(duì)羥基肉桂酸酰對(duì)羥基苯乙胺（11）對(duì)α-葡萄苷酶有明顯抑制作用[34]；順式阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺（24）對(duì)RAW264.7 巨噬細(xì)胞分泌NO 有顯著抑制作用[35-36]；反式阿魏酸酰對(duì)羥基苯乙胺（28）具有抗氧化作用[37]。黃酮類(lèi)成分：大麻黃素A（10）具有神經(jīng)性保護(hù)作用[38]；木犀草素（25）對(duì)卵巢癌細(xì)胞有抑制作用[39]；兒茶素（30）有顯著的抗氧化作用[40]。苯丙素類(lèi)成分中：對(duì)羥基肉桂酸甲酯（5）具有抗氧化作用[41]；二氫阿魏酸甲酯（6）具有抑制真菌的作用[42]；反式對(duì)羥基肉桂酸（17）具有抑菌作用[43]；反式肉桂酸（20）對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞具有抑制作用[44]。降倍半萜類(lèi)成分：3S-羥基- 5α,6α-環(huán)氧-β-紫羅蘭酮（13）對(duì)種子萌發(fā)具有抑制作用[45]；6S,9R-二羥基-3-酮-α-紫羅蘭醇（27）具有神經(jīng)保護(hù)作用[46]；布盧姆醇B（29）具有抗炎活性[47]；二氫獼猴桃內(nèi)脂（2）具有很強(qiáng)的乙酰膽堿酯酶抑制活性[48]；黑麥草素（12）對(duì)銅綠假單胞菌有顯著的抑制作用[49]。生物堿類(lèi)成分：3-吲哚甲酸（15）具有細(xì)胞毒活性并對(duì)枯草芽孢桿菌和白色念球菌有顯著的抑制作用[49-50]。這些具有活性的成分在工業(yè)大麻醋酸乙酯萃取物中分離得到，顯示工業(yè)大麻的諸多生物活性及藥理作用可能與工業(yè)大麻所含有的這些非大麻素類(lèi)成分相關(guān)，同時(shí)證明工業(yè)大麻具有較好的藥物開(kāi)發(fā)前景。本研究通過(guò)進(jìn)一步研究工業(yè)大麻的物質(zhì)基礎(chǔ)，并推測(cè)成分與生物活性的相關(guān)性，可為綜合利用工業(yè)大麻資源、研究開(kāi)發(fā)新型藥物等提供理論依據(jù)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突